抗體反應特點:
1.高度特異性,特異性是抗原抗體反應的最主要特征,特定抗原決定簇只與特定抗體結合;
2.產品僅用于科研可逆性:抗原與抗體結合形成抗原抗體復合物的過程是一種動態(tài)平衡, 其反應式為:Ag+AbAg·Ab;
3.適當濃度和比例;
4.敏感性:在測定血清中某一物質的含量時,化學比色法的敏感度為mg/ml水平,酶反應測定法的敏感度約為5~10μg/ml,免疫測定中凝膠擴散法的敏感度與酶反應法相仿。
自噬相關蛋白4D抗體 別 名 APG4 D; APG4D; ATG4 autophagy related 4 homolog D; Atg4dl; AUT like 4 cysteine endopeptidase; AUTL4; Autophagin 4; Autophagy related cysteine endopeptidase 4; Autophagy related protein 4 homolog D; Cysteine protease ATG4D.
濃 度 1mg/1ml
規(guī) 格 0.2ml/200μg
抗體來源 Rabbit
克隆類型 polyclonal
交叉反應 Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow
產品類型 一抗
英文名稱 Anti-ATG4D
中文名稱 自噬相關蛋白4D抗體
研究領域 腫瘤 免疫學 細胞凋亡
蛋白分子量 predicted molecular weight: 52kDa
性 狀 Lyophilized or Liquid
免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human ATG4D
亞 型 IgG
純化方法 affinity purified by Protein A
儲 存 液 0.01M PBS, pH 7.4 with 10 mg/ml BSA and 0.1% Sodium azide
產品應用 WB=1:100-500 ELISA=1:500-1000 IP=1:20-100 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 IF=1:100-500
(石蠟切片需做抗原修復)
抗體反應的因素:
1.電解質 :抗原抗體特異結合后,膠體粒便可發(fā)生脫水作用,此時易受電解質影響,如有適當濃度的電解質存在就會使它們失去部分負電荷而相互凝聚,于是出現明顯的凝集或沉淀現象。
2.酸堿度:合適的pH為6-8。
3.溫度:37℃通常是抗原體反應最適溫度。
含試劑:
1、一抗(應用:IHC-P=1:400-800 IHC-F=1:400-800 )
2、無色試劑:內源性過氧化物酶阻斷劑
3、試劑A:封閉用正常山羊血清工作液
4、試劑B:生物素標記二抗工作液:生物素標記羊抗兔IgG
5、試劑C:辣根酶標記鏈酶卵白素工作液
6、顯色液D液 (棕色) 1ml
7、顯色液E液(白色)20ml
實驗步驟:
1、石蠟切片,常規(guī)脫蠟至水
2、蒸餾水沖洗,pbs 浸泡5 分鐘(如需采用抗原修復,在此步驟后進行)。
3、3%雙氧水去離子水(無色液體)孵育15-20 分鐘,以消除內源性過氧物酶活性。
4、滴加試劑A(藍色液體)室溫孵育15-20 分鐘,傾去,勿洗。
5、滴加適當比例稀釋的一抗,37℃孵育2-3 小時或4℃過夜。
6、PBS 沖洗,3 分鐘3 次。
7、滴加試劑B(黃色液體),室溫或37℃孵育15-20 分鐘。
8、PBS 沖洗,3 分鐘3 次。
9、滴加試劑C(橙色液體),室溫或37℃孵育15-20 分鐘。
10、PBS 沖洗,3 分鐘3 次。
11、顯色劑顯色(DAB 或AEC)
12、自來水充分沖洗。
13、產品僅用于科研如果需要,可進行復染,脫水,透明。
14、選擇適當的封片劑封片。
抗體的鑒定:
1)抗體的效價鑒定:不管是用于診斷還是用于治療,制備抗體的目的都是要求較高效價。不同的抗原制備的抗體,要求的效價不一。鑒定效價的方法很多,包括有試管凝集反應,瓊脂擴散試驗,酶聯免疫吸附試驗等。常用的抗原所制備的抗體一般都有約成的鑒定效價的方法,以資比較。如制備抗抗體的效價,一般就采用瓊脂擴散試驗來鑒定。
2)抗體的特異性鑒定:抗體的特異性是指與相應抗原或近似抗原物質的識別能力??贵w的特異性高,它的識別能力就強。衡量特異性通常以交叉反應率來表示。交叉反應率可用競爭抑制試驗測定。以不同濃度抗原和近似抗原分別做競爭抑制曲線,計算各自的結合率,求出各自在IC50時的濃度,并按公式計算交叉反應率。
如果所用抗原濃度IC50濃度為pg/管,而一些近似抗原物質的IC50濃度幾乎是無窮大時,表示這一抗血清與其他抗原物質的交叉反應率近似為0,即該血清的特異性較好。
3)抗體親和力:是指抗體和抗原結合的牢固程度。親和力的高低是由抗原分子的大小,抗體分子的結合位點與抗原決定簇之間立體構型的合適度決定的。有助于維持抗原抗體復合物穩(wěn)定的分子間力有氫鍵,疏水鍵,側鏈相反電荷基因的庫侖力,范德華力和空間斥力。親和力常以親和常數K表示,K的單位是L/mol。抗體親和力的測定對抗體的篩選,確定抗體的用途,驗證抗體的均一性等均有重要意義。
菝葜皂苷元 10,12Heptacosadiynoic Acid 質量規(guī)格:>98.0%(GC)WRCH1一抗
人參皂苷F3 2,4Heptadecadiynoic Acid 質量規(guī)格:>95.0%(T)絲/蘇激酶家族成員的基因WNK3一抗
人參皂苷F5 2,4Heneicosadiynoic Acid 質量規(guī)格:>95.0%(T)信號通路Wnt2B一抗
梣 10,12Heptadecadiynoic Acid 質量規(guī)格:>97.0%(T)WEE1蛋白一抗
白鮮 10,12Nonacosadiynoic Acid 質量規(guī)格:>97.0%(T)野生型P53誘導基因1一抗
紫菀 2,4Nonadecadiynoic Acid 質量規(guī)格:>97.0%(T)心肌缺血預處理正調節(jié)蛋白2一抗
九里香 10,12Pentacosadiynoic Acid 質量規(guī)格:>97.0%(GC)(T)化WEE1蛋白一抗
白頭翁皂苷B4 2,4Pentadecadiynoic Acid 質量規(guī)格:>97.0%(T)信號通路Wnt3a一抗
石吊蘭素草苷 10,12Tricosadiynoic Acid 質量規(guī)格:>98.0%(GC)(T)信號通路Wnt1一抗
次野鳶尾黃素 1,4Bis(trimethylsilyl),3butadiyne 質量規(guī)格:>99.0%(GC)P53應答基因蛋白5一抗
路路通 1Butynyl Iodide (stabilized with Copper chip) 質量規(guī)格:>98.0%(GC)原癌基因WIP1一抗
表木栓 3Chlorobutyne 質量規(guī)格:>98.0%(GC)賴缺陷型蛋白激酶1一抗
鴨腳樹葉 2,4Hexadiyne,6diol 質量規(guī)格:>99.0%(GC)信號傳導抑制蛋白WD重復蛋白2一抗
泛影鈉 10,12Pentacosadiynol 質量規(guī)格:>98.0%(GC)WD重復膜蛋白19一抗
阿糖胞苷 1Pentynyl Iodide 質量規(guī)格:>97.0%(GC)WD重復蛋白16一抗
油紅 O 1Iodopropyne 質量規(guī)格:>97.0%(GC)WW結構域E3泛素連接酶1一抗
山柰O蕓香糖苷 1(Trimethylsilyl)propyne 質量規(guī)格:>98.0%(GC)型肝炎X相關蛋白2一抗
細胞角蛋白14抗體Longistylin C中文名:別名:分子式:C20H22O2
神經細胞NB3特定蛋白抗體Protosappanin B中文名:原蘇木素B別名:分子式:C16H16O6
可卡因單克隆抗體Broussonin E中文名:別名:分子式:C17H20O4
2號染色體開放閱讀框72抗體2'-O-Methylbroussonin C中文名:別名:分子式:C21H26O3
細胞間粘附分子-3抗體Cannabidiolic acid中文名:別名:分子式:C22H30O4
自噬相關蛋白4D抗體 Cunninghamella│blakeleana種屬:Cunninghamella│blakeleana
提供形式:凍干物
安全等級:1
模式菌株:no
培養(yǎng)方法
培養(yǎng)基:CM0014
生長條件:28℃
存儲條件:真空冷凍干燥法短刺小克銀漢霉