檢測原理:
本試劑盒采用雙抗體夾心ELISA法。用抗TBP2抗體包被于酶標板上,實驗時樣品或標準品中的TBP2會與包被抗體結合,游離的成分被洗去。依次加入生物素化的抗GF-β1抗體和辣根過氧化物酶標記的親和素??筎BP2抗體與結合在包被抗體上的TBP2結合、生物素與親和素特異性結合而形成免疫復合物,游離的成分被洗去。加入顯色底物(TMB),TMB在辣根過氧化物酶的催化下呈現(xiàn)藍色,加終止液后變成黃色。用酶標儀在450nm波長處測OD值,TBP2濃度與OD450值之間呈正比,通過繪制標準曲線計算出樣品中TBP2的濃度。
產(chǎn)品名稱:小鼠硫氧還蛋白結合蛋白2(TBP2)ELISA試劑盒
英文名稱:Mouse Thioredoxin Binding Protein 2(TBP2)ELISA Kit
規(guī)格:48T/96T
貨號:A106462
主要成分:酶標板,試劑,標準品等。
試劑盒種屬:馬鈴薯、鹿、羊、雞、鴨、魚、人、大鼠、小鼠、豚鼠、倉鼠、裸鼠、兔子、豬、犬、猴、馬、牛等動植物。
檢測目的:用于測定血清,血漿及相關液體等樣本。例如適合檢測包括血清、血漿、尿液、胸腹水、灌洗液、腦脊液、細胞培養(yǎng)上清、組織勻漿等標本..
實驗流程:
1. 實驗前標準品、試劑及樣本的準備;
2. 加樣(標準品及樣本)100µL,37°C孵育1小時;
3. 吸棄,加檢測溶液A100µL,37°C孵育1小時;
4. 洗板3次;
5. 加檢測溶液B100µL,37°C孵育30分鐘;
6. 洗板5次;
7. 加TMB底物90µL,37°C孵育10-20分鐘;
8. 加終止液50µL,立即450nm讀數(shù)。
樣本處理及要求:
1. 血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。
仔細收集上清,保存過程中如出現(xiàn)沉淀,應再次離心。
2. 血漿:應根據(jù)標本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應該再次離心。
3. 尿液:用無菌管收集,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。胸腹水、腦脊液參照實行。
4. 細胞培養(yǎng)上清:檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。檢測細胞內(nèi)的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復凍融,以使細胞破壞并放出細胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
5. 組織標本:切割標本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。標本融化后仍然保?-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或勻漿器將標本勻漿充分。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
6. 標本采集后盡早進行提取,提取按相關文獻進行,提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將小鼠硫氧還蛋白結合蛋白2(TBP2)ELISA試劑盒標本放于-20℃保存,但應避免反復凍融.
7. 不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
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小鼠硫氧還蛋白結合蛋白2(TBP2)ELISA試劑盒Anti-VTG/HRP 辣根過化物酶標記兔抗魚、青鳉魚卵黃蛋白原抗體IgG焦油紫染色液(0.06%)
Phospho-EEF2k (Ser366) 化真核延伸因子激酶2抗體淋系增強子結合因子1檢測試劑盒含量:
Alpha B Crystallin/HSPB5 熱休克蛋白β5抗體金屬蛋白檢測試劑盒含量:
Anti-Tumstatin/Col4a3/FITC 熒光素標記腫瘤抑素抗體IgG焦油紫染色液(0.1%)
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EGFR 表皮生長因子受體抗體前列腺素檢測試劑盒含量:
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Rabbit Anti-human Fibrinogen/HRP 辣根過化物酶標記可溶性纖維蛋白原抗體IgG脂鐵蘇木素(FeH)染色液
Rabbit Anti-human Fibrinogen/FITC 熒光素標記纖維蛋白原IgG神經(jīng)HRP示蹤顯色液(TMB法)
Phospho-EGFR (Thr678) 化表皮生長因子受體抗體緊密連接蛋白1檢測試劑盒含量:
Goat Anti-human Fibrinogen/HRP 辣根過化物酶標記羊抗人纖維蛋白原神經(jīng)HRP示蹤顯色液(DAB法)
脊髓灰質(zhì)炎抗血清生物檢定參照物
Anti-TY3H/FITC (Tyrosine Hydroxylase ) 熒光素標記酪羥化酶抗體IgG核仁組成區(qū)嗜銀蛋白染色液(AgNOR Stain)
流感病毒A IgG抗體檢測質(zhì)控品
注意事項:
1)試劑應按標簽說明書儲存,使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄,不可保存。
2)實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。
3)不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。
4)使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器。
5)使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。
6)洗滌酶標板時應充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。
7)底物A應揮發(fā),避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應立即讀取OD值。
8)加入試劑的順序應一致,以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。
9)按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。
關鍵字: 小鼠硫氧還蛋白結合蛋白2;TBP2;ELISA試劑盒;ELISA檢測試劑盒;ELISA酶聯(lián)免疫試劑盒;
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