抗體的制備過(guò)程:
1. 免疫原的制備
普通的大分子蛋白,產(chǎn)品僅用于科研通過(guò)分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進(jìn)行誘導(dǎo)表達(dá)獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為免疫原。
小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯(lián)載體對(duì)該分子進(jìn)行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,常見(jiàn)偶聯(lián)載體如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫動(dòng)物
常用于制備抗血清的動(dòng)物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等,大量生產(chǎn)時(shí)需要用到狗、綿羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集
一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動(dòng)脈采血,家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血,家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定
得到的抗血清需要進(jìn)一步的純化,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進(jìn)行層析,具有高效,特異性強(qiáng),純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對(duì)分子的質(zhì)量、純度以及特異性。
5. 免疫血清的保存
建議將抗體分裝后進(jìn)行保存。抗體一般比較穩(wěn)定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會(huì)影響效價(jià),而真空干燥保存時(shí)間可以更久。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑。
參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品名稱
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卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白85B抗體
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英文名稱
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Anti-CCDC85B
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規(guī)格
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0.2ml/200μg
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產(chǎn)品應(yīng)用 WB=1:100-500 ELISA=1:500-1000 IP=1:20-100 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 IF=1:100-500
(石蠟切片需做抗原修復(fù))
英文名稱 Anti-CCDC85B
中文名稱 卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白85B抗體
別 名 Ccdc85b; Coiled coil domain containing 85B; Coiled-coil domain-containing protein 85B; Delta interacting protein A; Delta-interacting protein A; DIPA; Hepatitis delta antigen interacting protein A; Hepatitis delta antigen-interacting protein A; CC85B_HUMAN.
濃 度 1mg/1ml
規(guī) 格 0.2ml/200μg
抗體來(lái)源 Rabbit
克隆類型 polyclonal
交叉反應(yīng) Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow
產(chǎn)品類型 一抗
研究領(lǐng)域 細(xì)胞生物 免疫學(xué) 染色質(zhì)和核信號(hào) 微生物學(xué) 信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo) 轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子
蛋白分子量 predicted molecular weight: 22kDa
性 狀 Lyophilized or Liquid
免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human CCDC85B
亞 型 IgG
純化方法 affinity purified by Protein A
儲(chǔ) 存 液 0.01M PBS, pH 7.4 with 10 mg/ml BSA and 0.1% Sodium azide
抗體分子標(biāo)記技術(shù):
(一)原理
產(chǎn)品僅用于科研當(dāng)應(yīng)用化學(xué)氧化法時(shí)(NaI)遇強(qiáng)氧化劑,離子被氧化為分子,所生成的自由分子可與某些基團(tuán)進(jìn)行鹵化反應(yīng)。蛋白質(zhì)分子可進(jìn)行鹵化反應(yīng)的基團(tuán)主要為酪氨酸殘基,某些組氨酸殘基也可能進(jìn)行化。在應(yīng)用胺T( Chloramine T)法的實(shí)驗(yàn)中,所用的氧化劑(1,3,4,6- tetrachloro-3a,6adipheny l-glucoluril)強(qiáng)揮發(fā)性的有機(jī)溶劑中。該溶劑加入試管后,先讓其揮發(fā)(即讓氧化劑將試管包被),然后把Na125I和蛋白質(zhì)液加入包被好的試管中,反應(yīng)完成即將混合液移入他管終止反應(yīng)。
(二)準(zhǔn)備
1.試劑
經(jīng)親和層析純化的多克隆抗體或單克隆抗體;0.5mol/L磷酸鈉緩沖液,pH7.5;無(wú)載體的Na125I3.7GBq/ml(100mCi/ml)的NaOH液;100g/L三醋酸;70%乙醇;新鮮制備的含2mg/m1絡(luò)胺T的0.5mol/L磷酸鈉緩沖液(pH7.5);胺T反應(yīng)終止緩沖液;
2.儀器
凝膠過(guò)濾柱;¥-記數(shù)器;玻璃纖維濾。
(三)操作要點(diǎn)
1.用胺T法進(jìn)行化,也可在大約pH7.0的緩沖液中進(jìn)行;
2.如果氧化反應(yīng)損傷蛋白質(zhì),可將抗體與異硫氰酸熒光素(FITC)偶聯(lián))胺T量減少到0.02mg/m,并將偏重亞硫酸液的濃度降到0.024mg/ml;
3. Iodogen-包被的試管可在干燥器中,于室溫下保存多年;
4.1251標(biāo)記的抗體,在制備后六周內(nèi)均可使用(1251的半衰期為59.6天);
5.要注意保證所用的Na1251是新鮮的,陳舊制劑的比活性低;
6.酪氨酸的碘化偶爾會(huì)對(duì)抗原的抗體結(jié)合位點(diǎn)有干擾,因此降低其結(jié)合能力,但這種情況很少見(jiàn)。
抗體制備過(guò)程:
1.材料與試劑
a.提取的動(dòng)物 Ig
b.弗氏完全佐劑和弗氏不完全佐劑
c.青霉素和鏈霉素
d.實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 兔
e.其它材料及試劑
2、選擇實(shí)驗(yàn)活體。
3、進(jìn)行動(dòng)物免疫實(shí)驗(yàn)。
4、試取血樣進(jìn)行測(cè)試,查看免疫效果。
5、如果免疫成功,殺死實(shí)驗(yàn)活體,采集全部血清。
6、純化出抗體。
7、鑒定抗體。胎牛血清(無(wú)菌采制)
下列是卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白85B抗體 的相關(guān)熱銷產(chǎn)品:
葡聚糖40系統(tǒng)適用性用標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:200mg 英文名稱:Dextran 40 System Suitability
葡聚糖70標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:50mg 英文名稱:Dextran 70
葡聚糖70系統(tǒng)適用性用標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:200mg 英文名稱:Dextran 70 System Suitability
右旋糖死體積標(biāo)記物標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:100mg 英文名稱:Dextran Vo Marker
葡聚糖4校準(zhǔn)用標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:100mg 英文名稱:Dextran 4 Calibration
葡聚糖10校準(zhǔn)用標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:100mg 英文名稱:Dextran 10 Calibration
葡聚糖40校準(zhǔn)用標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:100mg 英文名稱:Dextran 40 Calibration
葡聚糖70校準(zhǔn)用標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:100mg 英文名稱:Dextran 70 Calibration
葡聚糖250校準(zhǔn)用標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:100mg 英文名稱:Dextran 250 Calibration
花旗參精粉標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:1.5g 英文名稱:
15150kDa精確分子量MARK 特價(jià)促銷 英文名稱:PreciseProteinMolecularweightMark 含量:BR,500000u/mg
19119kDa預(yù)先染色分子量MARK 特價(jià)促銷 英文名稱:PrestainedProteinMolecularweightMark 含量:BR,250u/mg
1H,3H并[1,8CD]吡喃1,3二 特價(jià)促銷 英文名稱:1,8Naphthalicanhydride 含量:AR,90%
1βD阿拉伯呋喃糖苷胸腺嘧啶 特價(jià)促銷 英文名稱:1βDArabinofuranosylthymine 含量:生物技術(shù)級(jí),99%
1βD呋喃核糖基1H1,2,4,三3羧酰 特價(jià)促銷 英文名稱:Ribavirin 含量:BR,97%
1氨基2 特價(jià)促銷 英文名稱:Isopropanolamine 含量:F53B
1基3甲基4甲?;?吡啉 特價(jià)促銷 英文名稱:PMBP 含量:BS
1 特價(jià)促銷 英文名稱:Sodium1propanesulfonate 含量:BR
1一水物 特價(jià)促銷 英文名稱:Sodium1propanesulfonatemonohydrate 含量:BR
1十六 特價(jià)促銷 英文名稱:1iodoHexadecane 含量:CP,97%
2-tert-Butyl-4-ethylphenol,99%通用試劑 25G
2,6-Dichloro-4-nitrophenol,98%通用試劑 5G
4-Bromo-2-(trifluoromethyl)phenol,99%通用試劑 1G
2-Bromo-4-fluorophenol,98%通用試劑 1G
3-Iodophenol,98%通用試劑 10G
4-Bromo-2-methoxyphenol,98%通用試劑 2G
4-Isopropylphenol,98%通用試劑 25G
2,3-Difluorophenol,98%通用試劑 1G
3-Hydroxybenzotrifluoride,99%通用試劑 5G
4-Methylpyrocatechol,≥95%通用試劑 25G
3,4-Dimethoxyphenol,97%通用試劑 5G
2,4-Bis(α,α-dimethylbenzyl)phenol,95%通用試劑 250G
2,5-Di-tert-Butylhydroquinone,99%通用試劑 25G
(R)-(+)-1,1′-Bi(2-naphthol),99%通用試劑 1G
4-Methyl-2-nitrophenol,99%通用試劑 25G
卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白85B抗體 Penicillium expansum Link種屬:Penicillium expansum Link
分離基物:桃幼成熟果實(shí)
提供形式:斜面培養(yǎng)物/凍干物
安全等級(jí):1
模式菌株:no
應(yīng)用領(lǐng)域:研究;教學(xué)
培養(yǎng)方法
培養(yǎng)基:綜合PDA:馬鈴薯煮汁1000mL,磷酸二氫鉀 3g,硫酸鎂 1.5g,葡萄糖 20g,維生素B1 10mg,瓊脂 20g,pH自然。
生長(zhǎng)條件:26℃,好氧
生長(zhǎng)特性菌落在查氏酵母膏瓊脂(CYA)上生長(zhǎng)較快,25℃7天直徑35-45mm,較厚,平坦;質(zhì)地絨狀兼有孢梗束而成顆粒狀;分生孢子結(jié)構(gòu)大量,灰黃綠色,近于暗?砂綠色(Dark Cinnabar Green Ridgway Pl. XIX)或鎳綠色(Nickel Green Ridgway Pl. XXXIII);菌絲白色;滲出液較多,無(wú)色至橙褐色;可溶性色素?zé)o至較多,褐色;反面黃褐色至棕色。分生孢子梗發(fā)生于基質(zhì)菌絲和孢梗束,孢梗莖120-500×3.0-4.0цm,壁平滑;帚狀枝三輪生,偶有雙輪生,彼此較緊密
存儲(chǔ)條件:定期移植法,2-8℃。青霉菌