"NCI-H2228 Cells|人非小細胞肺癌細胞系
細胞背景資料：詳見相關(guān)文獻介紹
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
Mouse podocyte細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PANC 813細胞、MEC-1細胞、L5178Y-R細胞
YD-15細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Ketr3細胞、NSC34細胞、Panc-10.05細胞
A549 ATCC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ECC1細胞、NCI-H2023細胞、NCIH2122細胞
細胞生長：貼壁
最近在培養(yǎng)細胞時，發(fā)現(xiàn)其狀態(tài)不是很好，很容易扎堆生長，用胰酶消化的時候也是一團一團地被消化下來，很難把它們吹散成一個一個細胞。而且長得也挺快也挺不均勻的，傳代的第二天，有些地方就長得滿滿的了。想請教一下這是為什么呢？你好，我養(yǎng)的細胞和你一樣，消化下來也是一團的，但吹打以后就沒有這樣的情況了。建議你分皿前還是要吹勻，分皿后在鏡下看一看，移動培養(yǎng)皿的時候盡量動作輕，避免晃動。細胞生長挺快，那么細胞的增殖能力應(yīng)該較強。胰酶消化成團的問題我覺得有以下幾種可能：一、細胞消化后吹打不均勻，造成細胞成團生長：二、細胞細化太過，細胞成片脫落，吹打時沒有受力點，細胞聚團生長。解決辦法：根據(jù)細胞生長的情況進行多次消化，將同次消化下來的細胞放在一個細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)。貼壁細胞傳代培養(yǎng)：一般步驟為：真空泵吸走培養(yǎng)基，１XPBS漂洗兩次，加入１mlEDTA-Tripsin（１００mm皿為例），３７度放置數(shù)分鐘，輕拍培養(yǎng)瓶使細胞自瓶壁脫落，加入適量血清，以吸管上下吸放數(shù)次以打散細胞團塊，離心后加入新鮮培養(yǎng)基，按比例轉(zhuǎn)移至新皿。細胞的傳代最重要的是胰酶處理時間，若胰酶處理太久，容易造成細胞貼壁不緊，顯微鏡下觀察立體感不強，嚴重的時候甚至?xí)斐杉毎劳?。我談?wù)剛€人經(jīng)驗：HepG-２、A５４９、Hela、SGC-７９０１幾種癌細胞處理時間可適當放長，一般處理５-６min，C２C１２、COS-７、NIH-３T３比較容易脫落，２min足矣，P１９Cl６和２９３細胞貼壁不緊，可在PBS漂洗后，直接換新鮮培養(yǎng)基打散。
NCI-H2228 Cells|人非小細胞肺癌細胞系
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
NCIH1838細胞系相關(guān)產(chǎn)品：High Five細胞、A-20細胞、RMS 1598細胞
KTCTL140細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-2009細胞、Evsa-T細胞、COLO 678細胞
RASMC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI-Ly8細胞、TPC-1細胞、WSU-DLCL-2細胞
WI 38細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM-346細胞、MOLT-4細胞、Okayama University Medical School-27細胞
細胞傳代方法：１：２-１：３傳代，每周２-３次。
傳代細胞培養(yǎng)注意事項：１)掌握好細胞消化的時間，消化時間過短時，細胞不宜從瓶壁脫落，過長的消化會導(dǎo)致細胞脫落、損傷；２)掌握好消化濃度，當消化液濃度過高時，消化時間應(yīng)縮短，過低時細胞消化時間相對延長。體內(nèi)細胞培養(yǎng)及其操作步驟：瘤細胞懸液接種１)無菌選取生長良好(有光澤，淡紅色)瘤組織或?qū)?shù)生長期培養(yǎng)瘤細胞；２)在PBS中將瘤組織剪碎后用勻漿器研磨，經(jīng)８０～１００目篩網(wǎng)過濾成細胞懸液；３)培養(yǎng)細胞應(yīng)用PBS洗兩遍；４)計數(shù)并調(diào)整細胞濃度至１０(７)～１０(８)/ml；５)常規(guī)消毒后，于接種部位(通常為背部或腋窩腹股溝皮下)用醫(yī)用注射器皮下潛行一段后注入細胞懸液(０.１ml/部位，＞１０(６)細胞)。初次接種成功率低，細胞數(shù)盡可能多一些；６)次日注意觀察動物一般情況。初次接種一般有一段較長的潛伏期，以后隨著傳代潛伏期逐漸縮短，最后固定為一個相對穩(wěn)定的時間。腹水瘤的建立與腹水瘤的接種：將實體瘤細胞直接種于小鼠腹腔、腹壁或其他部位，引起腹水，腹水中含有瘤細胞，將這種腹水反復(fù)傳代，即可成為腹水瘤。初次傳代時，腹水常呈血性(含大量紅細胞)，反復(fù)傳代后腹水逐漸變成乳白色。腹水瘤的接種過程如下：１)將凍存或培養(yǎng)的腹水瘤細胞離心和洗滌，進行細胞計數(shù)；２)消毒動物，左下腹穿刺接種１×１０(６)腹水瘤細胞；３)接種腹水瘤細胞后約７-１２d，待小鼠腹部明顯膨大。用碘酒棉球消毒小鼠腹部，用９號針頭抽取腹水，也可行腹部解剖后，用滴管吸取。每只小鼠可抽３-５ml；４)抽取的腹水經(jīng)３０００rpm離心１５min，收集上清，分裝凍存?zhèn)溆谩?/span>
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
NCI-H2228 Cells|人非小細胞肺癌細胞系
細胞生長特性：貼壁生長
Rat Fetal Lung-6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：JB6 [Mouse]細胞、HUV-EC-C細胞、SK-MEL-2細胞
U251細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Human Lung Microvascular Endothelial Cell line-5a細胞、H-2444細胞、B16-F10-BL6細胞
H1954細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Eca109細胞、HEK-293-FT細胞、EAC細胞
IMR 90細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU-398細胞、SCLC-21H細胞、Sp2/mIL-6細胞
細胞復(fù)蘇相關(guān)注意事項：１.取細胞的過程中注意帶好防凍手套，護目鏡。此項尤為重要，細胞凍存管可能漏入液氮，解凍時凍存管中的氣溫急劇上升，可導(dǎo)致爆炸。２.凍存液的問題：凍存液的配置已是常識，在這里不作詳述，但二甲基亞砜(DMSO )對細胞不是完全無毒副作用，在常溫下，二甲基亞砜對細胞的毒副作較大，因此，必須在１-２min內(nèi)使凍存液完全融化。如果復(fù)蘇溫度太慢，會造成細胞的損傷，二甲基亞砜(DMSO)選擇進口產(chǎn)品。３.離心前須加入少量培養(yǎng)液。細胞解凍后二甲基亞砜濃度較高，注意加入少量培養(yǎng)液可稀釋其濃度，以減少對細胞的損傷。４.離心問題：目前主要有兩種見解。一種是解凍后的細胞懸液直接吹打均勻后分裝到培養(yǎng)瓶中進行培養(yǎng)，第二天換液。因為離心的目的是兩個，去除DMSO，去除死細胞，這個是標準流程，但對一般人來說，把握不好離心轉(zhuǎn)速和時間，轉(zhuǎn)的不夠活細胞沉底的少，細胞就全被扔掉了，轉(zhuǎn)過了活細胞會受壓過大，死亡。此外在操作過程中容易污染，所以不推薦。另一種說法為細胞懸液中含有二甲基亞砜(DMSO)，DMSO對細胞有一定的毒副作用，所以須將離心后的液體前倒凈，且一定倒干凈。我在試驗中按照常規(guī)的離心分裝的方法進行復(fù)蘇，結(jié)果無異常。５.細胞貼壁少的問題：教科書中說明凍存細胞解凍時１ml細胞液要加１０ml-１５ml培養(yǎng)液，而在我的試驗中的經(jīng)驗總結(jié)為培養(yǎng)基越少細胞越容易貼附。６.復(fù)蘇細胞分裝的問題：試驗中我的經(jīng)驗總結(jié)為復(fù)蘇１管細胞一般可分裝到１-２只培養(yǎng)瓶中，分裝過多，細胞濃度過低，不利于細胞的貼壁。７.加培養(yǎng)基的量放入問題：這個量的多少的把握主要涉及到的問題DMSO的濃度，從如果你加培養(yǎng)基的太少，那么DMSO的濃度就會比較大，就會影響細胞生長，從以前的資料來看，DMSO的濃度在小于０.５%的時候?qū)σ话慵毎麤]有什么影響，還有一個說法是１%。所以如果你的凍存液的濃度是１０%DMSO的話那么加１０ml以上的培養(yǎng)基就恰好稀釋到了無害濃度。
KNS-42細胞系相關(guān)產(chǎn)品：P-388D1細胞、mRMEC細胞、T47-D細胞
FL62891細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PCI-SG231細胞、SNU-601細胞、SNU-668細胞
HCE-2 [50.B1]細胞系相關(guān)產(chǎn)品：G-401細胞、HRA-19細胞、NCIH378細胞
SKMEL2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Tca-83細胞、SW1353細胞、GM04679細胞
H-1373細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCO細胞、CHP 212細胞、MCFs細胞
Y-79細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MBT2細胞、DITNC1細胞、CX-1細胞
Anip[973]細胞系相關(guān)產(chǎn)品：B16BL6細胞、WTRL1細胞、293-EBNA細胞
Ramos.G6.C10細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MC-3T3細胞、ONS-76細胞、HUC細胞
NCI-H2228 Cells|人非小細胞肺癌細胞系
MSTO-211 H細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1666細胞、L5178Y-R細胞、Intestinal Porcine Epithelial Cell line-J2細胞
SHSY-5Y細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEL-1細胞、SKLMS-1細胞、Human Corneal Epithelial cells-Transformed細胞
RMa-bm細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CT26WT細胞、HEL-92.1.7細胞、HCC2218細胞
SEG-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1522細胞、CNLMG-B5537SKIN細胞、AR4-2J細胞
CV-1 in Origin Simian-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1993細胞、PG-4 (S+L-)細胞、TF-1a細胞
NCI-H1436細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LNCaP FGC細胞、V79細胞、H2087細胞
BNCL-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAKI 2細胞、QGY-7701細胞、A72細胞
H-508細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LLCPK1細胞、NCIH727細胞、University of Arizona Cell Culture-812細胞
H-508細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LLCPK1細胞、NCIH727細胞、University of Arizona Cell Culture-812細胞
D-324MED細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SF 539細胞、A-875細胞、OE-33細胞
Mouse Podocyte Clone-5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：DSL-6A/C1細胞、HCEC-12細胞、U-251細胞
UM-UC-14細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CF-1 MEF細胞、GL261細胞、ZYM-DIEC02細胞
NCI-H1417細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KTCTL-140細胞、SNU-620細胞、HuT78細胞
HL-7702細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Ly3細胞、H508細胞、BPH1細胞
293 Ad5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MO59J細胞、639V細胞、NCIADR.RES細胞
KM12-SM細胞系相關(guān)產(chǎn)品：143B TK-細胞、Potorous tridactylus Kidney 2細胞、HLFa細胞
A-253細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPMI2650細胞、GA-10-Clone-4細胞、SW756細胞
University of Arizona Cell Culture-893細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM2132細胞、SKBr3細胞、Sp2/O細胞
SF-539 BT細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SCL1細胞、Liver-02細胞、RMC細胞
G-401細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH889細胞、OC316細胞、Asian Medical Center-Head and Neck cancer-8細胞
NCI-H2171細胞系相關(guān)產(chǎn)品：AN3細胞、Walker/LLC-WRC 256細胞、RCK8細胞
A431細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HS688AT細胞、H740細胞、HCC 94細胞
HCEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HARAB細胞、VSC4.1細胞、B104 [Rat neuroblastoma]細胞
PL45細胞系相關(guān)產(chǎn)品：4T1細胞、NHDF細胞、Centre Antoine Lacassagne-12T細胞
GM02132細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU-620細胞、VMM5A細胞、A549ATCC細胞
RT4-D6-P2T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAKI.1細胞、H-2196細胞、AR-42J細胞
COLO-684細胞系相關(guān)產(chǎn)品：DMS 273細胞、NCI-SNU-668細胞、Hs852細胞
SCC7細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Douglas Foster-1細胞、ASH3細胞、Balb/3T3-4-Cl31細胞
Det. 562細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H19-7細胞、SNU620細胞、MES 13細胞
451Lu細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NS1-1 Ag4.1細胞、RPMI No. 1846細胞、HCa/16A3-F細胞
CHP-212細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RGM-1細胞、NCl-H157細胞、P3-X63-Ag8-6-5-3細胞
McArdle RH-7777細胞系相關(guān)產(chǎn)品：WB F344細胞、786.O細胞、OVCAR-420細胞
WM115細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NE1細胞、SN12PM6細胞、Jurkat FHCRC細胞
GNM細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW579細胞、Stanford University Pediatric T-cell line 1細胞、SK.MEL.5細胞
KMH2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKNBE(2)細胞、ARIP細胞、PG-4 (S+L-)細胞
NCI-H292細胞系相關(guān)產(chǎn)品：FC33細胞、GM04671細胞、Eca-109細胞
HKF細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-157細胞、OV1063細胞、NCIH520細胞
P388D1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MCF7ADR細胞、LTEP-sm細胞、HCC-70細胞
Panc05.04細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCPEpiC細胞、SW.620細胞、AtT20細胞
PAMC82細胞系相關(guān)產(chǎn)品：mousepodocyte細胞、RIN14B細胞、Homo sapiens No. 578, tumor cells細胞
P3HR1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU119細胞、KYSE 450細胞、Clone 166細胞
OVCAR3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BLO-11細胞、SNB.19細胞、NCI-H711細胞
NCI-H1299細胞系相關(guān)產(chǎn)品：COR-L23細胞、Madison 109細胞、C643細胞
UMR 106細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW 1990細胞、BSC1細胞、PC-3M-IE8細胞
NCl-H157細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BC-027細胞、HITT15細胞、MDA-134細胞
32D clone3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：A9細胞、4T1-A細胞、PANC-02-03細胞
Li-7細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCTC clone 929細胞、Balb/3T3-4-Cl31細胞、VM-CUB-I細胞
SUM149-PT細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MHCC-LM3細胞、Vero E-6細胞、NOMO-1細胞
B16/F0細胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3/ag細胞、SW-839細胞、ATN1細胞
ISHI細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SF17細胞、MC-26細胞、NCI-SNU-387細胞
SNU886細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Huh 7.5細胞、SNU-719細胞、Hu-P-T3細胞
NCI-H2228 Cells|人非小細胞肺癌細胞系
PL-11細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PA1細胞、YH-13細胞、A549細胞
b.End3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Calu 6細胞、SNUC1細胞、Psi2 DAP細胞
HCCLM6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LM3細胞、INS1E細胞、Centre Antoine Lacassagne-27細胞
MPP 89細胞系相關(guān)產(chǎn)品：QSG-7701細胞、KS-1 [Human glioblastoma]細胞、A-375.S2細胞
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