"M-07e細(xì)胞：人巨核細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料：詳見相關(guān)文獻(xiàn)介紹
細(xì)胞形態(tài)：淋巴母細(xì)胞樣
細(xì)胞生長：懸浮
細(xì)胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細(xì)胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
細(xì)胞來源說明：細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
細(xì)胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細(xì)胞說明書部分
細(xì)胞培養(yǎng)方面注意的幾點(diǎn)：無菌意識要強(qiáng)：實驗進(jìn)行前，超凈臺以紫外燈照射３０分鐘滅菌，以７０%ethanol擦拭無菌操作抬面，并開啟超凈工作臺風(fēng)扇運(yùn)轉(zhuǎn)數(shù)分鐘后，才開始實驗操作。每次操作只處理一株細(xì)胞株，以避免失誤混淆或細(xì)胞間污染。實驗完畢后，將實驗物品帶出工作臺，以７０%ethanol擦拭無菌操作抬面。無菌操作工作區(qū)域應(yīng)保持清潔及寬敞，必要物品，例如支架、吸管等公用物品可以暫時放置，其它個人實驗用品用完應(yīng)立即拿出。實驗用品以７０%乙醇擦拭后才帶入無菌操作臺內(nèi)。實驗操作應(yīng)在中央無菌區(qū)域，一般勿在邊緣區(qū)域操作。小心取用無菌之實驗物品，避免造成污染。勿碰觸吸管尖頭部或是容器瓶口，亦不要在打開之容器正上方操作實驗。容器打開后，以手夾住瓶蓋并握住瓶身，傾斜約４５°角取用，盡量勿將瓶蓋蓋口朝上放置桌面。選擇正確的培養(yǎng)基：不同的細(xì)胞可能培養(yǎng)基不同，甚至不同的文獻(xiàn)可能對相同的細(xì)胞培養(yǎng)基成分也是可能不同的。如我當(dāng)時培養(yǎng)神經(jīng)干細(xì)胞，有文獻(xiàn)就選用neurobase培養(yǎng)基，而我的實驗?zāi)康闹饕亲隹寡趸脱趸矫娴?，而這種培養(yǎng)基中含有抗氧化劑成分，此時，我就不得不選擇另外一種不含抗氧化劑的培養(yǎng)基。瓶裝血清一定要逐步解凍:４℃冰箱全溶后再分裝，在溶解過程中須規(guī)則搖晃均勻(小心勿造成氣泡)，使溫度與成分均一，減少沉淀的發(fā)生。勿直接由–２０℃直接至３７℃解凍，因溫度改變太大，容易造成蛋白質(zhì)凝結(jié)而發(fā)生沉淀。熱滅活是指５６℃，３０分鐘加熱已完全解凍之血清。水浴鍋升到５６℃后，將血清放入，待溫度升高到５６℃后計時，一般５分鐘左右規(guī)則搖晃均勻一次。此熱處理之目的是使血清中之補(bǔ)體成份去活化。除非必須，一般不要作此熱處理，因為會造成沉淀物之顯著增多，且會影響血清之品質(zhì)。注意更換新血清(包括不同批次)對細(xì)胞的影響。
有一些細(xì)胞是數(shù)量多一點(diǎn)比較好生長，生長狀態(tài)也比較好。這種一般是屬于生長速度慢的細(xì)胞。譬如內(nèi)皮細(xì)胞。而有一些是細(xì)胞是數(shù)量少一點(diǎn)細(xì)胞狀態(tài)會生長的比較好，譬如巨噬細(xì)胞和某些腫瘤細(xì)胞。尤其是巨噬細(xì)胞，生長速度非常得快，貼壁速度很快，所以傳代時就應(yīng)該留很少量的細(xì)胞，這樣細(xì)胞狀態(tài)會比較好。并且巨噬細(xì)胞比較喜歡扎堆生長，而堆與堆之間是有空間的。如果長成相連在一起的一滿片的時候，細(xì)胞形態(tài)基本上就會差了，老化的會比較多，對后期實驗結(jié)果是不好的。所以在養(yǎng)細(xì)胞的時候應(yīng)該摸索該細(xì)胞喜歡的生長空間密度問題。這個其實是有一個方法可以改善的。對于貼壁細(xì)胞，如果細(xì)胞形態(tài)不好，（或者細(xì)胞形態(tài)不清晰，表面似有異物等）可以在傳代的時候進(jìn)行如下操作：首先，倒掉舊的培養(yǎng)基，加入3ml新的培養(yǎng)基（有無血清的都可）洗滌一次，用滴管吸走，然后再加入3ml的培養(yǎng)基，進(jìn)行預(yù)吹打，控制吹打力度，輕輕地大概沿著瓶底過一遍，然后吸走。這時侯再開始正式的消化、吹打。（巨噬細(xì)胞建議只吹打，不消化）其次，把吹打下來的細(xì)胞懸液加入到新的培養(yǎng)瓶內(nèi)，培養(yǎng)瓶事先加入培養(yǎng)基，放入培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)，按時間點(diǎn)觀察細(xì)胞貼壁情況。10分鐘觀察一次，20分鐘，30分鐘觀察一次。選擇一個時間點(diǎn)，已經(jīng)有部分細(xì)胞貼壁的情況下，重新置于潔凈臺，底面朝上迅速倒出其中的培養(yǎng)基，加入3ml新培養(yǎng)基再輕輕洗一次。然后加入完全培養(yǎng)基培養(yǎng)。后續(xù)觀察細(xì)胞生長情況以及形態(tài)。通常稱之為“二傳”。如果一次效果還不理想，可重復(fù)多次。直到找到細(xì)胞上乘形態(tài)。其中要注意，結(jié)合細(xì)胞喜歡的生長情況。喜歡多一點(diǎn)數(shù)量長得好的細(xì)胞你就等貼壁細(xì)胞比較多點(diǎn)的時候再傳。反之亦然。
細(xì)胞傳代時消化的問題：可以這樣說，對于需要消化傳代的細(xì)胞，每一次的消化都是對這個細(xì)胞存活與否，狀態(tài)好與不好最至關(guān)重要的考驗。很多同學(xué)都遇到過這個問題，自己養(yǎng)的細(xì)胞開始的幾代長的還挺好的，可是穿過幾代之后就發(fā)現(xiàn)自己的細(xì)胞，狀態(tài)越來越差勁了。對于這個問題，可以非?？隙ǖ卣f，你的消化環(huán)節(jié)出問題了。你每一次的消化都讓細(xì)胞受到較大損傷了。所以，越長越差。在消化的過程中，你加入胰酶后，所有細(xì)胞都在被胰酶消化著，但是我們忽視了一個問題就是，細(xì)胞的生長狀態(tài)是不一樣的，每一個細(xì)胞的貼壁情況也是不一樣的，有的貼壁牢固，有的貼壁沒有那么牢固的，所以，讓所有的細(xì)胞消化同樣的時間對細(xì)胞是不公平的，他們受到了差別待遇當(dāng)然會有脾氣啊。我后來對消化的方法進(jìn)行了改良。爭取做到因材施教呵呵。我稱之為“四步消化法”。（以難消化細(xì)胞為例）；具體操作：１)首先不加胰酶，倒掉舊培養(yǎng)基加入少量新培養(yǎng)基洗１-２遍，（這是前奏，即為步，目的是將漂浮著的死細(xì)胞之類盡量洗掉。２)然后再加入少量新培養(yǎng)基直接吹打一遍，這一遍是把貼壁不牢固的細(xì)胞吹打下來。再用培養(yǎng)基洗一遍，兩次所得懸液混合傳入新瓶。即為第二步（你可以將這些傳入新瓶培養(yǎng)，以與后面胰酶消化過的細(xì)胞對比觀察看誰長的更好一點(diǎn)就知道該細(xì)胞對胰酶的敏感度了。）３)吸干凈瓶內(nèi)剩余液體，加入０.３ml左右的胰酶潤洗一遍，吸掉棄之，再加入１ml左右的胰酶消化。消化的同時置于顯微鏡下觀察，待細(xì)胞與細(xì)胞之間間隙明顯的時候立即吸掉胰酶與干凈子彈頭里備用，加入新培養(yǎng)基開始吹打，吹打２-３遍后吸取懸液于試管或新瓶暫存。用２ml左右新培養(yǎng)基洗一遍與前面的混合。（你也可以傳入新瓶培養(yǎng)，以與后面及前面的做對比。）這是第三步。４)然后把前面剛吸出來的胰酶重新加進(jìn)去瓶里繼續(xù)消化剩余的貼壁牢固的細(xì)胞。當(dāng)然你也可以用新的胰酶，如果你們那比較富裕的話，呵呵。繼續(xù)鏡下觀察，待剩余細(xì)胞間隙明顯，細(xì)胞獨(dú)立開來的時候，吸掉胰酶，加入新培養(yǎng)基吹打。懸液傳入新瓶培養(yǎng)（根據(jù)實際情況你自己把握）。這是第四步。其實還可以有第五步，對于特別難消化的細(xì)胞和對胰酶特別敏感的細(xì)胞的話，你可以繼續(xù)加第五步甚至第六步。為了細(xì)胞更好的狀態(tài)，更漂亮的樣子，沒辦法，你必須分多批多次消化，這樣才能限度地將胰酶對細(xì)胞的損傷降到最低，保證細(xì)胞的狀態(tài)能夠。當(dāng)然了，如果細(xì)胞是屬于那種很容易消化的細(xì)胞，像RAW２６４.７，僅僅第二步就搞定了。就沒必要第三步第四步了。這個是需要你在實驗中能夠自己用心去體會的。建議你接受一個新細(xì)胞時把各步消化的細(xì)胞分別培養(yǎng)起來做比較，去摸索好細(xì)胞對胰酶的要求。便于你后續(xù)實驗的開展。將細(xì)胞消化分成這幾步，除了是為了避免胰酶對細(xì)胞的損傷之外，還有一個更重要的作用就是，可以程度地把細(xì)胞吹打成單個單個的狀態(tài)，不成片不連體。
MSTO-211H細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-748細(xì)胞、Bx-PC3細(xì)胞、ECGI10細(xì)胞
H1048細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：IGROV1細(xì)胞、HT55細(xì)胞、NL20細(xì)胞
BC-019細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVCAR 8細(xì)胞、VMRC-RCZ細(xì)胞、Jurkat細(xì)胞
RD-ES細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BSC1細(xì)胞、H-810細(xì)胞、OCI-AML-4細(xì)胞
MCF10A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H647細(xì)胞、GP5d細(xì)胞、CV-1.K細(xì)胞
HCC1419細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Lymph Node Carcinoma of the prostate細(xì)胞、LC-1Sq細(xì)胞、SK-RC 52細(xì)胞
M-1 myeloid leukemia細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI H69細(xì)胞、H69/P細(xì)胞、RAT2細(xì)胞
HME1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MC 116細(xì)胞、LNCaP clone FGC細(xì)胞、NCIH1666細(xì)胞
293GP細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BT.549細(xì)胞、H-23細(xì)胞、R3/1細(xì)胞
COLO-320細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：AML-12細(xì)胞、LLCMK2細(xì)胞、SSP-25細(xì)胞
EBC1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Panc 04.03細(xì)胞、NK 10a細(xì)胞、KNS-62細(xì)胞
SNU-C2A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：AAV293細(xì)胞、SNU-354細(xì)胞、SNU-5細(xì)胞
OV 2008細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：FOXNY細(xì)胞、HFF-1細(xì)胞、NCI-H78細(xì)胞
Hs 895 T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CP-70細(xì)胞、THP-1細(xì)胞、MLTC-1細(xì)胞
CCD 19Lu細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TE 671細(xì)胞、HCC1569細(xì)胞、H2198細(xì)胞
WERI Rb-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LY細(xì)胞、SW1116細(xì)胞、U-343 MG細(xì)胞
WERI Rb-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LY細(xì)胞、SW1116細(xì)胞、U-343 MG細(xì)胞
FL 62891細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HL60細(xì)胞、NCI-SNU-216細(xì)胞、KPL-1細(xì)胞
PANC 1005細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BEP2D細(xì)胞、Psi-2-DAP細(xì)胞、JVM-3細(xì)胞
THC-8307細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LS 123細(xì)胞、SW-403細(xì)胞、Medical Research Council cell strain-9細(xì)胞
C17.2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：U 138 MG細(xì)胞、Eca109細(xì)胞、U266S細(xì)胞
CCRF-CEM C1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HIMEC細(xì)胞、FaDu細(xì)胞、HCT-GEO細(xì)胞
Scott細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GOS3細(xì)胞、SCC 4細(xì)胞、SW1116細(xì)胞
MES23.5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-SNU-1040細(xì)胞、L Wnt-3A細(xì)胞、SN12CPM6細(xì)胞
RPMI-8226S細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RCSMC細(xì)胞、C32 mel細(xì)胞、HT115細(xì)胞
NTERA-2 cl.D1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM02219細(xì)胞、HMC3細(xì)胞、B16/F1細(xì)胞
KMST6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MH7A細(xì)胞、SUM102PT細(xì)胞、NB19-RIKEN細(xì)胞
293EBNA細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM-3573細(xì)胞、A375-MEL細(xì)胞、Hs-281-T細(xì)胞
SuDHL 4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Evsa T細(xì)胞、H-1876細(xì)胞、WTRL1細(xì)胞
MOLM-14細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：C-643細(xì)胞、OCI-Ly07細(xì)胞、PANC0203細(xì)胞
CCD841CoTr細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：A-72細(xì)胞、MFM223細(xì)胞、U-343細(xì)胞
GM02131A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：B16/F10細(xì)胞、PLC-8024細(xì)胞、MDA MB 453細(xì)胞
NK-92 transfected with MFG-hIL2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：293GP細(xì)胞、KY70細(xì)胞、CHO-ori細(xì)胞
Tu177細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CMT64細(xì)胞、Mhh-Call 2細(xì)胞、HPDE細(xì)胞
NR-8383細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SU4細(xì)胞、NK92細(xì)胞、HFL 1細(xì)胞
JM-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPMI No. 1846細(xì)胞、Clone Y-1細(xì)胞、H7721細(xì)胞
IPLB-SF 21AE細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKO3細(xì)胞、Intestinal Porcine Epithelial細(xì)胞：-J2細(xì)胞、HCC-2108細(xì)胞
IOSE-Van細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：VM Cub 1細(xì)胞、Potorous tridactylus Kidney 1細(xì)胞、HMO6細(xì)胞
HCT 8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KNS42細(xì)胞、P-388D1細(xì)胞、WEHI 231細(xì)胞
MRASMC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Tohoku Hospital Pediatrics-1細(xì)胞、EC9706細(xì)胞、CCD-18Co細(xì)胞
HMrSV5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CL11細(xì)胞、NCIH1437細(xì)胞、MD Anderson-Metastatic Breast-134-VI細(xì)胞
MD Anderson-Metastatic Breast-435細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LNCaP-FGC細(xì)胞、HOC-1細(xì)胞、CMT-64細(xì)胞
MC-3T3-E1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NUGC-4細(xì)胞、Mo 59J細(xì)胞、NCI-SNU-182細(xì)胞
DV-90細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Eca-109細(xì)胞、Wayne State University-Head and Neck 13細(xì)胞、Duck embryo細(xì)胞
AHH-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Be Wo細(xì)胞、3T6-Swiss albino細(xì)胞、WEHI231細(xì)胞
H-810細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKRC-42細(xì)胞、COLO-320DM細(xì)胞、H 9細(xì)胞
NCI.H226細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEC1-B細(xì)胞、5-8F細(xì)胞、NCI H508細(xì)胞
BEL 7405細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H128細(xì)胞、D-341細(xì)胞、IOSE80UBC細(xì)胞
PG13細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MNNG-HOS細(xì)胞、MDST8細(xì)胞、FRTL-5細(xì)胞
HEK293EBNA細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OACP4 C細(xì)胞、NCIH2110細(xì)胞、3AA細(xì)胞
SNB-19細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LP1細(xì)胞、CCD18細(xì)胞、SKOV3細(xì)胞
BHK21細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MHCC97細(xì)胞、H2135細(xì)胞、SU 86.86細(xì)胞
Molm14細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAL78細(xì)胞、HCE-2 [50.B1]細(xì)胞、HS 445T細(xì)胞
BN-CL2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW-1271細(xì)胞、OCI/AML-4細(xì)胞、Calu-3細(xì)胞
SNK6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BJA-B1細(xì)胞、H69C細(xì)胞、CCC-HPF-1細(xì)胞
MRASMC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Tohoku Hospital Pediatrics-1細(xì)胞、EC9706細(xì)胞、CCD-18Co細(xì)胞
HT 1080.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-Hep1細(xì)胞、HANK細(xì)胞、HFL細(xì)胞
MDAMB436細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW-1990細(xì)胞、UMR-106細(xì)胞、SJRH-30細(xì)胞
U-138 MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH196細(xì)胞、A549/DDP細(xì)胞、VMRCRCZ細(xì)胞
H2066細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H889細(xì)胞、T-84細(xì)胞、PLA802細(xì)胞
KP-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NBL-S細(xì)胞、Colo-206F細(xì)胞、NCI-SNU-16細(xì)胞
HEB細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KMS26細(xì)胞、H-847細(xì)胞、EB1細(xì)胞
SKOV3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA 1386細(xì)胞、3T3-L1細(xì)胞、SW-1088細(xì)胞
HO-8910 PM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CL-40細(xì)胞、H-2227細(xì)胞、NCI-H345細(xì)胞
NCI-SNU-1040細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：DHL-2細(xì)胞、NIE 115細(xì)胞、H-1417細(xì)胞
NCI-H1836細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GRSL細(xì)胞、WM 266-4細(xì)胞、Jurkat 77細(xì)胞
HEK293-EBNA1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：16HBE細(xì)胞、M21細(xì)胞、IPECJ2細(xì)胞
RCC_7860細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：U-2 OS細(xì)胞、IOSE80UBC細(xì)胞、OLN93細(xì)胞
NCIH2106細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM03190細(xì)胞、RCF細(xì)胞、MN 60細(xì)胞
B5537SKIN細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MLTC-1細(xì)胞、HT 29細(xì)胞、OVCAR-3細(xì)胞
LC-2-Ad細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKRC 39細(xì)胞、D283細(xì)胞、NCI H82細(xì)胞
NCIH1944細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KMM1細(xì)胞、NG10815細(xì)胞、SF 767細(xì)胞
BC-019細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVCAR 8細(xì)胞、MDAMB175細(xì)胞、SCL I細(xì)胞
HECV細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：UWB1.289細(xì)胞、Hs683T細(xì)胞、HUT28細(xì)胞
"