"L-363細(xì)胞:人多發(fā)性骨髓瘤細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料:詳見相關(guān)文獻(xiàn)介紹
細(xì)胞形態(tài):淋巴母細(xì)胞樣
細(xì)胞生長:懸浮
細(xì)胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細(xì)胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
細(xì)胞來源說明:細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
細(xì)胞生長特性:貼壁或懸浮,詳見細(xì)胞說明書部分
培養(yǎng)細(xì)胞的凍存及復(fù)蘇:細(xì)胞低溫凍存是培養(yǎng)室常規(guī)工作和通用技術(shù)。細(xì)胞凍存在-196℃液氮中,儲存時間幾乎是無限的。細(xì)胞凍存及復(fù)蘇的原則是慢凍快融。【凍存細(xì)胞】1)選對數(shù)增生期細(xì)胞(證明無支原體污染),在凍存前1d換液;2)按常規(guī)方法把培養(yǎng)細(xì)胞制備成懸液,計數(shù),使細(xì)胞密度達(dá)5×10/ml左右密度,離心,去上清;3)加入配制好的凍存液(培養(yǎng)液6.8ml,小牛血清2ml,DMSO 1ml,5.6%NaHCO3 0.1ml),按與去上清相同的量一滴一滴加入離心管中,然后用吸管輕輕吹打令細(xì)胞重懸。凍存細(xì)胞時培養(yǎng)液中加入保護(hù)劑10%二甲基亞砜(DMSO)或甘油,可使冰點降低,使細(xì)胞內(nèi)水分在凍結(jié)前透出細(xì)胞外;4)分裝于無菌凍存管中,每管加1.5m懸液;5)旋好凍存管并仔細(xì)檢查,一定要蓋緊,做好標(biāo)記;6)凍存:在特殊的儀器或簡易的液氮容器中,按-1℃/min的速度,在30~40min時間內(nèi),下降到液氮表面,再停30min后,直接投入液氮中。要適當(dāng)掌握下降冷凍速度,過快能影響細(xì)胞內(nèi)水分透出,太慢則促進(jìn)冰晶形成。操作時應(yīng)戴防護(hù)眼鏡和手套,以免液氮凍傷?!緩?fù)蘇細(xì)胞】1)從罐中取出凍存管;2)迅速放入36℃~37℃水浴,不時搖動,使其急速融化,30~60s內(nèi)完成;3)凍存管用70%酒精擦拭消毒后,打開蓋子,用吸管將細(xì)胞懸液注入離心管中,再滴加10ml培養(yǎng)液;4)低速離心(500~1000r/min) 5min,去上清后再用培養(yǎng)液洗一次;5)用培養(yǎng)液適當(dāng)稀釋后,裝入培養(yǎng)瓶37℃培養(yǎng),次日更換一次培養(yǎng)液后,繼續(xù)培養(yǎng)。以后仍按常規(guī)進(jìn)行培養(yǎng)。凍存細(xì)胞數(shù)量要充分,密度應(yīng)達(dá)到10/ml,在融后稀釋20倍時,仍能保持5×10/ml數(shù)量。
有一些細(xì)胞是數(shù)量多一點比較好生長,生長狀態(tài)也比較好。這種一般是屬于生長速度慢的細(xì)胞。譬如內(nèi)皮細(xì)胞。而有一些是細(xì)胞是數(shù)量少一點細(xì)胞狀態(tài)會生長的比較好,譬如巨噬細(xì)胞和某些腫瘤細(xì)胞。尤其是巨噬細(xì)胞,生長速度非常得快,貼壁速度很快,所以傳代時就應(yīng)該留很少量的細(xì)胞,這樣細(xì)胞狀態(tài)會比較好。并且巨噬細(xì)胞比較喜歡扎堆生長,而堆與堆之間是有空間的。如果長成相連在一起的一滿片的時候,細(xì)胞形態(tài)基本上就會差了,老化的會比較多,對后期實驗結(jié)果是不好的。所以在養(yǎng)細(xì)胞的時候應(yīng)該摸索該細(xì)胞喜歡的生長空間密度問題。這個其實是有一個方法可以改善的。對于貼壁細(xì)胞,如果細(xì)胞形態(tài)不好,(或者細(xì)胞形態(tài)不清晰,表面似有異物等)可以在傳代的時候進(jìn)行如下操作:首先,倒掉舊的培養(yǎng)基,加入3ml新的培養(yǎng)基(有無血清的都可)洗滌一次,用滴管吸走,然后再加入3ml的培養(yǎng)基,進(jìn)行預(yù)吹打,控制吹打力度,輕輕地大概沿著瓶底過一遍,然后吸走。這時侯再開始正式的消化、吹打。(巨噬細(xì)胞建議只吹打,不消化)其次,把吹打下來的細(xì)胞懸液加入到新的培養(yǎng)瓶內(nèi),培養(yǎng)瓶事先加入培養(yǎng)基,放入培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng),按時間點觀察細(xì)胞貼壁情況。10分鐘觀察一次,20分鐘,30分鐘觀察一次。選擇一個時間點,已經(jīng)有部分細(xì)胞貼壁的情況下,重新置于潔凈臺,底面朝上迅速倒出其中的培養(yǎng)基,加入3ml新培養(yǎng)基再輕輕洗一次。然后加入完全培養(yǎng)基培養(yǎng)。后續(xù)觀察細(xì)胞生長情況以及形態(tài)。通常稱之為“二傳”。如果一次效果還不理想,可重復(fù)多次。直到找到細(xì)胞上乘形態(tài)。其中要注意,結(jié)合細(xì)胞喜歡的生長情況。喜歡多一點數(shù)量長得好的細(xì)胞你就等貼壁細(xì)胞比較多點的時候再傳。反之亦然。
細(xì)胞培養(yǎng)相關(guān)問題總結(jié):冷凍管應(yīng)如何解凍?取出冷凍管后,須立即放入37°C水槽中快速解凍,輕搖冷凍管使其在1分鐘內(nèi)全部融化,并注意水面不可超過冷凍管蓋沿,否則易發(fā)生污染情形。另冷凍管由液氮桶中取出解凍時,必須注意安全,預(yù)防冷凍管之爆裂;細(xì)胞冷凍管解凍培養(yǎng)時,是否應(yīng)馬上去除DMSO?除少數(shù)特別注明對DMSO敏感之細(xì)胞外,絕大部分細(xì)胞株(包括懸浮性細(xì)胞),在解凍之后,應(yīng)直接放入含有10-15ml新鮮培養(yǎng)基之培養(yǎng)角瓶中,待隔天再置換新鮮培養(yǎng)基以去除DMSO 即可,如此可避免大部分解凍后細(xì)胞無法生長或貼附之問題;可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基?不能。每一細(xì)胞株均有其特定使用且已適應(yīng)之細(xì)胞培養(yǎng)基,若驟然使用和原先提供之培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基,細(xì)胞大都無法立即適應(yīng),造成細(xì)胞無法存活;可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之血清種類?不能。血清是細(xì)胞培養(yǎng)上一個極為重要的營養(yǎng)來源,所以血清的種類和品質(zhì)對于細(xì)胞的生長會產(chǎn)生極大的影響。來自不同物種的血清,在一些物質(zhì)或分子的量或內(nèi)容物上都有所不同,血清使用錯誤常會造成細(xì)胞無法存活;培養(yǎng)細(xì)胞時應(yīng)使用5%或10%CO2?或根本沒有影響?一般培養(yǎng)基中大都使用HCO3-/CO32-/H+作為pH的緩沖系統(tǒng),而培養(yǎng)基中NaHCO3的含量將決定細(xì)胞培養(yǎng)時應(yīng)使用的CO2濃度。當(dāng)培養(yǎng)基中NaHCO3含量為每公升3.7g時,細(xì)胞培養(yǎng)時應(yīng)使用10%CO2;當(dāng)培養(yǎng)基中NaHCO3為每公升1.5g時,則應(yīng)使用5%CO2培養(yǎng)細(xì)胞。何時須更換培養(yǎng)基?視細(xì)胞生長密度而定,或遵照細(xì)胞株基本數(shù)據(jù)上之更換時間,按時更換培養(yǎng)基即可。培養(yǎng)基中是否須添加抗生素?除于特殊篩選系統(tǒng)中外,一般正常培養(yǎng)狀態(tài)下,培養(yǎng)基中不應(yīng)添加任何抗生素。
MB157細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU-1細(xì)胞、18G3.cl 1細(xì)胞、SK-ChA-1細(xì)胞
CTSC-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HFF細(xì)胞、Nb2-11細(xì)胞、SU-DHL-5細(xì)胞
CCC-HHM-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CL40細(xì)胞、NCIH2171細(xì)胞、CCD19-Lu細(xì)胞
HSAEC1-KT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW-403細(xì)胞、Duke University 4475細(xì)胞、H-1623細(xì)胞
Colon38細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H125細(xì)胞、RC13細(xì)胞、JF305細(xì)胞
Ly18細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH28細(xì)胞、TC-1 [Mouse lung]細(xì)胞、P3.times.63 Ag8.653細(xì)胞
PC-3/M細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:184A1細(xì)胞、NCM356細(xì)胞、H1155細(xì)胞
NCIH1395細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:C2-C12細(xì)胞、MH-S細(xì)胞、BJAB-1細(xì)胞
M4e細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GBCSD細(xì)胞、JeKo 1細(xì)胞、H676B細(xì)胞
BxPC-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPMI-7666細(xì)胞、M 1細(xì)胞、H-345細(xì)胞
T_T_細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BN-CL2細(xì)胞、NCIH82細(xì)胞、LP1細(xì)胞
Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:A375SM細(xì)胞、RL-95-2細(xì)胞、IB-RS-2細(xì)胞
GM04678細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:P388細(xì)胞、L cells (TK-)細(xì)胞、GCT細(xì)胞
P30-OHK細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA468細(xì)胞、KU812-F細(xì)胞、H441細(xì)胞
H-2227細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HT1197細(xì)胞、HUT 125細(xì)胞、J.E6-1細(xì)胞
JEG-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-295R細(xì)胞、GM02131A細(xì)胞、Shadyside Hospital Pittsburgh-77細(xì)胞
Pt-K1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC0070細(xì)胞、Kasumi-6細(xì)胞、NCI-H1373細(xì)胞
NCIH1792細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HOS TE85細(xì)胞、Y3-Ag 1.2.3細(xì)胞、HCC1833細(xì)胞
HFF-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MHCC 97-L細(xì)胞、McARH7777細(xì)胞、HCC827細(xì)胞
D6P2T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HFL1細(xì)胞、SAS細(xì)胞、Hs 675.T細(xì)胞
C33A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH1770細(xì)胞、HCC2157細(xì)胞、Chinese Hamster Ovary細(xì)胞
149PT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MOLT-4細(xì)胞、NCIH2405細(xì)胞、MD Anderson-Metastatic Breast-435細(xì)胞
HELF細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BAR-T細(xì)胞、MBT-2細(xì)胞、CAL-120細(xì)胞
U87 MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:F56 [Human neoplasm]細(xì)胞、Chinese Hamster Lung細(xì)胞、NCI-H929細(xì)胞
ST細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HGF-1細(xì)胞、THPI細(xì)胞、RGM-1細(xì)胞
EJ1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUDHL2細(xì)胞、OVCA 433細(xì)胞、SW-1463細(xì)胞
Caco2BBe細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Tn-5B1-4細(xì)胞、OVCAR4細(xì)胞、LS174T細(xì)胞
SBC-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC4006細(xì)胞、NCIH716細(xì)胞、RM-1細(xì)胞
Hs 895 T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CP-70細(xì)胞、THP-1細(xì)胞、MLTC-1細(xì)胞
RPMC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RA-FLSs細(xì)胞、NeHepLxHT細(xì)胞、H2286細(xì)胞
MCF-7/ADR-RES細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PT67細(xì)胞、B16-F0細(xì)胞、MDAMB-231細(xì)胞
SB細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SU8686細(xì)胞、KG-1細(xì)胞、Tu 177細(xì)胞
HBL1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:U2-OS細(xì)胞、VSMC細(xì)胞、D324細(xì)胞
DMS153細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PL-9細(xì)胞、NCI-H1819細(xì)胞、SK-Mel1細(xì)胞
Vertebral Cancer of the Prostate細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CT26.WT細(xì)胞、JTC-39細(xì)胞、MMVECs細(xì)胞
rRMECs細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NEC-8細(xì)胞、751-NA細(xì)胞、U 937細(xì)胞
Cloudman M3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Dami細(xì)胞、Hs600T細(xì)胞、H1650細(xì)胞
MLO-Y4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HELF細(xì)胞、Hs 832(C).T細(xì)胞、Jiyoye (P-2003)細(xì)胞
RC-4B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RIN-14B細(xì)胞、MDA468細(xì)胞、MonoMac1細(xì)胞
JKT1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hi-5細(xì)胞、PC3M-1E8細(xì)胞、CAL 120細(xì)胞
High Five細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KLN-205細(xì)胞、SW-48細(xì)胞、D-341細(xì)胞
D283-MED細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MBVP細(xì)胞、CAL 78細(xì)胞、WM115-mel細(xì)胞
HT(H9)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Jurkat E6-1細(xì)胞、PLA-801C細(xì)胞、CG-4細(xì)胞
OCI/AML-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDST8細(xì)胞、293FT細(xì)胞、He La細(xì)胞
OVCAR433細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BEL/FU細(xì)胞、HBZY-1細(xì)胞、Lilly Laboratories Cell-Monkey Kidney 2細(xì)胞
HuH6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Mel526細(xì)胞、LC1細(xì)胞、Wistar Institute, Susan Hayflick細(xì)胞
L- cell細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:UMR 106細(xì)胞、32D CL3細(xì)胞、SK MEL-28細(xì)胞
IM9細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Chang Cells細(xì)胞、W256細(xì)胞、FTC133細(xì)胞
BNL.CL2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TFK-1細(xì)胞、MA-104細(xì)胞、NCIH244細(xì)胞
KNS-62細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:UMNSAH-DF-1細(xì)胞、SK-N-BE(2)細(xì)胞、MNNG/HOS細(xì)胞
AN3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Kasumi 1細(xì)胞、alpha TC1 clone 6細(xì)胞、MNNG/HOS Cl #5細(xì)胞
PLA-801C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:FHL124細(xì)胞、BTT739細(xì)胞、PC-3細(xì)胞
NCIH1568細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:THEECs細(xì)胞、118 MG細(xì)胞、RPMC細(xì)胞
Panc-3_27細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:WiDr細(xì)胞、SUIT 2細(xì)胞、PC3M-2B4細(xì)胞
H1688細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:T/G HA VSMC細(xì)胞、KLM1細(xì)胞、HEL-299細(xì)胞
V79細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDCKII-WT細(xì)胞、SW-948細(xì)胞、Tokyo Medical and Dental university 8細(xì)胞
Jiyoye (P-2003)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1299細(xì)胞、COS1細(xì)胞、HMCB細(xì)胞
CaES-17細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA453細(xì)胞、MNNGHOS細(xì)胞、H211細(xì)胞
FRO 81-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:hTERT-RPE1細(xì)胞、Ect1/E6E7細(xì)胞、IMCD3細(xì)胞
Hs-578-T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H2196細(xì)胞、OKa-C-1細(xì)胞、H-2228細(xì)胞
MH-22a細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:High-5細(xì)胞、NCI-H2286細(xì)胞、P3-NS1/1Ag 4.1細(xì)胞
MEF (CF-1)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HPDE6c7細(xì)胞、RMG-I細(xì)胞、1301細(xì)胞
SJ-Rh 30細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LLC PK1細(xì)胞、H716細(xì)胞、RKN細(xì)胞
NCI-H295細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH2141細(xì)胞、HUC-1細(xì)胞、Keio University-19-19細(xì)胞
Jurkat, Clone E6-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H2452細(xì)胞、HEYA8細(xì)胞、MC3T3E1細(xì)胞
DanG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:207細(xì)胞、TGW細(xì)胞、T2(174 x CEM.T2)細(xì)胞
SVG(P12)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BPH1細(xì)胞、NCI-SNU-886細(xì)胞、COLO320-DM細(xì)胞
HCC-2935細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:746T細(xì)胞、MOLT4細(xì)胞、253JBV細(xì)胞
KU 812F細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPMI-8226S細(xì)胞、MRC-9細(xì)胞、HCC1171細(xì)胞
SU-DHL2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCoEpiC細(xì)胞、Oka-C1細(xì)胞、TMD8細(xì)胞
SNB.19細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LLC-MK2細(xì)胞、H2195細(xì)胞、H-1404細(xì)胞
BLO 11細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:COR-L105細(xì)胞、H524細(xì)胞、SK-ES細(xì)胞
CCC-HHM-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CL40細(xì)胞、SK MEL 5細(xì)胞、HCC-1588細(xì)胞
NCIH441細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:D324細(xì)胞、VSMC細(xì)胞、NBL-3細(xì)胞
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