"KNS-62 Cells|人肺支氣管鱗狀細胞癌細胞系
細胞背景資料：詳見相關文獻介紹
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
H841細胞系相關產(chǎn)品：B16 F1細胞、MonoMac1細胞、TE-671細胞
JG細胞系相關產(chǎn)品：SCC9細胞、High5細胞、MFE-296細胞
Pt K1細胞系相關產(chǎn)品：Ly18細胞、PZ-HPV-7細胞、H2452細胞
細胞生長：貼壁
為了防止因污染或技術原因使長期培養(yǎng)功虧一簣，考慮到培養(yǎng)細胞因傳代而遲早會出現(xiàn)變異，有時因寄贈、交換和購買，培養(yǎng)細胞從一個實驗室轉(zhuǎn)運到另一個實驗室，的策略是進行低溫保存。這對于維持一些特殊細胞株的遺傳特性極為重要?，F(xiàn)簡要介紹深低溫保存法(-７０℃~-１９６℃)的特點。細胞深低溫保存的基本原理是：在-７０℃以下時，細胞內(nèi)的酶活性均己停止，即代謝處于完全停止狀態(tài)，故可以長期保存。細胞低溫保存的關鍵，在于通過０~２０℃階段的處理過程。在此溫度范圍內(nèi)，水晶呈針狀，極易招致細胞的嚴重損傷。凍存細胞的復蘇：凍存細胞較脆弱，要輕柔操作。凍存細胞要快速融化，并直接加入完全生長培養(yǎng)基中。若細胞對凍存劑(DMSO或甘油)敏感，離心去除凍存培養(yǎng)基，然后加入完全生長培養(yǎng)基中。直接鋪板方法：取出貯存細胞，３７℃水浴中快速融化；直接用完全生長培養(yǎng)基鋪板細胞。１ml凍存細胞使用１０~２０ml完全生長培養(yǎng)基。進行活細胞計數(shù)，細胞接種應該至少在３×１０(５)活細胞/ml；培養(yǎng)細胞１２到２４小時，更換新鮮的完全生長培養(yǎng)基，去除凍存劑。離心方法：取出貯存細胞，３７℃水浴中快速融化；把１到２ml凍存細胞加入到大約２５ml完全生長培養(yǎng)基，輕輕混勻；以大約８０x離心２到３分鐘；棄去上清。在完全生長培養(yǎng)基輕輕再次懸浮細胞，并且進行活細胞計數(shù)。細胞鋪板，細胞接種應該至少為３×１０(５)活細胞/ml。細胞的分化：一個成年人全身細胞總數(shù)約１０１２個，可以區(qū)分為２００多種不同類型的細胞：形態(tài)結(jié)構(gòu)，代謝，行為，功能等各不相同。追根溯源，這么多種細胞均來自一個受精卵細胞。所以，通常把發(fā)育過程中，細胞后代在形態(tài)、結(jié)構(gòu)和功能上發(fā)生差異的過程稱為細胞分化。細胞分化發(fā)生在胚胎階段，也發(fā)生在胎兒出生以后，乃至成人階段。例如，人體血細胞的產(chǎn)生和分化，這個過程在人的一生中一直持續(xù)著。由旺盛生長不斷分裂的細胞，轉(zhuǎn)入分化，通常從細胞周期中G１期開始時一個確定的點G０點“逃逸”出細胞周期。旺盛生長分裂的細胞和各種分化了的細胞，它們的基因表達和代謝活動各不相同。
KNS-62 Cells|人肺支氣管鱗狀細胞癌細胞系
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
H-1915細胞系相關產(chǎn)品：S180細胞、NPC-TW039細胞、Pt-K2細胞
PLMVEC細胞系相關產(chǎn)品：JB6 clone 30, subclone 7b細胞、HTh-74細胞、L(TK-)細胞
D6P2T細胞系相關產(chǎn)品：HFL1細胞、SAS細胞、Hs 675.T細胞
OCI Ly19細胞系相關產(chǎn)品：H-3255細胞、M-20細胞、HCC70細胞
細胞傳代方法：每周換液２次。
養(yǎng)科研細胞是生物醫(yī)學研究的基本功。有三個小經(jīng)驗可以和大家分享一下：１)不要燒瓶口。大多數(shù)人都喜歡在酒精燈的火焰上關瓶子，覺得這樣可以避免污染。不知道大家是不是有培養(yǎng)基怎么越用越發(fā)紫的困惑？知道為什么嗎？燒瓶口燒的。培養(yǎng)基一般都是用碳酸/碳酸跟作緩沖體系。瓶口在火焰上的時候，熾熱的空氣進入瓶內(nèi)。塞緊塞子放入冰箱后，空氣變冷，壓力驟降，培養(yǎng)基中的碳酸就會轉(zhuǎn)化成二氧化碳，釋放出來。培養(yǎng)基中的碳酸少了，當然會變堿。如果不燒瓶口的話，你會發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)液變堿的速度會大大減慢。(當然多多少少還是會有一點越用越堿，因為室溫還是比冰箱內(nèi)的溫度高)，其實燒瓶口防止污染純粹是心理安慰。不妨試一下把手指在火上晃幾下，你會發(fā)現(xiàn)根本就不會燒疼。如果有細菌的話，這么晃兩下也燒不死多少。要想燒死全部細菌，除非把瓶口和塞子燒紅。我在國內(nèi)從來就不燒瓶口。來以后發(fā)現(xiàn)這里更徹底，超凈臺內(nèi)根本就不點酒精燈；２)不要頻繁看細胞。對于初學者而言，養(yǎng)細胞就像養(yǎng)孩子一樣，有空就要去看看。細胞越是養(yǎng)不好，就越是經(jīng)常去看。實際上看細胞對細胞的生長沒有任何好處，特別是對原代細胞或是免疫磁珠分選后，密度特別低的細胞。培養(yǎng)基中的生長因子是非常有限的。細胞好不容易自分泌一點兒促生長的因子在其周圍，形成有利于生長的局部環(huán)境。你跑去看細胞，培養(yǎng)瓶這么一晃，把因子都給晃散了。經(jīng)?？梢钥吹叫率忠惶斓酵矶荚诳醇毎毎鲜情L不好。老手細胞一扔好幾天不管，細胞瘋長；３)不要怕消化。在傳代的時候，初學者往往生怕細胞消化過度，早早地終止消化。細胞沒下來就使勁吹燈，吹得滿瓶子都是氣泡。在我看來，用力吹打?qū)毎膿p傷比消化更大。我?guī)熜衷谧鲅芷交≡臅r候，３７度消化過夜，細胞也沒事。我一般是等細胞完全變圓后才中止消化。細胞輕輕一晃就能下來。還有，動作要輕柔，盡量不要產(chǎn)生氣泡。氣泡在破裂時的機械應力相當大，對細胞的傷害也是很大的。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
KNS-62 Cells|人肺支氣管鱗狀細胞癌細胞系
細胞生長特性：貼壁生長
HFF-1細胞系相關產(chǎn)品：MHCC 97-L細胞、McARH7777細胞、HCC827細胞
HLEC-B3細胞系相關產(chǎn)品：MOLT 16細胞、BN-CL2細胞、MTEC1細胞
HEK 293-EBNA細胞系相關產(chǎn)品：HIT clone T15細胞、NCIH211細胞、SUM-52-PE細胞
Hs 578T細胞系相關產(chǎn)品：SK-N-AS細胞、F98細胞、WM 239-A細胞
細胞凍存復蘇材料與方法步驟：常用的細胞冷凍貯存器為液氮貯存器，規(guī)格有３５L和５０L兩種。使用時要注意以下幾點：(１)一般兩周需充液氮一次，至少一個月充氮一次。液氮溫度達-１９６℃，使用時注意勿讓液氮濺到皮膚上，以免引起凍傷。(２)液氮容器為雙層結(jié)構(gòu)，中間為真空層，瓶口有雙層焊接處，應防止焊接部裂開。(３)在裝入液氮時，要注意緩慢小心，并用厚紙卷筒或特制漏斗作引導，使液氮直達瓶底，如有專用液氮灌注裝置則更好。若為初次使用，加液氮時更要緩慢，以免溫度驟降而使容器損壞。細胞凍存時常備的材料有：０.２５%胰蛋白酶，含１０%～２０%的血清培養(yǎng)液，DMSO(分析純)或無色新鮮甘油(１２１°C蒸氣高壓消毒)，２mL安瓿(或?qū)Ｓ眉毎麅龃婀?、吸管、離心管、噴燈、紗布袋(或凍存管架)等。主要操作步驟為：(１)選擇處于對數(shù)生長期的細胞，在凍存前一天換液。將多個培養(yǎng)瓶中的細胞培養(yǎng) 液去掉，用０.２５%胰蛋白酶消化。適時去掉胰蛋白酶，加入少量新培養(yǎng)液。用吸管吸取培養(yǎng)液反復吹打瓶壁上的細胞，使其成為均勻分散的細胞懸液。懸浮生產(chǎn)細胞則不要消化處理。然后將細胞收集于離心管中離心(１０００r/min，１０分鐘)。(２)去上清液，加入含２０%小牛血清的完全培養(yǎng)基，于４℃預冷１５分鐘后，逐滴加入已無菌的DMSO或甘油，用吸管輕輕吹打使細胞均勻，細胞濃度為３×１０６～１×１０７/mL之間。(３)將上述細胞分裝于安瓿或?qū)Ｓ美鋬鏊芰瞎苤校碴逞b１～１.５mL在火焰噴燈上封口，封口處要完全封閉，圓滑無勾。冷凍管要將蓋子蓋緊，并標記好細胞名稱和凍存日期，同時作好登記(日期、細胞種類及代次、凍存支數(shù))。(４)將裝好細胞的安瓿或凍存管裝入沙布袋內(nèi);置于液氮容器頸口處存放過夜，次日轉(zhuǎn)入液氮中。采用控制降溫速度的方法也可采用下列步驟：先將安瓿置入４℃冰箱中２～３小時，再移至冰箱冷凍室內(nèi)３～４小時，再吊入液氮容器頸氣態(tài)部分存放２小時，最后沉入液氮中。細胞凍存在液氮中可以長期保存，但為妥善起見，凍存半年后，取出一只安瓿細胞復蘇培養(yǎng)，觀察生長情況，然后再繼續(xù)凍存。
TOV112細胞系相關產(chǎn)品：SKHEP-1細胞、DU145細胞、Hs683細胞
MALME 3M細胞系相關產(chǎn)品：A204細胞、HaCaT細胞、MDCK II細胞
MGH-U1 (EJ)細胞系相關產(chǎn)品：Lewis lung carcinoma line 1細胞、HBL-100細胞、H1436細胞
HIT-T15細胞系相關產(chǎn)品：SMA560細胞、H747細胞、SNU886細胞
HARA-B細胞系相關產(chǎn)品：HUCCT1細胞、MARC145細胞、DR2R1610細胞
SUP-B1細胞系相關產(chǎn)品：RPMI 7951細胞、Hep-G2細胞、SKLMS1細胞
Ly10細胞系相關產(chǎn)品：SK-LU-1細胞、NRK 52E細胞、HT 144細胞
SNU-C2B細胞系相關產(chǎn)品：MDA-MB-435細胞、H-82細胞、HuLEC-5a細胞
KNS-62 Cells|人肺支氣管鱗狀細胞癌細胞系
Embryonic Bovine Tracheal cells細胞系相關產(chǎn)品：NCM460細胞、HNE2細胞、DMS 153細胞
MT-4細胞系相關產(chǎn)品：HPAC細胞、PANC0813細胞、BBE細胞
JKT1細胞系相關產(chǎn)品：Hi-5細胞、PC3M-1E8細胞、CAL 120細胞
GM00637H細胞系相關產(chǎn)品：A101D細胞、SUDHL16細胞、IM-95細胞
H2081細胞系相關產(chǎn)品：hFOB細胞、NCI-H2171細胞、CP70細胞
Hs 888Lu細胞系相關產(chǎn)品：Ramos 2G6 4C10細胞、KP2細胞、KYSE70細胞
L cells (TK-)細胞系相關產(chǎn)品：Karpas 422細胞、H1882細胞、OV-CA 432細胞
RPVSMC細胞系相關產(chǎn)品：SUM-149細胞、NCI-H1651細胞、NCIH1975細胞
RPVSMC細胞系相關產(chǎn)品：SUM-149細胞、NCI-H1651細胞、NCIH1975細胞
786-0WT細胞系相關產(chǎn)品：PATU-S細胞、BXPC3細胞、TW 01細胞
PANC0203細胞系相關產(chǎn)品：SK-BR3細胞、SNU423細胞、HeLa 229細胞
PAMC82細胞系相關產(chǎn)品：mousepodocyte細胞、RIN14B細胞、Homo sapiens No. 578, tumor cells細胞
LS 174T細胞系相關產(chǎn)品：HS 445T細胞、P3-NS1/1-Ag4-1細胞、L 540細胞
KYSE180細胞系相關產(chǎn)品：RSC-96細胞、SU4細胞、JROECL21細胞
ONS76細胞系相關產(chǎn)品：TCam 2細胞、He-La細胞、MG63細胞
Dysplastic Oral Keratinocyte細胞系相關產(chǎn)品：ACC2細胞、SK-RC-42細胞、SKMEL1細胞
VCaP細胞系相關產(chǎn)品：Hs274T細胞、LNCaP-C4-2細胞、SKOV-3細胞
IOSE-Mar細胞系相關產(chǎn)品：4T1-A細胞、GM02132細胞、SEG1細胞
COLO 320DM細胞系相關產(chǎn)品：4T1.2細胞、R2C細胞、C3H/10T1/2 CL8細胞
MCF-7/ADR細胞系相關產(chǎn)品：CAL 62細胞、CRFK細胞、SCC9細胞
MH-22a細胞系相關產(chǎn)品：High-5細胞、NCI-H2286細胞、P3-NS1/1Ag 4.1細胞
OE21細胞系相關產(chǎn)品：NCI-H508細胞、ECV304細胞、H64細胞
NCI-SNU-216細胞系相關產(chǎn)品：KPL4細胞、ANA-1細胞、H4-II-EC3細胞
Onda 11細胞系相關產(chǎn)品：SK-N-BE(2)C細胞、GM02219D細胞、COLO206細胞
Panc08.13細胞系相關產(chǎn)品：PC-3M-1E8細胞、MEL-526細胞、NIH3T3-L1細胞
NCI-H1869細胞系相關產(chǎn)品：LS-1034細胞、ssMCF7細胞、TGHAVSMC細胞
A375-SM細胞系相關產(chǎn)品：RT4-D6-P2T細胞、HepG2細胞、NCI-H165細胞
RASMCs細胞系相關產(chǎn)品：U2932細胞、JIMT1細胞、SKNBE2C細胞
SW 1417細胞系相關產(chǎn)品：OB2細胞、SKMEL1細胞、U-2 OS細胞
Mono Mac6細胞系相關產(chǎn)品：138 MG細胞、KATOIII細胞、SCC-9細胞
SK-LMS-1細胞系相關產(chǎn)品：HNE1細胞、MDCC-MSB-1細胞、NCI-SNU-1細胞
B 95.8細胞系相關產(chǎn)品：NS20Y細胞、KBM5細胞、HFE-145細胞
Y3細胞系相關產(chǎn)品：KLN205細胞、MuM-2B細胞、hRMECs細胞
TGBC-11-TKB細胞系相關產(chǎn)品：RPMI7951細胞、J82 COT細胞、LC-1 sq細胞
LL2細胞系相關產(chǎn)品：UMNSAH-DF 1細胞、HL-60細胞、SW 1116細胞
H23細胞系相關產(chǎn)品：EC-GI細胞、HUSMC細胞、2T細胞
Beta-TC-6細胞系相關產(chǎn)品：HEK 293-F細胞、2T細胞、OCI-Ly10細胞
Beta-TC-6細胞系相關產(chǎn)品：HEK 293-F細胞、2T細胞、OCI-Ly10細胞
OCIAML3細胞系相關產(chǎn)品：BetaTC6細胞、GM2132細胞、HS-5細胞
MHCC-LM3細胞系相關產(chǎn)品：C-28I2細胞、JROECL19細胞、Hs934T細胞
ARH-77細胞系相關產(chǎn)品：RFL-6細胞、NCI-N87細胞、HEK/EBNA細胞
MM-1S細胞系相關產(chǎn)品：C12細胞、Human Embryonic Skin細胞、G 292 Clone A 141B1細胞
SNU5細胞系相關產(chǎn)品：NCI-SNU-C2B細胞、Hela-Ap-1細胞、HEK 293-EBNA細胞
NCI-H1437細胞系相關產(chǎn)品：H2141細胞、MV 3細胞、KBM-7/Hap8細胞
HBZY-1細胞系相關產(chǎn)品：OCI-AML-3細胞、HSC1細胞、P-388細胞
PG-4(S+L-)細胞系相關產(chǎn)品：F36P細胞、NCI-H157細胞、VCaP細胞
Panc 2.03細胞系相關產(chǎn)品：CC-LP-1細胞、SNU-368細胞、SKML-28細胞
CMT 64細胞系相關產(chǎn)品：TGBC11T細胞、M20 [Human melanoma]細胞、NEC8細胞
H548細胞系相關產(chǎn)品：Jurkat, Clone E6-1細胞、CCD18Co細胞、TSCCa細胞
MDA 1386細胞系相關產(chǎn)品：LC2/Ad細胞、Huh-7.5.1細胞、HCC2185細胞
SW 1573細胞系相關產(chǎn)品：Sp 2817細胞、CBRH7919細胞、MDA231細胞
KNS-62 Cells|人肺支氣管鱗狀細胞癌細胞系
D-283 Med細胞系相關產(chǎn)品：KALS1細胞、H64細胞、P3-X63Ag8細胞
BT325細胞系相關產(chǎn)品：QGY細胞、SK-BR3細胞、Japanese Tissue Culture-28細胞
MGH-U1 (EJ)細胞系相關產(chǎn)品：Lewis lung carcinoma line 1細胞、NTC-200細胞、P3J-HR-1細胞
RenCa細胞系相關產(chǎn)品：Bx-PC3細胞、MT-3 [Human leukocytes]細胞、Bovine ENDometrial cells細胞
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