抗體制備過程:
1.材料與試劑
a.提取的動物 Ig
b.弗氏完全佐劑和弗氏不完全佐劑
c.青霉素和鏈霉素
d.實(shí)驗(yàn)動物 兔
e.其它材料及試劑
2、選擇實(shí)驗(yàn)活體。
3、產(chǎn)品僅用于科研進(jìn)行動物免疫實(shí)驗(yàn)。
4、試取血樣進(jìn)行測試,查看免疫效果。
5、如果免疫成功,殺死實(shí)驗(yàn)活體,采集全部血清。
6、純化出抗體。
7、鑒定抗體。胎牛血清(無菌采制)
參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品名稱
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卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白70抗體
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英文名稱
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Anti-CCDC70
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規(guī)格
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0.2ml/200μg
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產(chǎn)品應(yīng)用 WB=1:100-500 ELISA=1:500-1000 IP=1:20-100 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 IF=1:100-500
(石蠟切片需做抗原修復(fù))
英文名稱 Anti-CCDC70
中文名稱 卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白70抗體
別 名 CCDC 70; Coiled coil domain containing 70; Coiled coil domain containing protein 70; FLJ25853; CCD70_HUMAN.
濃 度 1mg/1ml
規(guī) 格 0.2ml/200μg
抗體來源 Rabbit
克隆類型 polyclonal
交叉反應(yīng) Human, Mouse, Rat, Horse, Rabbit
產(chǎn)品類型 一抗
研究領(lǐng)域 細(xì)胞生物 免疫學(xué)
蛋白分子量 predicted molecular weight: 22kDa
性 狀 Lyophilized or Liquid
免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human CCDC70
亞 型 IgG
純化方法 affinity purified by Protein A
儲 存 液 Preservative: 15mM Sodium Azide, Constituents: 1% BSA, 0.01M PBS, pH 7.4
抗體的制備過程:
1. 免疫原的制備
普通的大分子蛋白,通過分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進(jìn)行誘導(dǎo)表達(dá)獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為免疫原。
小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯(lián)載體對該分子進(jìn)行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,常見偶聯(lián)載體如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫動物
常用于制備抗血清的動物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等,大量生產(chǎn)時需要用到狗、綿羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集
一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動脈采血,家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血,家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定
得到的抗血清需要進(jìn)一步的純化,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進(jìn)行層析,具有高效,特異性強(qiáng),純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對分子的質(zhì)量、純度以及特異性。
5. 免疫血清的保存
建議將抗體分裝后進(jìn)行保存??贵w一般比較穩(wěn)定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價,而真空干燥保存時間可以更久。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑。
抗體分子標(biāo)記技術(shù):
(一)原理
當(dāng)應(yīng)用化學(xué)氧化法時(NaI)遇強(qiáng)氧化劑,離子被氧化為分子,所生成的自由分子可與某些基團(tuán)進(jìn)行鹵化反應(yīng)。蛋白質(zhì)分子可進(jìn)行鹵化反應(yīng)的基團(tuán)主要為酪氨酸殘基,某些組氨酸殘基也可能進(jìn)行化。在應(yīng)用胺T( Chloramine T)法的實(shí)驗(yàn)中,所用的氧化劑(1,3,4,6- tetrachloro-3a,6adipheny l-glucoluril)強(qiáng)揮發(fā)性的有機(jī)溶劑中。該溶劑加入試管后,先讓其揮發(fā)(即讓氧化劑將試管包被),然后把Na125I和蛋白質(zhì)液加入包被好的試管中,反應(yīng)完成即將混合液移入他管終止反應(yīng)。
(二)準(zhǔn)備
1.試劑
經(jīng)親和層析純化的多克隆抗體或單克隆抗體;0.5mol/L磷酸鈉緩沖液,pH7.5;無載體的Na125I3.7GBq/ml(100mCi/ml)的NaOH液;100g/L三醋酸;70%乙醇;新鮮制備的含2mg/m1絡(luò)胺T的0.5mol/L磷酸鈉緩沖液(pH7.5);胺T反應(yīng)終止緩沖液;
2.儀器
凝膠過濾柱;¥-記數(shù)器;玻璃纖維濾。
(三)操作要點(diǎn)
1.產(chǎn)品僅用于科研用胺T法進(jìn)行化,也可在大約pH7.0的緩沖液中進(jìn)行;
2.如果氧化反應(yīng)損傷蛋白質(zhì),可將抗體與異硫氰酸熒光素(FITC)偶聯(lián))胺T量減少到0.02mg/m,并將偏重亞硫酸液的濃度降到0.024mg/ml;
3. Iodogen-包被的試管可在干燥器中,于室溫下保存多年;
4.1251標(biāo)記的抗體,在制備后六周內(nèi)均可使用(1251的半衰期為59.6天);
5.要注意保證所用的Na1251是新鮮的,陳舊制劑的比活性低;
6.酪氨酸的碘化偶爾會對抗原的抗體結(jié)合位點(diǎn)有干擾,因此降低其結(jié)合能力,但這種情況很少見。
下列是卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白70抗體 的相關(guān)熱銷產(chǎn)品:
白酒中酒精度、甲醇 500mL Abalone Herpes-like Virus(AbHV)鮑皰疹樣病毒探針法熒光定量PCR試劑盒
白酒中香型鑒定(清香型/老白干香型/醬香型/芝麻香型/濃香型 可選) 50mL Abalone Shriveling Syndrome-associated Virus(AbSV)鮑肌肉萎縮癥病毒PCR試劑盒
食用油中飽和脂肪酸、單不飽和脂肪酸、多不飽和脂肪酸 20mL Abalone Shriveling Syndrome-associated Virus(AbSV)鮑肌肉萎縮癥病毒染料法熒光定量PCR試劑盒
肉糜中貂源性成分(定性) 10g Abalone Shriveling Syndrome-associated Virus(AbSV)鮑肌肉萎縮癥病毒探針法熒光定量PCR試劑盒
肉糜中狐貍源性成分(定性) 10g Abalone Spherical Virus鮑球狀病毒PCR試劑盒
肉糜中貓?jiān)葱猿煞郑ǘㄐ裕?0g Abalone Spherical Virus鮑球狀病毒染料法熒光定量PCR試劑盒
食用油中鄰苯二甲酸二辛酯(DEHP)、鄰苯二甲酸二丁酯(DBP) 20mL Abalone Spherical Virus鮑球狀病毒探針法熒光定量PCR試劑盒
食用油中B1 20mL Absidia corymbifera傘枝梨頭霉PCR試劑盒
食用油中丁基羥基茴香醚(BHA)、二丁基羥基甲苯(BHT)、叔丁基對苯二 200mL Absidia corymbifera傘枝梨頭霉染料法熒光定量PCR試劑盒
食用油中苯并芘 20g Absidia corymbifera傘枝梨頭霉探針法熒光定量PCR試劑盒
食用油中酸價、過氧化值 100g Acanthamoeba spp.多食棘阿米巴屬通用PCR試劑盒
啤酒中酒精度、原麥芽汁濃度、總酸 330mL Acanthamoeba spp.多食棘阿米巴屬通用染料法熒光定量PCR試劑盒
肉糜中火雞源性成分(定性) 10g Acanthamoeba spp.多食棘阿米巴屬通用探針法熒光定量PCR試劑盒
肉糜中鴿子源性成分(定性) 10g Acarapis woodi武氏盾螨PCR試劑盒
肉糜中鵪鶉源性成分(定性) 10g Acarapis woodi武氏盾螨染料法熒光定量PCR試劑盒
雞轉(zhuǎn)化生長因子β1(TGF-β1)ELISA試劑盒 英文名稱:Chicken Transforming Growth factor β1,TGF-β1 ELISA Kit 進(jìn)口/分裝
雞轉(zhuǎn)化生長因子β2(TGF-β2)ELISA試劑盒英文名稱:Chicken Transforming Growth factor β2,TGF-β2 ELISA Kit 進(jìn)口/分裝
家蠶卵黃蛋白(LT) ELISA試劑盒英文名稱:Bombyx mori Livetin,LT ELISA Kit特價供應(yīng)
荊豆凝集素(UEA)ELISA試劑盒 英文名稱:Ulex Europaeus agglutinin,UEA ELISA Kit進(jìn)口/分裝
規(guī)格:5*96孔口蹄疫非結(jié)構(gòu)蛋白抗體ELISA試劑盒英文名稱:Elisa特價供應(yīng)
規(guī)格:5*96孔藍(lán)耳病ELISA試劑盒英文名稱:Elisa特價促銷
卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白70抗體 Phytophthora│cactorum (Lebert & Cohn) J. Schröt.種屬:Phytophthora│cactorum (Lebert & Cohn) J. Schröt.
分離基物:梨果實(shí)
提供形式:斜面培養(yǎng)物
安全等級:1
模式菌株:no
培養(yǎng)方法
培養(yǎng)基:14
生長條件:25
存儲條件:定期移植法惡疫霉
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