"MDA231-LM2-4175 cell line人高轉(zhuǎn)移性乳腺癌細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料：乳腺癌
細(xì)胞培養(yǎng)過程中相關(guān)問題總結(jié)：懸浮性細(xì)胞應(yīng)如何繼代處理？一般僅需持續(xù)加入新鮮培養(yǎng)基于原培養(yǎng)角瓶中，稀釋細(xì)胞濃度即可，若培養(yǎng)液太多時(shí)，可將培養(yǎng)角瓶口端稍微抬高，直到無法容納為止。分瓶時(shí)取出一部份含細(xì)胞之培養(yǎng)液至另一新的培養(yǎng)角瓶，加入新鮮培養(yǎng)基稀釋至適當(dāng)濃度，重復(fù)前述步驟即可。欲將一般動物細(xì)胞離心下來，其離心速率應(yīng)為多少轉(zhuǎn)速？欲回收動物細(xì)胞，其離心速率一般為３００xg(約１,０００rpm)，５-１０分鐘，過高之轉(zhuǎn)速，將造成細(xì)胞死亡；細(xì)胞之接種密度為何？依照細(xì)胞株基本數(shù)據(jù)上之接種密度或稀釋分盤之比例接種即可。細(xì)胞數(shù)太少或稀釋的太多亦是造成細(xì)胞無法生長之一重要原因；細(xì)胞冷凍培養(yǎng)基之成份為何？動物細(xì)胞冷凍保存時(shí)最常使用的冷凍培養(yǎng)基是含５-１０%DMSO(dimethyl sulfoxide)和９０-９５%原來細(xì)胞生長用之新鮮培養(yǎng)基均勻混合之。注意：由于DMSO稀釋時(shí)會放出大量熱能，故不可將DMSO直接加入細(xì)胞液中，必須使用前先行配制完成；DMSO之等級和無菌過濾之方式為何？冷凍保存使用之DMSO等級，必須為Tissue culture grade之DMSO，其本身即為無菌狀況，次開瓶后應(yīng)立即少量分裝于無菌試管中，保存于４°C，避免反復(fù)冷凍解凍造成DMSO之裂解而釋出有害物質(zhì)，并可減少污染之機(jī)會。若要過濾DMSO，則須使用耐DMSO之Nylon材質(zhì)濾膜；冷凍保存細(xì)胞之方法？冷凍保存方法一：冷凍管置于４°C ３０~６０分鐘→ (-２０°C ３０分鐘)→-８０°C １６~１８小時(shí)(或隔夜)→液氮槽vaporphase長期儲存。冷凍保存方法二：冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降１-３°C至–８０°C以下，再放入液氮槽vapor phase長期儲存。-２０°C不可超過１小時(shí)，以防止冰晶過大，造成細(xì)胞大量死亡，亦可跳過此步驟直接放入-８０°C冰箱中，惟存活率稍微降低一些；細(xì)胞欲冷凍保存時(shí)，細(xì)胞冷凍管內(nèi)應(yīng)有多少細(xì)胞濃度？冷凍管內(nèi)細(xì)胞數(shù)目一般為１x１０(６)cells/ml vial，融合瘤細(xì)胞則以５x１０(６)cells/ml vial為宜；應(yīng)如何避免細(xì)胞污染？細(xì)胞污染的種類可分成細(xì)菌、酵母菌、霉菌、病毒和霉?jié){菌。主要的污染原因?yàn)闊o菌操作技術(shù)不當(dāng)、操作室環(huán)境不佳、污染之血清和污染之細(xì)胞等。嚴(yán)格之無菌操作技術(shù)、清潔的環(huán)境、與品質(zhì)良好之細(xì)胞來源和培養(yǎng)基配制是減低污染之方法；如果細(xì)胞發(fā)生微生物污染時(shí)，應(yīng)如何處理？直接滅菌后丟棄之。
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣
細(xì)胞生長：貼壁
細(xì)胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
MDA231-LM2-4175 cell line人高轉(zhuǎn)移性乳腺癌細(xì)胞系
細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)中常見問題總結(jié)：１)一般客戶拿到細(xì)胞后，應(yīng)該注意什么？客戶收到細(xì)胞后先不開蓋，放在培養(yǎng)箱靜置若干小時(shí)后(看細(xì)胞密度而定)在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞生長情況，并對細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照(建議受收細(xì)胞后觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況，顯微鏡下拍細(xì)胞１００X，２００X各一張)，排除細(xì)胞本身污染的情況；收到細(xì)胞未開封，出現(xiàn)污染狀況我們負(fù)責(zé)免費(fèi)發(fā)送一株細(xì)胞。收到細(xì)胞時(shí)如無異常情況，請?jiān)陲@微鏡下觀察細(xì)胞密度，如為貼壁細(xì)胞，未超過８０%匯合度時(shí)，將培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)液吸出，留下１０ml培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)；超過８０%匯合度時(shí)，請按細(xì)胞培養(yǎng)條件傳代培養(yǎng)。如為懸浮細(xì)胞，吸出培養(yǎng)液、１０００轉(zhuǎn)/分鐘離心２分鐘，吸出上清，管底細(xì)胞用新鮮培養(yǎng)基懸浮細(xì)胞后移回培養(yǎng)瓶。細(xì)胞消化液建議使用PBS配制，慎用Hanks液配制；２)快遞細(xì)胞多久能到，是寄凍存的細(xì)胞還是復(fù)蘇好的細(xì)胞？我們采用快遞發(fā)貨，一般外地２--３天，寄細(xì)胞前請確認(rèn)當(dāng)?shù)販囟?，如果氣溫低于４度的，則采用郵寄凍存細(xì)胞；３)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基？不能。每一細(xì)胞株均有其特定使用且已適應(yīng)之細(xì)胞培養(yǎng)基，若驟然使用和原先提供之培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基，細(xì)胞大都無法立即適應(yīng)，造成細(xì)胞無法存活；４)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之血清種類？不能。血清是細(xì)胞培養(yǎng)上一個(gè)極為重要的營養(yǎng)來源，所以血清的種類和品質(zhì)對于細(xì)胞的生長會產(chǎn)生極大的影響。來自不同物種的血清，在一些物質(zhì)或分子的量或內(nèi)容物上都有所不同，血清使用錯誤常會造成細(xì)胞無法存活。
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細(xì)胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
細(xì)胞來源說明：細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
細(xì)胞生長特性：貼壁
細(xì)胞復(fù)蘇后貼壁細(xì)胞較少的問題分析：總結(jié)１：復(fù)蘇過程沒有問題，是否是從液氮拿出直接放入溫水，還有培養(yǎng)箱，二氧化碳濃度，培養(yǎng)基、PH值等環(huán)節(jié)。要么加高濃度FBS １５-２０%，看看能否幫助貼壁，當(dāng)然也需要考慮血清問題，還有確信拿來的細(xì)胞沒問題?？偨Y(jié)２：首先應(yīng)該懷疑凍存，實(shí)際上復(fù)蘇出問題的可能非常小，因?yàn)椴僮骱唵危宜腊?。１、你凍存的時(shí)候是不是消化的時(shí)間過長，這是一般人所注意不到的，即使書上也不講這個(gè)問題，太長的消化時(shí)間會讓細(xì)胞復(fù)蘇時(shí)失去貼壁能力，表現(xiàn)為先貼后死，原因是在你復(fù)蘇的時(shí)候細(xì)胞已進(jìn)入凋亡程序，不可逆轉(zhuǎn)的死亡。２、你的凍存液好不好，是什么，甘油還是DMSO，質(zhì)量非常重要，否則也會死亡。３、你的凍存液的量加的是不是太多，ATCC推薦是不超過７%，大于５%，太多也不好。４、你在凍存的時(shí)候是不是把DMSO混均勻，這個(gè)有一些影響，但不算太大。５、你的凍存是否按部就班，就是所溫度梯度是不是把握嚴(yán)格，很多人容易忘卻這個(gè)事情，因?yàn)檫@個(gè)東西流程長。６、如果你細(xì)胞污染，你是否能很快看到，我比我的導(dǎo)師能早一天看到污染。從這個(gè)角度講建議去除離心這步。７、你的細(xì)胞在凍存前是否過密。還有，不贊成孵箱污染這個(gè)概念的，所有在一個(gè)孵箱里的細(xì)胞都污染一個(gè)細(xì)菌的話，這個(gè)細(xì)菌是源于孵箱的，但這不代表孵箱污染，因?yàn)榉跸錈o論你如何處理都有大量的細(xì)菌，問題在操作。每次污染的原因都要盡可能的找，以后就不犯同樣的問題，這個(gè)很重要，不能靠猜，否則你就有可能細(xì)胞養(yǎng)絕最后換課題，這個(gè)見得太多了，別不當(dāng)會事。
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細(xì)胞形態(tài)特性：詳見細(xì)胞說明書
CRFK細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TCC-PAN2細(xì)胞、JVM3細(xì)胞、NCI.H522細(xì)胞
SK-RC-52細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SC細(xì)胞、H4IIE細(xì)胞、HT 1080.T細(xì)胞
MC3T3-E細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-RC-42細(xì)胞、LNCaP細(xì)胞、FLC7細(xì)胞
Intestinal Porcine Epithelial Cell line-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVCAR-5細(xì)胞、A-101D細(xì)胞、FCCH1018細(xì)胞
SAOS 2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：EO771細(xì)胞、SU.86細(xì)胞、Toledo細(xì)胞
TF-1a細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Karpas299細(xì)胞、KYSE-140細(xì)胞、S37細(xì)胞
H1581細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HSC-6細(xì)胞、L 132細(xì)胞、SPDC-CCL141細(xì)胞
BALB 3T3 clone A31細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MG-63細(xì)胞、PL45細(xì)胞、TM-3細(xì)胞
HEC1A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH2029細(xì)胞、GES1細(xì)胞、Bac12F5細(xì)胞
L-WRN細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LC-1細(xì)胞、NCIH1836細(xì)胞、CW-2細(xì)胞
BSC1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Granta-519細(xì)胞、SNU-119細(xì)胞、H69/P細(xì)胞
MT2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HS-294-T細(xì)胞、BIU87細(xì)胞、DMS273細(xì)胞
SP2-0-Ag14細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KNS-81細(xì)胞、Toledo細(xì)胞、MHH-CALL2細(xì)胞
MDA231-LM2-4175 cell line人高轉(zhuǎn)移性乳腺癌細(xì)胞系
L-Wnt-3A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MC3T3-E細(xì)胞、A-172細(xì)胞、RPMI-1788細(xì)胞
HCC-9724細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LN299細(xì)胞、L-6 myoblast細(xì)胞、697細(xì)胞
Z-138細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H838細(xì)胞、LNCaP-FGC細(xì)胞、D283 Med細(xì)胞
Z-138細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H838細(xì)胞、LNCaP-FGC細(xì)胞、D283 Med細(xì)胞
Hs-611-T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC-202細(xì)胞、H-1618細(xì)胞、Sol8細(xì)胞
HMEL細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Strain V細(xì)胞、HEK 293A細(xì)胞、H1184細(xì)胞
B5537SKIN細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MLTC-1細(xì)胞、HT 29細(xì)胞、OVCAR-3細(xì)胞
33604細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KMS-18細(xì)胞、H-711細(xì)胞、U118細(xì)胞
253J B-V細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MNNG/HOS Cl #5細(xì)胞、HEC-1A細(xì)胞、H838細(xì)胞
RPMI-8226細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Human Epithelioma-2細(xì)胞、CCRF-CEM細(xì)胞、Turbot Embryonic Cell line細(xì)胞
U373 MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：D-341細(xì)胞、NUGC-4細(xì)胞、H-1395細(xì)胞
MBMEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CNLMG-B5537SKIN細(xì)胞、alphaTC1 Clone 6細(xì)胞、UPCI:SCC90細(xì)胞
NCI-H1755細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BEAS2B細(xì)胞、Leukemia 1210細(xì)胞、LCLC103H細(xì)胞
S16細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MS751細(xì)胞、Hep 3B2細(xì)胞、BEL-7404細(xì)胞
CHO K1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAL 78細(xì)胞、NCIH1623細(xì)胞、NCI-H82細(xì)胞
OVMANA細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-MEL-5細(xì)胞、LIXC-002細(xì)胞、PA317細(xì)胞
Jurkat E6.1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1869細(xì)胞、H2291細(xì)胞、NCI522細(xì)胞
HCC-1438細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LN229細(xì)胞、PA I細(xì)胞、BpRcl細(xì)胞
PTK-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H2052細(xì)胞、CFPAC細(xì)胞、MuM-2B細(xì)胞
SUM-52PE細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM01232E細(xì)胞、LLC-PK1細(xì)胞、U-226AR1細(xì)胞
COLO201細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Duke University 4475細(xì)胞、BC-PAP細(xì)胞、Karpas422細(xì)胞
CAL-27細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAL-51細(xì)胞、My-La 2059細(xì)胞、NCI-747細(xì)胞
LS174T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Rat Lung-65細(xì)胞、Ra #1細(xì)胞、P3/X63/Ag8細(xì)胞
SK-RC-20細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CT 26細(xì)胞、L 1210細(xì)胞、TE 32.T細(xì)胞
HCC-1599細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：B/C3T3細(xì)胞、HBEpiC細(xì)胞、Human ErythroLeukemia細(xì)胞
NCI-H1838細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：A3細(xì)胞、Strain V細(xì)胞、B16細(xì)胞
NCI-H747細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：C 6細(xì)胞、BIC-1細(xì)胞、MDAMB134VI細(xì)胞
Hs 695T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3/NS1/1-Ag4-1細(xì)胞、L-6細(xì)胞、Hos TE-85細(xì)胞
CHP 212細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC-1806細(xì)胞、H-1155細(xì)胞、KMS-11細(xì)胞
rRMECs細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NEC-8細(xì)胞、751-NA細(xì)胞、U 937細(xì)胞
NCI-SNU-423細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CNE2細(xì)胞、JKT-1細(xì)胞、PMVEC細(xì)胞
PC2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Nb2細(xì)胞、HOP92細(xì)胞、HLEB3細(xì)胞
HCC-1954細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CMECs細(xì)胞、P3-X63Ag8細(xì)胞、EST50細(xì)胞
NCIH1092細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RCC-JF細(xì)胞、D283細(xì)胞、SK-OV-433細(xì)胞
RS4-11細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1688細(xì)胞、H-292細(xì)胞、C-643細(xì)胞
KYSE450細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NALM 6細(xì)胞、HEK293FT細(xì)胞、KMBC細(xì)胞
3T3 L1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NL20SV細(xì)胞、IEC6細(xì)胞、NALM 6細(xì)胞
TK+/- (clone 3.7.2C)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H2106細(xì)胞、130 T細(xì)胞、PLC-8024細(xì)胞
PAMC82細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：mousepodocyte細(xì)胞、RIN14B細(xì)胞、Homo sapiens No. 578, tumor cells細(xì)胞
TR-146細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-231細(xì)胞、University of Michigan-Urothelial Carcinoma-3細(xì)胞、CHO細(xì)胞
NCI-H-82細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BMDC細(xì)胞、HOS-TE85細(xì)胞、M619細(xì)胞
Dx5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-UMC-11細(xì)胞、Saos2細(xì)胞、GT39細(xì)胞
CAL 120細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CV-1.K細(xì)胞、D562細(xì)胞、MRC9細(xì)胞
MDA231-LM2-4175 cell line人高轉(zhuǎn)移性乳腺癌細(xì)胞系
EC9706細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：EA hy 926細(xì)胞、COR-L 105細(xì)胞、McA-RH 8994細(xì)胞
BHK 21細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NBL-1細(xì)胞、LLC細(xì)胞、HUVEC細(xì)胞
A375S2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1341細(xì)胞、PANC 1005細(xì)胞、PNT1-a細(xì)胞
TC7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KMBC細(xì)胞、LC2/Ad細(xì)胞、A-72細(xì)胞
NEC8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：EB3 [Human Burkitt lymphoma]細(xì)胞、PANC1005細(xì)胞、RL95-2細(xì)胞
CCC-HSF-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：McArdle RH-7777細(xì)胞、SW 1463細(xì)胞、CCD1095Sk細(xì)胞
MC3T3-E細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-RC-42細(xì)胞、Normal fibroblast-10細(xì)胞、PC-3細(xì)胞
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