"HMCB Cells|人黑色素瘤細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料：詳見相關(guān)文獻(xiàn)介紹
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣
BJA-B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Y3Ag1.2.3細(xì)胞、NE-1細(xì)胞、BC-020細(xì)胞
HSC（Human Schwann）細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCC-HHM-2細(xì)胞、SupB15W細(xì)胞、GM17219細(xì)胞
RPMI-2650細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BC-021細(xì)胞、NHLF細(xì)胞、H-1648細(xì)胞
細(xì)胞生長(zhǎng)：貼壁
最近在培養(yǎng)細(xì)胞時(shí)，發(fā)現(xiàn)其狀態(tài)不是很好，很容易扎堆生長(zhǎng)，用胰酶消化的時(shí)候也是一團(tuán)一團(tuán)地被消化下來(lái)，很難把它們吹散成一個(gè)一個(gè)細(xì)胞。而且長(zhǎng)得也挺快也挺不均勻的，傳代的第二天，有些地方就長(zhǎng)得滿滿的了。想請(qǐng)教一下這是為什么呢？你好，我養(yǎng)的細(xì)胞和你一樣，消化下來(lái)也是一團(tuán)的，但吹打以后就沒有這樣的情況了。建議你分皿前還是要吹勻，分皿后在鏡下看一看，移動(dòng)培養(yǎng)皿的時(shí)候盡量動(dòng)作輕，避免晃動(dòng)。細(xì)胞生長(zhǎng)挺快，那么細(xì)胞的增殖能力應(yīng)該較強(qiáng)。胰酶消化成團(tuán)的問題我覺得有以下幾種可能：一、細(xì)胞消化后吹打不均勻，造成細(xì)胞成團(tuán)生長(zhǎng)：二、細(xì)胞細(xì)化太過，細(xì)胞成片脫落，吹打時(shí)沒有受力點(diǎn)，細(xì)胞聚團(tuán)生長(zhǎng)。解決辦法：根據(jù)細(xì)胞生長(zhǎng)的情況進(jìn)行多次消化，將同次消化下來(lái)的細(xì)胞放在一個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)。貼壁細(xì)胞傳代培養(yǎng)：一般步驟為：真空泵吸走培養(yǎng)基，１XPBS漂洗兩次，加入１mlEDTA-Tripsin（１００mm皿為例），３７度放置數(shù)分鐘，輕拍培養(yǎng)瓶使細(xì)胞自瓶壁脫落，加入適量血清，以吸管上下吸放數(shù)次以打散細(xì)胞團(tuán)塊，離心后加入新鮮培養(yǎng)基，按比例轉(zhuǎn)移至新皿。細(xì)胞的傳代最重要的是胰酶處理時(shí)間，若胰酶處理太久，容易造成細(xì)胞貼壁不緊，顯微鏡下觀察立體感不強(qiáng)，嚴(yán)重的時(shí)候甚至?xí)斐杉?xì)胞死亡。我談?wù)剛€(gè)人經(jīng)驗(yàn)：HepG-２、A５４９、Hela、SGC-７９０１幾種癌細(xì)胞處理時(shí)間可適當(dāng)放長(zhǎng)，一般處理５-６min，C２C１２、COS-７、NIH-３T３比較容易脫落，２min足矣，P１９Cl６和２９３細(xì)胞貼壁不緊，可在PBS漂洗后，直接換新鮮培養(yǎng)基打散。
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細(xì)胞物種來(lái)源：人源或鼠源等其它物種來(lái)源
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
CL-34細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA134細(xì)胞、IOSE-29細(xì)胞、Hep 3B細(xì)胞
hEM15A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H2591細(xì)胞、U-251_MG細(xì)胞、M-14細(xì)胞
SCC-9細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Ls-174-T細(xì)胞、TU 686細(xì)胞、A2780/CP70細(xì)胞
T/GHA-VSMC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SGC-7901細(xì)胞、NCIH441細(xì)胞、KOSC2細(xì)胞
細(xì)胞傳代方法：１：６—１：１０傳代，２天換液１次
傳代培養(yǎng)及其操作步驟：原代細(xì)胞培養(yǎng)成功以后，需要進(jìn)行分離培養(yǎng)，否則細(xì)胞會(huì)因生存空間不足或密度過大，營(yíng)養(yǎng)障礙，影響細(xì)胞生長(zhǎng)。細(xì)胞由原培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)分離稀釋后傳到新的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)的過程稱之為傳代培養(yǎng)。傳代細(xì)胞允許培養(yǎng)的細(xì)胞擴(kuò)增(形成細(xì)胞株)，可以進(jìn)行細(xì)胞克隆，易于保存，但可能喪失一些特殊的細(xì)胞和分化特征。傳代細(xì)胞形成細(xì)胞株的利處在于提供了大量持久的實(shí)驗(yàn)材料，便于實(shí)驗(yàn)。傳代細(xì)胞培養(yǎng)操作步驟：１)吸掉或倒掉培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)舊培養(yǎng)液；２)向瓶?jī)?nèi)加入胰蛋白酶液和EDTA混合液少量。以能覆蓋培養(yǎng)瓶底為宜；３)置３７℃孵箱或室溫(２５℃溫度)下進(jìn)行消化，２-５min后把培養(yǎng)瓶放在倒置顯微鏡下進(jìn)行觀察，當(dāng)發(fā)現(xiàn)胞質(zhì)回縮、細(xì)胞間隙增大后，應(yīng)立即中止消化；４)吸出消化液，向瓶?jī)?nèi)加入Hanks液少量，輕輕轉(zhuǎn)動(dòng)培養(yǎng)瓶，把殘留消化液沖掉，然后再加培養(yǎng)液。如果僅使用胰蛋白酶消化，在吸除胰蛋白液后，可直接加入少量含血清的培養(yǎng)液，終止消化；５)使用彎頭吸管，吸取瓶?jī)?nèi)培養(yǎng)液，按順序反復(fù)輕輕吹打瓶壁細(xì)胞，使之從瓶壁脫離形成細(xì)胞懸液。吹打時(shí)動(dòng)作要輕柔，以防用力過猛損傷細(xì)胞；６)用計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)后，分別接種于新的培養(yǎng)瓶中，置CO２培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)；７)細(xì)胞培養(yǎng)換液時(shí)間應(yīng)根據(jù)細(xì)胞生長(zhǎng)的狀態(tài)和實(shí)驗(yàn)要求來(lái)確定。一般２-３d后應(yīng)換一次生長(zhǎng)液。待細(xì)胞鋪滿器皿底面，即可使用；也可繼續(xù)傳代擴(kuò)大培養(yǎng)或換成維持液。
細(xì)胞來(lái)源說(shuō)明：細(xì)胞主要來(lái)源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系
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細(xì)胞生長(zhǎng)特性：貼壁生長(zhǎng)
Panc05.04細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCPEpiC細(xì)胞、SW.620細(xì)胞、AtT20細(xì)胞
G-Olig2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：C3H10T1-2細(xì)胞、SNUC1細(xì)胞、Calu 6細(xì)胞
NCIH520細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUDHL-16細(xì)胞、A 172細(xì)胞、DC2.4細(xì)胞
NCI-H524細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：DHL8細(xì)胞、IMR32細(xì)胞、UPCI-SCC090細(xì)胞
細(xì)胞復(fù)蘇后貼壁細(xì)胞較少的問題分析：總結(jié)１：復(fù)蘇過程沒有問題，是否是從液氮拿出直接放入溫水，還有培養(yǎng)箱，二氧化碳濃度，培養(yǎng)基、PH值等環(huán)節(jié)。要么加高濃度FBS １５-２０%，看看能否幫助貼壁，當(dāng)然也需要考慮血清問題，還有確信拿來(lái)的細(xì)胞沒問題?？偨Y(jié)２：首先應(yīng)該懷疑凍存，實(shí)際上復(fù)蘇出問題的可能非常小，因?yàn)椴僮骱?jiǎn)單，而且死板。１、你凍存的時(shí)候是不是消化的時(shí)間過長(zhǎng)，這是一般人所注意不到的，即使書上也不講這個(gè)問題，太長(zhǎng)的消化時(shí)間會(huì)讓細(xì)胞復(fù)蘇時(shí)失去貼壁能力，表現(xiàn)為先貼后死，原因是在你復(fù)蘇的時(shí)候細(xì)胞已進(jìn)入凋亡程序，不可逆轉(zhuǎn)的死亡。２、你的凍存液好不好，是什么，甘油還是DMSO，質(zhì)量非常重要，否則也會(huì)死亡。３、你的凍存液的量加的是不是太多，ATCC推薦是不超過７%，大于５%，太多也不好。４、你在凍存的時(shí)候是不是把DMSO混均勻，這個(gè)有一些影響，但不算太大。５、你的凍存是否按部就班，就是所溫度梯度是不是把握嚴(yán)格，很多人容易忘卻這個(gè)事情，因?yàn)檫@個(gè)東西流程長(zhǎng)。６、如果你細(xì)胞污染，你是否能很快看到，我比我的導(dǎo)師能早一天看到污染。從這個(gè)角度講建議去除離心這步。７、你的細(xì)胞在凍存前是否過密。還有，不贊成孵箱污染這個(gè)概念的，所有在一個(gè)孵箱里的細(xì)胞都污染一個(gè)細(xì)菌的話，這個(gè)細(xì)菌是源于孵箱的，但這不代表孵箱污染，因?yàn)榉跸錈o(wú)論你如何處理都有大量的細(xì)菌，問題在操作。每次污染的原因都要盡可能的找，以后就不犯同樣的問題，這個(gè)很重要，不能靠猜，否則你就有可能細(xì)胞養(yǎng)絕最后換課題，這個(gè)見得太多了，別不當(dāng)會(huì)事。
D341細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：hFOB1.19細(xì)胞、CAL-120細(xì)胞、KASUMI6細(xì)胞
SKRC-42細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1618細(xì)胞、Ra No. 1細(xì)胞、NK-92MI細(xì)胞
HFL細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HeLaS3細(xì)胞、hTERT RPE-1細(xì)胞、SKLU-1細(xì)胞
SKNDZ細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：751-NA-15細(xì)胞、HCC366細(xì)胞、PFSK-1細(xì)胞
Nb-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：C666-1細(xì)胞、SK MEL 5細(xì)胞、CL40細(xì)胞
SMA-560細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MD Anderson-Metastatic Breast-361細(xì)胞、801-D細(xì)胞、Tu-686細(xì)胞
3-LL細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCD 966 SK細(xì)胞、SRS-82細(xì)胞、SW-954細(xì)胞
Ramos-RA1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-740細(xì)胞、H2052_MM細(xì)胞、870細(xì)胞
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HRVEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCK-81細(xì)胞、COLO_320DM細(xì)胞、L-6細(xì)胞
C42細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LUDLU-1細(xì)胞、1E8-H細(xì)胞、PLA 802細(xì)胞
T98G細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RS4:11細(xì)胞、130T細(xì)胞、NSI/1-Ag4-1細(xì)胞
SNGM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H2009細(xì)胞、RT4-D6-P2T細(xì)胞、293-FT細(xì)胞
Dunn LM8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：343MG細(xì)胞、Fortner's melanotic melanoma #3細(xì)胞、BMSCs（mBMSCs）細(xì)胞
CAMA-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Human Microglia Clone 3細(xì)胞、PC3M-IE8細(xì)胞、WERI細(xì)胞
253J B-V細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MNNG/HOS Cl #5細(xì)胞、HEC-1A細(xì)胞、H838細(xì)胞
253JB-V細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OV2008細(xì)胞、HSC-6細(xì)胞、NCI-HUT-520細(xì)胞
253JB-V細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OV2008細(xì)胞、HSC-6細(xì)胞、NCI-HUT-520細(xì)胞
Y1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CaSki細(xì)胞、28SC細(xì)胞、LS-123細(xì)胞
Normal fibroblast-10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：58F細(xì)胞、PNT1A細(xì)胞、JVM-2細(xì)胞
BA/F3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：DSL-6A-C1細(xì)胞、HEP-3B2細(xì)胞、MDA-MB468細(xì)胞
CV-1 in Origin Simian-7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MCF-7/ADR細(xì)胞、U937細(xì)胞、Vero C1008細(xì)胞
16HBE14o-細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Panc 3.27細(xì)胞、SGC7901細(xì)胞、HeLa/S3細(xì)胞
Kasumi-6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WEHI-3B細(xì)胞、HS578細(xì)胞、OVCA 420細(xì)胞
NCIH2066細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAL-62細(xì)胞、hTERT-HME-1細(xì)胞、SUDHL10細(xì)胞
NCI-H661細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-MB-231細(xì)胞、NCI H295R細(xì)胞、RetroPack PT67細(xì)胞
H1404細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：He-La細(xì)胞、Hs-343-T細(xì)胞、PT-67細(xì)胞
8226細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCT-15細(xì)胞、H-1930細(xì)胞、NCI H295R細(xì)胞
SK ES 01細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MKN45細(xì)胞、PSN-1細(xì)胞、NCI-H1385細(xì)胞
CSQT-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Blotchy fibroblast-11細(xì)胞、COR-L88細(xì)胞、BT-474細(xì)胞
Hs68細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：DMS 114細(xì)胞、OCI-LY-1細(xì)胞、M21細(xì)胞
KM.12細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HFLS細(xì)胞、GM02131細(xì)胞、SK HEP 01細(xì)胞
L-5178-Y-R細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WPE-int細(xì)胞、SW260細(xì)胞、OUMS23細(xì)胞
C33細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：2B4細(xì)胞、B16-F10--RED細(xì)胞、MNNG-HOS (TE 85, clone F-5)細(xì)胞
CL MC/9細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HFL 1細(xì)胞、Walker256-TC細(xì)胞、NOR-10細(xì)胞
H716細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Colo16細(xì)胞、BRL 3A細(xì)胞、NCI-H1666細(xì)胞
KRC-Y細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Human Foreskin Fibroblast細(xì)胞、EAC細(xì)胞、Y3M細(xì)胞
TE-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OC316細(xì)胞、Sf-21細(xì)胞、HCC-1395細(xì)胞
HD11細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM05887細(xì)胞、RPMI-6666細(xì)胞、SKNDZ細(xì)胞
SW 1573細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Sp 2817細(xì)胞、CBRH7919細(xì)胞、MDA231細(xì)胞
SKHEP-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNT-8細(xì)胞、NCI-H1436細(xì)胞、Human Microvascular Endothelial Cell line-1細(xì)胞
MV 3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDAMB361細(xì)胞、UCLA SO M21細(xì)胞、Stanford University Pediatric T-cell line 1細(xì)胞
CCRF-SB細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RT-BM 1細(xì)胞、NS1-1 Ag4.1細(xì)胞、C12細(xì)胞
A-431細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RL95-2細(xì)胞、Raji細(xì)胞、SKBR-3細(xì)胞
MG-HU-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TE-32細(xì)胞、CCD-1112sk細(xì)胞、LTEPa2細(xì)胞
KLM-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPE1細(xì)胞、KALS1細(xì)胞、MEL細(xì)胞
Hs940-T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H2228細(xì)胞、SNU-886細(xì)胞、DMS 79細(xì)胞
NBL-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RL952細(xì)胞、H-2085細(xì)胞、WSUDLCL2細(xì)胞
AN-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：U373MG細(xì)胞、COLO 320細(xì)胞、HCM細(xì)胞
BNL CL2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BT 20細(xì)胞、MDA2B細(xì)胞、Hs-600-T細(xì)胞
HEL299細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKOV3細(xì)胞、SK.OV.3細(xì)胞、TGBC11T細(xì)胞
GM2219C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：AK細(xì)胞、HEK 293-EBNA細(xì)胞、Loucy細(xì)胞
hTERT-RPE-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SAS細(xì)胞、MASMC細(xì)胞、TE32細(xì)胞
H-69細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：VK2 (E6/E7)細(xì)胞、E304細(xì)胞、NCI-H1048細(xì)胞
NT-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CATH.a細(xì)胞、CT 26細(xì)胞、3T3-L1細(xì)胞
NCI-H727細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：T-ALL 1細(xì)胞、NCI-H1993細(xì)胞、KG-1細(xì)胞
Kit 225細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCC-IT細(xì)胞、MC3T3-L1細(xì)胞、NFHIOSE-29細(xì)胞
HIMEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-157細(xì)胞、2V6.11細(xì)胞、SCL-2細(xì)胞
Y3M細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCCLM3細(xì)胞、DiFi細(xì)胞、DHL8細(xì)胞
TMD8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：UMNSAH/DF-1細(xì)胞、H-1915細(xì)胞、SNU387細(xì)胞
HMCB Cells|人黑色素瘤細(xì)胞系
TE10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：V-79-4細(xì)胞、NCI-H526細(xì)胞、Jurkat FHCRC細(xì)胞
NCIH727細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-N87細(xì)胞、NCI-H1882細(xì)胞、COV434細(xì)胞
HFLS細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MPC11細(xì)胞、Panc05.04細(xì)胞、Panc813細(xì)胞
PC-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LS180細(xì)胞、RC-2細(xì)胞、Jurkat E6-1細(xì)胞
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