"ChaGo-K-1 Cells|人肺支氣管癌細胞系
細胞背景資料:詳見相關文獻介紹
細胞形態(tài):上皮細胞樣
VSC4.1細胞系相關產(chǎn)品:UCH-1細胞、KE-37細胞、118 MG細胞
HFLS-OA細胞系相關產(chǎn)品:HFF-1細胞、L5178-R細胞、COV 434細胞
Fetal Rhesus Kidney-4細胞系相關產(chǎn)品:IGR-OV1細胞、HOS TE85細胞、LAN-6細胞
細胞生長:貼壁
細胞培養(yǎng)中支原體污染的經(jīng)驗分享:支原體是一類缺乏細胞壁的原核細胞型微生物,大小一般在0.3-0.5um之間,呈高度多形性,有球形、桿形、絲狀、分枝狀等多種形態(tài)。它不同于細胞,也不同于病毒。支原體用普通染色法不易著色,用姬姆薩染色很淺,革蘭染色為陰性。支原體可在雞胚絨毛尿囊膜上或細胞培養(yǎng)中生長,營養(yǎng)要求比細菌高。細胞培養(yǎng)(特別是傳代細胞)被支原體污染是個世界性問題。在細胞培養(yǎng)中支原體感染發(fā)生率達到63%,支原體感染發(fā)生后能改變細胞的DNA,RNA及蛋白表達,又不能通過可視法對其進行檢測,而且它對細胞的生長率影響較小,不易引起注意。國內(nèi)外研究表明,95%以上是以下四種支原體:口腔支原體(M.orale)、精酸支原體(M.arginini)、豬鼻支原體(M.hyorhinis)和萊氏無膽甾原體(A.laidlawii),為牛源性。以上是最常見的污染細胞培養(yǎng)的支原體菌群,但能夠污染細胞的支原體種類是很多的,國外調(diào)查證明,大約有二十多種支原體能污染細胞,有的細胞株可以同時污染兩種以上的支原體。支原體污染的來源包括工作環(huán)境的污染、操作者本身的污染(一些支原體在人體是正常菌群)、培養(yǎng)基的污染、污染支原體的細胞造成的交叉污染、實驗器材帶來的污染和用來制備細胞的原始組織或器官的污染。組織細胞培養(yǎng)工作中,主要從以下幾個方面來預防支原體的污染:控制環(huán)境污染;嚴格實驗操作;細胞培養(yǎng)基和器材要保證無菌;在細胞培養(yǎng)基中加入適量的抗生素。支原體污染細胞后,特別是重要的細胞株,有必要清除支原體,常用方法有抗生素處理、抗血清處理、抗生素加抗血清和補體聯(lián)合處理。支原體最突出的結構特征是沒有細胞壁,一般來講,對作用于細胞壁生物合成的抗生素,如萬古霉素等完全不敏感;對多粘菌素(polymycin)、利福平、磺胺藥物普遍耐藥。對支原體最有抑制活性及常用于支原體感染治療的抗生素是四環(huán)素類、大環(huán)內(nèi)酯類及一些喹諾酮;其他類抗生素如基糖苷類、霉素對支原體有較小抑制作用,所以常不用來作為支原體感染的化學治療劑。
ChaGo-K-1 Cells|人肺支氣管癌細胞系
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
NCI-H1155細胞系相關產(chǎn)品:H-146細胞、MDCK-II細胞、RSMC細胞
Pan02細胞系相關產(chǎn)品:OVCAR.5細胞、JTC-28細胞、EHEB細胞
SVEC4-10細胞系相關產(chǎn)品:Hx147細胞、CORL88細胞、Hs 729.T細胞
DCS細胞系相關產(chǎn)品:GM16136細胞、KMS-26細胞、DU_145細胞
細胞傳代方法:1:4-1:8傳代;每周換液2次。
傳代培養(yǎng)及其操作步驟:原代細胞培養(yǎng)成功以后,需要進行分離培養(yǎng),否則細胞會因生存空間不足或密度過大,營養(yǎng)障礙,影響細胞生長。細胞由原培養(yǎng)瓶內(nèi)分離稀釋后傳到新的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)的過程稱之為傳代培養(yǎng)。傳代細胞允許培養(yǎng)的細胞擴增(形成細胞株),可以進行細胞克隆,易于保存,但可能喪失一些特殊的細胞和分化特征。傳代細胞形成細胞株的利處在于提供了大量持久的實驗材料,便于實驗。傳代細胞培養(yǎng)操作步驟:1)吸掉或倒掉培養(yǎng)瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液;2)向瓶內(nèi)加入胰蛋白酶液和EDTA混合液少量。以能覆蓋培養(yǎng)瓶底為宜;3)置37℃孵箱或室溫(25℃溫度)下進行消化,2-5min后把培養(yǎng)瓶放在倒置顯微鏡下進行觀察,當發(fā)現(xiàn)胞質(zhì)回縮、細胞間隙增大后,應立即中止消化;4)吸出消化液,向瓶內(nèi)加入Hanks液少量,輕輕轉(zhuǎn)動培養(yǎng)瓶,把殘留消化液沖掉,然后再加培養(yǎng)液。如果僅使用胰蛋白酶消化,在吸除胰蛋白液后,可直接加入少量含血清的培養(yǎng)液,終止消化;5)使用彎頭吸管,吸取瓶內(nèi)培養(yǎng)液,按順序反復輕輕吹打瓶壁細胞,使之從瓶壁脫離形成細胞懸液。吹打時動作要輕柔,以防用力過猛損傷細胞;6)用計數(shù)板計數(shù)后,分別接種于新的培養(yǎng)瓶中,置CO2培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng);7)細胞培養(yǎng)換液時間應根據(jù)細胞生長的狀態(tài)和實驗要求來確定。一般2-3d后應換一次生長液。待細胞鋪滿器皿底面,即可使用;也可繼續(xù)傳代擴大培養(yǎng)或換成維持液。
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
ChaGo-K-1 Cells|人肺支氣管癌細胞系
細胞生長特性:貼壁生長
M 1細胞系相關產(chǎn)品:32D.cl3細胞、NCIH187細胞、639 V細胞
H520細胞系相關產(chǎn)品:EoL-1 cell細胞、NCIH660細胞、MLA-144細胞
MV(4;11)細胞系相關產(chǎn)品:PC12(高分化)細胞、WISH細胞、451-LU細胞
NSC-34細胞系相關產(chǎn)品:CMK細胞、FRhK-4細胞、SKRC 39細胞
貼壁消化難題:1,先用PBS 把細胞洗兩遍,使瓶內(nèi)沒有血清了,減少對胰酶的中和,然后用新配的0.25%的胰酶加入3ml左右,放在37度,然后可以在細胞有些消化下來時,拿著瓶口,運用手腕的力量輕輕震蕩瓶內(nèi)液體,這樣細胞很快就下來了,還不需要吹打,分散也均勻;2,成團、絮狀:消化液里加入edta可以減少細胞成團的現(xiàn)象,血清可以終止胰酶的作用,如果是進口血清的話也能終止edta的作用。用胰酶消化后胰酶可以倒掉,也可以不倒,直接加血清終止,如果消化液中加入了edta的話,就要將消化液倒干凈,如果細胞貼壁要求不是很嚴格的話,一般不需要進行離心。鼻咽癌細胞的貼壁能力很強,用0.5%胰酶(含0.1%EDTA)一般要消化12~15min。用PBS洗滌時要洗凈殘余的培養(yǎng)基,加入胰酶后在培養(yǎng)箱中消化(避免細胞室溫下受損以及在此溫度時胰酶活性最強)至細胞收縮變圓(可顯微鏡下觀察)且有少許細胞脫落(有流下來的趨勢),隨后立即棄去胰酶(如果脫落的細胞很多且需要大量細胞實驗,則不能棄去胰酶),加入培養(yǎng)基仔細吹打(不能用無血清培養(yǎng)基或者PBS替代,否則細胞聚集成團塊或絮狀)。一般我都離心一次棄去上清(去除殘留的胰酶及漂浮的死細胞或細胞碎片);消化過度:馬上用培養(yǎng)基中和,用吸管吹打細胞,收集全部的細胞到以無菌的離心管中800RPM 3分鐘。棄上清,用全培重懸,換新的培養(yǎng)瓶繼續(xù)培養(yǎng),狀態(tài)不好的細胞在培養(yǎng)的過程中會死亡脫落,在換液的時候可以清除掉!
Spodoptera frugiperda clone 9細胞系相關產(chǎn)品:IPLB-Sf21細胞、VP 267細胞、KBM5細胞
Epstein-Barr-1細胞系相關產(chǎn)品:HIT T-15細胞、HCC1359細胞、MDCC-MSB-1細胞
H1792細胞系相關產(chǎn)品:IM9細胞、Caco-2BBe細胞、MRC-V細胞
OCI/AML-4細胞系相關產(chǎn)品:IGR.OV1細胞、PTK 2細胞、COLO 16細胞
N-87細胞系相關產(chǎn)品:108CC15細胞、Hs 895 T細胞、KYSE 520細胞
HCE-2 [50.B1]細胞系相關產(chǎn)品:G-401細胞、HRA-19細胞、NCIH378細胞
Hs 729細胞系相關產(chǎn)品:SK Hep1細胞、YES-2細胞、JB-6 Cl 30細胞
SNK-1細胞系相關產(chǎn)品:CCD 966SK細胞、MD Anderson-Metastatic Breast-453細胞、H-2085細胞
ChaGo-K-1 Cells|人肺支氣管癌細胞系
NCI-747細胞系相關產(chǎn)品:Ramos-2G6-4C10細胞、CHG5細胞、FRO81-2細胞
PK13細胞系相關產(chǎn)品:MIA PaCa-2細胞、MM1S細胞、BEAS-2B細胞
A204細胞系相關產(chǎn)品:HuT 102細胞、KY-270細胞、TK10細胞
MPC5細胞系相關產(chǎn)品:COLO-HSR細胞、CCRF.CEM細胞、H-2052細胞
TOV112細胞系相關產(chǎn)品:SKHEP-1細胞、DU145細胞、Hs683細胞
MSB-1細胞系相關產(chǎn)品:WEHI3細胞、MC57細胞、NBL-5細胞
PE/CA-PJ34細胞系相關產(chǎn)品:HIT-T15細胞、NS20-Y細胞、Hce8693細胞
CATH-a細胞系相關產(chǎn)品:M210B4細胞、HCFB(HCF)細胞、Hs-688A-T細胞
CATH-a細胞系相關產(chǎn)品:M210B4細胞、HCFB(HCF)細胞、Hs-688A-T細胞
Panc_05_04細胞系相關產(chǎn)品:JIMT1細胞、H2172細胞、McARH7777細胞
KP-2細胞系相關產(chǎn)品:NBL-S細胞、Colo-206F細胞、NCI-SNU-16細胞
KTC1細胞系相關產(chǎn)品:VMM39細胞、3T3 Swiss Albino細胞、HCC-94細胞
NKM1細胞系相關產(chǎn)品:ECC 10細胞、RD-2細胞、766T細胞
B/C3T3細胞系相關產(chǎn)品:NCI-H1672細胞、HMC細胞、HNE3細胞
Rat Fetal Lung-6細胞系相關產(chǎn)品:JB6 [Mouse]細胞、HUV-EC-C細胞、SK-MEL-2細胞
HEC1-B細胞系相關產(chǎn)品:HConEpic細胞、HT 1376.T細胞、GDM-1細胞
HEC1-B細胞系相關產(chǎn)品:HConEpic細胞、HT 1376.T細胞、GDM-1細胞
SKRC-39細胞系相關產(chǎn)品:H1155細胞、SPDC-CCL141細胞、MOLT-3細胞
tdott細胞系相關產(chǎn)品:PANC0813細胞、PC-3M-2B4細胞、U-2932細胞
RFL 6細胞系相關產(chǎn)品:BT 325細胞、HEC1-A細胞、SUM52細胞
P-19細胞系相關產(chǎn)品:HPAF/CD18細胞、184A1細胞、Spodoptera frugiperda clone 9細胞
CCC-HEH-2細胞系相關產(chǎn)品:SK-GT-4細胞、Tn5 B1-4細胞、MESSADX5細胞
SKOV-3細胞系相關產(chǎn)品:MOLT 3細胞、MADB-106細胞、G-292細胞
SW 962細胞系相關產(chǎn)品:OCI-Ly07細胞、MMAc.SF細胞、SNU-119細胞
B-104細胞系相關產(chǎn)品:COLO-320DM細胞、SaOS細胞、RMS 13細胞
MS1細胞系相關產(chǎn)品:H1522細胞、MS-751細胞、YES-2細胞
PC-3M-IE8細胞系相關產(chǎn)品:MDA-MB-231-GFP細胞、M059J細胞、CCK-81細胞
H-747細胞系相關產(chǎn)品:HPC-Y5細胞、H727細胞、VMRC-LCD細胞
AN3細胞系相關產(chǎn)品:Kasumi 1細胞、alpha TC1 clone 6細胞、MNNG/HOS Cl #5細胞
SUM 159細胞系相關產(chǎn)品:C8-D1A細胞、IALM細胞、NCI-H2066細胞
H-1836細胞系相關產(chǎn)品:Colo699細胞、BJ [Human fibroblast]細胞、SK-N-AS細胞
NCIH82細胞系相關產(chǎn)品:HT55細胞、NTera 2細胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-1細胞
NCI-H1048細胞系相關產(chǎn)品:TE 85.T細胞、CMT 167細胞、RAG細胞
HDF-a細胞系相關產(chǎn)品:MDA-330細胞、HCC-38細胞、MILE SVEN 1細胞
ASH-3細胞系相關產(chǎn)品:H-1703細胞、SW756細胞、NCI-H2342細胞
HuNS1細胞系相關產(chǎn)品:HHFK細胞、MPASMC細胞、ACHN細胞
KE-37細胞系相關產(chǎn)品:KE39細胞、6-T CEM細胞、HM1900細胞
SUDHL-10細胞系相關產(chǎn)品:MDCC-MSB-1細胞、HPAC細胞、MDA-MB415細胞
CCRF細胞系相關產(chǎn)品:EC9706細胞、SP2/0 Ag-14細胞、EA hy 926細胞
VK2細胞系相關產(chǎn)品:COR-L26細胞、H2170細胞、H2171細胞
SUM149PT細胞系相關產(chǎn)品:HCC1954細胞、hTERT RPE1細胞、HEK293-F細胞
UM-UC3細胞系相關產(chǎn)品:HEC1A細胞、H1299細胞、HD-LM-2細胞
He-La細胞系相關產(chǎn)品:NCI-H1703細胞、J 82細胞、THP1細胞
NRK 52E細胞系相關產(chǎn)品:OVCAR8細胞、Human Fetal Thymocyte-8810細胞、GC-1細胞
MC3T3-E1 Subclone 24細胞系相關產(chǎn)品:H1666_DA細胞、526mel細胞、Lung cancer-1/squamous細胞
SW1116細胞系相關產(chǎn)品:KYSE0520細胞、HT-1197細胞、NCI-H719細胞
ARO 81-1細胞系相關產(chǎn)品:FHCRC-11細胞、MV-3細胞、CNE-2Z細胞
KATOIII細胞系相關產(chǎn)品:NCI-841細胞、Z310細胞、NIH:OVCAR-4細胞
RKO_AS45細胞系相關產(chǎn)品:NCL-H548細胞、X63-Ag8.653細胞、Saos2細胞
CHL1細胞系相關產(chǎn)品:MBMEC細胞、NCI-H220細胞、MDA157細胞
HFLS細胞系相關產(chǎn)品:MPC11細胞、HCC-9204細胞、HEM細胞
ChaGo-K-1 Cells|人肺支氣管癌細胞系
SK-RC-39細胞系相關產(chǎn)品:PE/CA-PJ34細胞、Huh 7.5.1細胞、GM03571細胞
SF17細胞系相關產(chǎn)品:HCC2157細胞、IPLB-SF-21-AE細胞、Mouse Forestomach Carcinoma細胞
H-1792細胞系相關產(chǎn)品:Detroit 562細胞、NPC-TW 039細胞、DKMG細胞
BIU-87/Adr細胞系相關產(chǎn)品:Rh30細胞、3AO細胞、NCIH187細胞
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