"NCI-H747 Cells|人盲腸癌細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料:詳見(jiàn)相關(guān)文獻(xiàn)介紹
細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣
ssMCF-7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-SNU-C1細(xì)胞、NCI.H522細(xì)胞、AZ 521細(xì)胞
PC615.3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC827細(xì)胞、LIM1215細(xì)胞、BEL7402細(xì)胞
MC3T3-E1 Subclone 4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RCF細(xì)胞、H184A1細(xì)胞、CAL 148細(xì)胞
細(xì)胞生長(zhǎng):貼壁
最近在培養(yǎng)細(xì)胞時(shí),發(fā)現(xiàn)其狀態(tài)不是很好,很容易扎堆生長(zhǎng),用胰酶消化的時(shí)候也是一團(tuán)一團(tuán)地被消化下來(lái),很難把它們吹散成一個(gè)一個(gè)細(xì)胞。而且長(zhǎng)得也挺快也挺不均勻的,傳代的第二天,有些地方就長(zhǎng)得滿滿的了。想請(qǐng)教一下這是為什么呢?你好,我養(yǎng)的細(xì)胞和你一樣,消化下來(lái)也是一團(tuán)的,但吹打以后就沒(méi)有這樣的情況了。建議你分皿前還是要吹勻,分皿后在鏡下看一看,移動(dòng)培養(yǎng)皿的時(shí)候盡量動(dòng)作輕,避免晃動(dòng)。細(xì)胞生長(zhǎng)挺快,那么細(xì)胞的增殖能力應(yīng)該較強(qiáng)。胰酶消化成團(tuán)的問(wèn)題我覺(jué)得有以下幾種可能:一、細(xì)胞消化后吹打不均勻,造成細(xì)胞成團(tuán)生長(zhǎng):二、細(xì)胞細(xì)化太過(guò),細(xì)胞成片脫落,吹打時(shí)沒(méi)有受力點(diǎn),細(xì)胞聚團(tuán)生長(zhǎng)。解決辦法:根據(jù)細(xì)胞生長(zhǎng)的情況進(jìn)行多次消化,將同次消化下來(lái)的細(xì)胞放在一個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)。貼壁細(xì)胞傳代培養(yǎng):一般步驟為:真空泵吸走培養(yǎng)基,1XPBS漂洗兩次,加入1mlEDTA-Tripsin(100mm皿為例),37度放置數(shù)分鐘,輕拍培養(yǎng)瓶使細(xì)胞自瓶壁脫落,加入適量血清,以吸管上下吸放數(shù)次以打散細(xì)胞團(tuán)塊,離心后加入新鮮培養(yǎng)基,按比例轉(zhuǎn)移至新皿。細(xì)胞的傳代最重要的是胰酶處理時(shí)間,若胰酶處理太久,容易造成細(xì)胞貼壁不緊,顯微鏡下觀察立體感不強(qiáng),嚴(yán)重的時(shí)候甚至?xí)斐杉?xì)胞死亡。我談?wù)剛€(gè)人經(jīng)驗(yàn):HepG-2、A549、Hela、SGC-7901幾種癌細(xì)胞處理時(shí)間可適當(dāng)放長(zhǎng),一般處理5-6min,C2C12、COS-7、NIH-3T3比較容易脫落,2min足矣,P19Cl6和293細(xì)胞貼壁不緊,可在PBS漂洗后,直接換新鮮培養(yǎng)基打散。
NCI-H747 Cells|人盲腸癌細(xì)胞系
細(xì)胞物種來(lái)源:人源或鼠源等其它物種來(lái)源
細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
FHL124細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GCT0404細(xì)胞、MADISON LUNG TA-109細(xì)胞、HeLa-229細(xì)胞
H1944細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Giant Cell Tumor細(xì)胞、HFF1細(xì)胞、8505C細(xì)胞
OCI-Ly3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:C8166細(xì)胞、WERI-Rb-1細(xì)胞、PLA801D細(xì)胞
J111細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH650細(xì)胞、Hs819T細(xì)胞、University of Michigan-Urothelial Carcinoma-14細(xì)胞
細(xì)胞傳代方法:1:2—1:4傳代,每周換液2次
細(xì)胞培養(yǎng)常見(jiàn)問(wèn)題及解決方案:1)培養(yǎng)瓶有破裂,培養(yǎng)液有漏液:細(xì)胞極大可能會(huì)污染,所以我們會(huì)及時(shí)安排幫老師解決;2)細(xì)胞漂?。号囵B(yǎng)瓶不開(kāi)封,瓶口酒精擦拭后平躺放置在培養(yǎng)箱。次日觀察,如細(xì)胞大部分又貼回瓶底,表明細(xì)胞活力正常,剩余漂浮的細(xì)胞可以離心去掉,留10ml培養(yǎng)液培養(yǎng)觀察,細(xì)胞生長(zhǎng)至匯合度80%,進(jìn)行消化傳代;如細(xì)胞還是不貼壁,將細(xì)胞離心收集轉(zhuǎn)到新培養(yǎng)瓶,原培養(yǎng)瓶加部分培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng),中間注意觀察,我們的技術(shù)人員會(huì)一直跟蹤指導(dǎo),直到問(wèn)題解決;3)對(duì)于生長(zhǎng)緩慢的貼壁細(xì)胞:可采用適當(dāng)?shù)奶岣吲囵B(yǎng)基中血清濃度,或隔日換液的方法來(lái)保證細(xì)胞的狀態(tài)和生長(zhǎng)速度;4)對(duì)于生長(zhǎng)不均的貼壁細(xì)胞:在培養(yǎng)過(guò)程中若出現(xiàn)細(xì)胞分布明顯不均時(shí)(即某一區(qū)域細(xì)胞已重疊生長(zhǎng),而旁邊則為一塊空白),此時(shí)可將細(xì)胞進(jìn)行消化,重新打散,貼壁,加入新培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)。
細(xì)胞來(lái)源說(shuō)明:細(xì)胞主要來(lái)源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系
NCI-H747 Cells|人盲腸癌細(xì)胞系
細(xì)胞生長(zhǎng)特性:貼壁生長(zhǎng)
RCC23細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:L 929細(xì)胞、BHK-21細(xì)胞、HCC-1438細(xì)胞
HNE1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RINm5F細(xì)胞、TE-14細(xì)胞、AX-Mel細(xì)胞
A172細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI-Ly 8細(xì)胞、SN12C-PM6細(xì)胞、RPMI-7951細(xì)胞
NEC-8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE-10細(xì)胞、Panc2_03細(xì)胞、KTA7細(xì)胞
細(xì)胞復(fù)蘇后貼壁細(xì)胞較少的問(wèn)題分析:總結(jié)1:復(fù)蘇過(guò)程沒(méi)有問(wèn)題,是否是從液氮拿出直接放入溫水,還有培養(yǎng)箱,二氧化碳濃度,培養(yǎng)基、PH值等環(huán)節(jié)。要么加高濃度FBS 15-20%,看看能否幫助貼壁,當(dāng)然也需要考慮血清問(wèn)題,還有確信拿來(lái)的細(xì)胞沒(méi)問(wèn)題??偨Y(jié)2:首先應(yīng)該懷疑凍存,實(shí)際上復(fù)蘇出問(wèn)題的可能非常小,因?yàn)椴僮骱?jiǎn)單,而且死板。1、你凍存的時(shí)候是不是消化的時(shí)間過(guò)長(zhǎng),這是一般人所注意不到的,即使書(shū)上也不講這個(gè)問(wèn)題,太長(zhǎng)的消化時(shí)間會(huì)讓細(xì)胞復(fù)蘇時(shí)失去貼壁能力,表現(xiàn)為先貼后死,原因是在你復(fù)蘇的時(shí)候細(xì)胞已進(jìn)入凋亡程序,不可逆轉(zhuǎn)的死亡。2、你的凍存液好不好,是什么,甘油還是DMSO,質(zhì)量非常重要,否則也會(huì)死亡。3、你的凍存液的量加的是不是太多,ATCC推薦是不超過(guò)7%,大于5%,太多也不好。4、你在凍存的時(shí)候是不是把DMSO混均勻,這個(gè)有一些影響,但不算太大。5、你的凍存是否按部就班,就是所溫度梯度是不是把握嚴(yán)格,很多人容易忘卻這個(gè)事情,因?yàn)檫@個(gè)東西流程長(zhǎng)。6、如果你細(xì)胞污染,你是否能很快看到,我比我的導(dǎo)師能早一天看到污染。從這個(gè)角度講建議去除離心這步。7、你的細(xì)胞在凍存前是否過(guò)密。還有,不贊成孵箱污染這個(gè)概念的,所有在一個(gè)孵箱里的細(xì)胞都污染一個(gè)細(xì)菌的話,這個(gè)細(xì)菌是源于孵箱的,但這不代表孵箱污染,因?yàn)榉跸錈o(wú)論你如何處理都有大量的細(xì)菌,問(wèn)題在操作。每次污染的原因都要盡可能的找,以后就不犯同樣的問(wèn)題,這個(gè)很重要,不能靠猜,否則你就有可能細(xì)胞養(yǎng)絕最后換課題,這個(gè)見(jiàn)得太多了,別不當(dāng)會(huì)事。
RS411細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NT2-D1細(xì)胞、LAN-5細(xì)胞、HEK293-FT細(xì)胞
LS411N細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-510細(xì)胞、GM2219C細(xì)胞、MC-CAR細(xì)胞
H-748細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Mel624細(xì)胞、MARC 145細(xì)胞、SK-RC 39細(xì)胞
HFL-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCRF-SB細(xì)胞、RCC10RGB細(xì)胞、H196細(xì)胞
U118MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H2141細(xì)胞、TCCSUP細(xì)胞、SNU-878細(xì)胞
Walker-256細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:AR4-IP細(xì)胞、HCC0366細(xì)胞、HEL-92_1_7細(xì)胞
Panc02細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:P815細(xì)胞、KTA-7細(xì)胞、CHOS細(xì)胞
CHO-S細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OPM-2細(xì)胞、NTera2 cl.D1細(xì)胞、KMB17細(xì)胞
NCI-H747 Cells|人盲腸癌細(xì)胞系
Psi-2-DAP細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:EAC-E2G8細(xì)胞、IEC-6細(xì)胞、OKa-C-1細(xì)胞
MNNG/HOS Cl #5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Chinese Hamster Lung細(xì)胞、CHP-212細(xì)胞、Hs 895 T細(xì)胞
WEHI 3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H292細(xì)胞、Hs27F細(xì)胞、Clone 15 HL-60細(xì)胞
OUMS-27細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KYSE270細(xì)胞、H774細(xì)胞、B-cell Acute Lymphoblastic Leukemia-1細(xì)胞
T-HEECs細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:QBI-HEK 293A細(xì)胞、MV4;11細(xì)胞、MDA134細(xì)胞
NBL-7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KU 812F細(xì)胞、M14細(xì)胞、Highly Aggressively Proliferating Immortalized細(xì)胞
NCI-H87細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:7404細(xì)胞、RH-35細(xì)胞、COLO824細(xì)胞
WB-F344細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H211細(xì)胞、Kit225/K6細(xì)胞、WM239A細(xì)胞
WB-F344細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H211細(xì)胞、Kit225/K6細(xì)胞、WM239A細(xì)胞
CAL 12T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HOS-TE85細(xì)胞、SW-1990細(xì)胞、MES-SA/Dx-5細(xì)胞
JCA1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-Hut 125細(xì)胞、Sp2/O細(xì)胞、H-64細(xì)胞
NT2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:T1-73細(xì)胞、C 643細(xì)胞、NFHIOSE-80細(xì)胞
GA-10 clone 4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:P388.D1細(xì)胞、Hs 636 T細(xì)胞、SNU-869細(xì)胞
HEM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW 1116細(xì)胞、KASUMI6細(xì)胞、NCI-446細(xì)胞
GM637細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI-Ly19細(xì)胞、DMS273細(xì)胞、H865細(xì)胞
RAEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC2279細(xì)胞、NCIH2122細(xì)胞、HM06.A1細(xì)胞
H647ell細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SMMC-7721細(xì)胞、C3H10T1/2細(xì)胞、OCIAML4細(xì)胞
EA hy 926細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM00637B細(xì)胞、SUDHL-6細(xì)胞、HS-68細(xì)胞
TE-11細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HuPT4細(xì)胞、COV434細(xì)胞、RPMI6666細(xì)胞
D-283MED細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:293 Ad5細(xì)胞、KMS-18細(xì)胞、P3-NS1/1-Ag4-1細(xì)胞
138 MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC-9724細(xì)胞、A-204細(xì)胞、C2BBe1細(xì)胞
MDA-MB-175細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:293T/17細(xì)胞、MDA-MB-453細(xì)胞、UCH-1細(xì)胞
NCI-H2030細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TK+/- (clone 3.7.2C)細(xì)胞、H-2591細(xì)胞、BIU-87/Adr細(xì)胞
OsACL細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Instituto Biologico-Rim Suino-2細(xì)胞、LU65細(xì)胞、SUM-159-PT細(xì)胞
MSCs(mUCMSCs)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH64細(xì)胞、NIH:OVCAR4細(xì)胞、MD Anderson-Metastatic Breast-231細(xì)胞
MDBK細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ECC10細(xì)胞、U-hth74細(xì)胞、HBZY1細(xì)胞
HEK-A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LTPA細(xì)胞、VAESBJ細(xì)胞、NCIH747細(xì)胞
H-2452細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:S-16細(xì)胞、hOMF細(xì)胞、BCaP 37細(xì)胞
RIN Cl-5F細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNB19細(xì)胞、HCC9204細(xì)胞、GM15452細(xì)胞
MHCC 97-H細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NIT-1細(xì)胞、SW-626細(xì)胞、16HBEo-細(xì)胞
L5178-R細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Karpas-299細(xì)胞、GM3190細(xì)胞、P3X63-Ag8.653細(xì)胞
MV-1-Lu細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BIU-87/Adr細(xì)胞、NOZC-1細(xì)胞、T 98 G細(xì)胞
NCIH2023細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CHP 100細(xì)胞、COLO 206細(xì)胞、Glioma-261細(xì)胞
Ramos-RA1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-740細(xì)胞、H2052_MM細(xì)胞、870細(xì)胞
MEL細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RS411細(xì)胞、QGP1細(xì)胞、TE 85 ClF-5細(xì)胞
TK 10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MC-116細(xì)胞、AG06814-N細(xì)胞、CAL851細(xì)胞
NCL-H548細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MOLM13細(xì)胞、HH [Human lymphoma]細(xì)胞、BEAS 2B細(xì)胞
NCIH1581細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-125細(xì)胞、EB-2細(xì)胞、Soleus clone 8細(xì)胞
L-363細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H2342細(xì)胞、MCF-7細(xì)胞、SK ES 01細(xì)胞
Fetal Rhesus Kidney-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:IGR-OV1細(xì)胞、HOS TE85細(xì)胞、LAN-6細(xì)胞
HTori3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM637A細(xì)胞、MDA330細(xì)胞、P30/Ohkubo細(xì)胞
SBC3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:L-M[TK-]細(xì)胞、RPE1細(xì)胞、WERI Rb-1細(xì)胞
VMRCRCZ細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BE(2)-C細(xì)胞、SL1細(xì)胞、NU-GC-3細(xì)胞
A2780/Taxol細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RT112細(xì)胞、OVMANA細(xì)胞、HSC/mHSC細(xì)胞
HO-8910細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H2081細(xì)胞、LA-795細(xì)胞、SUM159PT細(xì)胞
HuT-102細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:102PT細(xì)胞、SK-UT-1細(xì)胞、P3-X63Ag8細(xì)胞
H2141細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Reuber H-35細(xì)胞、LP-1細(xì)胞、NCI-Hut 125細(xì)胞
NeHepLxHT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU-C2A細(xì)胞、SLMT1細(xì)胞、SNU449細(xì)胞
MDA-436細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RKOAS451細(xì)胞、BNL-CL.2細(xì)胞、HUT28細(xì)胞
THPI細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-N-BE(2C)細(xì)胞、NBL-12細(xì)胞、HS940細(xì)胞
SNU520細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H2170細(xì)胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-6細(xì)胞、MPASMC細(xì)胞
NCI-H747 Cells|人盲腸癌細(xì)胞系
T_T_細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BN-CL2細(xì)胞、PK (15)細(xì)胞、L 540細(xì)胞
OAW42細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:EAC細(xì)胞、HEK-293-FT細(xì)胞、KU812-F細(xì)胞
H747細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUD-4細(xì)胞、R D細(xì)胞、HCC827細(xì)胞
OVCAR-5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MKN 28細(xì)胞、3T3J2細(xì)胞、MILE SVEN 1細(xì)胞
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