"GM12878細胞:人B淋巴細胞系
細胞背景資料:B淋巴細胞;EBV轉化;女性
細胞形態(tài):淋巴母細胞樣
細胞生長:懸浮
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
細胞生長特性:懸浮
細胞傳代注意事項:①傳代培養(yǎng)時注意無菌操作并防止細胞間的交叉污染。所有操作盡量靠近酒精燈火焰。每次只進行一種細胞的操作。每種細胞使用一套器材;②每天觀察細胞形態(tài),掌握好細胞是否健康的標準:健康細胞的形態(tài)飽滿,折光性好,生長致密時即可傳代;③如發(fā)現(xiàn)細胞有污染跡象,應立即采取措施,一般應棄置污染的細胞,如果必須挽救,可加含有抗生素的BBS或培養(yǎng)基反復清洗,隨后培養(yǎng)基中加入較大量的抗生素,并經(jīng)常更換培養(yǎng)基。傳代細胞的建系和維持:細胞系的維持通過換液傳代再換液、再傳代和細胞種子凍存來實現(xiàn)。對每一個細胞系來說都有其自身的特點,要做好建系的維持必須記錄好細胞檔案,換液傳代和做好細胞系的管理工作。培養(yǎng)細胞的凍存及復蘇:細胞低溫凍存是培養(yǎng)室常規(guī)工作和通用技術。細胞凍存在-196℃液氮中,儲存時間幾乎是無限的。細胞凍存及復蘇的原則是慢凍快融。
有一些細胞是數(shù)量多一點比較好生長,生長狀態(tài)也比較好。這種一般是屬于生長速度慢的細胞。譬如內(nèi)皮細胞。而有一些是細胞是數(shù)量少一點細胞狀態(tài)會生長的比較好,譬如巨噬細胞和某些腫瘤細胞。尤其是巨噬細胞,生長速度非常得快,貼壁速度很快,所以傳代時就應該留很少量的細胞,這樣細胞狀態(tài)會比較好。并且巨噬細胞比較喜歡扎堆生長,而堆與堆之間是有空間的。如果長成相連在一起的一滿片的時候,細胞形態(tài)基本上就會差了,老化的會比較多,對后期實驗結果是不好的。所以在養(yǎng)細胞的時候應該摸索該細胞喜歡的生長空間密度問題。這個其實是有一個方法可以改善的。對于貼壁細胞,如果細胞形態(tài)不好,(或者細胞形態(tài)不清晰,表面似有異物等)可以在傳代的時候進行如下操作:首先,倒掉舊的培養(yǎng)基,加入3ml新的培養(yǎng)基(有無血清的都可)洗滌一次,用滴管吸走,然后再加入3ml的培養(yǎng)基,進行預吹打,控制吹打力度,輕輕地大概沿著瓶底過一遍,然后吸走。這時侯再開始正式的消化、吹打。(巨噬細胞建議只吹打,不消化)其次,把吹打下來的細胞懸液加入到新的培養(yǎng)瓶內(nèi),培養(yǎng)瓶事先加入培養(yǎng)基,放入培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng),按時間點觀察細胞貼壁情況。10分鐘觀察一次,20分鐘,30分鐘觀察一次。選擇一個時間點,已經(jīng)有部分細胞貼壁的情況下,重新置于潔凈臺,底面朝上迅速倒出其中的培養(yǎng)基,加入3ml新培養(yǎng)基再輕輕洗一次。然后加入完全培養(yǎng)基培養(yǎng)。后續(xù)觀察細胞生長情況以及形態(tài)。通常稱之為“二傳”。如果一次效果還不理想,可重復多次。直到找到細胞上乘形態(tài)。其中要注意,結合細胞喜歡的生長情況。喜歡多一點數(shù)量長得好的細胞你就等貼壁細胞比較多點的時候再傳。反之亦然。
細胞培養(yǎng)過程中相關問題總結:懸浮性細胞應如何繼代處理?一般僅需持續(xù)加入新鮮培養(yǎng)基于原培養(yǎng)角瓶中,稀釋細胞濃度即可,若培養(yǎng)液太多時,可將培養(yǎng)角瓶口端稍微抬高,直到無法容納為止。分瓶時取出一部份含細胞之培養(yǎng)液至另一新的培養(yǎng)角瓶,加入新鮮培養(yǎng)基稀釋至適當濃度,重復前述步驟即可。欲將一般動物細胞離心下來,其離心速率應為多少轉速?欲回收動物細胞,其離心速率一般為300xg(約1,000rpm),5-10分鐘,過高之轉速,將造成細胞死亡;細胞之接種密度為何?依照細胞株基本數(shù)據(jù)上之接種密度或稀釋分盤之比例接種即可。細胞數(shù)太少或稀釋的太多亦是造成細胞無法生長之一重要原因;細胞冷凍培養(yǎng)基之成份為何?動物細胞冷凍保存時最常使用的冷凍培養(yǎng)基是含5-10%DMSO(dimethyl sulfoxide)和90-95%原來細胞生長用之新鮮培養(yǎng)基均勻混合之。注意:由于DMSO稀釋時會放出大量熱能,故不可將DMSO直接加入細胞液中,必須使用前先行配制完成;DMSO之等級和無菌過濾之方式為何?冷凍保存使用之DMSO等級,必須為Tissue culture grade之DMSO,其本身即為無菌狀況,次開瓶后應立即少量分裝于無菌試管中,保存于4°C,避免反復冷凍解凍造成DMSO之裂解而釋出有害物質,并可減少污染之機會。若要過濾DMSO,則須使用耐DMSO之Nylon材質濾膜;冷凍保存細胞之方法?冷凍保存方法一:冷凍管置于4°C 30~60分鐘→ (-20°C 30分鐘)→-80°C 16~18小時(或隔夜)→液氮槽vaporphase長期儲存。冷凍保存方法二:冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3°C至–80°C以下,再放入液氮槽vapor phase長期儲存。-20°C不可超過1小時,以防止冰晶過大,造成細胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80°C冰箱中,惟存活率稍微降低一些;細胞欲冷凍保存時,細胞冷凍管內(nèi)應有多少細胞濃度?冷凍管內(nèi)細胞數(shù)目一般為1x10(6)cells/ml vial,融合瘤細胞則以5x10(6)cells/ml vial為宜;應如何避免細胞污染?細胞污染的種類可分成細菌、酵母菌、霉菌、病毒和霉?jié){菌。主要的污染原因為無菌操作技術不當、操作室環(huán)境不佳、污染之血清和污染之細胞等。嚴格之無菌操作技術、清潔的環(huán)境、與品質良好之細胞來源和培養(yǎng)基配制是減低污染之方法;如果細胞發(fā)生微生物污染時,應如何處理?直接滅菌后丟棄之。
UMRC-2細胞系相關產(chǎn)品:RBL細胞、NCI-H740細胞、CMT-93細胞
PLCPRF5細胞系相關產(chǎn)品:SCL-II細胞、QBC939細胞、L929(NCTC)細胞
GMK,BSC-1細胞系相關產(chǎn)品:TE 85 ClF-5細胞、HEK-AD293細胞、HARA-B細胞
NCI-HUT-520細胞系相關產(chǎn)品:P3J HR-1細胞、RS(4;11)細胞、MF2059細胞
NCI-H2081細胞系相關產(chǎn)品:NCI-H102細胞、Mouse podocyte細胞、Evsa-T細胞
PLA-801D細胞系相關產(chǎn)品:THP1細胞、PMVEC細胞、NCIH64細胞
UACC 812細胞系相關產(chǎn)品:RL-952細胞、VMM5細胞、Tu212細胞
NIH3T3-L1細胞系相關產(chǎn)品:KE 37細胞、Hs294細胞、HCC38細胞
Tu212細胞系相關產(chǎn)品:FOX-NY細胞、RT4P細胞、H-1436細胞
RCC-JF細胞系相關產(chǎn)品:HUVEC-C[HUVEC]細胞、T47D細胞、EFM19細胞
HS5細胞系相關產(chǎn)品:huH 1細胞、PLB985細胞、COLO829細胞
Colo320細胞系相關產(chǎn)品:PLC/PRF/5細胞、RBL-I細胞、TERT-RPE1細胞
CORL88細胞系相關產(chǎn)品:H-1819細胞、Vx2細胞、MESSA/Dx5細胞
Rainbow Trout Embryo細胞系相關產(chǎn)品:SupB15W細胞、BOWES細胞、TOG細胞
UPCISCC090細胞系相關產(chǎn)品:LA-4 [Mouse lung adenoma]細胞、2PK-3細胞、3T3F442A細胞
Hs695細胞系相關產(chǎn)品:NB4細胞、C-33-A細胞、M109細胞
Hs695細胞系相關產(chǎn)品:NB4細胞、C-33-A細胞、M109細胞
LS-180細胞系相關產(chǎn)品:COLO678細胞、ABC1細胞、K1735細胞
COLO-16細胞系相關產(chǎn)品:OUMS27細胞、P3-X63-Ag8.653細胞、SW900細胞
JB6 Cl 30細胞系相關產(chǎn)品:MD Anderson-Metastatic Breast-435細胞、HEY-A8細胞、NCIH1184細胞
Huh-7.5.1細胞系相關產(chǎn)品:L-cells細胞、NPA87細胞、SMA-560細胞
HMEC細胞系相關產(chǎn)品:BE(2)-M17細胞、SKGT4細胞、QGP 1細胞
HuPT3細胞系相關產(chǎn)品:LU165細胞、624-mel細胞、COLO-738細胞
NTERA2D1細胞系相關產(chǎn)品:MARC145細胞、MGH-U3細胞、H2195細胞
BHK細胞系相關產(chǎn)品:TEC細胞、I90細胞、H2085細胞
Bovine Turbinate細胞系相關產(chǎn)品:MARC-145細胞、TCC-PAN2細胞、RPMI-1846細胞
HCM細胞系相關產(chǎn)品:HEK-AD293細胞、AG 9細胞、WIL2-S細胞
NBL_S細胞系相關產(chǎn)品:KCL22細胞、HEK.EBNA細胞、Ocular Choroidal Melanoma-1細胞
6-10B細胞系相關產(chǎn)品:SK-ChA-1細胞、OVCA8細胞、SU-86-86細胞
HL60細胞系相關產(chǎn)品:MT-3 [Human leukocytes]細胞、Farage細胞、MDA MB 436細胞
HNE-3細胞系相關產(chǎn)品:SK ES 01細胞、SK 1細胞、HOS-MNNG細胞
A549/DDP細胞系相關產(chǎn)品:NCI-H2029細胞、SW 948細胞、COLO320 DM細胞
HSMC細胞系相關產(chǎn)品:NCI-HUT-596細胞、Kasumi-1細胞、NCI-SNU-C2A細胞
MDA-1386細胞系相關產(chǎn)品:786-0細胞、VMM-5A細胞、SK BR 03細胞
WM 239-A細胞系相關產(chǎn)品:BCP1細胞、H-2106細胞、TE353.SK細胞
H-1869細胞系相關產(chǎn)品:Tb 1-Lu細胞、ES2細胞、EoL-1細胞
SNU484細胞系相關產(chǎn)品:Hs819T細胞、NCIH64細胞、OV-2008細胞
COLO 357細胞系相關產(chǎn)品:MB-49細胞、PC 61-5-3細胞、AR42J細胞
CL1.0細胞系相關產(chǎn)品:COR-L 105細胞、M14-MEL細胞、MMAc-Serum Free細胞
Oka-C1細胞系相關產(chǎn)品:H-719細胞、NCI-H322細胞、HHFK細胞
SW839細胞系相關產(chǎn)品:RC-2細胞、Kit 225 K6細胞、SNU182細胞
CF-PAC1細胞系相關產(chǎn)品:NCIH2452細胞、P30/Ohkubo細胞、NCC-IT細胞
IPLB-SF 21細胞系相關產(chǎn)品:HITT15細胞、RIN Cl-5F細胞、CLL-CII細胞
8226/S細胞系相關產(chǎn)品:LCD細胞、HCC-4006細胞、293細胞
HTR8細胞系相關產(chǎn)品:JHH2細胞、Farage OL細胞、HDQP1細胞
LS-174細胞系相關產(chǎn)品:OLN-93細胞、NCI-H1703細胞、HCC-2279細胞
Hs 746.T細胞系相關產(chǎn)品:SK_N_BE2C細胞、U87 MG細胞、Pt K2 (NBL-5)細胞
210RCY3-Ag1.2.3細胞系相關產(chǎn)品:C32 [Human melanoma]細胞、QSG-7701細胞、NCIH650細胞
SBC-5細胞系相關產(chǎn)品:SACC-LM細胞、Soleus clone 8細胞、253J-Bladder-V細胞
SUDHL10細胞系相關產(chǎn)品:CV-1 in Origin Simian-7細胞、B16 BL6細胞、SW1271細胞
PC-3M-2B4細胞系相關產(chǎn)品:GBC-SD細胞、HUT125細胞、Jurkat77細胞
OVCAR432細胞系相關產(chǎn)品:LU-65M細胞、Malme-3M細胞、H-2030細胞
hUC-MSC細胞系相關產(chǎn)品:NCIH378細胞、CHO-ori細胞、MXI細胞
Hs 819.T細胞系相關產(chǎn)品:MPVECs細胞、NU-GC-3細胞、M3 Clone M-3細胞
Hs 895 T細胞系相關產(chǎn)品:CP-70細胞、THP-1細胞、MLTC-1細胞
Melan-a細胞系相關產(chǎn)品:HCC15細胞、HNE1細胞、HPAF-2細胞
Melan-a細胞系相關產(chǎn)品:HCC15細胞、HNE1細胞、HPAF-2細胞
WM-239A細胞系相關產(chǎn)品:KYSE 410細胞、BRL-3A細胞、Mel-624細胞
H1417細胞系相關產(chǎn)品:Jiyoye細胞、GM03671C細胞、GM2131細胞
293c18細胞系相關產(chǎn)品:NCIH23細胞、UO31細胞、BC-023細胞
A.704細胞系相關產(chǎn)品:HEK293-EBNA細胞、16HBE140細胞、HSC-2細胞
CAL-51細胞系相關產(chǎn)品:WEHI 164細胞、HMVEC細胞、MC3T3細胞
SW 13細胞系相關產(chǎn)品:CCD18Co細胞、UMUC-14細胞、CAOV4細胞
SW 982細胞系相關產(chǎn)品:Danio rerio Gill細胞、UWB1.289細胞、WERI-Rb 1細胞
MUTZ-1細胞系相關產(chǎn)品:SKM1細胞、HEK293-EBNA細胞、HIT-T15細胞
MFHL-2細胞系相關產(chǎn)品:Normal fibroblast-10細胞、KLN205細胞、H-2198細胞
SuDHL 2細胞系相關產(chǎn)品:DH 82細胞、Ly7細胞、H378細胞
brain-derived Endothelial cells.3細胞系相關產(chǎn)品:NH-6細胞、RPMI 7951細胞、OCI-Ly 3細胞
RPE1細胞系相關產(chǎn)品:WM 266-4細胞、H-2195細胞、CCD-112 CoN細胞
Intestinal Porcine Epithelial細胞:-1細胞系相關產(chǎn)品:OVCAR-5細胞、A-101D細胞、FCCH1018細胞
Cloudman S91 melanoma clone M-3細胞系相關產(chǎn)品:451Lu細胞、MCF-7/ADR細胞、REC 1細胞
NCIH747細胞系相關產(chǎn)品:SK Mel 1細胞、E.G7-OVA細胞、HUC-1細胞
GM637細胞系相關產(chǎn)品:OCI-Ly19細胞、NCI-H1563細胞、MLE 12細胞
Rat Lung-65細胞系相關產(chǎn)品:SU-DHL-1細胞、H-508細胞、TE-85 clone 5細胞
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