"Loucy細胞：人淋巴細胞白血病細胞系
細胞背景資料：詳見相關(guān)文獻介紹
細胞形態(tài)：淋巴母細胞樣
細胞生長：懸浮
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法：２-３天換液１次。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
細胞生長特性：懸浮生長
細胞傳代培養(yǎng)的胰酶消化法：傳代培養(yǎng)：是指細胞從一個培養(yǎng)瓶以１：２或１：２以上的比例轉(zhuǎn)移，接種到另一培養(yǎng)瓶的培養(yǎng)。傳代細胞，可根據(jù)不同細胞采取不同的方法進行細胞傳代。貼壁生長的細胞用消化法傳代，部分貼壁的細胞用直接吹打或用硅膠軟刮的刮除法傳代。懸浮細胞可采用加入等量新鮮培養(yǎng)基后直接吹打分散進行傳代，或用自然沉降法加入新培養(yǎng)基后再吹打分散進行傳代。實驗步驟：①入無菌室之前用肥皂洗手，再用７５% 的酒精擦拭消毒雙手；②倒置顯微鏡下觀察細胞形態(tài)，確定細胞是否傳代及細胞需要稀釋的倍數(shù)。將培養(yǎng)用液３７℃下預(yù)熱；③超凈臺臺面應(yīng)整潔，用７５%酒精棉球擦拭清潔；④打開超凈工作臺的紫外燈照射臺面２０min左右，關(guān)閉紫外燈，打開風(fēng)機清潔空氣除去臭氧；⑤點燃酒精燈;取出無菌試管，巴士德吸管和刻度吸管;安上橡皮頭;過酒精燈火焰略燒后插在無菌試管內(nèi)；⑥將培養(yǎng)用液瓶口用７５%酒精消毒，過酒精燈火焰后斜置于酒精燈旁的架子上；⑦倒掉培養(yǎng)細胞的舊培養(yǎng)基。酌情可用２-３ml Hanks液洗去殘留的就培養(yǎng)基，或用少量胰酶涮洗一下；⑧每個大培養(yǎng)瓶加入１ml胰酶，小培養(yǎng)瓶用量酌減，蓋好瓶蓋后在倒置顯微鏡下觀察。當細胞收回突起變圓時立即翻轉(zhuǎn)培養(yǎng)瓶，使細胞脫離胰酶，然后將胰酶倒掉。注意勿使細胞提早脫落入消化液中；⑨加入少量的含血清的新鮮培養(yǎng)基，反復(fù)吹打消化好的細胞使其脫壁并分散，再根據(jù)分傳瓶數(shù)補加一定量的含血清的新鮮培養(yǎng)基(７-１０ml/大瓶;３-５ml/小瓶)制成細胞懸液，然后分裝到新培養(yǎng)瓶中。蓋好瓶蓋，適度擰緊后稍回轉(zhuǎn)，以利于CO２的進入，將培養(yǎng)瓶放回CO２培養(yǎng)箱；⑩對懸浮培養(yǎng)細胞，步驟７-９不做。直接將細胞懸液進行離心去除舊培養(yǎng)基上清，加入新鮮培養(yǎng)基，然后分裝到各瓶中。
貼壁細胞凍存注意事項：細胞凍存液需提前配制，不可直接將DMSO加入細胞懸液中；不同細胞消化時間有差異，以實際鏡檢結(jié)果為準，大部分細胞回縮變圓并有少量細胞脫落即可中止消化，消化時間不宜過長；應(yīng)選擇匯合度80%-90%左右，細胞處于對數(shù)生長期時進行凍存操作，確保細胞凍存時狀態(tài)，凍存密度可根據(jù)細胞特性進行調(diào)整；凍存細胞保存溫度應(yīng)低于-130℃，不可在-80℃長期保存。貼壁細胞凍存操作步驟：從培養(yǎng)箱中取出準備凍存的細胞；顯微鏡下觀察細胞狀態(tài)并拍照記錄；酒精消毒培養(yǎng)瓶后放入安全柜中；吸去多余的培養(yǎng)基，加人2~3ml(PBS緩沖液)潤洗一次；加入1ml胰酶，放入37℃消化；消化1min左右，在顯微鏡下觀察細胞消化情況；消化完全后，加3ml完全培養(yǎng)基終止；將細胞懸液移入15ml離心管中離心，1000rpm/min（約200g）離心3-5min；吸去多余的液體，向細胞沉淀中加入適量的凍存液，輕輕吸打混勻；按比例分裝至凍存管中；貼好標簽后放入梯度凍存盒中；將凍存盒放入-80℃，降溫過夜后，移入液氮中保存。貼壁細胞凍存實驗準備事項：將15mL離心管、凍存管、PBS緩沖液、移液管、電動移液器等物品提前放入生物安全柜中，紫外照射30min消毒滅菌；細胞完全培養(yǎng)基、0.25%胰酶-0.02%EDTA、細胞凍存液等從4℃冰箱中取出后，復(fù)溫至室溫，備用；程序降溫盒復(fù)溫至室溫備用。
細胞培養(yǎng)過程中相關(guān)問題總結(jié)：懸浮性細胞應(yīng)如何繼代處理？一般僅需持續(xù)加入新鮮培養(yǎng)基于原培養(yǎng)角瓶中，稀釋細胞濃度即可，若培養(yǎng)液太多時，可將培養(yǎng)角瓶口端稍微抬高，直到無法容納為止。分瓶時取出一部份含細胞之培養(yǎng)液至另一新的培養(yǎng)角瓶，加入新鮮培養(yǎng)基稀釋至適當濃度，重復(fù)前述步驟即可。欲將一般動物細胞離心下來，其離心速率應(yīng)為多少轉(zhuǎn)速？欲回收動物細胞，其離心速率一般為３００xg(約１,０００rpm)，５-１０分鐘，過高之轉(zhuǎn)速，將造成細胞死亡；細胞之接種密度為何？依照細胞株基本數(shù)據(jù)上之接種密度或稀釋分盤之比例接種即可。細胞數(shù)太少或稀釋的太多亦是造成細胞無法生長之一重要原因；細胞冷凍培養(yǎng)基之成份為何？動物細胞冷凍保存時最常使用的冷凍培養(yǎng)基是含５-１０%DMSO(dimethyl sulfoxide)和９０-９５%原來細胞生長用之新鮮培養(yǎng)基均勻混合之。注意：由于DMSO稀釋時會放出大量熱能，故不可將DMSO直接加入細胞液中，必須使用前先行配制完成；DMSO之等級和無菌過濾之方式為何？冷凍保存使用之DMSO等級，必須為Tissue culture grade之DMSO，其本身即為無菌狀況，次開瓶后應(yīng)立即少量分裝于無菌試管中，保存于４°C，避免反復(fù)冷凍解凍造成DMSO之裂解而釋出有害物質(zhì)，并可減少污染之機會。若要過濾DMSO，則須使用耐DMSO之Nylon材質(zhì)濾膜；冷凍保存細胞之方法？冷凍保存方法一：冷凍管置于４°C ３０~６０分鐘→ (-２０°C ３０分鐘)→-８０°C １６~１８小時(或隔夜)→液氮槽vaporphase長期儲存。冷凍保存方法二：冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機中每分鐘降１-３°C至–８０°C以下，再放入液氮槽vapor phase長期儲存。-２０°C不可超過１小時，以防止冰晶過大，造成細胞大量死亡，亦可跳過此步驟直接放入-８０°C冰箱中，惟存活率稍微降低一些；細胞欲冷凍保存時，細胞冷凍管內(nèi)應(yīng)有多少細胞濃度？冷凍管內(nèi)細胞數(shù)目一般為１x１０(６)cells/ml vial，融合瘤細胞則以５x１０(６)cells/ml vial為宜；應(yīng)如何避免細胞污染？細胞污染的種類可分成細菌、酵母菌、霉菌、病毒和霉?jié){菌。主要的污染原因為無菌操作技術(shù)不當、操作室環(huán)境不佳、污染之血清和污染之細胞等。嚴格之無菌操作技術(shù)、清潔的環(huán)境、與品質(zhì)良好之細胞來源和培養(yǎng)基配制是減低污染之方法；如果細胞發(fā)生微生物污染時，應(yīng)如何處理？直接滅菌后丟棄之。
NCI-H2066細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Panc_08_13細胞、Hs606T細胞、3T3細胞
Hs 766.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH838細胞、HPMC細胞、HT 1376.T細胞
NCIH2228細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KCL-22細胞、FHL-124細胞、ZYM-SVEC01細胞
NKT細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MASMC細胞、Tca8113細胞、SKMEL5細胞
JVM-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KYSE180細胞、HEL92.1.7細胞、Tca8113細胞
LA 4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：T/G HA-VSMC細胞、Fao細胞、BC3H-1細胞
SP2-0-Ag14細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KNS-81細胞、Toledo細胞、MHH-CALL2細胞
U-266 AR1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：DI TNC1細胞、SU86.86細胞、H1819細胞
Intestinal Porcine Epithelial細胞：-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVCAR-5細胞、A-101D細胞、FCCH1018細胞
Douglas Foster-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H2227細胞、APRE-19細胞、NIH:OVCAR-3細胞
NCI-H1668細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NPA細胞、Michigan Cancer Foundation-7細胞、HOS TE85細胞
NCIH358細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NOMO-1細胞、Giant Cell Tumor細胞、COS-1細胞
Kasumi 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Nb2-11細胞、PC.3細胞、SK_N_FI細胞
CCRF/CEM-C7細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SLMT-1細胞、COLO206細胞、SCCVII/St細胞
UPCI-SCC-090細胞系相關(guān)產(chǎn)品：U20-S細胞、R3/1細胞、OVMANA細胞
BC-021細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Highly Aggressively Proliferating Immortalized細胞、BRL細胞、MDA-MB 453細胞
T 24細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-MB415細胞、ECC 10細胞、SUNE1細胞
Rat 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HMrSV5細胞、NCI-H1792細胞、ACT-1細胞
SuperTube細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1930細胞、TGW-I-nu細胞、LM6細胞
B16BL-6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MMQ細胞、Ca 9-22細胞、H1755細胞
CCD-1112sk細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Renal Carcinoma細胞、Vertebral Cancer of the Prostate細胞、H727細胞
Hs 636 T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNG-M細胞、Hs.27細胞、A-101D細胞
NOMO1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Keio University-19-19細胞、Evsa T細胞、Kit 225 K6細胞
SVHUC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-2052細胞、Factor Dependent Cell-Paterson 1細胞、NCI-H716細胞
KMS26細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Kuramochi細胞、NCI-441細胞、3T3 Swiss Albino細胞
COR-L23/P細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RKO-E6細胞、AtT 20細胞、NALM-6細胞
SuDHL 8細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ACC-M細胞、Duck embryo細胞、SK-MEL-28細胞
NCTC-3960細胞系相關(guān)產(chǎn)品：JVM-2細胞、HuT102細胞、TPC-1細胞
Co320細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HOMEC細胞、H-508細胞、SU-DHL1細胞
MM1.S細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TKB1細胞、LM8細胞、V-79細胞
MMQ細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Potorous tridactylus Kidney 2細胞、PANC0504細胞、EBTr (NBL-4)細胞
COC1/CDDP細胞系相關(guān)產(chǎn)品：UCLA RO-81A-1細胞、IFRS1細胞、DHL-6細胞
HCT FET細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NBLAN5T細胞、MDCK supertube細胞、HO1-N-1細胞
EPC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：M059J細胞、SPCA1細胞、HCC1419細胞
ANA-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RBE4細胞、Rat 2細胞、NCI-460細胞
LC-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1836細胞、JB6 clone 30, subclone 7b細胞、CO115細胞
ONS76細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TCam 2細胞、He-La細胞、MG63細胞
Farage細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NRK clone 52E細胞、NTera2/D1細胞、H-1522細胞
RC-4B/C細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW-948細胞、BA/F3細胞、SK Mel28細胞
JM1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MG-HU-3細胞、MOLT 4細胞、S3-HeLa細胞
Glioma-261細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BHP 10-3細胞、H2141細胞、COLO 205細胞
JB-6 Cl 30細胞系相關(guān)產(chǎn)品：U-343 MG細胞、EC-109細胞、V79細胞
hTERT-HPNE細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVCAR-8/ADR細胞、LUDLU1細胞、Lewis lung carcinoma細胞
HIMEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-157細胞、2V6.11細胞、SCL-2細胞
UCW 100細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPTEC/TERT 1細胞、SW839細胞、TCam 2細胞
NCI-H2195細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Menschliche Und Tierische Zellkulture-3細胞、HEK 293 EBNA細胞、VMCUB1細胞
COLO 684細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-SNU-620細胞、AtT-20細胞、SKMEL2細胞
HCM細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK-AD293細胞、AG 9細胞、WIL2-S細胞
BV2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KYSE 520細胞、HCC-2108細胞、SKG3A細胞
ZR75_1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：AML193細胞、CCC-ESF-1細胞、RPMI 2650細胞
P30OHK細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Rat-2細胞、H-4-II-E細胞、SK-MEL-5細胞
MDA-330細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SPC-A-1細胞、H87細胞、10RGB細胞
Fetal Human Lens-124細胞系相關(guān)產(chǎn)品：bEnd.3[BEND3]細胞、A375-S2細胞、A-431細胞
MZCRC1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PNT-1A細胞、YD15細胞、HLF-a細胞
Hs606細胞系相關(guān)產(chǎn)品：JHH7細胞、HDMEC細胞、Panc 8.13細胞
MA104細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ONS-76細胞、MOLM16細胞、HSC1細胞
SW-1463細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HO1-N-1細胞、MCF.7細胞、BEAS2B細胞
Kit-225-K6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVCA-420細胞、H4IIEC3細胞、ABE­8.1/2細胞
DU-4475細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC1359細胞、CCD 841 CoTr細胞、HSKMC細胞
RAT2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Rat 2細胞、Walker256細胞、P31 FUJ細胞
W133細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HN 4細胞、UPCISCC090細胞、Sp2/0細胞
HT-1376細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUSM1細胞、NCI-H716細胞、KBM7細胞
DV-90細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Eca-109細胞、Wayne State University-Head and Neck 13細胞、Duck embryo細胞
JM-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPMI No. 1846細胞、Clone Y-1細胞、H7721細胞
J-82細胞系相關(guān)產(chǎn)品：293EBNA細胞、MDA-175細胞、NCI-H2172細胞
Caco-2 BBe細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPMI 6666細胞、Human Lung Microvascular Endothelial細胞：-5a細胞、Colo-678細胞
DoTc2 4510細胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO201細胞、SACC-83細胞、T-47-D細胞
IPI-2I細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KP-N-RT-BM-1細胞、Hs870T細胞、TE-14細胞
LICCF細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Emory University-3細胞、DB細胞、EJ1細胞
P815細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKMEL2細胞、NPA'87細胞、hFOB 1.19細胞
DV90細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SRA01/04 (HLE)細胞、H-2087細胞、H187細胞
H-2110細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RCC 786-O細胞、FT-293細胞、HCC-202細胞
NCIH2228細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KCL-22細胞、FHL-124細胞、hEEC細胞
HSCT6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HSC4細胞、CHG-5細胞、SUDHL1細胞
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