抗體制備過程:
1.材料與試劑
a.提取的動物 Ig
b.弗氏完全佐劑和弗氏不完全佐劑
c.青霉素和鏈霉素
d.實驗動物 兔
e.其它材料及試劑
2、選擇實驗活體。
3、產(chǎn)品僅用于科研進行動物免疫實驗。
4、試取血樣進行測試,查看免疫效果。
5、如果免疫成功,殺死實驗活體,采集全部血清。
6、純化出抗體。
7、鑒定抗體。胎牛血清(無菌采制)
參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品應(yīng)用 WB=1:100-500 ELISA=1:500-1000 IP=1:20-100 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 IF=1:100-500
(石蠟切片需做抗原修復(fù))
英文名稱 Anti-COX7A2
中文名稱 細胞色素c氧化酶COX7A2抗體
別 名 Mitochondrion. Cytochrome c oxidase subunit 7A2, mitochondrial; COX7a related protein; Cytochrome c oxidase subunit VIIa-L; Cytochrome c oxidase subunit VIIa-liver/heart; COX7a-related protein; COX7AR; COX7RP; Cytochrome c oxidase subunit VIIa related protein, mitochondrial; Cytochrome c oxidase subunit VIIaL; Cytochrome c oxidase subunit VIIa-L; Cytochrome c oxidase subunit VIIa-related protein, mitochondrial [Precursor]; EB1; Estrogen receptor binding CpG island; SIG81; CX7A2_HUMAN.
濃 度 1mg/1ml
規(guī) 格 0.1ml/100μg 0.2ml/200μg
抗體來源 Rabbit
克隆類型 polyclonal
交叉反應(yīng) Human, Mouse, Rat, Dog, Cow, Horse, Rabbit, Sheep
產(chǎn)品類型 一抗
研究領(lǐng)域 信號轉(zhuǎn)導(dǎo) 新陳代謝 線粒體
蛋白分子量 predicted molecular weight: 6.7kDa
性 狀 Lyophilized or Liquid
免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human COX7A2
亞 型 IgG
純化方法 affinity purified by Protein A
儲 存 液 0.01M PBS, pH 7.4 with 10 mg/ml BSA and 0.1% Sodium azide
抗體的制備過程:
1. 免疫原的制備
普通的大分子蛋白,通過分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進行誘導(dǎo)表達獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為免疫原。
小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯(lián)載體對該分子進行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,常見偶聯(lián)載體如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫動物
常用于制備抗血清的動物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等,大量生產(chǎn)時需要用到狗、綿羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集
一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動脈采血,家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血,家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定
得到的抗血清需要進一步的純化,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進行層析,具有高效,特異性強,純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對分子的質(zhì)量、純度以及特異性。
5. 免疫血清的保存
建議將抗體分裝后進行保存??贵w一般比較穩(wěn)定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價,而真空干燥保存時間可以更久。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑。
抗體分子標(biāo)記技術(shù):
(一)原理
當(dāng)應(yīng)用化學(xué)氧化法時(NaI)遇強氧化劑,離子被氧化為分子,所生成的自由分子可與某些基團進行鹵化反應(yīng)。蛋白質(zhì)分子可進行鹵化反應(yīng)的基團主要為酪氨酸殘基,某些組氨酸殘基也可能進行化。在應(yīng)用胺T( Chloramine T)法的實驗中,所用的氧化劑(1,3,4,6- tetrachloro-3a,6adipheny l-glucoluril)強揮發(fā)性的有機溶劑中。該溶劑加入試管后,先讓其揮發(fā)(即讓氧化劑將試管包被),然后把Na125I和蛋白質(zhì)液加入包被好的試管中,反應(yīng)完成即將混合液移入他管終止反應(yīng)。
(二)準(zhǔn)備
1.試劑
經(jīng)親和層析純化的多克隆抗體或單克隆抗體;0.5mol/L磷酸鈉緩沖液,pH7.5;無載體的Na125I3.7GBq/ml(100mCi/ml)的NaOH液;100g/L三醋酸;70%乙醇;新鮮制備的含2mg/m1絡(luò)胺T的0.5mol/L磷酸鈉緩沖液(pH7.5);胺T反應(yīng)終止緩沖液;
2.儀器
凝膠過濾柱;¥-記數(shù)器;玻璃纖維濾。
(三)操作要點
1.產(chǎn)品僅用于科研用胺T法進行化,也可在大約pH7.0的緩沖液中進行;
2.如果氧化反應(yīng)損傷蛋白質(zhì),可將抗體與異硫氰酸熒光素(FITC)偶聯(lián))胺T量減少到0.02mg/m,并將偏重亞硫酸液的濃度降到0.024mg/ml;
3. Iodogen-包被的試管可在干燥器中,于室溫下保存多年;
4.1251標(biāo)記的抗體,在制備后六周內(nèi)均可使用(1251的半衰期為59.6天);
5.要注意保證所用的Na1251是新鮮的,陳舊制劑的比活性低;
6.酪氨酸的碘化偶爾會對抗原的抗體結(jié)合位點有干擾,因此降低其結(jié)合能力,但這種情況很少見。
下列是細胞色素c氧化酶COX7A2抗體 的相關(guān)熱銷產(chǎn)品:
(R型)人參皂苷Rh2英文名稱:Ginsenoside Rh2 (R type)保存:20℃,避光規(guī)格:HPLC≥98% 20mg/支絲/蘇蛋白激酶PIM3一抗
異香英文名稱:Isoeugenol保存:20℃,避光規(guī)格:HPLC≥98% 20mg/支組蛋白精基轉(zhuǎn)移酶5一抗
人工虎骨英文名稱:Artificial bones保存:20℃,避光規(guī)格:0.5g腫瘤錯配修復(fù)基因PMS1一抗
高麗紅參英文名稱:Korea ginseng保存:20℃,避光規(guī)格:6g泛素連接酶一抗
虎杖葉英文名稱:The leaves of Polygonum cuspidatum Sieb保存:20℃,避光規(guī)格:1g原鈣粘蛋白γA7一抗
土鱉蟲(地鱉)英文名稱:Eupolyphaga sinensis Walker (ESS)保存:20℃,避光規(guī)格:1g原鈣粘蛋白γA8一抗
蓽澄茄英文名稱:Cubeb保存:20℃,避光規(guī)格:0.25g原鈣粘蛋白γA9一抗
母香英文名稱:Clove mother保存:20℃,避光規(guī)格:1.5g原鈣粘蛋白γA11一抗
龍膽(龍膽)英文名稱:Long Dan (Long Dan)保存:20℃,避光規(guī)格:0.5原鈣粘蛋白γA12一抗
甘青青蘭英文名稱:Tangut dragonhead保存:20℃,避光規(guī)格:1g原鈣粘蛋白β12一抗
茅膏菜英文名稱:Sundew保存:20℃,避光規(guī)格:1.0g原鈣粘蛋白β3一抗
西藏棱子芹英文名稱:Tibet shuttle Qin保存:20℃,避光規(guī)格:1g原鈣粘蛋白γB1一抗
熊膽粉英文名稱:Bear bile powder保存:20℃,避光規(guī)格:0.1g原鈣粘蛋白γB2一抗
羊膽粉英文名稱:Sheep bile powder保存:20℃,避光規(guī)格:0.1g原鈣粘蛋白γB4一抗
五加皮英文名稱:Wujiapi保存:20℃,避光規(guī)格:1g原鈣粘蛋白γB6一抗
通關(guān)藤英文名稱:Marsdenia tenacissima保存:20℃,避光規(guī)格:2g原鈣粘蛋白γC3一抗
三棱英文名稱:Rhizoma sparganii保存:20℃,避光規(guī)格:1g原鈣粘蛋白γC4一抗
卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白54抗體2-Methoxyanofinic acid中文名:別名:分子式:C13H14O4
卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白61抗體17-Hydroxy-18-dehydroneogrifolin中文名:別名:分子式:C22H32O3
卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白8抗體Ethyl 4-(rhamnosyloxy)benzylcarbamate中文名:別名:分子式:C16H23NO7
細胞周期蛋白依賴性激酶CABLES1抗體5,6-Desmethylenedioxy-5-methoxyaglalactone中文名:別名:分子式:C17H16O5
細胞分裂周期相關(guān)蛋白3抗體Niazimicin中文名:別名:分子式:C16H23NO6S
細胞色素c氧化酶COX7A2抗體 Penicillium raistrickii種屬:Penicillium raistrickii
提供形式:凍干物
安全等級:1
模式菌株:no
應(yīng)用領(lǐng)域:15α羥化。
培養(yǎng)方法
培養(yǎng)基:CM0509
生長條件:28℃
存儲條件:真空冷凍干燥法瑞氏青霉