"ChaGo-K-1 Cells|人肺支氣管癌細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料:詳見相關(guān)文獻(xiàn)介紹
細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣
VSC4.1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:UCH-1細(xì)胞、KE-37細(xì)胞、118 MG細(xì)胞
HFLS-OA細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HFF-1細(xì)胞、L5178-R細(xì)胞、COV 434細(xì)胞
Fetal Rhesus Kidney-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:IGR-OV1細(xì)胞、HOS TE85細(xì)胞、LAN-6細(xì)胞
細(xì)胞生長(zhǎng):貼壁
細(xì)胞培養(yǎng)中支原體污染的經(jīng)驗(yàn)分享:支原體是一類缺乏細(xì)胞壁的原核細(xì)胞型微生物,大小一般在0.3-0.5um之間,呈高度多形性,有球形、桿形、絲狀、分枝狀等多種形態(tài)。它不同于細(xì)胞,也不同于病毒。支原體用普通染色法不易著色,用姬姆薩染色很淺,革蘭染色為陰性。支原體可在雞胚絨毛尿囊膜上或細(xì)胞培養(yǎng)中生長(zhǎng),營(yíng)養(yǎng)要求比細(xì)菌高。細(xì)胞培養(yǎng)(特別是傳代細(xì)胞)被支原體污染是個(gè)世界性問題。在細(xì)胞培養(yǎng)中支原體感染發(fā)生率達(dá)到63%,支原體感染發(fā)生后能改變細(xì)胞的DNA,RNA及蛋白表達(dá),又不能通過可視法對(duì)其進(jìn)行檢測(cè),而且它對(duì)細(xì)胞的生長(zhǎng)率影響較小,不易引起注意。國(guó)內(nèi)外研究表明,95%以上是以下四種支原體:口腔支原體(M.orale)、精酸支原體(M.arginini)、豬鼻支原體(M.hyorhinis)和萊氏無膽甾原體(A.laidlawii),為牛源性。以上是最常見的污染細(xì)胞培養(yǎng)的支原體菌群,但能夠污染細(xì)胞的支原體種類是很多的,國(guó)外調(diào)查證明,大約有二十多種支原體能污染細(xì)胞,有的細(xì)胞株可以同時(shí)污染兩種以上的支原體。支原體污染的來源包括工作環(huán)境的污染、操作者本身的污染(一些支原體在人體是正常菌群)、培養(yǎng)基的污染、污染支原體的細(xì)胞造成的交叉污染、實(shí)驗(yàn)器材帶來的污染和用來制備細(xì)胞的原始組織或器官的污染。組織細(xì)胞培養(yǎng)工作中,主要從以下幾個(gè)方面來預(yù)防支原體的污染:控制環(huán)境污染;嚴(yán)格實(shí)驗(yàn)操作;細(xì)胞培養(yǎng)基和器材要保證無菌;在細(xì)胞培養(yǎng)基中加入適量的抗生素。支原體污染細(xì)胞后,特別是重要的細(xì)胞株,有必要清除支原體,常用方法有抗生素處理、抗血清處理、抗生素加抗血清和補(bǔ)體聯(lián)合處理。支原體最突出的結(jié)構(gòu)特征是沒有細(xì)胞壁,一般來講,對(duì)作用于細(xì)胞壁生物合成的抗生素,如萬古霉素等完全不敏感;對(duì)多粘菌素(polymycin)、利福平、磺胺藥物普遍耐藥。對(duì)支原體最有抑制活性及常用于支原體感染治療的抗生素是四環(huán)素類、大環(huán)內(nèi)酯類及一些喹諾酮;其他類抗生素如基糖苷類、霉素對(duì)支原體有較小抑制作用,所以常不用來作為支原體感染的化學(xué)治療劑。
ChaGo-K-1 Cells|人肺支氣管癌細(xì)胞系
細(xì)胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
NCI-H1155細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-146細(xì)胞、MDCK-II細(xì)胞、RSMC細(xì)胞
Pan02細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVCAR.5細(xì)胞、JTC-28細(xì)胞、EHEB細(xì)胞
SVEC4-10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hx147細(xì)胞、CORL88細(xì)胞、Hs 729.T細(xì)胞
DCS細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM16136細(xì)胞、KMS-26細(xì)胞、DU_145細(xì)胞
細(xì)胞傳代方法:1:4-1:8?jìng)鞔?;每周換液2次。
傳代培養(yǎng)及其操作步驟:原代細(xì)胞培養(yǎng)成功以后,需要進(jìn)行分離培養(yǎng),否則細(xì)胞會(huì)因生存空間不足或密度過大,營(yíng)養(yǎng)障礙,影響細(xì)胞生長(zhǎng)。細(xì)胞由原培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)分離稀釋后傳到新的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)的過程稱之為傳代培養(yǎng)。傳代細(xì)胞允許培養(yǎng)的細(xì)胞擴(kuò)增(形成細(xì)胞株),可以進(jìn)行細(xì)胞克隆,易于保存,但可能喪失一些特殊的細(xì)胞和分化特征。傳代細(xì)胞形成細(xì)胞株的利處在于提供了大量持久的實(shí)驗(yàn)材料,便于實(shí)驗(yàn)。傳代細(xì)胞培養(yǎng)操作步驟:1)吸掉或倒掉培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)舊培養(yǎng)液;2)向瓶?jī)?nèi)加入胰蛋白酶液和EDTA混合液少量。以能覆蓋培養(yǎng)瓶底為宜;3)置37℃孵箱或室溫(25℃溫度)下進(jìn)行消化,2-5min后把培養(yǎng)瓶放在倒置顯微鏡下進(jìn)行觀察,當(dāng)發(fā)現(xiàn)胞質(zhì)回縮、細(xì)胞間隙增大后,應(yīng)立即中止消化;4)吸出消化液,向瓶?jī)?nèi)加入Hanks液少量,輕輕轉(zhuǎn)動(dòng)培養(yǎng)瓶,把殘留消化液沖掉,然后再加培養(yǎng)液。如果僅使用胰蛋白酶消化,在吸除胰蛋白液后,可直接加入少量含血清的培養(yǎng)液,終止消化;5)使用彎頭吸管,吸取瓶?jī)?nèi)培養(yǎng)液,按順序反復(fù)輕輕吹打瓶壁細(xì)胞,使之從瓶壁脫離形成細(xì)胞懸液。吹打時(shí)動(dòng)作要輕柔,以防用力過猛損傷細(xì)胞;6)用計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)后,分別接種于新的培養(yǎng)瓶中,置CO2培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng);7)細(xì)胞培養(yǎng)換液時(shí)間應(yīng)根據(jù)細(xì)胞生長(zhǎng)的狀態(tài)和實(shí)驗(yàn)要求來確定。一般2-3d后應(yīng)換一次生長(zhǎng)液。待細(xì)胞鋪滿器皿底面,即可使用;也可繼續(xù)傳代擴(kuò)大培養(yǎng)或換成維持液。
細(xì)胞來源說明:細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系
ChaGo-K-1 Cells|人肺支氣管癌細(xì)胞系
細(xì)胞生長(zhǎng)特性:貼壁生長(zhǎng)
M 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:32D.cl3細(xì)胞、NCIH187細(xì)胞、639 V細(xì)胞
H520細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:EoL-1 cell細(xì)胞、NCIH660細(xì)胞、MLA-144細(xì)胞
MV(4;11)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PC12(高分化)細(xì)胞、WISH細(xì)胞、451-LU細(xì)胞
NSC-34細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CMK細(xì)胞、FRhK-4細(xì)胞、SKRC 39細(xì)胞
貼壁消化難題:1,先用PBS 把細(xì)胞洗兩遍,使瓶?jī)?nèi)沒有血清了,減少對(duì)胰酶的中和,然后用新配的0.25%的胰酶加入3ml左右,放在37度,然后可以在細(xì)胞有些消化下來時(shí),拿著瓶口,運(yùn)用手腕的力量輕輕震蕩瓶?jī)?nèi)液體,這樣細(xì)胞很快就下來了,還不需要吹打,分散也均勻;2,成團(tuán)、絮狀:消化液里加入edta可以減少細(xì)胞成團(tuán)的現(xiàn)象,血清可以終止胰酶的作用,如果是進(jìn)口血清的話也能終止edta的作用。用胰酶消化后胰酶可以倒掉,也可以不倒,直接加血清終止,如果消化液中加入了edta的話,就要將消化液倒干凈,如果細(xì)胞貼壁要求不是很嚴(yán)格的話,一般不需要進(jìn)行離心。鼻咽癌細(xì)胞的貼壁能力很強(qiáng),用0.5%胰酶(含0.1%EDTA)一般要消化12~15min。用PBS洗滌時(shí)要洗凈殘余的培養(yǎng)基,加入胰酶后在培養(yǎng)箱中消化(避免細(xì)胞室溫下受損以及在此溫度時(shí)胰酶活性最強(qiáng))至細(xì)胞收縮變圓(可顯微鏡下觀察)且有少許細(xì)胞脫落(有流下來的趨勢(shì)),隨后立即棄去胰酶(如果脫落的細(xì)胞很多且需要大量細(xì)胞實(shí)驗(yàn),則不能棄去胰酶),加入培養(yǎng)基仔細(xì)吹打(不能用無血清培養(yǎng)基或者PBS替代,否則細(xì)胞聚集成團(tuán)塊或絮狀)。一般我都離心一次棄去上清(去除殘留的胰酶及漂浮的死細(xì)胞或細(xì)胞碎片);消化過度:馬上用培養(yǎng)基中和,用吸管吹打細(xì)胞,收集全部的細(xì)胞到以無菌的離心管中800RPM 3分鐘。棄上清,用全培重懸,換新的培養(yǎng)瓶繼續(xù)培養(yǎng),狀態(tài)不好的細(xì)胞在培養(yǎng)的過程中會(huì)死亡脫落,在換液的時(shí)候可以清除掉!
Spodoptera frugiperda clone 9細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:IPLB-Sf21細(xì)胞、VP 267細(xì)胞、KBM5細(xì)胞
Epstein-Barr-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HIT T-15細(xì)胞、HCC1359細(xì)胞、MDCC-MSB-1細(xì)胞
H1792細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:IM9細(xì)胞、Caco-2BBe細(xì)胞、MRC-V細(xì)胞
OCI/AML-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:IGR.OV1細(xì)胞、PTK 2細(xì)胞、COLO 16細(xì)胞
N-87細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:108CC15細(xì)胞、Hs 895 T細(xì)胞、KYSE 520細(xì)胞
HCE-2 [50.B1]細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:G-401細(xì)胞、HRA-19細(xì)胞、NCIH378細(xì)胞
Hs 729細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK Hep1細(xì)胞、YES-2細(xì)胞、JB-6 Cl 30細(xì)胞
SNK-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCD 966SK細(xì)胞、MD Anderson-Metastatic Breast-453細(xì)胞、H-2085細(xì)胞
ChaGo-K-1 Cells|人肺支氣管癌細(xì)胞系
NCI-747細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ramos-2G6-4C10細(xì)胞、CHG5細(xì)胞、FRO81-2細(xì)胞
PK13細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MIA PaCa-2細(xì)胞、MM1S細(xì)胞、BEAS-2B細(xì)胞
A204細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HuT 102細(xì)胞、KY-270細(xì)胞、TK10細(xì)胞
MPC5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO-HSR細(xì)胞、CCRF.CEM細(xì)胞、H-2052細(xì)胞
TOV112細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKHEP-1細(xì)胞、DU145細(xì)胞、Hs683細(xì)胞
MSB-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:WEHI3細(xì)胞、MC57細(xì)胞、NBL-5細(xì)胞
PE/CA-PJ34細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HIT-T15細(xì)胞、NS20-Y細(xì)胞、Hce8693細(xì)胞
CATH-a細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:M210B4細(xì)胞、HCFB(HCF)細(xì)胞、Hs-688A-T細(xì)胞
CATH-a細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:M210B4細(xì)胞、HCFB(HCF)細(xì)胞、Hs-688A-T細(xì)胞
Panc_05_04細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:JIMT1細(xì)胞、H2172細(xì)胞、McARH7777細(xì)胞
KP-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NBL-S細(xì)胞、Colo-206F細(xì)胞、NCI-SNU-16細(xì)胞
KTC1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:VMM39細(xì)胞、3T3 Swiss Albino細(xì)胞、HCC-94細(xì)胞
NKM1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ECC 10細(xì)胞、RD-2細(xì)胞、766T細(xì)胞
B/C3T3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1672細(xì)胞、HMC細(xì)胞、HNE3細(xì)胞
Rat Fetal Lung-6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:JB6 [Mouse]細(xì)胞、HUV-EC-C細(xì)胞、SK-MEL-2細(xì)胞
HEC1-B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HConEpic細(xì)胞、HT 1376.T細(xì)胞、GDM-1細(xì)胞
HEC1-B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HConEpic細(xì)胞、HT 1376.T細(xì)胞、GDM-1細(xì)胞
SKRC-39細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1155細(xì)胞、SPDC-CCL141細(xì)胞、MOLT-3細(xì)胞
tdott細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PANC0813細(xì)胞、PC-3M-2B4細(xì)胞、U-2932細(xì)胞
RFL 6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BT 325細(xì)胞、HEC1-A細(xì)胞、SUM52細(xì)胞
P-19細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HPAF/CD18細(xì)胞、184A1細(xì)胞、Spodoptera frugiperda clone 9細(xì)胞
CCC-HEH-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-GT-4細(xì)胞、Tn5 B1-4細(xì)胞、MESSADX5細(xì)胞
SKOV-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MOLT 3細(xì)胞、MADB-106細(xì)胞、G-292細(xì)胞
SW 962細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI-Ly07細(xì)胞、MMAc.SF細(xì)胞、SNU-119細(xì)胞
B-104細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO-320DM細(xì)胞、SaOS細(xì)胞、RMS 13細(xì)胞
MS1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1522細(xì)胞、MS-751細(xì)胞、YES-2細(xì)胞
PC-3M-IE8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA-MB-231-GFP細(xì)胞、M059J細(xì)胞、CCK-81細(xì)胞
H-747細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HPC-Y5細(xì)胞、H727細(xì)胞、VMRC-LCD細(xì)胞
AN3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Kasumi 1細(xì)胞、alpha TC1 clone 6細(xì)胞、MNNG/HOS Cl #5細(xì)胞
SUM 159細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:C8-D1A細(xì)胞、IALM細(xì)胞、NCI-H2066細(xì)胞
H-1836細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Colo699細(xì)胞、BJ [Human fibroblast]細(xì)胞、SK-N-AS細(xì)胞
NCIH82細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HT55細(xì)胞、NTera 2細(xì)胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-1細(xì)胞
NCI-H1048細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE 85.T細(xì)胞、CMT 167細(xì)胞、RAG細(xì)胞
HDF-a細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA-330細(xì)胞、HCC-38細(xì)胞、MILE SVEN 1細(xì)胞
ASH-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1703細(xì)胞、SW756細(xì)胞、NCI-H2342細(xì)胞
HuNS1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HHFK細(xì)胞、MPASMC細(xì)胞、ACHN細(xì)胞
KE-37細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KE39細(xì)胞、6-T CEM細(xì)胞、HM1900細(xì)胞
SUDHL-10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDCC-MSB-1細(xì)胞、HPAC細(xì)胞、MDA-MB415細(xì)胞
CCRF細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:EC9706細(xì)胞、SP2/0 Ag-14細(xì)胞、EA hy 926細(xì)胞
VK2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:COR-L26細(xì)胞、H2170細(xì)胞、H2171細(xì)胞
SUM149PT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC1954細(xì)胞、hTERT RPE1細(xì)胞、HEK293-F細(xì)胞
UM-UC3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEC1A細(xì)胞、H1299細(xì)胞、HD-LM-2細(xì)胞
He-La細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1703細(xì)胞、J 82細(xì)胞、THP1細(xì)胞
NRK 52E細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVCAR8細(xì)胞、Human Fetal Thymocyte-8810細(xì)胞、GC-1細(xì)胞
MC3T3-E1 Subclone 24細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1666_DA細(xì)胞、526mel細(xì)胞、Lung cancer-1/squamous細(xì)胞
SW1116細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KYSE0520細(xì)胞、HT-1197細(xì)胞、NCI-H719細(xì)胞
ARO 81-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:FHCRC-11細(xì)胞、MV-3細(xì)胞、CNE-2Z細(xì)胞
KATOIII細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-841細(xì)胞、Z310細(xì)胞、NIH:OVCAR-4細(xì)胞
RKO_AS45細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCL-H548細(xì)胞、X63-Ag8.653細(xì)胞、Saos2細(xì)胞
CHL1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MBMEC細(xì)胞、NCI-H220細(xì)胞、MDA157細(xì)胞
HFLS細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MPC11細(xì)胞、HCC-9204細(xì)胞、HEM細(xì)胞
ChaGo-K-1 Cells|人肺支氣管癌細(xì)胞系
SK-RC-39細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PE/CA-PJ34細(xì)胞、Huh 7.5.1細(xì)胞、GM03571細(xì)胞
SF17細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC2157細(xì)胞、IPLB-SF-21-AE細(xì)胞、Mouse Forestomach Carcinoma細(xì)胞
H-1792細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Detroit 562細(xì)胞、NPC-TW 039細(xì)胞、DKMG細(xì)胞
BIU-87/Adr細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Rh30細(xì)胞、3AO細(xì)胞、NCIH187細(xì)胞
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