"NCI-H1944 Cells|人非小細胞肺癌細胞系
細胞背景資料:詳見相關文獻介紹
細胞形態(tài):上皮細胞樣
Hs 870.T細胞系相關產品:RPVSMC細胞、MRC5細胞、KYSE510細胞
SUPB-15細胞系相關產品:CCD-841-CoN細胞、HCT-8細胞、NCI-H446細胞
EAC細胞系相關產品:U-373 MG細胞、Acanthosis Nigricans 3rd attempt-CArcinoma細胞、Swiss-3T3細胞
細胞生長:貼壁
最近在培養(yǎng)細胞時,發(fā)現(xiàn)其狀態(tài)不是很好,很容易扎堆生長,用胰酶消化的時候也是一團一團地被消化下來,很難把它們吹散成一個一個細胞。而且長得也挺快也挺不均勻的,傳代的第二天,有些地方就長得滿滿的了。想請教一下這是為什么呢?你好,我養(yǎng)的細胞和你一樣,消化下來也是一團的,但吹打以后就沒有這樣的情況了。建議你分皿前還是要吹勻,分皿后在鏡下看一看,移動培養(yǎng)皿的時候盡量動作輕,避免晃動。細胞生長挺快,那么細胞的增殖能力應該較強。胰酶消化成團的問題我覺得有以下幾種可能:一、細胞消化后吹打不均勻,造成細胞成團生長:二、細胞細化太過,細胞成片脫落,吹打時沒有受力點,細胞聚團生長。解決辦法:根據(jù)細胞生長的情況進行多次消化,將同次消化下來的細胞放在一個細胞培養(yǎng)瓶內。貼壁細胞傳代培養(yǎng):一般步驟為:真空泵吸走培養(yǎng)基,1XPBS漂洗兩次,加入1mlEDTA-Tripsin(100mm皿為例),37度放置數(shù)分鐘,輕拍培養(yǎng)瓶使細胞自瓶壁脫落,加入適量血清,以吸管上下吸放數(shù)次以打散細胞團塊,離心后加入新鮮培養(yǎng)基,按比例轉移至新皿。細胞的傳代最重要的是胰酶處理時間,若胰酶處理太久,容易造成細胞貼壁不緊,顯微鏡下觀察立體感不強,嚴重的時候甚至會造成細胞死亡。我談談個人經驗:HepG-2、A549、Hela、SGC-7901幾種癌細胞處理時間可適當放長,一般處理5-6min,C2C12、COS-7、NIH-3T3比較容易脫落,2min足矣,P19Cl6和293細胞貼壁不緊,可在PBS漂洗后,直接換新鮮培養(yǎng)基打散。
NCI-H1944 Cells|人非小細胞肺癌細胞系
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
細胞產品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
9L細胞系相關產品:ZYM-DIEC02細胞、Homo sapiens No. 578, tumor cells細胞、HCC1008細胞
H-1882細胞系相關產品:IPECJ2細胞、K7M2細胞、MIA PaCa-2細胞
H2052細胞系相關產品:K-562細胞、P560細胞、L cells (TK-)細胞
JHH-2細胞系相關產品:MRC-9細胞、LP1細胞、IM95細胞
細胞傳代方法:1:3—1:6傳代,每周換液2—3次
幾種實驗室細胞培養(yǎng)基成分的作用:1)NaHCO3的作用是什么?與CO2一起形成緩沖系統(tǒng),保持培養(yǎng)基PH值穩(wěn)定;2)酸鈉的作用是什么?酸鈉可以作為細胞培養(yǎng)中的替代碳源,盡管細胞更傾向于以葡萄糖作為碳源,但是如果沒有葡萄糖的話,細胞也可以代謝酸鈉。酸鈉的貯存液濃度一般為50mM,-20℃保存,培養(yǎng)基中的終濃度為1mM;3)加入HEPES有何好處?培養(yǎng)基中最常用的Buffer system是碳酸鹽,它可提供營養(yǎng),但卻在生理PH值條件下會降低緩沖能力。而HEPES是一種很強的Buffer,加入HEPES能使細胞培養(yǎng)基在PH7.2-7.6條件下緩沖能力增強。Hepes的貯存液濃度一般為1M,常溫保存。培養(yǎng)基中的終濃度為25mM,即5ml 1M的Hepes加入到200ml完全培養(yǎng)基中;4)紅的作用是什么?紅在培養(yǎng)基中被用來作為PH值指示劑:中性時為紅色,酸性時為黃色,堿性時為紫色;5)谷酰胺的作用是什么?幾乎所有的細胞對谷酰胺都有膠高的要求。谷酰胺脫掉基后,可作為培養(yǎng)細胞的能量來源,參與蛋白質的合成和能量代謝。在缺少谷酰胺時,細胞生長不良而死亡。所以,各種培養(yǎng)液中都含有較大量的谷酰胺。谷酰胺在溶液中很不穩(wěn)定,應置-20℃冰凍保存,用前加入培養(yǎng)基中。加有谷酰胺的液體培養(yǎng)基4度冰箱儲存兩周以上時,應重新加入原來量的谷酰胺。試驗操作中常配制高濃度(100倍)的谷酰胺溶液(1ml/支),分裝使用,-20℃保存。使用時,每支1ml的谷酰胺加入到99ml完全培養(yǎng)基中,使其終濃度為2mM培養(yǎng)基。
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
NCI-H1944 Cells|人非小細胞肺癌細胞系
細胞生長特性:貼壁生長
OCI-AML-5細胞系相關產品:SNU398細胞、16HBE細胞、SK-N-BE(2C)細胞
HCASMC細胞系相關產品:NR-8383細胞、J-774細胞、MA-104細胞
NCI-H2030細胞系相關產品:TK+/- (clone 3.7.2C)細胞、H-2591細胞、BIU-87/Adr細胞
FD-LSC-1細胞系相關產品:DI-TNC1細胞、DK-MG細胞、C127細胞
貼壁消化難題:1,先用PBS 把細胞洗兩遍,使瓶內沒有血清了,減少對胰酶的中和,然后用新配的0.25%的胰酶加入3ml左右,放在37度,然后可以在細胞有些消化下來時,拿著瓶口,運用手腕的力量輕輕震蕩瓶內液體,這樣細胞很快就下來了,還不需要吹打,分散也均勻;2,成團、絮狀:消化液里加入edta可以減少細胞成團的現(xiàn)象,血清可以終止胰酶的作用,如果是進口血清的話也能終止edta的作用。用胰酶消化后胰酶可以倒掉,也可以不倒,直接加血清終止,如果消化液中加入了edta的話,就要將消化液倒干凈,如果細胞貼壁要求不是很嚴格的話,一般不需要進行離心。鼻咽癌細胞的貼壁能力很強,用0.5%胰酶(含0.1%EDTA)一般要消化12~15min。用PBS洗滌時要洗凈殘余的培養(yǎng)基,加入胰酶后在培養(yǎng)箱中消化(避免細胞室溫下受損以及在此溫度時胰酶活性最強)至細胞收縮變圓(可顯微鏡下觀察)且有少許細胞脫落(有流下來的趨勢),隨后立即棄去胰酶(如果脫落的細胞很多且需要大量細胞實驗,則不能棄去胰酶),加入培養(yǎng)基仔細吹打(不能用無血清培養(yǎng)基或者PBS替代,否則細胞聚集成團塊或絮狀)。一般我都離心一次棄去上清(去除殘留的胰酶及漂浮的死細胞或細胞碎片);消化過度:馬上用培養(yǎng)基中和,用吸管吹打細胞,收集全部的細胞到以無菌的離心管中800RPM 3分鐘。棄上清,用全培重懸,換新的培養(yǎng)瓶繼續(xù)培養(yǎng),狀態(tài)不好的細胞在培養(yǎng)的過程中會死亡脫落,在換液的時候可以清除掉!
LS 180細胞系相關產品:HT-1080細胞、MODE-K細胞、H-661細胞
ME-1 [Human leukemia]細胞系相關產品:Murine Thymic Epithelial Cell line 1細胞、U373MG細胞、NCIH2591細胞
H1838細胞系相關產品:DCS細胞、P3.NS-1/1.Ag4.1細胞、MDAMB157細胞
NRCC細胞系相關產品:Fu97細胞、8505C細胞、COLO320HSR細胞
NPA87細胞系相關產品:DU 145細胞、Sc-1細胞、SHEP1細胞
Jurkat, Clone E6-1細胞系相關產品:H2452細胞、HEYA8細胞、MC3T3E1細胞
BJ1細胞系相關產品:MD Anderson-Metastatic Breast-330細胞、T241細胞、NCI-H510A細胞
MT4細胞系相關產品:B6Tert-1細胞、XWLC-05細胞、MRC-5細胞
NCI-H1944 Cells|人非小細胞肺癌細胞系
rRTEC細胞系相關產品:H596細胞、NCI-H1105細胞、MCF7ADR細胞
CCD 841 CoTr細胞系相關產品:COLO-320HSR細胞、CHP212細胞、C3H-10T1/2細胞
MDAMB435細胞系相關產品:NCIH647細胞、PTK1細胞、UACC 812細胞
Ly1細胞系相關產品:Intestinal Porcine Epithelial Cell line-1細胞、Sp2/0細胞、NCIH847細胞
C-28I2細胞系相關產品:RPPVEC細胞、H-1650細胞、NCI-H1993細胞
JVM-3細胞系相關產品:KYSE180細胞、HEL92.1.7細胞、Tca8113細胞
H2029細胞系相關產品:CAL27細胞、Panc08.13細胞、Hs 274細胞
Hs819T細胞系相關產品:HS-766-T細胞、U2OS細胞、INS1-E細胞
Hs819T細胞系相關產品:HS-766-T細胞、U2OS細胞、INS1-E細胞
Hs_578t細胞系相關產品:NOZC-1細胞、MILE SVEN 1細胞、NCIH1876細胞
H1869細胞系相關產品:PA12細胞、SW900細胞、H283細胞
TGBC11TKB細胞系相關產品:NCIH2085細胞、NCTC-3960細胞、OVCAR-433細胞
HepG2/C3A細胞系相關產品:SUM-102PT細胞、HUCCT1細胞、LS411細胞
SJCRH30細胞系相關產品:SBC-3細胞、RCC-10RGB細胞、NCI660細胞
OCIAML4細胞系相關產品:NG10815細胞、A2780/Taxol細胞、3T3 clone A31細胞
HPAF2細胞系相關產品:EB-2細胞、NCI-H1373細胞、NCIH358細胞
GM03569B細胞系相關產品:NCI-H1819細胞、HCC1588細胞、MOLT 3細胞
H-1755細胞系相關產品:NCIH2342細胞、COLO-680N細胞、OCI-AML-3細胞
mREC細胞系相關產品:SKNBE(2c)細胞、16-HBE14o細胞、LLC-PK-1細胞
HCC-70細胞系相關產品:Swiss/3T3細胞、HBL100細胞、C8D1A細胞
SBC-5細胞系相關產品:SACC-LM細胞、Soleus clone 8細胞、253J-Bladder-V細胞
Co320細胞系相關產品:HOMEC細胞、H-508細胞、SU-DHL1細胞
L929(NCTC)細胞系相關產品:C-26細胞、GP-293細胞、AHH1細胞
TPC1細胞系相關產品:TE-4細胞、Mono Mac 1細胞、U-373MG細胞
SHIN3細胞系相關產品:HO8910PM細胞、H187細胞、PC 61細胞
NCI-H2171細胞系相關產品:AN3細胞、Walker/LLC-WRC 256細胞、RCK8細胞
HMC-1細胞系相關產品:ML-2細胞、NCI-H711細胞、H35 Reuber細胞
BNL CL2細胞系相關產品:BT 20細胞、MDA2B細胞、Hs-600-T細胞
KP-N-RT細胞系相關產品:NCIH1563細胞、Ca-Ski細胞、HG2855細胞
LLC-WRC 256細胞系相關產品:HuNS1細胞、HEEpiC細胞、MHCC-LM3細胞
OKa-C-1細胞系相關產品:RPMI-1788細胞、C33細胞、N-87細胞
SW 839細胞系相關產品:EL 4細胞、TT細胞、FU-97細胞
D324 Med細胞系相關產品:HFL細胞、FHCRC-11細胞、PANC0504細胞
OCI-Ly 18細胞系相關產品:8305C細胞、F81細胞、P-3J細胞
HEK293FT細胞系相關產品:U-87-MG細胞、251MG細胞、B16F10細胞
H1581細胞系相關產品:HSC-6細胞、L 132細胞、SPDC-CCL141細胞
3T6細胞系相關產品:L cells細胞、alpha TC1-6細胞、OV 1063細胞
3T6細胞系相關產品:L cells細胞、alpha TC1-6細胞、OV 1063細胞
TSUpr1細胞系相關產品:SNU761細胞、UCLA NPA871細胞、KG1細胞
DMS 153細胞系相關產品:Hs852T細胞、CHO細胞、T/G HA VSMC細胞
Panc08.13細胞系相關產品:PC-3M-1E8細胞、MEL-526細胞、NIH3T3-L1細胞
NSI/1-Ag4-1細胞系相關產品:NCI-H2066細胞、Nthy-ori 3.1細胞、alpha TC1 clone 6細胞
SW-1417細胞系相關產品:Jurkat FHCRC細胞、NCI-H889細胞、JURKAT E-6.1細胞
KU-19-19細胞系相關產品:MM1.S細胞、SK-NEP-1細胞、HT細胞
Mono Mac 1細胞系相關產品:BHP-10細胞、KE 37細胞、Leukemia 1210細胞
MD Anderson-Metastatic Breast-453細胞系相關產品:Gingival carcinoma Neck Metastasis細胞、Okayama University Medical School-23細胞、FHL124細胞
TE-13細胞系相關產品:Jurkat clone A3細胞、HOS (TE85)細胞、NRK細胞
Hs934T細胞系相關產品:Kit-225-K6細胞、hRPTC細胞、HEK293F細胞
beta TC6細胞系相關產品:RPMI1788細胞、HUVEC-C[HUVEC]細胞、STTG1細胞
Kit225-K6細胞系相關產品:NCI-H358細胞、Okayama University Medical School-27細胞、HeLa.S3細胞
Lu99A細胞系相關產品:B16-F1細胞、Renal Carcinoma細胞、MBT2細胞
NCI-H1944 Cells|人非小細胞肺癌細胞系
M20 [Human melanoma]細胞系相關產品:WM115細胞、CAL 78細胞、SUDHL-16細胞
NS653細胞系相關產品:H1869細胞、HECCL-1細胞、NCI H747細胞
H1836細胞系相關產品:H-1581細胞、FRH-0201細胞、NHLF細胞
SK-MEL3細胞系相關產品:Human Embryo Lung-1細胞、HC-11細胞、HEK-293-F細胞
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