"Dami細(xì)胞：人巨核細(xì)胞白血病細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料：從一個(gè)巨核細(xì)胞白血病患者的血液建立了一株新的人類巨核細(xì)胞(Dami)。 此細(xì)胞懸浮生長(zhǎng)為主，倍增時(shí)間２４-３０小時(shí)。 至少８９%的細(xì)胞可與血小板糖蛋白(GP) lb and Ilb/llla及血型糖蛋白單克隆抗體反應(yīng)。 不與抗淋巴腺、單核細(xì)胞、粒性白細(xì)胞、巨噬細(xì)胞抗原的抗體反應(yīng)。 Dami細(xì)胞為研究巨核細(xì)胞生化及分化提供了極好的模型。
細(xì)胞形態(tài)：淋巴母細(xì)胞樣
細(xì)胞生長(zhǎng)：懸浮
細(xì)胞物種來(lái)源：人源或鼠源等其它物種來(lái)源
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細(xì)胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
細(xì)胞來(lái)源說(shuō)明：細(xì)胞主要來(lái)源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系
細(xì)胞生長(zhǎng)特性：懸浮為主，少量貼壁
細(xì)胞培養(yǎng)無(wú)菌操作的演示：凡是帶入超凈工作臺(tái)內(nèi)的酒精、PBS、培養(yǎng)基、胰蛋白酶的瓶子均要用７５％酒精擦拭瓶子的外表面；靠近酒精燈火焰操作。器皿使用前必須過(guò)火滅菌，繼續(xù)使用的器皿(如瓶蓋、滴管)要放在高處，使用時(shí)仍要過(guò)火。各種操作要靠近酒精燈，動(dòng)作要輕、準(zhǔn)確，不能亂碰。如吸管不能碰到廢液缸。吸取兩種以上的使用液時(shí)要注意更換吸管，防止交叉污染。玻璃器械洗消：一、新的玻璃器皿的洗消：自來(lái)水刷洗，除去灰塵。烘干、泡：烤箱中烘干，然后再浸入５％稀中１２小時(shí)以除去臟物、鉛、等物。刷洗、烘干：１２小時(shí)后立即用自來(lái)水沖洗，再用洗滌劑刷洗，自來(lái)水沖干凈后用烤箱烘干；泡酸、清洗：用清潔液浸泡１２小時(shí)，然后從酸缸內(nèi)撈出器皿用自來(lái)水沖洗１５次，最后蒸餾水沖洗３-５次和用雙蒸水過(guò)３次。烘干、包裝：洗干凈后先烘干，然后用牛皮紙(油光紙)包裝。高壓消毒：包裝好的器皿裝入高壓鍋內(nèi)蓋好蓋子，打開(kāi)開(kāi)關(guān)和安全閥，當(dāng)蒸氣成直線上升時(shí)，關(guān)閉安全閥，當(dāng)指針指向１５磅時(shí)，維持２０-３０分鐘。高壓消毒后烘干。二、舊的玻璃器皿的洗消：刷洗、烘干：使用過(guò)的玻璃器皿可直接泡入來(lái)蘇爾液或洗滌劑溶液中，泡過(guò)來(lái)蘇爾溶液(洗滌劑)的器皿要用清水刷洗干凈，然后烘干。泡酸、清洗：烘干后泡入清潔液(酸液)，１２小時(shí)后從酸缸內(nèi)撈出器皿立即用自來(lái)水沖洗(避免蛋白質(zhì)干涸后粘附于玻璃上難以清洗)，再用蒸餾水沖洗３次。烘干、包裝：洗干凈的器皿烘干后取出用牛皮紙(油光紙)等包裝。
貼壁細(xì)胞凍存注意事項(xiàng)：細(xì)胞凍存液需提前配制，不可直接將DMSO加入細(xì)胞懸液中；不同細(xì)胞消化時(shí)間有差異，以實(shí)際鏡檢結(jié)果為準(zhǔn)，大部分細(xì)胞回縮變圓并有少量細(xì)胞脫落即可中止消化，消化時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng)；應(yīng)選擇匯合度80%-90%左右，細(xì)胞處于對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期時(shí)進(jìn)行凍存操作，確保細(xì)胞凍存時(shí)狀態(tài)，凍存密度可根據(jù)細(xì)胞特性進(jìn)行調(diào)整；凍存細(xì)胞保存溫度應(yīng)低于-130℃，不可在-80℃長(zhǎng)期保存。貼壁細(xì)胞凍存操作步驟：從培養(yǎng)箱中取出準(zhǔn)備凍存的細(xì)胞；顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)并拍照記錄；酒精消毒培養(yǎng)瓶后放入安全柜中；吸去多余的培養(yǎng)基，加人2~3ml(PBS緩沖液)潤(rùn)洗一次；加入1ml胰酶，放入37℃消化；消化1min左右，在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況；消化完全后，加3ml完全培養(yǎng)基終止；將細(xì)胞懸液移入15ml離心管中離心，1000rpm/min（約200g）離心3-5min；吸去多余的液體，向細(xì)胞沉淀中加入適量的凍存液，輕輕吸打混勻；按比例分裝至凍存管中；貼好標(biāo)簽后放入梯度凍存盒中；將凍存盒放入-80℃，降溫過(guò)夜后，移入液氮中保存。貼壁細(xì)胞凍存實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備事項(xiàng)：將15mL離心管、凍存管、PBS緩沖液、移液管、電動(dòng)移液器等物品提前放入生物安全柜中，紫外照射30min消毒滅菌；細(xì)胞完全培養(yǎng)基、0.25%胰酶-0.02%EDTA、細(xì)胞凍存液等從4℃冰箱中取出后，復(fù)溫至室溫，備用；程序降溫盒復(fù)溫至室溫備用。
如何把細(xì)胞養(yǎng)的形態(tài)更好更漂亮。１.不同的細(xì)胞，喜歡的環(huán)境是不一樣的。這個(gè)不僅僅是說(shuō)培養(yǎng)基的不同，還有就是細(xì)胞生長(zhǎng)的空間密度問(wèn)題。有一些細(xì)胞是數(shù)量多一點(diǎn)比較好生長(zhǎng)，生長(zhǎng)狀態(tài)也比較好。這種一般是屬于生長(zhǎng)速度慢的細(xì)胞。譬如內(nèi)皮細(xì)胞。而有一些是細(xì)胞是數(shù)量少一點(diǎn)細(xì)胞狀態(tài)會(huì)生長(zhǎng)的比較好，譬如巨噬細(xì)胞和某些腫瘤細(xì)胞。尤其是巨噬細(xì)胞，生長(zhǎng)速度非常得快，貼壁速度很快，所以傳代時(shí)就應(yīng)該留很少量的細(xì)胞，這樣細(xì)胞狀態(tài)會(huì)比較好。并且巨噬細(xì)胞比較喜歡扎堆生長(zhǎng)，而堆與堆之間是有空間的。如果長(zhǎng)成相連在一起的一滿片的時(shí)候，細(xì)胞形態(tài)基本上就會(huì)差了，老化的會(huì)比較多，對(duì)后期實(shí)驗(yàn)結(jié)果是不好的。所以在養(yǎng)細(xì)胞的時(shí)候應(yīng)該摸索該細(xì)胞喜歡的生長(zhǎng)空間密度問(wèn)題。２.對(duì)于有些人總是會(huì)遇到養(yǎng)的細(xì)胞形態(tài)怎么都不好的問(wèn)題。這個(gè)其實(shí)是有一個(gè)方法可以改善的。對(duì)于貼壁細(xì)胞，如果細(xì)胞形態(tài)不好，（或者細(xì)胞形態(tài)不清晰，表面似有異物等）可以在傳代的時(shí)候進(jìn)行如下操作：首先，倒掉舊的培養(yǎng)基，加入３ml新的培養(yǎng)基（有無(wú)血清的都可）洗滌一次，用滴管吸走，然后再加入３ml的培養(yǎng)基，進(jìn)行預(yù)吹打，控制吹打力度，輕輕地大概沿著瓶底過(guò)一遍，然后吸走。這時(shí)侯再開(kāi)始正式的消化、吹打。（巨噬細(xì)胞我們只吹打，不消化的）；其次，把吹打下來(lái)的細(xì)胞懸液加入到新的培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)，培養(yǎng)瓶事先加入培養(yǎng)基，放入培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)，按時(shí)間點(diǎn)觀察細(xì)胞貼壁情況。１０分鐘觀察一次，２０分鐘，３０分鐘觀察一次。選擇一個(gè)時(shí)間點(diǎn)，已經(jīng)有部分細(xì)胞貼壁的情況下，重新置于潔凈臺(tái)，底面朝上迅速倒出其中的培養(yǎng)基，加入３ml新培養(yǎng)基再輕輕洗一次。然后加入完全培養(yǎng)基培養(yǎng)。后續(xù)觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況以及形態(tài)。我稱之為“二傳”。呵呵。如果一次效果還不理想，可重復(fù)多次。直到找到細(xì)胞完美形態(tài)。其中要注意，結(jié)合細(xì)胞喜歡的生長(zhǎng)情況。喜歡多一點(diǎn)數(shù)量長(zhǎng)得好的細(xì)胞你就等貼壁細(xì)胞比較多點(diǎn)的時(shí)候再傳。反之亦然。３.關(guān)于培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)加入培養(yǎng)基的量的問(wèn)題。這個(gè)是要靠自己去摸索你所養(yǎng)的細(xì)胞的。并不是小的玻璃方瓶１２ml，大方瓶１４ml的。有些細(xì)胞反而是培養(yǎng)基少一點(diǎn)相反細(xì)胞形態(tài)會(huì)長(zhǎng)得比較好。（可能也是競(jìng)爭(zhēng)很大，有優(yōu)勝劣汰吧。呵呵。）對(duì)于生長(zhǎng)速度快的細(xì)胞，易生長(zhǎng)的細(xì)胞加少一點(diǎn)培養(yǎng)基細(xì)胞形態(tài)會(huì)更好。但是要注意換液掌握。４.關(guān)于選擇培養(yǎng)瓶的問(wèn)題。個(gè)人發(fā)現(xiàn)生長(zhǎng)速度快的細(xì)胞在玻璃瓶?jī)?nèi)生長(zhǎng)的狀態(tài)會(huì)比一次性相對(duì)好一些。而對(duì)于同一種細(xì)胞，在其生長(zhǎng)旺盛快速的時(shí)期在玻璃瓶?jī)?nèi)的生長(zhǎng)狀態(tài)也比內(nèi)好。這可能是因?yàn)楸炔Ａ扛菀踪N壁。生長(zhǎng)速度快的細(xì)胞在這種相對(duì)“更安逸”的環(huán)境里反而長(zhǎng)得狀態(tài)不如玻璃瓶好。所以對(duì)于生長(zhǎng)速度慢的細(xì)胞如果想要更漂亮的細(xì)胞狀態(tài)，比玻璃瓶會(huì)好，對(duì)于生長(zhǎng)速度慢的細(xì)胞，玻璃瓶則會(huì)更好。同樣，對(duì)于同一種細(xì)胞，在其生長(zhǎng)速度慢的時(shí)候，會(huì)好一點(diǎn)，比如剛剛復(fù)蘇的時(shí)候，或者原代培養(yǎng)的時(shí)候。而在其生長(zhǎng)旺盛的時(shí)候，玻璃瓶則相對(duì)會(huì)好一點(diǎn)。
H1963細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK Col 1細(xì)胞、GA-10 clone 4細(xì)胞、MCF-7/ADR細(xì)胞
DAN-G細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：aNK細(xì)胞、MC 3T3-E1細(xì)胞、Ramos-2G6-4C10細(xì)胞
Hepa-RG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SF 763細(xì)胞、DHL4細(xì)胞、NCIH1373細(xì)胞
A-704細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CEM C7細(xì)胞、HCV29細(xì)胞、NCI-H676B細(xì)胞
NS-1-Ag4-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H661細(xì)胞、Tb1Lu細(xì)胞、OUMS27細(xì)胞
LuCL4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CD 18細(xì)胞、BC-025細(xì)胞、Baby Hamster Kidney 21細(xì)胞
G 401細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PC-9細(xì)胞、HO8910細(xì)胞、HEB細(xì)胞
MAEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH820細(xì)胞、TF1細(xì)胞、RBL細(xì)胞
McArdle RH-7777細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WB F344細(xì)胞、786.O細(xì)胞、OVCAR-420細(xì)胞
SKUT-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-498細(xì)胞、Kit225細(xì)胞、Ra #1細(xì)胞
D10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HDLM2細(xì)胞、ACC-2細(xì)胞、AAV293細(xì)胞
NALM 6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-1386細(xì)胞、BT-549細(xì)胞、EC-109細(xì)胞
SK-MEL5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HemECs細(xì)胞、HUT-28細(xì)胞、SW 403細(xì)胞
CF-1 MEF細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Centre Antoine Lacassagne-62細(xì)胞、RM1細(xì)胞、NCI-H-82細(xì)胞
HDLM2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HT-115細(xì)胞、HIC細(xì)胞、Duke University 4475細(xì)胞
H661細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ABC1細(xì)胞、BHK21細(xì)胞、TSUpr1細(xì)胞
Colo16細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HBMEC細(xì)胞、NCIH520細(xì)胞、Wills Eye Research Institute-Retinoblastoma-1細(xì)胞
NCI-H2170細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Intestinal Porcine Epithelial細(xì)胞：-J2細(xì)胞、BHT101細(xì)胞、COLO-824細(xì)胞
C6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1975細(xì)胞、GNM細(xì)胞、MUTZ-3細(xì)胞
Doubling time: ~50 hours (ATCC).細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OV1/P細(xì)胞、HFL細(xì)胞、RBSMC細(xì)胞
RAMSCs細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H920細(xì)胞、DHL-6細(xì)胞、A3細(xì)胞
Human ErythroLeukemia細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：EBC-1細(xì)胞、LAN6細(xì)胞、GM3570細(xì)胞
H1836細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1581細(xì)胞、MUGCHOR1細(xì)胞、GM00215A細(xì)胞
HT 115細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SBC5細(xì)胞、H2171細(xì)胞、KYSE520細(xì)胞
KTA-7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Y3-Ag 1.2.3細(xì)胞、Colon-38細(xì)胞、HOS細(xì)胞
CAL 120細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CV-1.K細(xì)胞、D562細(xì)胞、MRC9細(xì)胞
NCIH841細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：C33-A細(xì)胞、HARAB細(xì)胞、NCI-SNU-761細(xì)胞
M109細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：JAR細(xì)胞、RGC5細(xì)胞、Hs895.T細(xì)胞
LNCaP細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Y79細(xì)胞、CCK81細(xì)胞、PE/CA-PJ34細(xì)胞
SNU601細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KYSE0030細(xì)胞、WiDr-TC細(xì)胞、KPNRTBM1細(xì)胞
Ca9-22細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：C643細(xì)胞、MV-4-11細(xì)胞、NCIH128細(xì)胞
Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NHEK細(xì)胞、T-HEECs細(xì)胞、SV40-MES13細(xì)胞
MM1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MV 4;11細(xì)胞、Tregs細(xì)胞、NIH-3T3細(xì)胞
HCC-1187細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：High 5細(xì)胞、Wistar Institute-38細(xì)胞、OCI-Ly8細(xì)胞
BT.549細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1755細(xì)胞、KU19-19細(xì)胞、DV90細(xì)胞
H-676細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：X63-Ag 8.6.5.3細(xì)胞、Hs742T細(xì)胞、H1238細(xì)胞
BNCL2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H647細(xì)胞、IGR.OV1細(xì)胞、U-251_MG細(xì)胞
P116細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MH-22a細(xì)胞、DMS 114細(xì)胞、CHP 126細(xì)胞
NCIH1437細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1385細(xì)胞、Madison lung細(xì)胞、PL11細(xì)胞
BT 549細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：DU4475細(xì)胞、HS-729細(xì)胞、Mouse podocyte細(xì)胞
HUT 226細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC-2185細(xì)胞、HCoEpiC細(xì)胞、CMT 167細(xì)胞
MARC-145細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MC-26細(xì)胞、HUVEC細(xì)胞、HOMEC細(xì)胞
Y79細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CHL-1細(xì)胞、MAVER細(xì)胞、NCI-H211細(xì)胞
MN9D細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：U251n細(xì)胞、Vero from pool #76細(xì)胞、HAPI細(xì)胞
TGBC11TKB細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH2085細(xì)胞、NCTC-3960細(xì)胞、OVCAR-433細(xì)胞
H508細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ADR-RES細(xì)胞、U 138 MG細(xì)胞、H-1819細(xì)胞
3396細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA MB 361細(xì)胞、Panc 05.04細(xì)胞、PC-3M-2B4細(xì)胞
WILL-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Baby Hamster Kidney from litter No. 21細(xì)胞、BMF細(xì)胞、NCIH2172細(xì)胞
HCC-1806細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：D324 Med細(xì)胞、RBL 2H3細(xì)胞、HCS2/8細(xì)胞
SU-DHL-5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WiDr-TC細(xì)胞、PC3-M細(xì)胞、MCA 38細(xì)胞
SKCO-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：FAT細(xì)胞、EU-3細(xì)胞、293GP細(xì)胞
HLFa細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1563細(xì)胞、SNU-398細(xì)胞、H2196細(xì)胞
MD Anderson-Metastatic Breast-415細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM17219細(xì)胞、UACC-812細(xì)胞、D-324 Med細(xì)胞
A204細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HuT 102細(xì)胞、KY-270細(xì)胞、TK10細(xì)胞
THP-1(ATCC)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：J.E6-1細(xì)胞、BLO-11細(xì)胞、Vero 76細(xì)胞
U373MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TE85細(xì)胞、C127細(xì)胞、CHP126細(xì)胞
Hs 683.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TPC1細(xì)胞、RPTC細(xì)胞、HS5細(xì)胞
GM3570細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HS-729細(xì)胞、OCILY10細(xì)胞、GM02132細(xì)胞
RAT2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Rat 2細(xì)胞、Walker256細(xì)胞、P31 FUJ細(xì)胞
TPC1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TE-4細(xì)胞、Mono Mac 1細(xì)胞、U-373MG細(xì)胞
DU-4475細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC1359細(xì)胞、CCD 841 CoTr細(xì)胞、HSKMC細(xì)胞
A-431細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RL95-2細(xì)胞、Raji細(xì)胞、SKBR-3細(xì)胞
NCI-H187細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RCK8細(xì)胞、Y 1細(xì)胞、HEK-293H細(xì)胞
Turbot Embryonic細(xì)胞：細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RAOEC細(xì)胞、SKNEP細(xì)胞、Caco-2/BBe細(xì)胞
H-1993細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Panc02細(xì)胞、Wistar Institute, Susan Hayflick細(xì)胞、293A細(xì)胞
CEMO-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC-1395細(xì)胞、MADB 106細(xì)胞、NUGC-3細(xì)胞
Intestinal Porcine Epithelial細(xì)胞：-J2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：B10BR細(xì)胞、C-33A細(xì)胞、HuH 6細(xì)胞
HIT T15細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SuDHL 8細(xì)胞、DH82細(xì)胞、TCMK-1細(xì)胞
RPE-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Human Hepatocyte Line 5細(xì)胞、H-1793細(xì)胞、HFLS細(xì)胞
MOLP-8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 742.T細(xì)胞、HSC-4細(xì)胞、SNU475細(xì)胞
B5537SKIN細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MLTC-1細(xì)胞、C8161細(xì)胞、697細(xì)胞
MES-SA/Dx5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Glioma-261細(xì)胞、COLO 206細(xì)胞、MBMEC細(xì)胞
Hepa1-6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Dx5細(xì)胞、H-1522細(xì)胞、Panc 5.04細(xì)胞
Hos TE-85細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：C22 (Clara)細(xì)胞、Mouse INsulinoma 6細(xì)胞、CHP 100細(xì)胞
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