"OCI-Ly19細胞：人彌漫大B淋巴瘤細胞系
細胞背景資料：彌漫大B淋巴瘤；女性
細胞形態(tài)：淋巴母細胞樣
細胞生長：懸浮
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
細胞生長特性：懸浮
細胞培養(yǎng)方面注意的幾點：無菌意識要強：實驗進行前，超凈臺以紫外燈照射３０分鐘滅菌，以７０%ethanol擦拭無菌操作抬面，并開啟超凈工作臺風扇運轉(zhuǎn)數(shù)分鐘后，才開始實驗操作。每次操作只處理一株細胞株，以避免失誤混淆或細胞間污染。實驗完畢后，將實驗物品帶出工作臺，以７０%ethanol擦拭無菌操作抬面。無菌操作工作區(qū)域應(yīng)保持清潔及寬敞，必要物品，例如支架、吸管等公用物品可以暫時放置，其它個人實驗用品用完應(yīng)立即拿出。實驗用品以７０%乙醇擦拭后才帶入無菌操作臺內(nèi)。實驗操作應(yīng)在中央無菌區(qū)域，一般勿在邊緣區(qū)域操作。小心取用無菌之實驗物品，避免造成污染。勿碰觸吸管尖頭部或是容器瓶口，亦不要在打開之容器正上方操作實驗。容器打開后，以手夾住瓶蓋并握住瓶身，傾斜約４５°角取用，盡量勿將瓶蓋蓋口朝上放置桌面。選擇正確的培養(yǎng)基：不同的細胞可能培養(yǎng)基不同，甚至不同的文獻可能對相同的細胞培養(yǎng)基成分也是可能不同的。如我當時培養(yǎng)神經(jīng)干細胞，有文獻就選用neurobase培養(yǎng)基，而我的實驗?zāi)康闹饕亲隹寡趸脱趸矫娴?，而這種培養(yǎng)基中含有抗氧化劑成分，此時，我就不得不選擇另外一種不含抗氧化劑的培養(yǎng)基。瓶裝血清一定要逐步解凍:４℃冰箱全溶后再分裝，在溶解過程中須規(guī)則搖晃均勻(小心勿造成氣泡)，使溫度與成分均一，減少沉淀的發(fā)生。勿直接由–２０℃直接至３７℃解凍，因溫度改變太大，容易造成蛋白質(zhì)凝結(jié)而發(fā)生沉淀。熱滅活是指５６℃，３０分鐘加熱已完全解凍之血清。水浴鍋升到５６℃后，將血清放入，待溫度升高到５６℃后計時，一般５分鐘左右規(guī)則搖晃均勻一次。此熱處理之目的是使血清中之補體成份去活化。除非必須，一般不要作此熱處理，因為會造成沉淀物之顯著增多，且會影響血清之品質(zhì)。注意更換新血清(包括不同批次)對細胞的影響。
凍存和復(fù)蘇的原則：慢凍快融》當細胞冷到零度以下，可以產(chǎn)生以下變化：細胞器脫水，細胞中可溶性物質(zhì)濃度升高，并在細胞內(nèi)形成冰晶。如果緩慢冷凍，可使細胞逐步脫水，細胞內(nèi)不致產(chǎn)生大的冰晶；相反，結(jié)晶就大，大結(jié)晶會造成細胞膜、綱胞器的損傷和破裂。復(fù)蘇過程應(yīng)快融，目的是防止小冰晶形成大冰晶，即冰晶的重結(jié)晶。慢凍程序》1.標準程序：采用細胞凍存器》當溫度在-25℃以上時，1~2℃/min；當溫度達-25℃以下時，5~10℃/min；當溫度達-100℃時，可迅速放入液氮中。2.簡易程序：將冷凍管（管口要朝上）放入紗布袋內(nèi)，紗布袋系以線繩，通過線繩將紗布袋固定于液氮罐罐口，按每分鐘溫度下降1~2℃的速度，在40min內(nèi)降至液氮表面過夜，次晨投人液氮中。3.傳統(tǒng)程序：冷凍管置于4℃10分鐘→-20℃30分鐘→-80℃16~18小時（或隔夜）→液氮槽長期儲存。細胞凍存方法：1.預(yù)先配制凍存液》（1）8%DMSO+細胞生長液（92%血清）2.取對數(shù)生長期細胞，經(jīng)胰酶消化后，加入適量凍存液，用吸管吹打制成細胞懸液（1×10(6)~5×10(6)細胞/ml）。3.加入1ml細胞于凍存管中，密封后標記冷凍細胞名稱和冷凍日期。液氮長期保存。保存細胞的復(fù)蘇方法：1.快速解凍》凍存細胞從液氮中取出后，立即放入37℃水浴中，輕輕搖動冷凍管，使其在1分鐘內(nèi)全部融化（不要超過3分鐘）。2.解凍后的細胞可直接接種到含完全生長培養(yǎng)液的細胞培養(yǎng)瓶中直接進行培養(yǎng)，24小時后再用新鮮完全培養(yǎng)液替換舊培養(yǎng)液，以去除DMSO。3.如果細胞對冷凍保護劑特別敏感解凍后的細胞應(yīng)先通過離心去除冷凍保護劑，然后再接種到含完全生長培養(yǎng)液的培養(yǎng)瓶中。
細胞消化過程總結(jié)：其實絕大部分細胞消化的時候是只要用胰酶潤洗一遍即可，吸去胰酶后，殘留的那些無法計算體積的附著在細胞表面的微量胰酶在３７度一般不到２min足夠消化細胞（絕大部分１min不到）。對于這些細胞原則上不要用胰酶孵育細胞，連續(xù)這樣傳代，對細胞傷害很大。簡單的程序是PBS潤洗吸去，胰酶潤洗吸去，然后３７度消化。２，什么算是消化好了呢？不是細胞全部成間隔分布很離散的單個圓形才算消化好了，一般你肉眼觀察貼壁細胞層，只要能移動了，多半呈沙壯移動，其實已經(jīng)可以了，很多人喜歡把細胞消化或者吹打成完全分離細胞，這是沒有必要的。一般能移動了，說明細胞與培養(yǎng)基質(zhì)材料的附著已經(jīng)消失了，細胞之間的附著也已經(jīng)消失了，細胞已經(jīng)獨立分布了（雖然沒有呈現(xiàn)很廣的離散分布）。這個時候應(yīng)該停止消化，不要等到看到鏡下所有細胞都分離得非常好，間隙很大，才停止。細胞就是完全成單個細胞懸液，之后在貼壁的過程中仍然會聚集，這個是貼壁培養(yǎng)的細胞，尤其是腫瘤細胞的一個特性，無論死活的細胞都是如此，你可以嘗試，準備１００%的單個細胞懸液，貼壁后觀察細胞，仍然是幾個幾個細胞聚集在一起。一些懸浮培養(yǎng)細胞也是如此，容易聚集，不要去嘗試過幾個小時就拿出來吹打成單細胞懸液（不要笑，這個是初養(yǎng)懸浮細胞的人常犯的錯誤，以為懸浮培養(yǎng)就是一個一個分開）。細胞只要能從基質(zhì)上脫離下來，這個時候即使是成片的（比如Calu-３細胞），吹打不超過２０次后（一般１０次即可），成小規(guī)模聚集（１０個細胞左右），是正常的，不要試圖再去延長消化時間，或者像有的同學(xué)那樣吹打１h，等待單細胞懸液出現(xiàn)。比較難消化的細胞（潤洗方法５min還不能消化），比如HCT１５, LS４１１和KM１２，這樣的細胞一般需要用少量胰酶孵育，但也不需要很多，一般１００mm dish，一次最多加入５００ul，就足夠了，一般我加３００ul。即使這樣難消化的細胞，一般不超過５min，即可見細胞成片移動，就應(yīng)該停止消化。一些正常細胞也會有難消化的時候，比如tsDC細胞，但也只要用少量胰酶孵育，３min左右即可看到成片沙狀移動。
HPF細胞系相關(guān)產(chǎn)品：2B4-L細胞、SVHUC細胞、Hepatoma-22細胞
SBC-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC4006細胞、NCIH716細胞、RM-1細胞
Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-8細胞系相關(guān)產(chǎn)品：AGS細胞、P388.D1細胞、P3X63 AG8-653細胞
TR 146細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW1222細胞、SNB19細胞、KM H-2細胞
HOS細胞系相關(guān)產(chǎn)品：S16細胞、COLO680N細胞、MIA-PaCa-2細胞
RF/6A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HT-29/CX-1細胞、RGM1細胞、LU65細胞
INS-1E細胞系相關(guān)產(chǎn)品：AA-Mel細胞、Ramos (RA)細胞、PL-45細胞
NCI-SNU-5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HRMC細胞、RIN-14B細胞、THC-8307細胞
CEM細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-4細胞、HEK-293H細胞、H740細胞
TN5B14細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MV4;11細胞、SKES-1細胞、F56 [Human neoplasm]細胞
SCC9細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H2135細胞、CCD-841-CoTr細胞、NIH:OVCAR-10細胞
WM266mel細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hepatoma-22細胞、HEK-293細胞、CEMC1細胞
MDA2B細胞系相關(guān)產(chǎn)品：WC00079細胞、LC1/Sq細胞、NCTC clone 1469細胞
RL952細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MV-4:11細胞、IA-LM細胞、Sf-21細胞
PNT1/A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC-1599細胞、Hs729T細胞、NRK-49F細胞
NKL細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Kobe university Oral Squamous Cell culture-2細胞、C4-2 B細胞、SW 1222細胞
NKL細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Kobe university Oral Squamous Cell culture-2細胞、C4-2 B細胞、SW 1222細胞
GM2219C細胞系相關(guān)產(chǎn)品：AK細胞、HEK 293-EBNA細胞、Loucy細胞
FRTL-5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs-675-T細胞、P3X63Ag8.653細胞、SO-RB50細胞
Namalva細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Nakata-1細胞、FF-WT-BJ細胞、Tca-83細胞
Caco2-BBE細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs729細胞、OCI-AML5細胞、Embryonic Bovine Tracheal cells細胞
MD Anderson-Metastatic Breast-415細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM17219細胞、UACC-812細胞、D-324 Med細胞
C41細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK293-A細胞、C2A細胞、EMT6細胞
RA-FLSs細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC0044細胞、ZR75-30細胞、L6細胞
EC-GI-10細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KYSE-180細胞、NOR10細胞、P31FUJ細胞
DSL6A/C1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HSC-4細胞、SW 900細胞、LK-2細胞
MonoMac1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HSC-3細胞、95C細胞、C38細胞
NS1-Ag4/1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MHH-CALL2細胞、MDA-MB-175細胞、BHK細胞
CZ-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ST細胞、EFO-27細胞、HMC細胞
MDA 231-LM2-4175細胞系相關(guān)產(chǎn)品：University of Michigan-Urothelial Carcinoma-14細胞、Ca761細胞、H719細胞
HCC1500細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OEC33細胞、HTR-8/SV neo細胞、H1417細胞
OCI-Ly 18細胞系相關(guān)產(chǎn)品：8305C細胞、F81細胞、P-3J細胞
Beta-TC-6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK 293-F細胞、2T細胞、OCI-Ly10細胞
HL1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：EM-3細胞、KU-812F細胞、Human Foreskin Fibroblast細胞
MUTZ-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKM1細胞、HEK293-EBNA細胞、HIT-T15細胞
MonoMac1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HSC-3細胞、95C細胞、C38細胞
SK-LMS-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HNE1細胞、MDCC-MSB-1細胞、NCI-SNU-1細胞
Lewis Lung Cancer細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Embryonic Bovine Tracheal cells細胞、HEL-1細胞、Caki-1細胞
NCIH647細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Kit 225-K6細胞、Tca-83細胞、CX1細胞
SV-HUC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：AD-293細胞、231-luc細胞、NCM356細胞
H1238細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Dysplastic Oral Keratinocyte細胞、PC-3M-IE8細胞、A549-Taxol細胞
KYSE-50細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs604T細胞、Calu 3細胞、SW 620細胞
BCPAP細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCCIT細胞、X63-AG 8.653細胞、COLO-357細胞
AML 12細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Kit225 K6細胞、NCI-H1882細胞、NCIN87細胞
HLCL9B10細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC1599細胞、8402細胞、BSC40細胞
OCM-1A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：A.704細胞、Bronchial Epithelium transformed with Ad12-SV40 2B細胞、OCILY3細胞
Hs 274細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CFPAC-1細胞、TK-10細胞、AML 12細胞
HBMEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LNCaP clone FGC細胞、U-266 AR1細胞、LS-174T細胞
H1105細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CHP 126細胞、SW579細胞、D-324MED細胞
Hs 695T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3/NS1/1-Ag4-1細胞、L-6細胞、Hos TE-85細胞
Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hep-3B細胞、KM12 SM細胞、HEK293E細胞
OCI-AML3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC0078細胞、UPCI:SCC90細胞、P3X63Ag8.653細胞
A7r5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKCol1細胞、HuH6細胞、NCI-H64細胞
Chang liver細胞系相關(guān)產(chǎn)品：COS-7細胞、IB-RS2細胞、L-6TG細胞
NCI-441細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SGC-996細胞、HCC-1569細胞、A 253細胞
P560細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HuT-78細胞、H889細胞、OVCAR-10細胞
Hs.27細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-526細胞、Hs 578Bst細胞、Nb 2細胞
COV504細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H341細胞、Rh30細胞、Hs 27細胞
SCC 25細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1650細胞、hESC細胞、PAN 02細胞
Gerner 7666細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 821.T細胞、RT 112細胞、HEK 293A細胞
hADSCs細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CLONE M3細胞、MESSA Dx5細胞、J82COT細胞
HT(H9)細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Jurkat E6-1細胞、PLA-801C細胞、CG-4細胞
Jurkat clone A3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LL/2 (LLC1)細胞、RTMC細胞、RIN m5F細胞
MC-116細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SBC3細胞、NPA87-1細胞、H-510細胞
RPMI2650細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H747細胞、HEC-1-A細胞、HS688AT細胞
GM02219C細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MCF 10A細胞、Lec1細胞、RD 2細胞
PNT1A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPE-1細胞、HCCLM6細胞、HLEC-SRA 01/04細胞
JURKAT E-6.1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MEL細胞、NCIH647細胞、Balb/c3T3細胞
MCCAR細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TGHAVSMC細胞、U266 B1細胞、H1437細胞
3LL細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HT-22細胞、PA-TU S細胞、SH-SY5Y Parental細胞
MTEC1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC-1833細胞、SK ES 01細胞、N9細胞
COLO 201細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Madin Darby Canine Kidney細胞、IOSE80細胞、HLEC-SRA 01/04細胞
Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-8細胞系相關(guān)產(chǎn)品：AGS細胞、HCEC細胞、RMS13細胞
U373細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH441細胞、NCI/ADR-RES細胞、H650細胞
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