抗體反應(yīng)的因素:
1.電解質(zhì) :抗原抗體特異結(jié)合后,膠體粒便可發(fā)生脫水作用,此時易受電解質(zhì)影響,產(chǎn)品僅用于科研如有適當濃度的電解質(zhì)存在就會使它們失去部分負電荷而相互凝聚,于是出現(xiàn)明顯的凝集或沉淀現(xiàn)象。
2.酸堿度:合適的pH為6-8。
3.溫度:37℃通常是抗原體反應(yīng)最適溫度。
三磷酸腺苷結(jié)合盒轉(zhuǎn)運蛋白9抗體 別 名 ATP binding cassette A9; ATP binding cassette sub family A (ABC1) member 9; ATP binding cassette sub family A member 9; DKFZp686F2450; EST640918; MGC75415; ABCA9_HUMAN.
濃 度 1mg/1ml
規(guī) 格 0.2ml/200μg
抗體來源 Rabbit
克隆類型 polyclonal
交叉反應(yīng) Human, Mouse, Rat, Pig, Horse
產(chǎn)品類型 一抗
英文名稱 Anti-ABCA9
中文名稱 三磷酸腺苷結(jié)合盒轉(zhuǎn)運蛋白9抗體
研究領(lǐng)域 細胞生物 免疫學(xué) 信號轉(zhuǎn)導(dǎo) 細胞周期蛋白 細胞分化
蛋白分子量 predicted molecular weight: 184kDa
性 狀 Lyophilized or Liquid
免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human ABCA9
亞 型 IgG
純化方法 affinity purified by Protein A
儲 存 液 Preservative: 15mM Sodium Azide, Constituents: 1% BSA, 0.01M PBS, pH 7.4
產(chǎn)品應(yīng)用 WB=1:100-500 ELISA=1:500-1000 IP=1:20-100 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 IF=1:100-500
(石蠟切片需做抗原修復(fù))
實驗步驟:
1、石蠟切片,常規(guī)脫蠟至水
2、蒸餾水沖洗,pbs 浸泡5 分鐘(如需采用抗原修復(fù),在此步驟后進行)。
3、3%雙氧水去離子水(無色液體)孵育15-20 分鐘,以消除內(nèi)源性過氧物酶活性。
4、滴加試劑A(藍色液體)室溫孵育15-20 分鐘,傾去,勿洗。
5、滴加適當比例稀釋的一抗,37℃孵育2-3 小時或4℃過夜。
6、PBS 沖洗,3 分鐘3 次。
7、滴加試劑B(黃色液體),室溫或37℃孵育15-20 分鐘。
8、PBS 沖洗,3 分鐘3 次。
9、滴加試劑C(橙色液體),室溫或37℃孵育15-20 分鐘。
10、PBS 沖洗,3 分鐘3 次。
11、顯色劑顯色(DAB 或AEC)
12、自來水充分沖洗。
13、如果需要,可進行復(fù)染,脫水,透明。
14、選擇適當?shù)姆馄瑒┓馄?/span>
抗體的鑒定:
1)抗體的效價鑒定:不管是用于診斷還是用于治療,制備抗體的目的都是要求較高效價。不同的抗原制備的抗體,要求的效價不一。鑒定效價的方法很多,包括有試管凝集反應(yīng),瓊脂擴散試驗,酶聯(lián)免疫吸附試驗等。常用的抗原所制備的抗體一般都有約成的鑒定效價的方法,以資比較。如制備抗抗體的效價,一般就采用瓊脂擴散試驗來鑒定。
2)抗體的特異性鑒定:抗體的特異性是指與相應(yīng)抗原或近似抗原物質(zhì)的識別能力??贵w的特異性高,它的識別能力就強。衡量特異性通常以交叉反應(yīng)率來表示。交叉反應(yīng)率可用競爭抑制試驗測定。以不同濃度抗原和近似抗原分別做競爭抑制曲線,計算各自的結(jié)合率,求出各自在IC50時的濃度,并按公式計算交叉反應(yīng)率。
產(chǎn)品僅用于科研如果所用抗原濃度IC50濃度為pg/管,而一些近似抗原物質(zhì)的IC50濃度幾乎是無窮大時,表示這一抗血清與其他抗原物質(zhì)的交叉反應(yīng)率近似為0,即該血清的特異性較好。
3)抗體親和力:是指抗體和抗原結(jié)合的牢固程度。親和力的高低是由抗原分子的大小,抗體分子的結(jié)合位點與抗原決定簇之間立體構(gòu)型的合適度決定的。有助于維持抗原抗體復(fù)合物穩(wěn)定的分子間力有氫鍵,疏水鍵,側(cè)鏈相反電荷基因的庫侖力,范德華力和空間斥力。親和力常以親和常數(shù)K表示,K的單位是L/mol??贵w親和力的測定對抗體的篩選,確定抗體的用途,驗證抗體的均一性等均有重要意義。
抗體反應(yīng)特點:
1.高度特異性,特異性是抗原抗體反應(yīng)的最主要特征,特定抗原決定簇只與特定抗體結(jié)合;
2.可逆性:抗原與抗體結(jié)合形成抗原抗體復(fù)合物的過程是一種動態(tài)平衡, 其反應(yīng)式為:Ag+AbAg·Ab;
3.適當濃度和比例;
4.敏感性:在測定血清中某一物質(zhì)的含量時,化學(xué)比色法的敏感度為mg/ml水平,酶反應(yīng)測定法的敏感度約為5~10μg/ml,免疫測定中凝膠擴散法的敏感度與酶反應(yīng)法相仿。
含試劑:
1、一抗(應(yīng)用:IHC-P=1:400-800 IHC-F=1:400-800 )
2、無色試劑:內(nèi)源性過氧化物酶阻斷劑
3、試劑A:封閉用正常山羊血清工作液
4、試劑B:生物素標記二抗工作液:生物素標記羊抗兔IgG
5、試劑C:辣根酶標記鏈酶卵白素工作液
6、顯色液D液 (棕色) 1ml
7、顯色液E液(白色)20ml
磺保泰松標準品 規(guī)格:200mg 英文名稱:Sulfinpyrazone
異舒普林鹽鹽標準品 規(guī)格:200mg 英文名稱:Isoxsuprine Hydrochloride
一水天冬酰標準品 規(guī)格:200mg 英文名稱:Asparagine Monohydrate
糖二鈣標準品 規(guī)格:200mg 英文名稱:Calcium Saccharate
芹菜苷元7葡萄糖標準品 規(guī)格:30mg 英文名稱:Apigenin7glucoside
麥角固標準品 規(guī)格:50mg 英文名稱:Ergosterol
平標準品 規(guī)格:100mg 英文名稱:Clozapine
平分離度用混合物標準品 規(guī)格:30mg 英文名稱:Clozapine Resolution Mixture
鹽依達比星標準品 規(guī)格:50mg 英文名稱:Idarubicin Hydrochloride
素標準品 規(guī)格:200mg 英文名稱:Testosterone Propionate CIII
NFmocN'三基D半胱 進口、國產(chǎn) FmocDCys(Trt)OH 含量:特純,98%
NFmocN'三基L組 進口、國產(chǎn) FmocHis(Trt)OH 含量:特純,98%
Nβ酰L組 進口、國產(chǎn) LCarnosine 含量:BR,99%
N基?;? 進口、國產(chǎn) ACES 含量:FMP,90%
N基81磺 進口、國產(chǎn) 1,8ANS 含量:高純
N酰L纈酰甘酰L精對基鹽鹽 進口、國產(chǎn) NBZValGlyArgPNA•HC1 含量:BR,98%
N酰甘 進口、國產(chǎn) HippuricAcid 含量:BR,99%
N芐基甘酯 進口、國產(chǎn) NBenzylglycineethylester 含量:BR,97%
N芐氧基L酪酯 進口、國產(chǎn) BTEE 含量:BR,98%
N芐氧羰基DL基 進口、國產(chǎn) ZDLphenylalanine 含量:特純,98%
肽基脯氨酰順反異構(gòu)酶FKBP11抗體N-Acetylsulfanilyl chloride中文名:對乙酰胺基苯磺酰氯別名:分子式:C8H8ClNO3S
FKBP135蛋白抗體Exemestane中文名:依西美坦別名:分子式:C20H24O2
肽基脯氨酸異構(gòu)酶酶FKBP25抗體Hemapolin中文名:甲基環(huán)硫雄醇中間體 E別名:分子式:C20H32OS
肽基脯氨酸異構(gòu)酶酶FKBP8抗體Formestane中文名:福美司坦別名:分子式:C19H26O3
旋轉(zhuǎn)異構(gòu)酶FKBP6抗體4-Chlorotestosterone acetate中文名:醋酸氯睪酮別名:分子式:C21H29ClO3
三磷酸腺苷結(jié)合盒轉(zhuǎn)運蛋白9抗體 Francisellaphilomiragia種屬:Francisellaphilomiragia
安全等級:1
模式菌株:no
培養(yǎng)方法
培養(yǎng)基:2
生長條件:30℃蜃樓耶爾森氏菌