抗體的制備過程:
1. 免疫原的制備
普通的大分子蛋白,產(chǎn)品僅用于科研通過分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進(jìn)行誘導(dǎo)表達(dá)獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為免疫原。
小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯(lián)載體對(duì)該分子進(jìn)行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,常見偶聯(lián)載體如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫動(dòng)物
常用于制備抗血清的動(dòng)物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等,大量生產(chǎn)時(shí)需要用到狗、綿羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集
一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動(dòng)脈采血,家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血,家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定
得到的抗血清需要進(jìn)一步的純化,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進(jìn)行層析,具有高效,特異性強(qiáng),純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對(duì)分子的質(zhì)量、純度以及特異性。
5. 免疫血清的保存
建議將抗體分裝后進(jìn)行保存??贵w一般比較穩(wěn)定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會(huì)影響效價(jià),而真空干燥保存時(shí)間可以更久。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑。
參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品名稱
|
COPA蛋白抗體
|
英文名稱
|
Anti-COPA/alpha COP I
|
規(guī)格
|
0.2ml/200μg
|
產(chǎn)品應(yīng)用 WB=1:100-500 ELISA=1:500-1000 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 ICC=1:100-500 IF=1:100-500
(石蠟切片需做抗原修復(fù))
英文名稱 Anti-COPA/alpha COP I
中文名稱 COPA蛋白抗體
別 名 Alpha coat protein; Alpha COP; Alpha COPI; AlphaCOP; Coatomer protein complex subunit alpha; Coatomer subunit alpha; COP A; COP I alpha; COPA; COPI alpha; FLJ26320; HEP COP; HEPCOP; Proxenin; Xenin; Xenopsin-related peptide; COPA_HUMAN.
濃 度 1mg/1ml
規(guī) 格 0.2ml/200μg
抗體來源 Rabbit
克隆類型 polyclonal
交叉反應(yīng) Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Cow, Rabbit, Sheep
產(chǎn)品類型 一抗
研究領(lǐng)域 細(xì)胞生物 信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo) 轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白
蛋白分子量 predicted molecular weight: 138kDa
性 狀 Lyophilized or Liquid
免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human COPA/alpha COP I
亞 型 IgG
純化方法 affinity purified by Protein A
儲(chǔ) 存 液 Preservative: 15mM Sodium Azide, Constituents: 1% BSA, 0.01M PBS, pH 7.4
抗體分子標(biāo)記技術(shù):
(一)原理
產(chǎn)品僅用于科研當(dāng)應(yīng)用化學(xué)氧化法時(shí)(NaI)遇強(qiáng)氧化劑,離子被氧化為分子,所生成的自由分子可與某些基團(tuán)進(jìn)行鹵化反應(yīng)。蛋白質(zhì)分子可進(jìn)行鹵化反應(yīng)的基團(tuán)主要為酪氨酸殘基,某些組氨酸殘基也可能進(jìn)行化。在應(yīng)用胺T( Chloramine T)法的實(shí)驗(yàn)中,所用的氧化劑(1,3,4,6- tetrachloro-3a,6adipheny l-glucoluril)強(qiáng)揮發(fā)性的有機(jī)溶劑中。該溶劑加入試管后,先讓其揮發(fā)(即讓氧化劑將試管包被),然后把Na125I和蛋白質(zhì)液加入包被好的試管中,反應(yīng)完成即將混合液移入他管終止反應(yīng)。
(二)準(zhǔn)備
1.試劑
經(jīng)親和層析純化的多克隆抗體或單克隆抗體;0.5mol/L磷酸鈉緩沖液,pH7.5;無載體的Na125I3.7GBq/ml(100mCi/ml)的NaOH液;100g/L三醋酸;70%乙醇;新鮮制備的含2mg/m1絡(luò)胺T的0.5mol/L磷酸鈉緩沖液(pH7.5);胺T反應(yīng)終止緩沖液;
2.儀器
凝膠過濾柱;¥-記數(shù)器;玻璃纖維濾。
(三)操作要點(diǎn)
1.用胺T法進(jìn)行化,也可在大約pH7.0的緩沖液中進(jìn)行;
2.如果氧化反應(yīng)損傷蛋白質(zhì),可將抗體與異硫氰酸熒光素(FITC)偶聯(lián))胺T量減少到0.02mg/m,并將偏重亞硫酸液的濃度降到0.024mg/ml;
3. Iodogen-包被的試管可在干燥器中,于室溫下保存多年;
4.1251標(biāo)記的抗體,在制備后六周內(nèi)均可使用(1251的半衰期為59.6天);
5.要注意保證所用的Na1251是新鮮的,陳舊制劑的比活性低;
6.酪氨酸的碘化偶爾會(huì)對(duì)抗原的抗體結(jié)合位點(diǎn)有干擾,因此降低其結(jié)合能力,但這種情況很少見。
抗體制備過程:
1.材料與試劑
a.提取的動(dòng)物 Ig
b.弗氏完全佐劑和弗氏不完全佐劑
c.青霉素和鏈霉素
d.實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 兔
e.其它材料及試劑
2、選擇實(shí)驗(yàn)活體。
3、進(jìn)行動(dòng)物免疫實(shí)驗(yàn)。
4、試取血樣進(jìn)行測(cè)試,查看免疫效果。
5、如果免疫成功,殺死實(shí)驗(yàn)活體,采集全部血清。
6、純化出抗體。
7、鑒定抗體。胎牛血清(無菌采制)
下列是COPA蛋白抗體 的相關(guān)熱銷產(chǎn)品:
Rat Endothelial nitric oxide synthase 3,eNOS-3 ELISA試劑盒Erythromycin≥850 μg/mg,BR
Rat Endothelial nitric oxide synthase,eNOS ELISA試劑盒Erythromycin標(biāo)準(zhǔn)品用于含量測(cè)定
rat Endothelin 1,ET-1 ELISA試劑盒Lappaconitine hydrobromide>98%,標(biāo)準(zhǔn)品
Rat endotoxin,ET ELISA試劑盒Lappaconitine hydrobromideHPLC>90%,BR
Rat eosinophil cationic protein,ECP ELISA試劑盒Lappaconitine hydrobromideHPLC>90%,BR
Rat eosinophil chemotactic factor,ECF ELISA試劑盒Dobutamine HCLBR,細(xì)胞培養(yǎng)級(jí),純度大于99%,USP29
Rat Eotaxin 1 ELISA試劑盒Dobutamine HCLBR,細(xì)胞培養(yǎng)級(jí),純度大于99%,USP29
Rat epidermal growth factor receptor,EGFR ELISA試劑盒HPCD>98%,藥用級(jí)
Rat Epidermal growth factor,EGF ELISA試劑盒 HPCD>98%,藥用級(jí)
Rat Epinephrine/Adrenaline,EPI ELISA試劑盒HPCD>98%,藥用級(jí)
Rat Epithelial neutrophil activating peptide 78,ENA-78 ELISA試劑盒Carboxymethyl chitosan羧基化度80%,粘度10mPa.s~80mpa.s(cps);氧羧甲基
Rat Epithelial-Cadherin,E-Cad ELISA試劑盒Carboxymethyl chitosan羧基化度80%,粘度10mPa.s~80mpa.s(cps);氧羧甲基
Rat Erythropoietin receptor,EPOR ELISA試劑盒Carboxymethyl chitosan羧基化度80%,粘度10mPa.s~80mpa.s(cps);氧羧甲基
Rat Erythropoietin,EPO ELISA試劑盒Enoxaparin sodiumBR,細(xì)胞培養(yǎng)級(jí);Anti-factor Xa activity(dried substance):90.0~125.0IU/mg;Anti-factor Ⅱa activity(dried substance) :20.0~35.0IU/mg。符合USP35標(biāo)準(zhǔn)
Rat E-Selectin ELISA試劑盒 Enoxaparin sodiumBR,細(xì)胞培養(yǎng)級(jí);Anti-factor Xa activity(dried substance):90.0~125.0IU/mg;Anti-factor Ⅱa activity(dried substance) :20.0~35.0IU/mg。符合USP35標(biāo)準(zhǔn)
人膜間皮細(xì)胞,MET-5A細(xì)胞1 x 10^6 cells/T25培養(yǎng)瓶
人男性正常龜頭細(xì)胞,Hs68細(xì)胞1 x 10^6 cells/T25培養(yǎng)瓶
人腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞,HS683細(xì)胞1 x 10^6 cells/T25培養(yǎng)瓶
人腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞,A172細(xì)胞1 x 10^6 cells/T25培養(yǎng)瓶
人腦膠質(zhì)細(xì)胞株(正常),HEB細(xì)胞1 x 10^6 cells/T25培養(yǎng)瓶
人腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞,HBMEC細(xì)胞1 x 10^6 cells/T25培養(yǎng)瓶
COPA蛋白抗體 GeotrichumcandidumLink種屬:GeotrichumcandidumLink
安全等級(jí):1
模式菌株:no
應(yīng)用領(lǐng)域:飼料酵母
培養(yǎng)方法
培養(yǎng)基:13
生長(zhǎng)條件:25-28℃白地霉