"Karpas-422細胞：人類B細胞淋巴瘤細胞系
細胞背景資料：詳見相關(guān)文獻介紹
細胞形態(tài)：淋巴母細胞樣
細胞生長：懸浮
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
細胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細胞說明書部分
細胞培養(yǎng)無菌操作的演示：凡是帶入超凈工作臺內(nèi)的酒精、PBS、培養(yǎng)基、胰蛋白酶的瓶子均要用７５％酒精擦拭瓶子的外表面；靠近酒精燈火焰操作。器皿使用前必須過火滅菌，繼續(xù)使用的器皿(如瓶蓋、滴管)要放在高處，使用時仍要過火。各種操作要靠近酒精燈，動作要輕、準(zhǔn)確，不能亂碰。如吸管不能碰到廢液缸。吸取兩種以上的使用液時要注意更換吸管，防止交叉污染。玻璃器械洗消：一、新的玻璃器皿的洗消：自來水刷洗，除去灰塵。烘干、泡：烤箱中烘干，然后再浸入５％稀中１２小時以除去臟物、鉛、等物。刷洗、烘干：１２小時后立即用自來水沖洗，再用洗滌劑刷洗，自來水沖干凈后用烤箱烘干；泡酸、清洗：用清潔液浸泡１２小時，然后從酸缸內(nèi)撈出器皿用自來水沖洗１５次，最后蒸餾水沖洗３-５次和用雙蒸水過３次。烘干、包裝：洗干凈后先烘干，然后用牛皮紙(油光紙)包裝。高壓消毒：包裝好的器皿裝入高壓鍋內(nèi)蓋好蓋子，打開開關(guān)和安全閥，當(dāng)蒸氣成直線上升時，關(guān)閉安全閥，當(dāng)指針指向１５磅時，維持２０-３０分鐘。高壓消毒后烘干。二、舊的玻璃器皿的洗消：刷洗、烘干：使用過的玻璃器皿可直接泡入來蘇爾液或洗滌劑溶液中，泡過來蘇爾溶液(洗滌劑)的器皿要用清水刷洗干凈，然后烘干。泡酸、清洗：烘干后泡入清潔液(酸液)，１２小時后從酸缸內(nèi)撈出器皿立即用自來水沖洗(避免蛋白質(zhì)干涸后粘附于玻璃上難以清洗)，再用蒸餾水沖洗３次。烘干、包裝：洗干凈的器皿烘干后取出用牛皮紙(油光紙)等包裝。
有一些細胞是數(shù)量多一點比較好生長，生長狀態(tài)也比較好。這種一般是屬于生長速度慢的細胞。譬如內(nèi)皮細胞。而有一些是細胞是數(shù)量少一點細胞狀態(tài)會生長的比較好，譬如巨噬細胞和某些腫瘤細胞。尤其是巨噬細胞，生長速度非常得快，貼壁速度很快，所以傳代時就應(yīng)該留很少量的細胞，這樣細胞狀態(tài)會比較好。并且巨噬細胞比較喜歡扎堆生長，而堆與堆之間是有空間的。如果長成相連在一起的一滿片的時候，細胞形態(tài)基本上就會差了，老化的會比較多，對后期實驗結(jié)果是不好的。所以在養(yǎng)細胞的時候應(yīng)該摸索該細胞喜歡的生長空間密度問題。這個其實是有一個方法可以改善的。對于貼壁細胞，如果細胞形態(tài)不好，（或者細胞形態(tài)不清晰，表面似有異物等）可以在傳代的時候進行如下操作：首先，倒掉舊的培養(yǎng)基，加入3ml新的培養(yǎng)基（有無血清的都可）洗滌一次，用滴管吸走，然后再加入3ml的培養(yǎng)基，進行預(yù)吹打，控制吹打力度，輕輕地大概沿著瓶底過一遍，然后吸走。這時侯再開始正式的消化、吹打。（巨噬細胞建議只吹打，不消化）其次，把吹打下來的細胞懸液加入到新的培養(yǎng)瓶內(nèi)，培養(yǎng)瓶事先加入培養(yǎng)基，放入培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)，按時間點觀察細胞貼壁情況。10分鐘觀察一次，20分鐘，30分鐘觀察一次。選擇一個時間點，已經(jīng)有部分細胞貼壁的情況下，重新置于潔凈臺，底面朝上迅速倒出其中的培養(yǎng)基，加入3ml新培養(yǎng)基再輕輕洗一次。然后加入完全培養(yǎng)基培養(yǎng)。后續(xù)觀察細胞生長情況以及形態(tài)。通常稱之為“二傳”。如果一次效果還不理想，可重復(fù)多次。直到找到細胞上乘形態(tài)。其中要注意，結(jié)合細胞喜歡的生長情況。喜歡多一點數(shù)量長得好的細胞你就等貼壁細胞比較多點的時候再傳。反之亦然。
細胞傳代時消化的問題：可以這樣說，對于需要消化傳代的細胞，每一次的消化都是對這個細胞存活與否，狀態(tài)好與不好最至關(guān)重要的考驗。很多同學(xué)都遇到過這個問題，自己養(yǎng)的細胞開始的幾代長的還挺好的，可是穿過幾代之后就發(fā)現(xiàn)自己的細胞，狀態(tài)越來越差勁了。對于這個問題，可以非?？隙ǖ卣f，你的消化環(huán)節(jié)出問題了。你每一次的消化都讓細胞受到較大損傷了。所以，越長越差。在消化的過程中，你加入胰酶后，所有細胞都在被胰酶消化著，但是我們忽視了一個問題就是，細胞的生長狀態(tài)是不一樣的，每一個細胞的貼壁情況也是不一樣的，有的貼壁牢固，有的貼壁沒有那么牢固的，所以，讓所有的細胞消化同樣的時間對細胞是不公平的，他們受到了差別待遇當(dāng)然會有脾氣啊。我后來對消化的方法進行了改良。爭取做到因材施教呵呵。我稱之為“四步消化法”。（以難消化細胞為例）；具體操作：１)首先不加胰酶，倒掉舊培養(yǎng)基加入少量新培養(yǎng)基洗１-２遍，（這是前奏，即為步，目的是將漂浮著的死細胞之類盡量洗掉。２)然后再加入少量新培養(yǎng)基直接吹打一遍，這一遍是把貼壁不牢固的細胞吹打下來。再用培養(yǎng)基洗一遍，兩次所得懸液混合傳入新瓶。即為第二步（你可以將這些傳入新瓶培養(yǎng)，以與后面胰酶消化過的細胞對比觀察看誰長的更好一點就知道該細胞對胰酶的敏感度了。）３)吸干凈瓶內(nèi)剩余液體，加入０.３ml左右的胰酶潤洗一遍，吸掉棄之，再加入１ml左右的胰酶消化。消化的同時置于顯微鏡下觀察，待細胞與細胞之間間隙明顯的時候立即吸掉胰酶與干凈子彈頭里備用，加入新培養(yǎng)基開始吹打，吹打２-３遍后吸取懸液于試管或新瓶暫存。用２ml左右新培養(yǎng)基洗一遍與前面的混合。（你也可以傳入新瓶培養(yǎng)，以與后面及前面的做對比。）這是第三步。４)然后把前面剛吸出來的胰酶重新加進去瓶里繼續(xù)消化剩余的貼壁牢固的細胞。當(dāng)然你也可以用新的胰酶，如果你們那比較富裕的話，呵呵。繼續(xù)鏡下觀察，待剩余細胞間隙明顯，細胞獨立開來的時候，吸掉胰酶，加入新培養(yǎng)基吹打。懸液傳入新瓶培養(yǎng)（根據(jù)實際情況你自己把握）。這是第四步。其實還可以有第五步，對于特別難消化的細胞和對胰酶特別敏感的細胞的話，你可以繼續(xù)加第五步甚至第六步。為了細胞更好的狀態(tài)，更漂亮的樣子，沒辦法，你必須分多批多次消化，這樣才能限度地將胰酶對細胞的損傷降到最低，保證細胞的狀態(tài)能夠。當(dāng)然了，如果細胞是屬于那種很容易消化的細胞，像RAW２６４.７，僅僅第二步就搞定了。就沒必要第三步第四步了。這個是需要你在實驗中能夠自己用心去體會的。建議你接受一個新細胞時把各步消化的細胞分別培養(yǎng)起來做比較，去摸索好細胞對胰酶的要求。便于你后續(xù)實驗的開展。將細胞消化分成這幾步，除了是為了避免胰酶對細胞的損傷之外，還有一個更重要的作用就是，可以程度地把細胞吹打成單個單個的狀態(tài)，不成片不連體。
CWR22-Rv1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3-X63-Ag8-6-5-3細胞、Hs822T細胞、Panc203細胞
H2087細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MIN6細胞、HCC0827細胞、CCD-33Co細胞
LA795細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Vero from pool #76細胞、HLF-a細胞、OVCAR-5細胞
H-1838細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SVG p12細胞、H1734細胞、WM-239A細胞
SuDHL 5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 578.Bst細胞、LS-411細胞、ChaGo K-1細胞
SW1271細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BT325細胞、P3X63 AG8-653細胞、3T3L1細胞
NCIH64細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Colo-201細胞、HL-1細胞、HOP62細胞
ABC-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1869細胞、L 363細胞、NCIH1930細胞
SK-MEL2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO824細胞、NCIH2286細胞、NBL-2細胞
DMS53細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Ca-Ski細胞、L428細胞、H1836細胞
NCIH520細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUDHL-16細胞、A 172細胞、DC2.4細胞
DV90細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SRA01/04 (HLE)細胞、RenCa細胞、373 MG細胞
VM Cub 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：INS1E細胞、HLEpiC細胞、22Rv1細胞
NCI-H1105細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1694細胞、RKO-E6細胞、Sup T-1細胞
Ramos G6.C10細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW-579細胞、T-ALL-1細胞、MDA-MB-175VII細胞
KPL1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HS-940-T細胞、C2BBe1細胞、MV 3細胞
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SK-MES1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：G519細胞、MCF7-CTRL細胞、MB468細胞
MODE-K細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RC-4B細胞、GM03190A細胞、H-69細胞
KYSE70細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TF-1細胞、H-1838細胞、52PE細胞
HCC 2185細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1930細胞、P3X63Ag8-6-5-3細胞、N2a細胞
HN-6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ANA-1細胞、MDA-MB 453細胞、OSA細胞
NCIH2081細胞系相關(guān)產(chǎn)品：74Int細胞、HPAFII細胞、Homo sapiens No. 578, breast cells細胞
SJ-Rh 30細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LLC PK1細胞、H716細胞、RKN細胞
H929細胞系相關(guān)產(chǎn)品：639 V細胞、VK-2/E6E7細胞、NOK細胞
WM-451Lu細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MD Anderson-Metastatic Breast-453細胞、H-1666細胞、LN-18細胞
SW1463細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H69細胞、SF539細胞、TE1細胞
Karpas-299細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCM細胞、SHIN-3細胞、Rat Lung Epithelial-6-T-antigen Negative細胞
RGE細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 683.T細胞、L615細胞、NOZC-1細胞
U373MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TE85細胞、C127細胞、CHP126細胞
TSCC1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW-756細胞、M4e細胞、HuP-T4細胞
SF 763細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM2131細胞、RD細胞、HT-29細胞
MN-9D細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Mono Mac6細胞、BT549細胞、H-2405細胞
HC11細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MM6細胞、HEC-251細胞、NUGC4細胞
Lieming Xu-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HSC細胞、H810細胞、U251n細胞
MO59J細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PIG3細胞、LICR-LON-HN6細胞、TE7細胞
SW1783細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCT-GEO細胞、HuH-1細胞、LNCaP-C4-2細胞
D 407細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCT 15細胞、293 HEK細胞、ECC12細胞
Metastatic Variant 522細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ZR-75-30細胞、MV3細胞、MKN-74細胞
H1573細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HUT 125細胞、OSK-1細胞、NK-10A細胞
H-157細胞系相關(guān)產(chǎn)品：U266 B1細胞、NCI-H1876細胞、Panc10.05細胞
PNT1-a細胞系相關(guān)產(chǎn)品：DHL4細胞、GC-1細胞、MSTO-211細胞
LS 174T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HS 445T細胞、P3-NS1/1-Ag4-1細胞、L 540細胞
C-33 A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ST2細胞、KRC-Y細胞、VP 229細胞
GC-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVCAR 4細胞、C57/B6-L細胞、TSCC1細胞
K562/ADP細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SJRH-30細胞、TE-85 clone 5細胞、Renal Proximal Tubule Epithelial Cells/TERT-immortalized 1細胞
MC38細胞系相關(guān)產(chǎn)品：QG56細胞、H-1238細胞、OCM1A細胞
U2OS細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hela-Ap-1細胞、BIU-87細胞、KLN-205細胞
NCIH508細胞系相關(guān)產(chǎn)品：UACC893細胞、SUM-52PE細胞、Evsa T細胞
IM9細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Chang Cells細胞、W256細胞、FTC133細胞
BC-024細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MGH-UI細胞、SUM 159細胞、MV-1-Lu細胞
HIBEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-BL1339細胞、DOK細胞、NG-108-15細胞
JeKo-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：UM2細胞、BCP-1細胞、H1734細胞
NCI-H2081細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H102細胞、Mouse podocyte細胞、Evsa-T細胞
IPEC-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3 (Jiyoye)細胞、CCRF/CEM/0細胞、SKNO1細胞
PaCa2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NTera-2D1細胞、118MG細胞、OCILY19細胞
MLMA細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H727細胞、COLO-16細胞、SW1417細胞
VP303細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Huh-7細胞、COLO 205細胞、MOLP-8細胞
JeKo 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HPAF-2細胞、TE-8細胞、hOMF細胞
TE-6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK MEL 28細胞、MFC細胞、REC-1細胞
CCRF/CEM/0細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H9c2(2-1)細胞、HCC-1419細胞、H661細胞
HEH2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Walker/LLC-WRC256細胞、SNU119細胞、Huh-7.5細胞
H-524細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SRA01/04細胞、FC33細胞、Rat Glomerular Endothelial細胞
MGC-803細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NMC-G1細胞、Leukemic 1210細胞、SKMEL-24細胞
HPAF-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：L Wnt-3A細胞、NCI-H2107細胞、HMC3細胞
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RPMC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RA-FLSs細胞、NeHepLxHT細胞、H2286細胞
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Hi-5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC1438細胞、SNU-C2A細胞、As-PC1細胞
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SKNBE(2)細胞系相關(guān)產(chǎn)品：786-0WT細胞、AGS細胞、Vero 76 clone E6細胞
U-343MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-SNU-601細胞、BHP 10-3細胞、UMRC2細胞
LA795細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Vero from pool #76細胞、SKNAS細胞、C32-mel細胞
LL/2(LLc1)細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TE-85細胞、CMT64細胞、HPDE細胞
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