"NK-92MI細(xì)胞:人惡性非霍奇金淋巴瘤患者NK細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料:NK細(xì)胞;淋巴瘤;男性
細(xì)胞形態(tài):淋巴母細(xì)胞樣
細(xì)胞生長:懸浮
細(xì)胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細(xì)胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
細(xì)胞來源說明:細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
細(xì)胞生長特性:懸浮
細(xì)胞培養(yǎng)方面注意的幾點:無菌意識要強:實驗進(jìn)行前,超凈臺以紫外燈照射30分鐘滅菌,以70%ethanol擦拭無菌操作抬面,并開啟超凈工作臺風(fēng)扇運轉(zhuǎn)數(shù)分鐘后,才開始實驗操作。每次操作只處理一株細(xì)胞株,以避免失誤混淆或細(xì)胞間污染。實驗完畢后,將實驗物品帶出工作臺,以70%ethanol擦拭無菌操作抬面。無菌操作工作區(qū)域應(yīng)保持清潔及寬敞,必要物品,例如支架、吸管等公用物品可以暫時放置,其它個人實驗用品用完應(yīng)立即拿出。實驗用品以70%乙醇擦拭后才帶入無菌操作臺內(nèi)。實驗操作應(yīng)在中央無菌區(qū)域,一般勿在邊緣區(qū)域操作。小心取用無菌之實驗物品,避免造成污染。勿碰觸吸管尖頭部或是容器瓶口,亦不要在打開之容器正上方操作實驗。容器打開后,以手夾住瓶蓋并握住瓶身,傾斜約45°角取用,盡量勿將瓶蓋蓋口朝上放置桌面。選擇正確的培養(yǎng)基:不同的細(xì)胞可能培養(yǎng)基不同,甚至不同的文獻(xiàn)可能對相同的細(xì)胞培養(yǎng)基成分也是可能不同的。如我當(dāng)時培養(yǎng)神經(jīng)干細(xì)胞,有文獻(xiàn)就選用neurobase培養(yǎng)基,而我的實驗?zāi)康闹饕亲隹寡趸脱趸矫娴?,而這種培養(yǎng)基中含有抗氧化劑成分,此時,我就不得不選擇另外一種不含抗氧化劑的培養(yǎng)基。瓶裝血清一定要逐步解凍:4℃冰箱全溶后再分裝,在溶解過程中須規(guī)則搖晃均勻(小心勿造成氣泡),使溫度與成分均一,減少沉淀的發(fā)生。勿直接由–20℃直接至37℃解凍,因溫度改變太大,容易造成蛋白質(zhì)凝結(jié)而發(fā)生沉淀。熱滅活是指56℃,30分鐘加熱已完全解凍之血清。水浴鍋升到56℃后,將血清放入,待溫度升高到56℃后計時,一般5分鐘左右規(guī)則搖晃均勻一次。此熱處理之目的是使血清中之補體成份去活化。除非必須,一般不要作此熱處理,因為會造成沉淀物之顯著增多,且會影響血清之品質(zhì)。注意更換新血清(包括不同批次)對細(xì)胞的影響。
貼壁細(xì)胞傳代實驗準(zhǔn)備事項:將15mL離心管、T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶、PBS緩沖液、移液管、電動移液器等物品提前放入生物安全柜中,紫外照射30min消毒滅菌;細(xì)胞完全培養(yǎng)基、0.25%胰酶-0.02%EDTA從4℃冰箱中取出后,復(fù)溫至室溫,備用。貼壁細(xì)胞傳代實驗步驟:將準(zhǔn)備好的培養(yǎng)基等物品用酒精消毒后放入安全柜中;從培養(yǎng)箱中取出待處理的細(xì)胞,在顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài);用酒精消毒培養(yǎng)瓶,放入安全柜中;輕輕吸去細(xì)胞上清;加入2~3ml(PBS緩沖液)潤洗一次,吸去上清;加入1mL(0.25%胰酶-0.02%EDTA),輕輕晃勻、覆蓋所有細(xì)胞后,置于37℃培養(yǎng)箱靜置消化;消化1min左右,在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況;消化完全后,加3ml完全培養(yǎng)基終止;按比例將細(xì)胞懸液分裝至培養(yǎng)瓶中;在顯微鏡下觀察傳代后的細(xì)胞密度及狀態(tài);將培養(yǎng)瓶放入培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。注意事項:培養(yǎng)過程中需維持細(xì)胞處于對數(shù)生長期,80%左右即可傳代,傳代比例請參照說明書建議;消化時間不宜過長,大部分細(xì)胞回縮變圓并有少量細(xì)胞脫落即可中止消化,難消化的細(xì)胞可分次消化,每次時間不超過5min;培養(yǎng)過程中需要定期換液,一般細(xì)胞建議2~3天換液一次。
細(xì)胞培養(yǎng)相關(guān)問題總結(jié):冷凍管應(yīng)如何解凍?取出冷凍管后,須立即放入37°C水槽中快速解凍,輕搖冷凍管使其在1分鐘內(nèi)全部融化,并注意水面不可超過冷凍管蓋沿,否則易發(fā)生污染情形。另冷凍管由液氮桶中取出解凍時,必須注意安全,預(yù)防冷凍管之爆裂;細(xì)胞冷凍管解凍培養(yǎng)時,是否應(yīng)馬上去除DMSO?除少數(shù)特別注明對DMSO敏感之細(xì)胞外,絕大部分細(xì)胞株(包括懸浮性細(xì)胞),在解凍之后,應(yīng)直接放入含有10-15ml新鮮培養(yǎng)基之培養(yǎng)角瓶中,待隔天再置換新鮮培養(yǎng)基以去除DMSO 即可,如此可避免大部分解凍后細(xì)胞無法生長或貼附之問題;可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基?不能。每一細(xì)胞株均有其特定使用且已適應(yīng)之細(xì)胞培養(yǎng)基,若驟然使用和原先提供之培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基,細(xì)胞大都無法立即適應(yīng),造成細(xì)胞無法存活;可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之血清種類?不能。血清是細(xì)胞培養(yǎng)上一個極為重要的營養(yǎng)來源,所以血清的種類和品質(zhì)對于細(xì)胞的生長會產(chǎn)生極大的影響。來自不同物種的血清,在一些物質(zhì)或分子的量或內(nèi)容物上都有所不同,血清使用錯誤常會造成細(xì)胞無法存活;培養(yǎng)細(xì)胞時應(yīng)使用5%或10%CO2?或根本沒有影響?一般培養(yǎng)基中大都使用HCO3-/CO32-/H+作為pH的緩沖系統(tǒng),而培養(yǎng)基中NaHCO3的含量將決定細(xì)胞培養(yǎng)時應(yīng)使用的CO2濃度。當(dāng)培養(yǎng)基中NaHCO3含量為每公升3.7g時,細(xì)胞培養(yǎng)時應(yīng)使用10%CO2;當(dāng)培養(yǎng)基中NaHCO3為每公升1.5g時,則應(yīng)使用5%CO2培養(yǎng)細(xì)胞。何時須更換培養(yǎng)基?視細(xì)胞生長密度而定,或遵照細(xì)胞株基本數(shù)據(jù)上之更換時間,按時更換培養(yǎng)基即可。培養(yǎng)基中是否須添加抗生素?除于特殊篩選系統(tǒng)中外,一般正常培養(yǎng)狀態(tài)下,培養(yǎng)基中不應(yīng)添加任何抗生素。
RMS1598細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH1355細(xì)胞、T2細(xì)胞、Ramos 1細(xì)胞
SK-N-BE(2)-C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HOS (TE85)細(xì)胞、HCC 2185細(xì)胞、PL9細(xì)胞
HNSC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCASMC細(xì)胞、MDAMB435S細(xì)胞、HEL細(xì)胞
P 815細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SPCA1細(xì)胞、SNU354細(xì)胞、EU-3細(xì)胞
138 MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC-9724細(xì)胞、A-204細(xì)胞、C2BBe1細(xì)胞
MM.1S細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC-1419細(xì)胞、C-4I細(xì)胞、F36P細(xì)胞
293-EBNA1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NS-1-Ag4-1細(xì)胞、RAW264.7細(xì)胞、Blotchy fibroblast-11細(xì)胞
KMS-11細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NOR10細(xì)胞、NCIH2106細(xì)胞、BT細(xì)胞
SMC-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM07404A細(xì)胞、FRTL5細(xì)胞、Caki-2細(xì)胞
SaOS-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:A2058細(xì)胞、HO8910PM細(xì)胞、LNCaP-FGC細(xì)胞
KYSE180細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RSC-96細(xì)胞、SU4細(xì)胞、JROECL21細(xì)胞
NTC200細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUPB15細(xì)胞、SK-ES細(xì)胞、P815細(xì)胞
H-1404細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPMI.8226細(xì)胞、CCC-HSF-1細(xì)胞、HTR-8細(xì)胞
MDA-MB231細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SF-126細(xì)胞、NCI-H1184細(xì)胞、TW-039細(xì)胞
BALB 3T3 clone A31細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MG-63細(xì)胞、PL45細(xì)胞、TM-3細(xì)胞
SK-N-BE(2)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H2023細(xì)胞、NEC8細(xì)胞、CALU 1細(xì)胞
SK-N-BE(2)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H2023細(xì)胞、NEC8細(xì)胞、CALU 1細(xì)胞
JURKAT E-6.1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MEL細(xì)胞、NCIH647細(xì)胞、Balb/c3T3細(xì)胞
TE10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:V-79-4細(xì)胞、GM12878細(xì)胞、MPC5細(xì)胞
32D.3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TKB-1細(xì)胞、Hs 636.T細(xì)胞、Capan1細(xì)胞
MNNG-HOS (TE 85, clone F-5)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SHP-77細(xì)胞、JF305細(xì)胞、SKMEL28細(xì)胞
OCIAML4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NG10815細(xì)胞、A2780/Taxol細(xì)胞、3T3 clone A31細(xì)胞
DAN-G細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:aNK細(xì)胞、MC 3T3-E1細(xì)胞、Ramos-2G6-4C10細(xì)胞
CCD 841 CoTr細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO-320HSR細(xì)胞、CHP212細(xì)胞、C3H-10T1/2細(xì)胞
SK-RC 42細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW 13細(xì)胞、Hs 870.T細(xì)胞、USMC細(xì)胞
ReNcell CX細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HM06.A1細(xì)胞、U251MG細(xì)胞、P3-x63-Ag8 653細(xì)胞
CCD841CoN細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Molm 14細(xì)胞、Hep2細(xì)胞、Hs742T細(xì)胞
S3-HeLa細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hi-five細(xì)胞、RPTEC/TERT 1細(xì)胞、HNTEC細(xì)胞
NMCG1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HBVSMC細(xì)胞、SaOS-2細(xì)胞、HEK-EBNA細(xì)胞
KASUMI1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:9L細(xì)胞、Tca-8113細(xì)胞、NCI-H295R細(xì)胞
WM-115細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH1944細(xì)胞、MHHCALL2細(xì)胞、SK-BR-3細(xì)胞
TE-3A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO 741細(xì)胞、GM06141B細(xì)胞、SuperTube細(xì)胞
SUDHL-10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDCC-MSB-1細(xì)胞、HPAC細(xì)胞、MDA-MB415細(xì)胞
A549 ATCC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ECC1細(xì)胞、NCI-H2023細(xì)胞、NCIH2122細(xì)胞
LIM-1215細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PANC0327細(xì)胞、CEMx721.174.T2細(xì)胞、GM00637F細(xì)胞
T98細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUPB-15細(xì)胞、CF PAC-1細(xì)胞、MV-4-11細(xì)胞
T98細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUPB-15細(xì)胞、CF PAC-1細(xì)胞、MV-4-11細(xì)胞
SK ES 01細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MKN45細(xì)胞、PSN-1細(xì)胞、NCI-H1385細(xì)胞
S3-HeLa細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hi-five細(xì)胞、RPTEC/TERT 1細(xì)胞、HNTEC細(xì)胞
NRK-49F細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-MEL 28細(xì)胞、SK-N-BE細(xì)胞、MCCAR細(xì)胞
HKBML細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HL-1細(xì)胞、8226細(xì)胞、SW 962細(xì)胞
MLFC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Murine Carcinoma-38細(xì)胞、Karpas422細(xì)胞、MM1細(xì)胞
SKNSH細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVCAR 432細(xì)胞、Pfeiffer細(xì)胞、AR41P細(xì)胞
MGH-U3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RC-K8細(xì)胞、AR4-2J細(xì)胞、PANC1005細(xì)胞
BC-025細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ramos G6.C10細(xì)胞、Human Microglia Clone 3細(xì)胞、NCI-H748細(xì)胞
Lewis lung carcinoma line 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA157細(xì)胞、IPEC-1細(xì)胞、SNU119細(xì)胞
H865細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEK 293FT細(xì)胞、B16F0細(xì)胞、R-1059-D細(xì)胞
UT7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MEG01細(xì)胞、TE-671細(xì)胞、T/GHA-VSMC細(xì)胞
MAD109細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Karpas422細(xì)胞、S16細(xì)胞、Hs-940細(xì)胞
HEK (AD293)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:WI 38細(xì)胞、HT 1197細(xì)胞、BAEC細(xì)胞
NCI-747細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ramos-2G6-4C10細(xì)胞、CHG5細(xì)胞、FRO81-2細(xì)胞
HANK1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MCA-38細(xì)胞、H-1781細(xì)胞、NCI-H322細(xì)胞
HCC2108細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BNCL2細(xì)胞、MXI細(xì)胞、SW1783細(xì)胞
L132細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW 579細(xì)胞、UCLA SO M14細(xì)胞、SK-LMS-1細(xì)胞
Oregon J-111細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RGC6細(xì)胞、hTERT-HME1細(xì)胞、ARIP細(xì)胞
NIH-3T3-L1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Sup T-1細(xì)胞、B4G12細(xì)胞、RM1細(xì)胞
T241細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:JeKo 1細(xì)胞、VMCUB1細(xì)胞、MRC5細(xì)胞
PNEC30細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ly7細(xì)胞、FHC細(xì)胞、BCPAP細(xì)胞
130T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:L 132細(xì)胞、HuPT4細(xì)胞、F81細(xì)胞
MILE SVEN 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:AN3 CA細(xì)胞、Ha Fe細(xì)胞、GM04154細(xì)胞
RWPE-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:C 643細(xì)胞、SF-539細(xì)胞、NT2D1細(xì)胞
293GP細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BT.549細(xì)胞、H-23細(xì)胞、R3/1細(xì)胞
mousepodocyte細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HH [Human lymphoma]細(xì)胞、Menschliche Und Tierische Zellkulture-3細(xì)胞、MCA-38細(xì)胞
H1770細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-209細(xì)胞、HuH1細(xì)胞、Ku812細(xì)胞
PAMC82細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:mousepodocyte細(xì)胞、RIN14B細(xì)胞、Homo sapiens No. 578, tumor cells細(xì)胞
CDC/EU.HMEC-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH2227細(xì)胞、SKN-SH細(xì)胞、NCI-H209細(xì)胞
Hs 445細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OP9細(xì)胞、TK.10細(xì)胞、H-1963細(xì)胞
DMS-273細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs840_T細(xì)胞、2780細(xì)胞、201T細(xì)胞
NCI-H774細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:UMUC14細(xì)胞、BE2_C細(xì)胞、CCC-HEL-1細(xì)胞
38C-13細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MAVER細(xì)胞、HT-3細(xì)胞、U343細(xì)胞
BIU87細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H2591細(xì)胞、NIH3T3-L1細(xì)胞、PNT1-a細(xì)胞
Caco-2/ATCC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1944細(xì)胞、D324 Med細(xì)胞、CMT 167細(xì)胞
HNEpC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Jurkat-77細(xì)胞、HeLa/S3細(xì)胞、Cates 1B細(xì)胞
KHYG-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:T98細(xì)胞、MHCC97細(xì)胞、NCIH1623細(xì)胞
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