抗體制備過程:
1.材料與試劑
a.提取的動物 Ig
b.弗氏完全佐劑和弗氏不完全佐劑
c.青霉素和鏈霉素
d.實(shí)驗(yàn)動物 兔
e.其它材料及試劑
2、選擇實(shí)驗(yàn)活體。
3、產(chǎn)品僅用于科研進(jìn)行動物免疫實(shí)驗(yàn)。
4、試取血樣進(jìn)行測試,查看免疫效果。
5、如果免疫成功,殺死實(shí)驗(yàn)活體,采集全部血清。
6、純化出抗體。
7、鑒定抗體。胎牛血清(無菌采制)
參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品名稱
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周期蛋白依賴性激酶14抗體
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英文名稱
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Anti-CDK14/PFTK1
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規(guī)格
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0.2ml/200μg
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產(chǎn)品應(yīng)用 WB=1:100-500 ELISA=1:500-1000 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 IF=1:50-200
(石蠟切片需做抗原修復(fù))
英文名稱 Anti-CDK14/PFTK1
中文名稱 周期蛋白依賴性激酶14抗體
別 名 cdk14; CDK14_HUMAN; Cell division protein kinase 14; Cyclin-dependent kinase 14; hPFTAIRE1; KIAA0834; mKIAA0834; PFTAIRE1; PFTK1; Serine/threonine protein kinase PFTAIRE 1; Serine/threonine-protein kinase PFTAIRE-1.
濃 度 1mg/1ml
規(guī) 格 0.2ml/200μg
抗體來源 Rabbit
克隆類型 polyclonal
交叉反應(yīng) Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit
產(chǎn)品類型 一抗
研究領(lǐng)域 細(xì)胞生物 免疫學(xué) 神經(jīng)生物學(xué) 信號轉(zhuǎn)導(dǎo) 激酶和磷酸酶
蛋白分子量 predicted molecular weight: 53kDa
性 狀 Lyophilized or Liquid
免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human CDK14/PFTK1
亞 型 IgG
純化方法 affinity purified by Protein A
儲 存 液 Preservative: 15mM Sodium Azide, Constituents: 1% BSA, 0.01M PBS, pH 7.4
抗體的制備過程:
1. 免疫原的制備
普通的大分子蛋白,通過分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進(jìn)行誘導(dǎo)表達(dá)獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為免疫原。
小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯(lián)載體對該分子進(jìn)行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,常見偶聯(lián)載體如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫動物
常用于制備抗血清的動物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等,大量生產(chǎn)時(shí)需要用到狗、綿羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集
一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動脈采血,家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血,家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定
得到的抗血清需要進(jìn)一步的純化,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進(jìn)行層析,具有高效,特異性強(qiáng),純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對分子的質(zhì)量、純度以及特異性。
5. 免疫血清的保存
建議將抗體分裝后進(jìn)行保存??贵w一般比較穩(wěn)定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價(jià),而真空干燥保存時(shí)間可以更久。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑。
抗體分子標(biāo)記技術(shù):
(一)原理
當(dāng)應(yīng)用化學(xué)氧化法時(shí)(NaI)遇強(qiáng)氧化劑,離子被氧化為分子,所生成的自由分子可與某些基團(tuán)進(jìn)行鹵化反應(yīng)。蛋白質(zhì)分子可進(jìn)行鹵化反應(yīng)的基團(tuán)主要為酪氨酸殘基,某些組氨酸殘基也可能進(jìn)行化。在應(yīng)用胺T( Chloramine T)法的實(shí)驗(yàn)中,所用的氧化劑(1,3,4,6- tetrachloro-3a,6adipheny l-glucoluril)強(qiáng)揮發(fā)性的有機(jī)溶劑中。該溶劑加入試管后,先讓其揮發(fā)(即讓氧化劑將試管包被),然后把Na125I和蛋白質(zhì)液加入包被好的試管中,反應(yīng)完成即將混合液移入他管終止反應(yīng)。
(二)準(zhǔn)備
1.試劑
經(jīng)親和層析純化的多克隆抗體或單克隆抗體;0.5mol/L磷酸鈉緩沖液,pH7.5;無載體的Na125I3.7GBq/ml(100mCi/ml)的NaOH液;100g/L三醋酸;70%乙醇;新鮮制備的含2mg/m1絡(luò)胺T的0.5mol/L磷酸鈉緩沖液(pH7.5);胺T反應(yīng)終止緩沖液;
2.儀器
凝膠過濾柱;¥-記數(shù)器;玻璃纖維濾。
(三)操作要點(diǎn)
1.產(chǎn)品僅用于科研用胺T法進(jìn)行化,也可在大約pH7.0的緩沖液中進(jìn)行;
2.如果氧化反應(yīng)損傷蛋白質(zhì),可將抗體與異硫氰酸熒光素(FITC)偶聯(lián))胺T量減少到0.02mg/m,并將偏重亞硫酸液的濃度降到0.024mg/ml;
3. Iodogen-包被的試管可在干燥器中,于室溫下保存多年;
4.1251標(biāo)記的抗體,在制備后六周內(nèi)均可使用(1251的半衰期為59.6天);
5.要注意保證所用的Na1251是新鮮的,陳舊制劑的比活性低;
6.酪氨酸的碘化偶爾會對抗原的抗體結(jié)合位點(diǎn)有干擾,因此降低其結(jié)合能力,但這種情況很少見。
下列是周期蛋白依賴性激酶14抗體 的相關(guān)熱銷產(chǎn)品:
食用油中酸價(jià)、過氧化值 100g Acanthamoeba spp.多食棘阿米巴屬通用PCR試劑盒
啤酒中酒精度、原麥芽汁濃度、總酸 330mL Acanthamoeba spp.多食棘阿米巴屬通用染料法熒光定量PCR試劑盒
肉糜中火雞源性成分(定性) 10g Acanthamoeba spp.多食棘阿米巴屬通用探針法熒光定量PCR試劑盒
肉糜中鴿子源性成分(定性) 10g Acarapis woodi武氏盾螨PCR試劑盒
肉糜中鵪鶉源性成分(定性) 10g Acarapis woodi武氏盾螨染料法熒光定量PCR試劑盒
肉糜中鵝源性成分(定性) 10g Acarapis woodi武氏盾螨探針法熒光定量PCR試劑盒
肉糜中鴨源性成分(定性) 10g Acholeplasma laidlawii 萊氏無膽甾原體PCR試劑盒
肉糜中鹿源性成分(定性) 10g Acholeplasma laidlawii 萊氏無膽甾原體染料法熒光定量PCR試劑盒
肉糜中兔源性成分(定性) 10g Acholeplasma laidlawii 萊氏無膽甾原體探針法熒光定量PCR試劑盒
肉糜中馬源性成分(定性) 10g Achromobacter spp.無色桿菌屬通用PCR試劑盒
肉糜中豬源性成分(定性) 10g Achromobacter spp.無色桿菌屬通用染料法熒光定量PCR試劑盒
肉糜中羊源性成分(定性) 10g Achromobacter spp.無色桿菌屬通用探針法熒光定量PCR試劑盒
肉糜中牛源性成分(定性) 10g Acinetobacter baumannii鮑氏不動桿菌(鮑曼不動桿菌)PCR試劑盒
甲醇/二氯甲烷(1:1)中苯并[j]熒蒽溶液 1.2ml Acinetobacter baumannii鮑氏不動桿菌(鮑曼不動桿菌)染料法熒光定量PCR試劑盒
硝基苯-D5溶液 1.2ml Acinetobacter baumannii鮑氏不動桿菌(鮑曼不動桿菌)探針法熒光定量PCR試劑盒
人血血小板衍生生長因子可溶性受體α(PDGFsR-α)ELISA試劑盒英文名稱:Platelet-Derived Growth Factor Soluble Receptor α,PDGFsR-α ELISA Kit 進(jìn)口/分裝
人循環(huán)免疫復(fù)合物(CIC)ELISA試劑盒英文名稱:circulating immune complex,CIC ELISA Kit特價(jià)供應(yīng)
人煙酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(NADPH)ELISA試劑盒 英文名稱:人高香草酸(HVA) ELISA Kit特價(jià)供應(yīng)
人延伸蛋白A(EloA)ELISA試劑盒英文名稱:elongin A,EloA ELISA Kit進(jìn)口/原裝
人氧化低密度脂蛋白(OxLDL)ELISA試劑盒 英文名稱:oxidized lowdensity lipoprotein,OxLDL ELISA Kit 特價(jià)供應(yīng)
人氧化低密度脂蛋白抗體(OLAb)ELISA試劑盒 英文名稱:oxidized lowdensity lipoprotein antibody,OLAb ELISA Kit 進(jìn)口/原裝
周期蛋白依賴性激酶14抗體 Valsa│ceratosperma (Tode) Maire種屬:Valsa│ceratosperma (Tode) Maire
分離基物:植物/泰山海棠/枝干
提供形式:斜面培養(yǎng)物
模式菌株:no
培養(yǎng)方法
培養(yǎng)基:14
生長條件:25
存儲條件:定期移植法黑腐皮殼菌