"OCI-Ly19細(xì)胞：人彌漫大B淋巴瘤細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料：彌漫大B淋巴瘤；女性
細(xì)胞形態(tài)：淋巴母細(xì)胞樣
細(xì)胞生長：懸浮
細(xì)胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細(xì)胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
細(xì)胞來源說明：細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
細(xì)胞生長特性：懸浮
細(xì)胞培養(yǎng)方面注意的幾點(diǎn)：無菌意識要強(qiáng)：實(shí)驗(yàn)進(jìn)行前，超凈臺以紫外燈照射３０分鐘滅菌，以７０%ethanol擦拭無菌操作抬面，并開啟超凈工作臺風(fēng)扇運(yùn)轉(zhuǎn)數(shù)分鐘后，才開始實(shí)驗(yàn)操作。每次操作只處理一株細(xì)胞株，以避免失誤混淆或細(xì)胞間污染。實(shí)驗(yàn)完畢后，將實(shí)驗(yàn)物品帶出工作臺，以７０%ethanol擦拭無菌操作抬面。無菌操作工作區(qū)域應(yīng)保持清潔及寬敞，必要物品，例如支架、吸管等公用物品可以暫時放置，其它個人實(shí)驗(yàn)用品用完應(yīng)立即拿出。實(shí)驗(yàn)用品以７０%乙醇擦拭后才帶入無菌操作臺內(nèi)。實(shí)驗(yàn)操作應(yīng)在中央無菌區(qū)域，一般勿在邊緣區(qū)域操作。小心取用無菌之實(shí)驗(yàn)物品，避免造成污染。勿碰觸吸管尖頭部或是容器瓶口，亦不要在打開之容器正上方操作實(shí)驗(yàn)。容器打開后，以手夾住瓶蓋并握住瓶身，傾斜約４５°角取用，盡量勿將瓶蓋蓋口朝上放置桌面。選擇正確的培養(yǎng)基：不同的細(xì)胞可能培養(yǎng)基不同，甚至不同的文獻(xiàn)可能對相同的細(xì)胞培養(yǎng)基成分也是可能不同的。如我當(dāng)時培養(yǎng)神經(jīng)干細(xì)胞，有文獻(xiàn)就選用neurobase培養(yǎng)基，而我的實(shí)驗(yàn)?zāi)康闹饕亲隹寡趸脱趸矫娴?，而這種培養(yǎng)基中含有抗氧化劑成分，此時，我就不得不選擇另外一種不含抗氧化劑的培養(yǎng)基。瓶裝血清一定要逐步解凍:４℃冰箱全溶后再分裝，在溶解過程中須規(guī)則搖晃均勻(小心勿造成氣泡)，使溫度與成分均一，減少沉淀的發(fā)生。勿直接由–２０℃直接至３７℃解凍，因溫度改變太大，容易造成蛋白質(zhì)凝結(jié)而發(fā)生沉淀。熱滅活是指５６℃，３０分鐘加熱已完全解凍之血清。水浴鍋升到５６℃后，將血清放入，待溫度升高到５６℃后計(jì)時，一般５分鐘左右規(guī)則搖晃均勻一次。此熱處理之目的是使血清中之補(bǔ)體成份去活化。除非必須，一般不要作此熱處理，因?yàn)闀斐沙恋砦镏@著增多，且會影響血清之品質(zhì)。注意更換新血清(包括不同批次)對細(xì)胞的影響。
凍存和復(fù)蘇的原則：慢凍快融》當(dāng)細(xì)胞冷到零度以下，可以產(chǎn)生以下變化：細(xì)胞器脫水，細(xì)胞中可溶性物質(zhì)濃度升高，并在細(xì)胞內(nèi)形成冰晶。如果緩慢冷凍，可使細(xì)胞逐步脫水，細(xì)胞內(nèi)不致產(chǎn)生大的冰晶；相反，結(jié)晶就大，大結(jié)晶會造成細(xì)胞膜、綱胞器的損傷和破裂。復(fù)蘇過程應(yīng)快融，目的是防止小冰晶形成大冰晶，即冰晶的重結(jié)晶。慢凍程序》1.標(biāo)準(zhǔn)程序：采用細(xì)胞凍存器》當(dāng)溫度在-25℃以上時，1~2℃/min；當(dāng)溫度達(dá)-25℃以下時，5~10℃/min；當(dāng)溫度達(dá)-100℃時，可迅速放入液氮中。2.簡易程序：將冷凍管（管口要朝上）放入紗布袋內(nèi)，紗布袋系以線繩，通過線繩將紗布袋固定于液氮罐罐口，按每分鐘溫度下降1~2℃的速度，在40min內(nèi)降至液氮表面過夜，次晨投人液氮中。3.傳統(tǒng)程序：冷凍管置于4℃10分鐘→-20℃30分鐘→-80℃16~18小時（或隔夜）→液氮槽長期儲存。細(xì)胞凍存方法：1.預(yù)先配制凍存液》（1）8%DMSO+細(xì)胞生長液（92%血清）2.取對數(shù)生長期細(xì)胞，經(jīng)胰酶消化后，加入適量凍存液，用吸管吹打制成細(xì)胞懸液（1×10(6)~5×10(6)細(xì)胞/ml）。3.加入1ml細(xì)胞于凍存管中，密封后標(biāo)記冷凍細(xì)胞名稱和冷凍日期。液氮長期保存。保存細(xì)胞的復(fù)蘇方法：1.快速解凍》凍存細(xì)胞從液氮中取出后，立即放入37℃水浴中，輕輕搖動冷凍管，使其在1分鐘內(nèi)全部融化（不要超過3分鐘）。2.解凍后的細(xì)胞可直接接種到含完全生長培養(yǎng)液的細(xì)胞培養(yǎng)瓶中直接進(jìn)行培養(yǎng)，24小時后再用新鮮完全培養(yǎng)液替換舊培養(yǎng)液，以去除DMSO。3.如果細(xì)胞對冷凍保護(hù)劑特別敏感解凍后的細(xì)胞應(yīng)先通過離心去除冷凍保護(hù)劑，然后再接種到含完全生長培養(yǎng)液的培養(yǎng)瓶中。
細(xì)胞消化過程總結(jié)：其實(shí)絕大部分細(xì)胞消化的時候是只要用胰酶潤洗一遍即可，吸去胰酶后，殘留的那些無法計(jì)算體積的附著在細(xì)胞表面的微量胰酶在３７度一般不到２min足夠消化細(xì)胞（絕大部分１min不到）。對于這些細(xì)胞原則上不要用胰酶孵育細(xì)胞，連續(xù)這樣傳代，對細(xì)胞傷害很大。簡單的程序是PBS潤洗吸去，胰酶潤洗吸去，然后３７度消化。２，什么算是消化好了呢？不是細(xì)胞全部成間隔分布很離散的單個圓形才算消化好了，一般你肉眼觀察貼壁細(xì)胞層，只要能移動了，多半呈沙壯移動，其實(shí)已經(jīng)可以了，很多人喜歡把細(xì)胞消化或者吹打成完全分離細(xì)胞，這是沒有必要的。一般能移動了，說明細(xì)胞與培養(yǎng)基質(zhì)材料的附著已經(jīng)消失了，細(xì)胞之間的附著也已經(jīng)消失了，細(xì)胞已經(jīng)獨(dú)立分布了（雖然沒有呈現(xiàn)很廣的離散分布）。這個時候應(yīng)該停止消化，不要等到看到鏡下所有細(xì)胞都分離得非常好，間隙很大，才停止。細(xì)胞就是完全成單個細(xì)胞懸液，之后在貼壁的過程中仍然會聚集，這個是貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞，尤其是腫瘤細(xì)胞的一個特性，無論死活的細(xì)胞都是如此，你可以嘗試，準(zhǔn)備１００%的單個細(xì)胞懸液，貼壁后觀察細(xì)胞，仍然是幾個幾個細(xì)胞聚集在一起。一些懸浮培養(yǎng)細(xì)胞也是如此，容易聚集，不要去嘗試過幾個小時就拿出來吹打成單細(xì)胞懸液（不要笑，這個是初養(yǎng)懸浮細(xì)胞的人常犯的錯誤，以為懸浮培養(yǎng)就是一個一個分開）。細(xì)胞只要能從基質(zhì)上脫離下來，這個時候即使是成片的（比如Calu-３細(xì)胞），吹打不超過２０次后（一般１０次即可），成小規(guī)模聚集（１０個細(xì)胞左右），是正常的，不要試圖再去延長消化時間，或者像有的同學(xué)那樣吹打１h，等待單細(xì)胞懸液出現(xiàn)。比較難消化的細(xì)胞（潤洗方法５min還不能消化），比如HCT１５, LS４１１和KM１２，這樣的細(xì)胞一般需要用少量胰酶孵育，但也不需要很多，一般１００mm dish，一次最多加入５００ul，就足夠了，一般我加３００ul。即使這樣難消化的細(xì)胞，一般不超過５min，即可見細(xì)胞成片移動，就應(yīng)該停止消化。一些正常細(xì)胞也會有難消化的時候，比如tsDC細(xì)胞，但也只要用少量胰酶孵育，３min左右即可看到成片沙狀移動。
HPF細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：2B4-L細(xì)胞、SVHUC細(xì)胞、Hepatoma-22細(xì)胞
SBC-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC4006細(xì)胞、NCIH716細(xì)胞、RM-1細(xì)胞
Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：AGS細(xì)胞、P388.D1細(xì)胞、P3X63 AG8-653細(xì)胞
TR 146細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW1222細(xì)胞、SNB19細(xì)胞、KM H-2細(xì)胞
HOS細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：S16細(xì)胞、COLO680N細(xì)胞、MIA-PaCa-2細(xì)胞
RF/6A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HT-29/CX-1細(xì)胞、RGM1細(xì)胞、LU65細(xì)胞
INS-1E細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：AA-Mel細(xì)胞、Ramos (RA)細(xì)胞、PL-45細(xì)胞
NCI-SNU-5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HRMC細(xì)胞、RIN-14B細(xì)胞、THC-8307細(xì)胞
CEM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-4細(xì)胞、HEK-293H細(xì)胞、H740細(xì)胞
TN5B14細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MV4;11細(xì)胞、SKES-1細(xì)胞、F56 [Human neoplasm]細(xì)胞
SCC9細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H2135細(xì)胞、CCD-841-CoTr細(xì)胞、NIH:OVCAR-10細(xì)胞
WM266mel細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hepatoma-22細(xì)胞、HEK-293細(xì)胞、CEMC1細(xì)胞
MDA2B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WC00079細(xì)胞、LC1/Sq細(xì)胞、NCTC clone 1469細(xì)胞
RL952細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MV-4:11細(xì)胞、IA-LM細(xì)胞、Sf-21細(xì)胞
PNT1/A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC-1599細(xì)胞、Hs729T細(xì)胞、NRK-49F細(xì)胞
NKL細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Kobe university Oral Squamous Cell culture-2細(xì)胞、C4-2 B細(xì)胞、SW 1222細(xì)胞
NKL細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Kobe university Oral Squamous Cell culture-2細(xì)胞、C4-2 B細(xì)胞、SW 1222細(xì)胞
GM2219C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：AK細(xì)胞、HEK 293-EBNA細(xì)胞、Loucy細(xì)胞
FRTL-5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs-675-T細(xì)胞、P3X63Ag8.653細(xì)胞、SO-RB50細(xì)胞
Namalva細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Nakata-1細(xì)胞、FF-WT-BJ細(xì)胞、Tca-83細(xì)胞
Caco2-BBE細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs729細(xì)胞、OCI-AML5細(xì)胞、Embryonic Bovine Tracheal cells細(xì)胞
MD Anderson-Metastatic Breast-415細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM17219細(xì)胞、UACC-812細(xì)胞、D-324 Med細(xì)胞
C41細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK293-A細(xì)胞、C2A細(xì)胞、EMT6細(xì)胞
RA-FLSs細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC0044細(xì)胞、ZR75-30細(xì)胞、L6細(xì)胞
EC-GI-10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KYSE-180細(xì)胞、NOR10細(xì)胞、P31FUJ細(xì)胞
DSL6A/C1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HSC-4細(xì)胞、SW 900細(xì)胞、LK-2細(xì)胞
MonoMac1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HSC-3細(xì)胞、95C細(xì)胞、C38細(xì)胞
NS1-Ag4/1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MHH-CALL2細(xì)胞、MDA-MB-175細(xì)胞、BHK細(xì)胞
CZ-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ST細(xì)胞、EFO-27細(xì)胞、HMC細(xì)胞
MDA 231-LM2-4175細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：University of Michigan-Urothelial Carcinoma-14細(xì)胞、Ca761細(xì)胞、H719細(xì)胞
HCC1500細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OEC33細(xì)胞、HTR-8/SV neo細(xì)胞、H1417細(xì)胞
OCI-Ly 18細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：8305C細(xì)胞、F81細(xì)胞、P-3J細(xì)胞
Beta-TC-6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK 293-F細(xì)胞、2T細(xì)胞、OCI-Ly10細(xì)胞
HL1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：EM-3細(xì)胞、KU-812F細(xì)胞、Human Foreskin Fibroblast細(xì)胞
MUTZ-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKM1細(xì)胞、HEK293-EBNA細(xì)胞、HIT-T15細(xì)胞
MonoMac1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HSC-3細(xì)胞、95C細(xì)胞、C38細(xì)胞
SK-LMS-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HNE1細(xì)胞、MDCC-MSB-1細(xì)胞、NCI-SNU-1細(xì)胞
Lewis Lung Cancer細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Embryonic Bovine Tracheal cells細(xì)胞、HEL-1細(xì)胞、Caki-1細(xì)胞
NCIH647細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Kit 225-K6細(xì)胞、Tca-83細(xì)胞、CX1細(xì)胞
SV-HUC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：AD-293細(xì)胞、231-luc細(xì)胞、NCM356細(xì)胞
H1238細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Dysplastic Oral Keratinocyte細(xì)胞、PC-3M-IE8細(xì)胞、A549-Taxol細(xì)胞
KYSE-50細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs604T細(xì)胞、Calu 3細(xì)胞、SW 620細(xì)胞
BCPAP細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCCIT細(xì)胞、X63-AG 8.653細(xì)胞、COLO-357細(xì)胞
AML 12細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Kit225 K6細(xì)胞、NCI-H1882細(xì)胞、NCIN87細(xì)胞
HLCL9B10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC1599細(xì)胞、8402細(xì)胞、BSC40細(xì)胞
OCM-1A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：A.704細(xì)胞、Bronchial Epithelium transformed with Ad12-SV40 2B細(xì)胞、OCILY3細(xì)胞
Hs 274細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CFPAC-1細(xì)胞、TK-10細(xì)胞、AML 12細(xì)胞
HBMEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LNCaP clone FGC細(xì)胞、U-266 AR1細(xì)胞、LS-174T細(xì)胞
H1105細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CHP 126細(xì)胞、SW579細(xì)胞、D-324MED細(xì)胞
Hs 695T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3/NS1/1-Ag4-1細(xì)胞、L-6細(xì)胞、Hos TE-85細(xì)胞
Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hep-3B細(xì)胞、KM12 SM細(xì)胞、HEK293E細(xì)胞
OCI-AML3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC0078細(xì)胞、UPCI:SCC90細(xì)胞、P3X63Ag8.653細(xì)胞
A7r5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKCol1細(xì)胞、HuH6細(xì)胞、NCI-H64細(xì)胞
Chang liver細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：COS-7細(xì)胞、IB-RS2細(xì)胞、L-6TG細(xì)胞
NCI-441細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SGC-996細(xì)胞、HCC-1569細(xì)胞、A 253細(xì)胞
P560細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HuT-78細(xì)胞、H889細(xì)胞、OVCAR-10細(xì)胞
Hs.27細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-526細(xì)胞、Hs 578Bst細(xì)胞、Nb 2細(xì)胞
COV504細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H341細(xì)胞、Rh30細(xì)胞、Hs 27細(xì)胞
SCC 25細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1650細(xì)胞、hESC細(xì)胞、PAN 02細(xì)胞
Gerner 7666細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 821.T細(xì)胞、RT 112細(xì)胞、HEK 293A細(xì)胞
hADSCs細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CLONE M3細(xì)胞、MESSA Dx5細(xì)胞、J82COT細(xì)胞
HT(H9)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Jurkat E6-1細(xì)胞、PLA-801C細(xì)胞、CG-4細(xì)胞
Jurkat clone A3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LL/2 (LLC1)細(xì)胞、RTMC細(xì)胞、RIN m5F細(xì)胞
MC-116細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SBC3細(xì)胞、NPA87-1細(xì)胞、H-510細(xì)胞
RPMI2650細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H747細(xì)胞、HEC-1-A細(xì)胞、HS688AT細(xì)胞
GM02219C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MCF 10A細(xì)胞、Lec1細(xì)胞、RD 2細(xì)胞
PNT1A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPE-1細(xì)胞、HCCLM6細(xì)胞、HLEC-SRA 01/04細(xì)胞
JURKAT E-6.1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MEL細(xì)胞、NCIH647細(xì)胞、Balb/c3T3細(xì)胞
MCCAR細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TGHAVSMC細(xì)胞、U266 B1細(xì)胞、H1437細(xì)胞
3LL細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HT-22細(xì)胞、PA-TU S細(xì)胞、SH-SY5Y Parental細(xì)胞
MTEC1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC-1833細(xì)胞、SK ES 01細(xì)胞、N9細(xì)胞
COLO 201細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Madin Darby Canine Kidney細(xì)胞、IOSE80細(xì)胞、HLEC-SRA 01/04細(xì)胞
Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：AGS細(xì)胞、HCEC細(xì)胞、RMS13細(xì)胞
U373細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH441細(xì)胞、NCI/ADR-RES細(xì)胞、H650細(xì)胞
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