抗體制備過程:
1.材料與試劑
a.提取的動物 Ig
b.弗氏完全佐劑和弗氏不完全佐劑
c.青霉素和鏈霉素
d.實驗動物 兔
e.其它材料及試劑
2、選擇實驗活體。
3、產(chǎn)品僅用于科研進行動物免疫實驗。
4、試取血樣進行測試,查看免疫效果。
5、如果免疫成功,殺死實驗活體,采集全部血清。
6、純化出抗體。
7、鑒定抗體。胎牛血清(無菌采制)
參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品應用 WB=1:100-500 ELISA=1:500-1000 IP=1:20-100 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 IF=1:100-500
(石蠟切片需做抗原修復)
英文名稱 Anti-alpha Adducin
中文名稱 內(nèi)收蛋白a1抗體
別 名 ADD 1; ADD A; ADD1; ADD1 protein; ADDA; ADDA_HUMAN; Adducin 1 (alpha); Adducin 1 alpha; Alpha adducin; Alpha-adducin; Erythrocyte adducin alpha subunit; Erythrocyte adducin subunit alpha; MGC3339; MGC44427; OTTHUMP00000151163; OTTHUMP00000151164; OTTHUMP00000151165; OTTHUMP00000218664; OTTHUMP00000218665
濃 度 1mg/1ml
規(guī) 格 0.2ml/200μg
抗體來源 Rabbit
克隆類型 polyclonal
交叉反應 Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Rabbit
產(chǎn)品類型 一抗
研究領域 信號轉導 激酶和磷酸酶 細胞骨架
蛋白分子量 predicted molecular weight: 81kDa
性 狀 Lyophilized or Liquid
免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human alpha Adducin
亞 型 IgG
純化方法 affinity purified by Protein A
儲 存 液 0.01M PBS, pH 7.4 with 10 mg/ml BSA and 0.1% Sodium azide
抗體的制備過程:
1. 免疫原的制備
普通的大分子蛋白,通過分子克隆構建載體并在大腸桿菌中進行誘導表達獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為免疫原。
小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯(lián)載體對該分子進行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,常見偶聯(lián)載體如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫動物
常用于制備抗血清的動物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等,大量生產(chǎn)時需要用到狗、綿羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集
一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動脈采血,家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血,家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定
得到的抗血清需要進一步的純化,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進行層析,具有高效,特異性強,純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對分子的質量、純度以及特異性。
5. 免疫血清的保存
建議將抗體分裝后進行保存。抗體一般比較穩(wěn)定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價,而真空干燥保存時間可以更久。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑。
抗體分子標記技術:
(一)原理
當應用化學氧化法時(NaI)遇強氧化劑,離子被氧化為分子,所生成的自由分子可與某些基團進行鹵化反應。蛋白質分子可進行鹵化反應的基團主要為酪氨酸殘基,某些組氨酸殘基也可能進行化。在應用胺T( Chloramine T)法的實驗中,所用的氧化劑(1,3,4,6- tetrachloro-3a,6adipheny l-glucoluril)強揮發(fā)性的有機溶劑中。該溶劑加入試管后,先讓其揮發(fā)(即讓氧化劑將試管包被),然后把Na125I和蛋白質液加入包被好的試管中,反應完成即將混合液移入他管終止反應。
(二)準備
1.試劑
經(jīng)親和層析純化的多克隆抗體或單克隆抗體;0.5mol/L磷酸鈉緩沖液,pH7.5;無載體的Na125I3.7GBq/ml(100mCi/ml)的NaOH液;100g/L三醋酸;70%乙醇;新鮮制備的含2mg/m1絡胺T的0.5mol/L磷酸鈉緩沖液(pH7.5);胺T反應終止緩沖液;
2.儀器
凝膠過濾柱;¥-記數(shù)器;玻璃纖維濾。
(三)操作要點
1.產(chǎn)品僅用于科研用胺T法進行化,也可在大約pH7.0的緩沖液中進行;
2.如果氧化反應損傷蛋白質,可將抗體與異硫氰酸熒光素(FITC)偶聯(lián))胺T量減少到0.02mg/m,并將偏重亞硫酸液的濃度降到0.024mg/ml;
3. Iodogen-包被的試管可在干燥器中,于室溫下保存多年;
4.1251標記的抗體,在制備后六周內(nèi)均可使用(1251的半衰期為59.6天);
5.要注意保證所用的Na1251是新鮮的,陳舊制劑的比活性低;
6.酪氨酸的碘化偶爾會對抗原的抗體結合位點有干擾,因此降低其結合能力,但這種情況很少見。
下列是內(nèi)收蛋白a1抗體 的相關熱銷產(chǎn)品:
N-油酰-D-赤-鞘 質量規(guī)格:美國進口純度:≥98%
D-赤-鞘C-20 質量規(guī)格:美國進口純度:≥97%
L-蘇型-鞘C-18 質量規(guī)格:美國進口純度:≥97%
C16 神經(jīng)酰(N-十六酰鞘,D-赤) 質量規(guī)格:美國進口純度:≥95%
L-赤-鞘(合成物) 質量規(guī)格:美國進口純度:≥99%
疊-赤-鞘 質量規(guī)格:美國進口純度:≥97%
DL-赤-二氫鞘 質量規(guī)格:美國進口純度:≥97%
D-赤-二氫-D-鞘-1-鹽 質量規(guī)格:美國進口純度:97%
籠形D-赤-鞘-1-鹽 質量規(guī)格:美國進口純度:≥98%
2-疊-1-三基-D-赤-鞘 質量規(guī)格:美國進口純度:≥97%
D-赤-N,N-二基鞘 質量規(guī)格:美國進口純度:97%
4-去氧基奧美拉唑物 質量規(guī)格:美國進口純度:≥98%
奧美拉唑-d3 質量規(guī)格:美國進口純度:≥98%
奧美拉唑二鹽 質量規(guī)格:美國進口純度:≥98%
奧美拉唑砜 質量規(guī)格:美國進口純度:≥98%
奧美拉唑N-氧物 質量規(guī)格:美國進口純度:≥97%
蓬亂蛋白1抗體Fluoronaphthalene中文名:別名:1-氟萘; 度洛西汀雜質G分子式:C10H7F
DDX58抗體1-Naphthol中文名:別名:分子式:C10H8O
肌萎縮Dystrobrevin β蛋白抗體3-Methylamino-1-(2-thienyl)-1-propanol中文名:別名:分子式:C8H13NOS
轉錄調節(jié)因子DACH2抗體tert-Butyl4'-(bromomethyl)biphenyl-2-carboxylate中文名:別名:分子式:C18H19BrO2
雙特異性酪氨酸磷酸化調節(jié)激酶3抗體N-[2-Isopropylthiazol-4-ylmethyl(methyl)carbamoyl]-L-valine中文名:別名:MTV-III分子式:C14H23N3O3S
內(nèi)收蛋白a1抗體 Hyphomonasjohnsonii種屬:Hyphomonasjohnsonii
分離基物:淤泥
安全等級:1
模式菌株:yes
應用領域:模式菌株:
培養(yǎng)方法
培養(yǎng)基:102
生長條件:26℃Hyphomonasjohnsonii