"MOLT-3細胞:人急性T淋巴細胞白血病細胞系
細胞背景資料:急性T淋巴細胞白血??;男性
細胞形態(tài):淋巴母細胞樣
細胞生長:懸浮
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
細胞生長特性:懸浮
細胞培養(yǎng)方面注意的幾點:無菌意識要強:實驗進行前,超凈臺以紫外燈照射30分鐘滅菌,以70%ethanol擦拭無菌操作抬面,并開啟超凈工作臺風扇運轉數(shù)分鐘后,才開始實驗操作。每次操作只處理一株細胞株,以避免失誤混淆或細胞間污染。實驗完畢后,將實驗物品帶出工作臺,以70%ethanol擦拭無菌操作抬面。無菌操作工作區(qū)域應保持清潔及寬敞,必要物品,例如支架、吸管等公用物品可以暫時放置,其它個人實驗用品用完應立即拿出。實驗用品以70%乙醇擦拭后才帶入無菌操作臺內(nèi)。實驗操作應在中央無菌區(qū)域,一般勿在邊緣區(qū)域操作。小心取用無菌之實驗物品,避免造成污染。勿碰觸吸管尖頭部或是容器瓶口,亦不要在打開之容器正上方操作實驗。容器打開后,以手夾住瓶蓋并握住瓶身,傾斜約45°角取用,盡量勿將瓶蓋蓋口朝上放置桌面。選擇正確的培養(yǎng)基:不同的細胞可能培養(yǎng)基不同,甚至不同的文獻可能對相同的細胞培養(yǎng)基成分也是可能不同的。如我當時培養(yǎng)神經(jīng)干細胞,有文獻就選用neurobase培養(yǎng)基,而我的實驗目的主要是做抗氧化和氧化方面的,而這種培養(yǎng)基中含有抗氧化劑成分,此時,我就不得不選擇另外一種不含抗氧化劑的培養(yǎng)基。瓶裝血清一定要逐步解凍:4℃冰箱全溶后再分裝,在溶解過程中須規(guī)則搖晃均勻(小心勿造成氣泡),使溫度與成分均一,減少沉淀的發(fā)生。勿直接由–20℃直接至37℃解凍,因溫度改變太大,容易造成蛋白質(zhì)凝結而發(fā)生沉淀。熱滅活是指56℃,30分鐘加熱已完全解凍之血清。水浴鍋升到56℃后,將血清放入,待溫度升高到56℃后計時,一般5分鐘左右規(guī)則搖晃均勻一次。此熱處理之目的是使血清中之補體成份去活化。除非必須,一般不要作此熱處理,因為會造成沉淀物之顯著增多,且會影響血清之品質(zhì)。注意更換新血清(包括不同批次)對細胞的影響。
我們都知道世界宇宙浩瀚無極,除了我們知道的地球、太陽、月球、銀河系以外還有好多其他宇宙行星,這樣的世界對于很多人來說很陌生稀奇甚至無法想象,這樣的世界同樣也是我們無法觸摸的,然而還有一個微觀的世界也是我們無法接觸的,這個就是——細胞里的微觀世界。對于很多人來說,除了從書本上簡單了解植物細胞的知識以外,在行業(yè)外人的意識里,細胞還是一個讓人一頭霧水的詞語,甚至都是一個無形的存在,更別提描述和看見這個東西,但是對于行業(yè)內(nèi)的生物科學研究者和醫(yī)學研究者,這是個經(jīng)常被運用到的必需之物,用宇宙世界的包含于被包含的關系把細胞的微觀世界剖析開來,讓我們了解到細胞是什么樣的東西及應用和未來世界細胞在生命中的重要作用。細胞發(fā)炎——心臟疾??;DNA受損——癌癥;細胞能量衰退——腎功能衰竭、關節(jié)炎、帕金森氏;老化蛋白堆積——糖尿病、癡呆癥、心腦血管疾??;所有的衰老和疾病都是機體內(nèi)細胞開的損傷、衰老和死亡造成的。所以細胞在科學研究和醫(yī)學研究中有著重要的應用作用,尤其是原代細胞,它是從機體組織中分離提取培養(yǎng),它可以作為一種科研材料幫助研究者進行項目研究和課題研究,也可以幫助醫(yī)學者進行疾病研究和疾病試驗,試想從人體組織中分離培養(yǎng)的細胞經(jīng)過醫(yī)學藥物的試驗再運用到人體身上,無論從功效還是結果上效果都是。
如何把細胞養(yǎng)的形態(tài)更好更漂亮。1.不同的細胞,喜歡的環(huán)境是不一樣的。這個不僅僅是說培養(yǎng)基的不同,還有就是細胞生長的空間密度問題。有一些細胞是數(shù)量多一點比較好生長,生長狀態(tài)也比較好。這種一般是屬于生長速度慢的細胞。譬如內(nèi)皮細胞。而有一些是細胞是數(shù)量少一點細胞狀態(tài)會生長的比較好,譬如巨噬細胞和某些腫瘤細胞。尤其是巨噬細胞,生長速度非常得快,貼壁速度很快,所以傳代時就應該留很少量的細胞,這樣細胞狀態(tài)會比較好。并且巨噬細胞比較喜歡扎堆生長,而堆與堆之間是有空間的。如果長成相連在一起的一滿片的時候,細胞形態(tài)基本上就會差了,老化的會比較多,對后期實驗結果是不好的。所以在養(yǎng)細胞的時候應該摸索該細胞喜歡的生長空間密度問題。2.對于有些人總是會遇到養(yǎng)的細胞形態(tài)怎么都不好的問題。這個其實是有一個方法可以改善的。對于貼壁細胞,如果細胞形態(tài)不好,(或者細胞形態(tài)不清晰,表面似有異物等)可以在傳代的時候進行如下操作:首先,倒掉舊的培養(yǎng)基,加入3ml新的培養(yǎng)基(有無血清的都可)洗滌一次,用滴管吸走,然后再加入3ml的培養(yǎng)基,進行預吹打,控制吹打力度,輕輕地大概沿著瓶底過一遍,然后吸走。這時侯再開始正式的消化、吹打。(巨噬細胞我們只吹打,不消化的);其次,把吹打下來的細胞懸液加入到新的培養(yǎng)瓶內(nèi),培養(yǎng)瓶事先加入培養(yǎng)基,放入培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng),按時間點觀察細胞貼壁情況。10分鐘觀察一次,20分鐘,30分鐘觀察一次。選擇一個時間點,已經(jīng)有部分細胞貼壁的情況下,重新置于潔凈臺,底面朝上迅速倒出其中的培養(yǎng)基,加入3ml新培養(yǎng)基再輕輕洗一次。然后加入完全培養(yǎng)基培養(yǎng)。后續(xù)觀察細胞生長情況以及形態(tài)。我稱之為“二傳”。呵呵。如果一次效果還不理想,可重復多次。直到找到細胞完美形態(tài)。其中要注意,結合細胞喜歡的生長情況。喜歡多一點數(shù)量長得好的細胞你就等貼壁細胞比較多點的時候再傳。反之亦然。3.關于培養(yǎng)瓶內(nèi)加入培養(yǎng)基的量的問題。這個是要靠自己去摸索你所養(yǎng)的細胞的。并不是小的玻璃方瓶12ml,大方瓶14ml的。有些細胞反而是培養(yǎng)基少一點相反細胞形態(tài)會長得比較好。(可能也是競爭很大,有優(yōu)勝劣汰吧。呵呵。)對于生長速度快的細胞,易生長的細胞加少一點培養(yǎng)基細胞形態(tài)會更好。但是要注意換液掌握。4.關于選擇培養(yǎng)瓶的問題。個人發(fā)現(xiàn)生長速度快的細胞在玻璃瓶內(nèi)生長的狀態(tài)會比一次性相對好一些。而對于同一種細胞,在其生長旺盛快速的時期在玻璃瓶內(nèi)的生長狀態(tài)也比內(nèi)好。這可能是因為比玻璃瓶更容易貼壁。生長速度快的細胞在這種相對“更安逸”的環(huán)境里反而長得狀態(tài)不如玻璃瓶好。所以對于生長速度慢的細胞如果想要更漂亮的細胞狀態(tài),比玻璃瓶會好,對于生長速度慢的細胞,玻璃瓶則會更好。同樣,對于同一種細胞,在其生長速度慢的時候,會好一點,比如剛剛復蘇的時候,或者原代培養(yǎng)的時候。而在其生長旺盛的時候,玻璃瓶則相對會好一點。
MC 116細胞系相關產(chǎn)品:GM06141細胞、KFB細胞、MH-S細胞
RCC 7860細胞系相關產(chǎn)品:COLO-205細胞、WEHI231細胞、CAKI 2細胞
U251MG細胞系相關產(chǎn)品:3AO細胞、Cattle chondrocytes細胞、MCF10A細胞
HT細胞系相關產(chǎn)品:WM35細胞、MIHA細胞、SNU1細胞
SLK細胞系相關產(chǎn)品:SUM-52-PE細胞、SK_N_BE2C細胞、CAMA細胞
WB-F344細胞系相關產(chǎn)品:NCI-H211細胞、Kit225/K6細胞、WM239A細胞
A 2780 CP細胞系相關產(chǎn)品:SW-620細胞、SKNBE-1細胞、NCI-H1838細胞
H-2108細胞系相關產(chǎn)品:HEK;293細胞、KM932細胞、HS578細胞
HuP-T3細胞系相關產(chǎn)品:SK-CO-1細胞、SMMC-7721細胞、HCT-116細胞
H838細胞系相關產(chǎn)品:E.G7-OVA細胞、Hs 600.T細胞、AML-2細胞
MD Anderson-Metastatic Breast-415細胞系相關產(chǎn)品:GM17219細胞、UACC-812細胞、D-324 Med細胞
Capan-1細胞系相關產(chǎn)品:COLO-1細胞、SNU-520細胞、RPMI1846細胞
HDF-a細胞系相關產(chǎn)品:MDA-330細胞、HCC-38細胞、MILE SVEN 1細胞
QGY-7703細胞系相關產(chǎn)品:FLC7細胞、PFSK1細胞、MDCK2細胞
SJRH 30細胞系相關產(chǎn)品:NCI-H498細胞、GA-10(Clone 4)細胞、HVSMC細胞
253JBV細胞系相關產(chǎn)品:BT549細胞、Hs 578.T細胞、BJ [Human fibroblast]細胞
NCI H929細胞系相關產(chǎn)品:SUM 159細胞、J82COT細胞、CCRF-CEM細胞
CAMA-1細胞系相關產(chǎn)品:Human Microglia Clone 3細胞、PC3M-IE8細胞、WERI細胞
IHH細胞系相關產(chǎn)品:HS5細胞、Jurkat-E6細胞、LPC-H12細胞
R3/1細胞系相關產(chǎn)品:JS1細胞、NK-10A細胞、HSC2細胞
HSC 3細胞系相關產(chǎn)品:P1-Raji細胞、YES2細胞、SNU368細胞
WM266細胞系相關產(chǎn)品:KE-39細胞、NTERA2-cloneD1細胞、293EBNA細胞
DV90細胞系相關產(chǎn)品:SRA01/04 (HLE)細胞、RenCa細胞、373 MG細胞
MM134細胞系相關產(chǎn)品:H526細胞、SKOV-433細胞、KFB細胞
TCCSUP細胞系相關產(chǎn)品:DiFi細胞、FOX-NY細胞、KYSE-70細胞
UACC-893細胞系相關產(chǎn)品:HGC27細胞、NCIH810細胞、NB19細胞
C6661細胞系相關產(chǎn)品:MOLP-8細胞、THLE-3細胞、NS1細胞
Leukemic 1210細胞系相關產(chǎn)品:NCI-H2108細胞、H-1693細胞、Co320細胞
Huh7.5細胞系相關產(chǎn)品:Hs819.T細胞、L-WRN細胞、Mono Mac6細胞
SNU-638細胞系相關產(chǎn)品:Hu-P-T4細胞、VeroC1008細胞、Anip[973]細胞
SUDHL-2細胞系相關產(chǎn)品:LP-1細胞、SK-N-BE-2細胞、8226細胞
THLE-3細胞系相關產(chǎn)品:Human podocyte細胞、SKMES細胞、95D細胞
LTEPsm細胞系相關產(chǎn)品:NCI-H596細胞、ONS76細胞、LC-1/sq細胞
TE-9細胞系相關產(chǎn)品:DMS-79細胞、MCF/Adr細胞、ECC10細胞
Y3Ag1.2.3細胞系相關產(chǎn)品:SKLMS1細胞、SNU16細胞、MDA MB 361細胞
SNU886細胞系相關產(chǎn)品:Huh 7.5細胞、SNU-719細胞、Hu-P-T3細胞
SW948細胞系相關產(chǎn)品:CL1-5細胞、Ramos 2G6.4C10細胞、Hs895T細胞
NTERA-2 cl.D1細胞系相關產(chǎn)品:GM02219細胞、HMC3細胞、B16/F1細胞
NCI-ADR-RES細胞系相關產(chǎn)品:Wayne State University-Head and Neck 13細胞、RPMI1846細胞、WEHI164細胞
Hos TE-85細胞系相關產(chǎn)品:MS1細胞、H650細胞、ACC3細胞
Panc-3_27細胞系相關產(chǎn)品:WiDr細胞、SUIT 2細胞、PC3M-2B4細胞
SN-12C細胞系相關產(chǎn)品:BRL 3A細胞、KM.12細胞、MCF7細胞
NRK52E細胞系相關產(chǎn)品:HCC-1500細胞、SK-MEL-2細胞、SKNEP1細胞
AKR細胞系相關產(chǎn)品:PA-TU S細胞、RS 4;11細胞、184A1細胞
MFM-223細胞系相關產(chǎn)品:SKLU-1細胞、KM12-SM細胞、P3X63Ag8-6-5-3細胞
BEL 7402細胞系相關產(chǎn)品:HTR-8/SVneo細胞、SW403細胞、NT-2細胞
NCTC-3960細胞系相關產(chǎn)品:JVM-2細胞、HuT102細胞、TPC-1細胞
COLO 679細胞系相關產(chǎn)品:CAOV4細胞、BHK 21細胞、NCIH2066細胞
C42細胞系相關產(chǎn)品:LUDLU-1細胞、1E8-H細胞、PLA 802細胞
SW 1417細胞系相關產(chǎn)品:OB2細胞、SKMEL1細胞、U-2 OS細胞
SF-126細胞系相關產(chǎn)品:HGSMC細胞、OCIAML2細胞、Lu-99A細胞
CBRH-7919細胞系相關產(chǎn)品:MH-S細胞、J774A.1細胞、BT20細胞
H-2108細胞系相關產(chǎn)品:HEK;293細胞、KM932細胞、HS578細胞
MLOY4細胞系相關產(chǎn)品:PC615.3細胞、GM346細胞、GM00346細胞
RL細胞系相關產(chǎn)品:SCC90細胞、NCIH596細胞、C22細胞
C38細胞系相關產(chǎn)品:SUDHL1細胞、NCI-H441-4細胞、RBL 2H3細胞
GT1-1細胞系相關產(chǎn)品:LY-R細胞、BCaP 37細胞、2B4細胞
CHO-K1細胞系相關產(chǎn)品:V 79細胞、MCF 7細胞、NCI-HUT-69細胞
GM03320D細胞系相關產(chǎn)品:TK.10細胞、HLEB3細胞、RH35細胞
OVCA-433細胞系相關產(chǎn)品:HOS細胞、NCC-IT細胞、Bowes melanoma cells細胞
Mel526細胞系相關產(chǎn)品:LC-MS細胞、KCL-22細胞、KRC/Y細胞
Tu 177細胞系相關產(chǎn)品:KP-4細胞、NCI-SNU-1細胞、H-82細胞
NCIH747細胞系相關產(chǎn)品:SK Mel 1細胞、RFL-6細胞、U266BL細胞
PK(15)細胞系相關產(chǎn)品:SW403細胞、T/G HA-VSMC細胞、BGC823細胞
CAL-120細胞系相關產(chǎn)品:Ishikawa細胞、RAT2細胞、MBT-2細胞
SW1271細胞系相關產(chǎn)品:BT325細胞、P3X63 AG8-653細胞、3T3L1細胞
H2108細胞系相關產(chǎn)品:MES-13細胞、H-2405細胞、NCIH69細胞
NWA細胞系相關產(chǎn)品:NCI H2106細胞、OCI AML3細胞、Natural Killer-92細胞
P3JHR1細胞系相關產(chǎn)品:CEMC7細胞、ECC-10細胞、JB6Cl30細胞
Calu-3細胞系相關產(chǎn)品:H-378細胞、OP-9細胞、Hs 611.T細胞
NIT-1細胞系相關產(chǎn)品:NPA 87細胞、Hca-F細胞、MiaPaca.2細胞
BJA-B1細胞系相關產(chǎn)品:Me Wo細胞、IGROV 1細胞、MOLM-13細胞
U251MG細胞系相關產(chǎn)品:3AO細胞、LNCaP C4-2細胞、NCI-H929細胞
RASMCs細胞系相關產(chǎn)品:HLE-B3細胞、SUIT-2細胞、UM-UC3細胞
"