抗體制備過(guò)程:
1.材料與試劑
a.提取的動(dòng)物 Ig
b.弗氏完全佐劑和弗氏不完全佐劑
c.青霉素和鏈霉素
d.實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 兔
e.其它材料及試劑
2、選擇實(shí)驗(yàn)活體。
3、產(chǎn)品僅用于科研進(jìn)行動(dòng)物免疫實(shí)驗(yàn)。
4、試取血樣進(jìn)行測(cè)試,查看免疫效果。
5、如果免疫成功,殺死實(shí)驗(yàn)活體,采集全部血清。
6、純化出抗體。
7、鑒定抗體。胎牛血清(無(wú)菌采制)
參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品應(yīng)用 WB=1:100-500 ELISA=1:500-1000 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 ICC=1:100-500 IF=1:100-500
(石蠟切片需做抗原修復(fù))
英文名稱 Anti-APPBP2
中文名稱 β淀粉樣蛋白前體蛋白結(jié)合蛋白2抗體
別 名 amyloid beta precursor protein (cytoplasmic tail) binding protein 2; Amyloid beta precursor protein-binding protein 2; Amyloid protein binding protein 2; Amyloid protein-binding protein 2; APBP2_HUMAN; APP BP2; APP-BP2; Appbp2; PAT1; Ara67 Protein interacting with APP tail 1.
濃 度 1mg/1ml
規(guī) 格 0.2ml/200μg
抗體來(lái)源 Rabbit
克隆類型 polyclonal
交叉反應(yīng) Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow, Zebrafish
產(chǎn)品類型 一抗
研究領(lǐng)域 免疫學(xué) 神經(jīng)生物學(xué) Alzheimer's
蛋白分子量 predicted molecular weight: 67kDa
性 狀 Lyophilized or Liquid
免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human APPBP2
亞 型 IgG
純化方法 affinity purified by Protein A
儲(chǔ) 存 液 Preservative: 15mM Sodium Azide, Constituents: 1% BSA, 0.01M PBS, pH 7.4
抗體的制備過(guò)程:
1. 免疫原的制備
普通的大分子蛋白,通過(guò)分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進(jìn)行誘導(dǎo)表達(dá)獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為免疫原。
小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯(lián)載體對(duì)該分子進(jìn)行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,常見(jiàn)偶聯(lián)載體如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫動(dòng)物
常用于制備抗血清的動(dòng)物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等,大量生產(chǎn)時(shí)需要用到狗、綿羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集
一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動(dòng)脈采血,家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血,家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定
得到的抗血清需要進(jìn)一步的純化,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進(jìn)行層析,具有高效,特異性強(qiáng),純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對(duì)分子的質(zhì)量、純度以及特異性。
5. 免疫血清的保存
建議將抗體分裝后進(jìn)行保存??贵w一般比較穩(wěn)定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會(huì)影響效價(jià),而真空干燥保存時(shí)間可以更久。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑。
抗體分子標(biāo)記技術(shù):
(一)原理
當(dāng)應(yīng)用化學(xué)氧化法時(shí)(NaI)遇強(qiáng)氧化劑,離子被氧化為分子,所生成的自由分子可與某些基團(tuán)進(jìn)行鹵化反應(yīng)。蛋白質(zhì)分子可進(jìn)行鹵化反應(yīng)的基團(tuán)主要為酪氨酸殘基,某些組氨酸殘基也可能進(jìn)行化。在應(yīng)用胺T( Chloramine T)法的實(shí)驗(yàn)中,所用的氧化劑(1,3,4,6- tetrachloro-3a,6adipheny l-glucoluril)強(qiáng)揮發(fā)性的有機(jī)溶劑中。該溶劑加入試管后,先讓其揮發(fā)(即讓氧化劑將試管包被),然后把Na125I和蛋白質(zhì)液加入包被好的試管中,反應(yīng)完成即將混合液移入他管終止反應(yīng)。
(二)準(zhǔn)備
1.試劑
經(jīng)親和層析純化的多克隆抗體或單克隆抗體;0.5mol/L磷酸鈉緩沖液,pH7.5;無(wú)載體的Na125I3.7GBq/ml(100mCi/ml)的NaOH液;100g/L三醋酸;70%乙醇;新鮮制備的含2mg/m1絡(luò)胺T的0.5mol/L磷酸鈉緩沖液(pH7.5);胺T反應(yīng)終止緩沖液;
2.儀器
凝膠過(guò)濾柱;¥-記數(shù)器;玻璃纖維濾。
(三)操作要點(diǎn)
1.產(chǎn)品僅用于科研用胺T法進(jìn)行化,也可在大約pH7.0的緩沖液中進(jìn)行;
2.如果氧化反應(yīng)損傷蛋白質(zhì),可將抗體與異硫氰酸熒光素(FITC)偶聯(lián))胺T量減少到0.02mg/m,并將偏重亞硫酸液的濃度降到0.024mg/ml;
3. Iodogen-包被的試管可在干燥器中,于室溫下保存多年;
4.1251標(biāo)記的抗體,在制備后六周內(nèi)均可使用(1251的半衰期為59.6天);
5.要注意保證所用的Na1251是新鮮的,陳舊制劑的比活性低;
6.酪氨酸的碘化偶爾會(huì)對(duì)抗原的抗體結(jié)合位點(diǎn)有干擾,因此降低其結(jié)合能力,但這種情況很少見(jiàn)。
下列是β淀粉樣蛋白前體蛋白結(jié)合蛋白2抗體 的相關(guān)熱銷產(chǎn)品:
腺嘌呤標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:200mg 英文名稱:Adenine
L色標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:200mg 英文名稱:LTryptophan
鹽阿可樂(lè)定標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:100mg 英文名稱:Apraclonidine Hydrochloride
唑尼沙相關(guān)物質(zhì)A標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:20mg 英文名稱:Zonisamide Related Compound A
美昔康相關(guān)物質(zhì)B標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:25mg 英文名稱:
卡維地標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:200mg 英文名稱:Carvedilol
卡維地相關(guān)物質(zhì)C標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:20mg 英文名稱:
雌二相關(guān)物質(zhì)B標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:10mg 英文名稱:
培高利特亞砜標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:50mg 英文名稱:Pergolide Sulfoxide
托拉塞米相關(guān)物質(zhì)A標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:75mg 英文名稱:
4磺酯 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) Ethylptoluenesulfonate 含量:CP
4氫樹(shù)脂 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) MBHAresin 含量:BR
4基1H咪唑 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) 4Methylimidazole 含量:LR
4基7(酰氧基)2H1并2二鹽 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) 4MUP 含量:植物細(xì)胞培養(yǎng)級(jí),98%
4基7氧基αD喃半乳糖苷 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) MUαGal 含量:BR,98%
4基7氧基βD喃半乳糖苷 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) MUGal 含量:BR,98%
4基 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) pCresol 含量:BR,5456℃
4基 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) pToluicacid 含量:BR,99%
4基傘花基βD葡糖苷 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) MUG 含量:高純,98%
4基傘形βD葡萄糖苷 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) MUD 含量:BR
ENAH蛋白抗體Benzo-15-crown 5-ether中文名:苯并-15-冠5-醚別名:分子式:C14H20O5
乙基丙二酸腦病蛋白抗體Benzo-18-crown-6 ether中文名:苯并-18-冠6-醚別名:分子式:C16H24O6
真核翻譯起始因子4E抗體9,10-Bis(3,5-dihydroxyphenyl)anthracene中文名:9,10-雙(3,5-二羥苯基)蒽別名:分子式:C26H18O4
早期B淋巴細(xì)胞因子1抗體3',5'-Anhydrothymidine中文名:3',5'-脫水胸苷別名:分子式:C10H12N2O4
表皮生長(zhǎng)因子受體抗體Artesunate中文名:青蒿琥酯別名:分子式:C19H28O8
β淀粉樣蛋白前體蛋白結(jié)合蛋白2抗體 Listeria ivanovii種屬:Listeria ivanovii
提供形式:凍干物
安全等級(jí):2
模式菌株:no
應(yīng)用領(lǐng)域:研究;分析檢測(cè)。研究、質(zhì)量控制,《GB 4789.30-2010單核細(xì)胞增生李斯特氏菌檢驗(yàn)》陽(yáng)性對(duì)照菌株。
培養(yǎng)方法
培養(yǎng)基:腦心瓊脂:心提取物 5.0g,腦提取物 12.5g,月示 胨10.0g,葡萄糖 2.0g,NaCl 5.0g,Na2HPO4 2.5g,瓊脂15.0g,蒸餾水1.0L,pH7.4。
生長(zhǎng)條件:37℃,兼性厭氧。
生長(zhǎng)特性G+短棒狀小桿菌,有動(dòng)力,過(guò)氧化氫酶陽(yáng)性,血平板上產(chǎn)生β-溶血;鹽還原實(shí)驗(yàn)陰性,尿素酶試驗(yàn)陰性,不發(fā)酵鼠李糖、甘露醇;甲基紅反應(yīng)陽(yáng)性,伏-普實(shí)驗(yàn)陽(yáng)性,發(fā)酵葡萄糖、麥芽糖、七葉苷、木糖;三糖鐵試驗(yàn)產(chǎn)酸、不產(chǎn)硫化氫;兼性厭氧,最適pH7.4~7.6。
存儲(chǔ)條件:2-8℃;-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法伊氏李斯特氏菌