"HuT 78細胞:人T淋巴瘤細胞系
細胞背景資料:皮膚;T淋巴瘤;男性
細胞形態(tài):淋巴母細胞樣
細胞生長:懸浮
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
細胞產品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數國外著名大學建系
細胞生長特性:懸浮
常見培養(yǎng)細胞預防污染的有效措施:體外培養(yǎng)的細胞受到嚴重污染時,有時即使想盡各種辦法也難以挽回。因此,防止污染,預防是關鍵。只有將預防措施貫穿于整個細胞培養(yǎng)的始終,才能將發(fā)生污染的可能性降到最小程度。一般預防可從以下幾方面著手:1)添加抗生素:各種抗生素性質不同,對各種微生物的作用也不同,聯(lián)合應用比單用效果好,預防性應用比污染后使用好(但迄今尚無對抗支原體特效抗生素)。但反復使用抗生素會使微生物產生耐藥性,且對細胞本身也有一定影響,因此為避免誘導抗藥細菌,應定期更換培養(yǎng)系統(tǒng)中的抗生素,或盡可能不用抗生素處理;2)從物品、用品消毒滅菌著手:細胞培養(yǎng)所用物品清洗、消毒要徹底,各種溶液滅菌除菌要仔細,并在取樣檢菌一周后確認無菌才能使用。同時,在無菌過濾操作中,隨著濾過體積的增大,濾膜破損的可能性增加,故應選擇最后過濾的液體進行檢測。定期對二氧化碳培養(yǎng)箱進行消毒。具體操作:75%的酒精搽拭培養(yǎng)箱后,使用可移動的紫外燈至少消毒30min,加入高壓滅菌過的超純水于培養(yǎng)箱水槽中保持濕度。也可配制300ml的飽和酸銅加3L滅菌超純水混合成酸銅溶液加入水槽中。
可以這樣說,對于需要消化傳代的細胞,每一次的消化都是對這個細胞存活與否,狀態(tài)好與不好至關重要的考驗。很多同學都遇到過這個問題,自己養(yǎng)的細胞開始的幾代長的還挺好的,可是穿過幾代之后就發(fā)現(xiàn)自己的細胞不行了,狀態(tài)越來越差勁了。對于這個問題,可以非??隙ǖ卣f,你的消化環(huán)節(jié)出問題了。你每一次的消化都讓細胞受到較大損傷了。所以,越長越差。在消化的過程中,你加入胰酶后,所有細胞都在被胰酶消化著,但是我們忽視了一個問題就是,細胞的生長狀態(tài)是不一樣的,每一個細胞的貼壁情況也是不一樣的,有的貼壁牢固,有的貼壁沒有那么牢固的,所以,讓所有的細胞消化同樣的時間對細胞是不公平的,他們受到了差別待遇當然會有脾氣的,大家爭取做到因材施教,比如試試下面的“四步消化法”。(以難消化細胞為例),具體操作:1)首先不加胰酶,倒掉舊培養(yǎng)基加入少量新培養(yǎng)基洗1-2遍(目的是將漂浮著的死細胞之類盡量洗掉)。2)然后再加入少量新培養(yǎng)基直接吹打一遍,這一遍是把貼壁不牢固的細胞吹打下來。再用培養(yǎng)基洗一遍,兩次所得懸液混合傳入新瓶。(你可以將這些傳入新瓶培養(yǎng),以與后面胰酶消化過的細胞對比觀察看誰長的更好一點就知道該細胞對胰酶的敏感度了)3)吸干凈瓶內剩余液體,加入0.3ml左右的胰酶潤洗一遍,吸掉棄之,再加入1ml左右的胰酶消化。消化的同時置于顯微鏡下觀察,待細胞與細胞之間間隙明顯的時候立即吸掉胰酶,加入新培養(yǎng)基開始吹打,吹打2-3遍后吸取懸液于試管或新瓶暫存。用2ml左右新培養(yǎng)基洗一遍與前面的混合。(也可以傳入新瓶培養(yǎng),以與后面及前面的做對比)4)然后把前面剛吸出來的胰酶重新加進去瓶里繼續(xù)消化剩余的貼壁牢固的細胞。當然你也可以用新的胰酶,如果你們那比較富裕的話,繼續(xù)鏡下觀察,待剩余細胞間隙明顯,細胞獨立開來的時候,吸掉胰酶,加入新培養(yǎng)基吹打。懸液傳入新瓶培養(yǎng)(根據實際情況把握)。
細胞培養(yǎng)實驗相關問題總結:支原體(mycoplasma)污染的細胞,是否能以肉眼觀察出異狀?不能。除極有經驗之專家外,大多數遭受支原體污染的細胞株,無法以其外觀分辨之;支原體污染會對細胞培養(yǎng)有何影響?支原體污染幾乎可影響所有細胞之生長參數,代謝及研究之任一數據。故進行實驗前,必須確認細胞為mycoplasma-free,實驗結果之數據方有意義;偵測出細胞株有支原體污染時,該如何處理?直接滅菌后丟棄,以避免污染其它細胞株;CO2培養(yǎng)箱之水盤如何保持清潔?定期(至少每兩周一次) 以無菌蒸餾水或無菌去離子水更換之;為何培養(yǎng)基保存于4°C冰箱中,顏色會偏暗紅色,且pH值會越來越偏堿性?培養(yǎng)基保存于4°C冰箱中,培養(yǎng)基內之CO2會逐漸溢出,造成培養(yǎng)基越來越偏堿性。而培養(yǎng)基中之酸堿指示劑(通常為phenol red)的顏色也會隨堿性增加而更偏暗紅。培養(yǎng)基偏堿之結果,將造成細胞生長停滯或死亡。若培養(yǎng)基偏堿時,可以通入無菌過濾之CO2,以調整pH值;購買之細胞冷凍管經解凍后,為何會發(fā)生細胞數目太少之情形?研究人員在冷凍細胞之培養(yǎng)時出現(xiàn)細胞數目太少,大都是因為離心過程操作上的失誤,造成細胞的物理性損傷,以及細胞流失。建議細胞解凍后不要立刻離心,應待細胞生長隔夜后再更換培養(yǎng)基即可;購買之細胞死亡或細胞存活率不佳可能原因?研究人員在細胞培養(yǎng)時出現(xiàn)存活率不佳,常見原因可歸納為:培養(yǎng)基使用錯誤或培養(yǎng)基品質不佳。血清使用錯誤或血清的品質不佳。解凍過程錯誤。冷凍細胞解凍后,加以洗滌細胞和離心。懸浮細胞誤認為死細胞。培養(yǎng)溫度使用錯誤。細胞置于–80°C太久;收到之冷凍管瓶身破裂,瓶蓋有裂紋,或瓶蓋脫落之原因?冷凍管瓶蓋裂紋,或瓶身破裂,可能是因為操作者夾取冷凍管時用力不當,造成冷凍管裂損,建議使用止血鉗小心夾取。另冷凍管瓶蓋松動或松脫,乃因熱脹冷縮之物理現(xiàn)象,冷凍管有可能因此而造成細胞污染,故冷凍管于放入和取出液氮桶時,均應立刻將冷凍管再一次扭緊。
A-101D細胞系相關產品:OCI/AML-3細胞、FRTL-5 Cl 2細胞、TE-15細胞
BC-019細胞系相關產品:OVCAR 8細胞、VMRC-RCZ細胞、Jurkat細胞
Molm 13細胞系相關產品:NTERA2-cloneD1細胞、PNT1/A細胞、SK-NSH細胞
HCCC-9810細胞系相關產品:ES2細胞、CAL-148細胞、MDA-MB-231細胞
NK92細胞系相關產品:HSC5細胞、PC-9/S1細胞、N1S1細胞
HITT15細胞系相關產品:CNE-1細胞、Lu-65細胞、HR-1細胞
Ca759細胞系相關產品:130T細胞、C3H10T1/2CL8細胞、OAC-P4C細胞
UCLA SO M14細胞系相關產品:H-220細胞、CEF細胞、C2BBe 1細胞
HCT116/L細胞系相關產品:PANC 1005細胞、LAC細胞、U-2-OS細胞
KTA7細胞系相關產品:NuTu-19細胞、M07e細胞、QGY7701細胞
CEM clone 7細胞系相關產品:NKM-1細胞、BTI-TN5B1-4細胞、SW-620細胞
C4-2 Bone metastatic細胞系相關產品:H-82細胞、SW-527細胞、NBL-7細胞
TMD8細胞系相關產品:UMNSAH/DF-1細胞、H-1915細胞、SNU387細胞
NOR-10細胞系相關產品:ROS-17/2.8細胞、H146細胞、SKNFI細胞
GM-346細胞系相關產品:OVHM細胞、KM H-2細胞、NBLS細胞
LK-2細胞系相關產品:RAEC細胞、COLO 829細胞、A1847細胞
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N87細胞系相關產品:HDSMC細胞、Th17細胞、L-M(TK-)細胞
OCI/AML4細胞系相關產品:SK-N-BE-2c細胞、MPC11細胞、OCI/AML4細胞
MUTZ-3細胞系相關產品:H1915細胞、NCIH1734細胞、DV-90細胞
E304細胞系相關產品:SR-786細胞、3LL細胞、U138細胞
B958細胞系相關產品:J774A.1細胞、C4-2 Bone metastatic細胞、NCI-H2195細胞
Walker/LLC-WRC256細胞系相關產品:INS1-E細胞、CL1-0細胞、Vero 76 clone E-6細胞
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S-16細胞系相關產品:Hs578Bst細胞、Vero 76 clone E-6細胞、QGY 7701細胞
3T3-Swiss細胞系相關產品:SK Mel 24細胞、LIPF155C細胞、DMS-79細胞
SCL-II細胞系相關產品:C41細胞、LL/2(LLc1)細胞、CCFSTTG1細胞
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BNL.1ME A.7R.1細胞系相關產品:NCI-H740細胞、NCI-SNU-C1細胞、3T3-Swiss albino細胞
H647ell細胞系相關產品:SMMC-7721細胞、C3H10T1/2細胞、OCIAML4細胞
H-1373細胞系相關產品:HCO細胞、CHP 212細胞、MCFs細胞
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BE2M17細胞系相關產品:LLC-PK-1細胞、KU 19-19細胞、Ketr-3細胞
NCIH1930細胞系相關產品:Hs888Lu細胞、LLC1細胞、NCI-H676細胞
RBL細胞系相關產品:MMAc.SF細胞、NK92MI細胞、H747細胞
639V細胞系相關產品:Hs695T細胞、OPM2細胞、SUDHL-4細胞
Onda 11細胞系相關產品:SK-N-BE(2)C細胞、GM02219D細胞、COLO206細胞
MV3細胞系相關產品:TE7細胞、IHH-4細胞、RD-2細胞
P3 (Jiyoye)細胞系相關產品:hMSC-BM細胞、CCD-1095Sk細胞、B-95-8細胞
NCI-H87細胞系相關產品:7404細胞、RH-35細胞、COLO824細胞
Hs 606細胞系相關產品:L132細胞、NCI-H2081細胞、NTERA-2 clone D1細胞
ARO細胞系相關產品:2PK3細胞、MOLM-14細胞、A375.S2細胞
beta TC6細胞系相關產品:RPMI1788細胞、HUVEC-C[HUVEC]細胞、STTG1細胞
DR2R 1610細胞系相關產品:GNM細胞、DLD 1細胞、Panc2_03細胞
MC116細胞系相關產品:Hs839.T細胞、SCaBER細胞、IHHA-1細胞
Jurkat (clone E6-1)細胞系相關產品:SW756細胞、CEM-CCRF (CAMR)細胞、MOLT-16細胞
4-1st細胞系相關產品:Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-5細胞、HL 60細胞、NCI H548細胞
H341細胞系相關產品:MTEC1細胞、Radiation Effects Research Foundation-Lung Cancer-MS細胞、MDAMB435細胞
NHA細胞系相關產品:MPP-89細胞、CNE細胞、NIE 115細胞
MMAc.SF細胞系相關產品:PIEC細胞、NCIH2452細胞、CDC/EU.HMEC-1細胞
4T1-LUC細胞系相關產品:HEL-92.1.7細胞、BT-325細胞、H650細胞
KTC1細胞系相關產品:VMM39細胞、3T3 Swiss Albino細胞、HCC-94細胞
T-84細胞系相關產品:SK-RC 39細胞、HCC1500細胞、BHP10-3細胞
MOLM13細胞系相關產品:CAL 85-1細胞、HCC-1954BL細胞、Hep-3B細胞
A-431細胞系相關產品:RL95-2細胞、Raji細胞、SKBR-3細胞
SKO3細胞系相關產品:143 B細胞、NCIH460細胞、CV-1 in Origin Simian-7細胞
CHP126細胞系相關產品:HC-11細胞、HCC2935細胞、LS174細胞
Centre Antoine Lacassagne-85-1細胞系相關產品:CHP-212細胞、Caco2BBe細胞、MDA330細胞
PIG3細胞系相關產品:HT 29細胞、786-O RCC細胞、JURKAT E-61細胞
DMS273細胞系相關產品:CF PAC-1細胞、CC-LP-I細胞、P-815細胞
C-26細胞系相關產品:NCI-SNU-878細胞、NS-1-Ag4-1細胞、J-774A.1細胞
NR8383細胞系相關產品:HAPI細胞、Vero from pool #76細胞、751-NA-15細胞
TE-9細胞系相關產品:DMS-79細胞、LIPF155C細胞、UCH-1細胞
Molm 13細胞系相關產品:NTERA2-cloneD1細胞、K422細胞、HCC-9724細胞
SW 837細胞系相關產品:WM-2664細胞、SW 837細胞、Caov-4細胞
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關鍵字: HuT 78細胞:人T淋巴瘤細胞系;
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