抗體的制備過(guò)程:
1. 免疫原的制備
普通的大分子蛋白,產(chǎn)品僅用于科研通過(guò)分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進(jìn)行誘導(dǎo)表達(dá)獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為免疫原。
小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯(lián)載體對(duì)該分子進(jìn)行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,常見(jiàn)偶聯(lián)載體如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫動(dòng)物
常用于制備抗血清的動(dòng)物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等,大量生產(chǎn)時(shí)需要用到狗、綿羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集
一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動(dòng)脈采血,家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血,家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定
得到的抗血清需要進(jìn)一步的純化,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進(jìn)行層析,具有高效,特異性強(qiáng),純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對(duì)分子的質(zhì)量、純度以及特異性。
5. 免疫血清的保存
建議將抗體分裝后進(jìn)行保存??贵w一般比較穩(wěn)定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會(huì)影響效價(jià),而真空干燥保存時(shí)間可以更久。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑。
參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品應(yīng)用 WB=1:100-500 ELISA=1:500-1000 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 ICC=1:100-500 IF=1:100-500
(石蠟切片需做抗原修復(fù))
英文名稱(chēng) Anti-Argonaute 3/eIF2C3
中文名稱(chēng) 真核翻譯起始因子2C3抗體
別 名 Argonaute 3/eIF2C 3; 5730550L01Rik; Ago 3; Ago3; AGO3_HUMAN; argonaute 3; Argonaute3; eIF 2C 3; eIF-2C 3; eIF2C 3; Eif2c3; eIF2C3; EIF2C3 protein; Eukaryotic translation initiation factor 2C 3; Eukaryotic translation initiation factor 2C3; FLJ12765; hAgo3; MGC86946; Protein argonaute-3.
濃 度 1mg/1ml
規(guī) 格 0.2ml/200μg
抗體來(lái)源 Rabbit
克隆類(lèi)型 polyclonal
交叉反應(yīng) Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit,
產(chǎn)品類(lèi)型 一抗
研究領(lǐng)域 細(xì)胞生物 表觀遺傳學(xué)
蛋白分子量 predicted molecular weight: 97kDa
性 狀 Lyophilized or Liquid
免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human Argonaute 3/eIF2C3
亞 型 IgG
純化方法 affinity purified by Protein A
儲(chǔ) 存 液 Preservative: 15mM Sodium Azide, Constituents: 1% BSA, 0.01M PBS, pH 7.4
抗體分子標(biāo)記技術(shù):
(一)原理
產(chǎn)品僅用于科研當(dāng)應(yīng)用化學(xué)氧化法時(shí)(NaI)遇強(qiáng)氧化劑,離子被氧化為分子,所生成的自由分子可與某些基團(tuán)進(jìn)行鹵化反應(yīng)。蛋白質(zhì)分子可進(jìn)行鹵化反應(yīng)的基團(tuán)主要為酪氨酸殘基,某些組氨酸殘基也可能進(jìn)行化。在應(yīng)用胺T( Chloramine T)法的實(shí)驗(yàn)中,所用的氧化劑(1,3,4,6- tetrachloro-3a,6adipheny l-glucoluril)強(qiáng)揮發(fā)性的有機(jī)溶劑中。該溶劑加入試管后,先讓其揮發(fā)(即讓氧化劑將試管包被),然后把Na125I和蛋白質(zhì)液加入包被好的試管中,反應(yīng)完成即將混合液移入他管終止反應(yīng)。
(二)準(zhǔn)備
1.試劑
經(jīng)親和層析純化的多克隆抗體或單克隆抗體;0.5mol/L磷酸鈉緩沖液,pH7.5;無(wú)載體的Na125I3.7GBq/ml(100mCi/ml)的NaOH液;100g/L三醋酸;70%乙醇;新鮮制備的含2mg/m1絡(luò)胺T的0.5mol/L磷酸鈉緩沖液(pH7.5);胺T反應(yīng)終止緩沖液;
2.儀器
凝膠過(guò)濾柱;¥-記數(shù)器;玻璃纖維濾。
(三)操作要點(diǎn)
1.用胺T法進(jìn)行化,也可在大約pH7.0的緩沖液中進(jìn)行;
2.如果氧化反應(yīng)損傷蛋白質(zhì),可將抗體與異硫氰酸熒光素(FITC)偶聯(lián))胺T量減少到0.02mg/m,并將偏重亞硫酸液的濃度降到0.024mg/ml;
3. Iodogen-包被的試管可在干燥器中,于室溫下保存多年;
4.1251標(biāo)記的抗體,在制備后六周內(nèi)均可使用(1251的半衰期為59.6天);
5.要注意保證所用的Na1251是新鮮的,陳舊制劑的比活性低;
6.酪氨酸的碘化偶爾會(huì)對(duì)抗原的抗體結(jié)合位點(diǎn)有干擾,因此降低其結(jié)合能力,但這種情況很少見(jiàn)。
抗體制備過(guò)程:
1.材料與試劑
a.提取的動(dòng)物 Ig
b.弗氏完全佐劑和弗氏不完全佐劑
c.青霉素和鏈霉素
d.實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 兔
e.其它材料及試劑
2、選擇實(shí)驗(yàn)活體。
3、進(jìn)行動(dòng)物免疫實(shí)驗(yàn)。
4、試取血樣進(jìn)行測(cè)試,查看免疫效果。
5、如果免疫成功,殺死實(shí)驗(yàn)活體,采集全部血清。
6、純化出抗體。
7、鑒定抗體。胎牛血清(無(wú)菌采制)
下列是真核翻譯起始因子2C3抗體 的相關(guān)熱銷(xiāo)產(chǎn)品:
嗪N,N雙(2... R(+)Aminoglutethimide LTartrate Salt 質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口非酶RNA清除劑2.0
3嗎啉基 2Hydroxyflutamide 質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口非酶多糖清除劑(DNA專(zhuān)用)
3嗎啉基(細(xì)... Flutamided7 質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口固相內(nèi)毒素清除劑(100g)
膽固 (常規(guī)) 4Hydroperoxy Cyclophosphamided4 質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口固相內(nèi)毒素清除劑(500g)
膽固 (超純級(jí)) Trimethoprim lactate salt 質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口內(nèi)毒素清除試劑盒
膽固 (細(xì)胞培養(yǎng)級(jí)) Sivelestat 質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口內(nèi)毒素清除專(zhuān)用親和介質(zhì)(5 mL)
3[3(膽基基... Sivelestat sodium salt 質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口內(nèi)毒素清除專(zhuān)用親和介質(zhì)(50 mL)
3[3(膽基基... 2Hydroxy Nevirapine 質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口凝膠法內(nèi)毒素半定量試劑盒
N,N雙(2羥基)... 3Hydroxy Nevirapine 質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口細(xì)菌內(nèi)毒素標(biāo)準(zhǔn)品(15 EU/支)
茶7 4Nitroso Sulfamethoxazole 質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口液相內(nèi)毒素清除劑(100次)
N基D亮 Sulfamethoxazole Hydroxylamine 質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口液相內(nèi)毒素清除劑(500次)
N亞 4Nitro Sulfamethoxazole 質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口終點(diǎn)顯色法內(nèi)毒素定量試劑盒
N羰基基... NAcetyl Sulfamethoxazole 質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口柱式腐殖清除劑(100次)
6基 Sulfamethoxazole βDGlucuronide 質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口柱式腐殖清除劑(30次)
NDL Cefpirome 質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口柱式內(nèi)毒素清除劑
2,4二 Amisulprided5 質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口DNA提取相關(guān)產(chǎn)品
放線菌素 C Meropenem with sodium carbonate 質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口硅膠膜DNA離心吸附柱(大提)
1號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框138抗體Ganoderic acid A中文名:靈芝酸A別名:分子式:C30H44O7
乳腺癌易感基因2相互作用蛋白抗體Celastrol中文名:雷公藤紅素別名:南蛇藤素分子式:C29H38O4
盤(pán)狀結(jié)構(gòu)域受體蛋白2抗體Cycloastragenol中文名:環(huán)黃芪醇別名:分子式:C30H50O5
細(xì)胞質(zhì)連接蛋白1抗體Adiantulupanone中文名:別名:分子式:C29H48O
膜糖蛋白CD200抗體Friedelin 3,4-lactone中文名:別名:分子式:C30H50O2
真核翻譯起始因子2C3抗體 Methylobacteriumplatani種屬:Methylobacteriumplatani
分離基物:分離源:懸鈴木葉側(cè)柏樹(shù),高麗大學(xué),首爾,韓國(guó)[7195]。
安全等級(jí):1
模式菌株:no
培養(yǎng)方法
培養(yǎng)基:108
生長(zhǎng)條件:30℃Methylobacteriumplatani