"3T3-J2細(xì)胞：小鼠胚胎成纖維細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料：胚胎；成纖維細(xì)胞
細(xì)胞形態(tài)：成纖維細(xì)胞樣
細(xì)胞生長(zhǎng)：貼壁
細(xì)胞物種來(lái)源：人源或鼠源等其它物種來(lái)源
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細(xì)胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
細(xì)胞來(lái)源說(shuō)明：細(xì)胞主要來(lái)源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系
細(xì)胞生長(zhǎng)特性：貼壁
目前，跟公司簽訂長(zhǎng)期戰(zhàn)略合作伙伴的科研單位有山西中醫(yī)學(xué)院、福建醫(yī)科大學(xué)附屬第二醫(yī)院、上海市第六人民醫(yī)院、北京大學(xué)醫(yī)學(xué)部、同濟(jì)大學(xué)、四平中心醫(yī)院、廣州中醫(yī)藥大學(xué)、中科院上海生命科學(xué)研究院生化與細(xì)胞研究所、解放軍第３０６醫(yī)院、江南大學(xué)、西南醫(yī)院、吉首大學(xué)、西南大學(xué)化學(xué)化工學(xué)院、寧波大學(xué)、福建醫(yī)科大學(xué)附屬醫(yī)院、蘇州市同濟(jì)醫(yī)院、中南大學(xué)、延安大學(xué)附屬醫(yī)院、中國(guó)科學(xué)院上海藥物研究所、天津市兒童醫(yī)院、江蘇省中醫(yī)藥研究院、湘雅醫(yī)學(xué)院、第四軍醫(yī)大學(xué)預(yù)防系勞動(dòng)與環(huán)境教研室、揚(yáng)州大學(xué)、上海交通大學(xué)、中國(guó)醫(yī)科大學(xué)、浙江省立同德醫(yī)院、中國(guó)人民解放軍第１５０中心醫(yī)院、蘇州大學(xué)、四川大學(xué)華西醫(yī)院、云南大學(xué)、揚(yáng)州大學(xué)獸醫(yī)學(xué)院、上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬第九人民醫(yī)院、海南醫(yī)學(xué)院、江蘇腫瘤醫(yī)院、上海市閔行區(qū)中心醫(yī)院、大連醫(yī)科大學(xué)附屬醫(yī)院、中國(guó)科學(xué)院廣州生物醫(yī)藥與健康研究院、沈陽(yáng)藥科大學(xué)、廣州市第八人民醫(yī)院、南京大學(xué)、浙江中醫(yī)藥大學(xué)、蘭州大學(xué)、上海中醫(yī)藥大學(xué)、中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院飼料研究所、廈門(mén)市婦幼保健院、大學(xué)、南京軍區(qū)總醫(yī)院、天津市人民醫(yī)院、北京醫(yī)學(xué)科學(xué)腫瘤醫(yī)院、上海市同濟(jì)醫(yī)院、江蘇大學(xué)、桂林醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院、中國(guó)科學(xué)院化學(xué)研究所
凍存和復(fù)蘇的原則：慢凍快融》當(dāng)細(xì)胞冷到零度以下，可以產(chǎn)生以下變化：細(xì)胞器脫水，細(xì)胞中可溶性物質(zhì)濃度升高，并在細(xì)胞內(nèi)形成冰晶。如果緩慢冷凍，可使細(xì)胞逐步脫水，細(xì)胞內(nèi)不致產(chǎn)生大的冰晶；相反，結(jié)晶就大，大結(jié)晶會(huì)造成細(xì)胞膜、綱胞器的損傷和破裂。復(fù)蘇過(guò)程應(yīng)快融，目的是防止小冰晶形成大冰晶，即冰晶的重結(jié)晶。慢凍程序》1.標(biāo)準(zhǔn)程序：采用細(xì)胞凍存器》當(dāng)溫度在-25℃以上時(shí)，1~2℃/min；當(dāng)溫度達(dá)-25℃以下時(shí)，5~10℃/min；當(dāng)溫度達(dá)-100℃時(shí)，可迅速放入液氮中。2.簡(jiǎn)易程序：將冷凍管（管口要朝上）放入紗布袋內(nèi)，紗布袋系以線繩，通過(guò)線繩將紗布袋固定于液氮罐罐口，按每分鐘溫度下降1~2℃的速度，在40min內(nèi)降至液氮表面過(guò)夜，次晨投人液氮中。3.傳統(tǒng)程序：冷凍管置于4℃10分鐘→-20℃30分鐘→-80℃16~18小時(shí)（或隔夜）→液氮槽長(zhǎng)期儲(chǔ)存。細(xì)胞凍存方法：1.預(yù)先配制凍存液》（1）8%DMSO+細(xì)胞生長(zhǎng)液（92%血清）2.取對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期細(xì)胞，經(jīng)胰酶消化后，加入適量?jī)龃嬉?，用吸管吹打制成?xì)胞懸液（1×10(6)~5×10(6)細(xì)胞/ml）。3.加入1ml細(xì)胞于凍存管中，密封后標(biāo)記冷凍細(xì)胞名稱(chēng)和冷凍日期。液氮長(zhǎng)期保存。保存細(xì)胞的復(fù)蘇方法：1.快速解凍》凍存細(xì)胞從液氮中取出后，立即放入37℃水浴中，輕輕搖動(dòng)冷凍管，使其在1分鐘內(nèi)全部融化（不要超過(guò)3分鐘）。2.解凍后的細(xì)胞可直接接種到含完全生長(zhǎng)培養(yǎng)液的細(xì)胞培養(yǎng)瓶中直接進(jìn)行培養(yǎng)，24小時(shí)后再用新鮮完全培養(yǎng)液替換舊培養(yǎng)液，以去除DMSO。3.如果細(xì)胞對(duì)冷凍保護(hù)劑特別敏感解凍后的細(xì)胞應(yīng)先通過(guò)離心去除冷凍保護(hù)劑，然后再接種到含完全生長(zhǎng)培養(yǎng)液的培養(yǎng)瓶中。
細(xì)胞傳代時(shí)消化的問(wèn)題：可以這樣說(shuō)，對(duì)于需要消化傳代的細(xì)胞，每一次的消化都是對(duì)這個(gè)細(xì)胞存活與否，狀態(tài)好與不好最至關(guān)重要的考驗(yàn)。很多同學(xué)都遇到過(guò)這個(gè)問(wèn)題，自己養(yǎng)的細(xì)胞開(kāi)始的幾代長(zhǎng)的還挺好的，可是穿過(guò)幾代之后就發(fā)現(xiàn)自己的細(xì)胞，狀態(tài)越來(lái)越差勁了。對(duì)于這個(gè)問(wèn)題，可以非常肯定地說(shuō)，你的消化環(huán)節(jié)出問(wèn)題了。你每一次的消化都讓細(xì)胞受到較大損傷了。所以，越長(zhǎng)越差。在消化的過(guò)程中，你加入胰酶后，所有細(xì)胞都在被胰酶消化著，但是我們忽視了一個(gè)問(wèn)題就是，細(xì)胞的生長(zhǎng)狀態(tài)是不一樣的，每一個(gè)細(xì)胞的貼壁情況也是不一樣的，有的貼壁牢固，有的貼壁沒(méi)有那么牢固的，所以，讓所有的細(xì)胞消化同樣的時(shí)間對(duì)細(xì)胞是不公平的，他們受到了差別待遇當(dāng)然會(huì)有脾氣啊。我后來(lái)對(duì)消化的方法進(jìn)行了改良。爭(zhēng)取做到因材施教呵呵。我稱(chēng)之為“四步消化法”。（以難消化細(xì)胞為例）；具體操作：１)首先不加胰酶，倒掉舊培養(yǎng)基加入少量新培養(yǎng)基洗１-２遍，（這是前奏，即為步，目的是將漂浮著的死細(xì)胞之類(lèi)盡量洗掉。２)然后再加入少量新培養(yǎng)基直接吹打一遍，這一遍是把貼壁不牢固的細(xì)胞吹打下來(lái)。再用培養(yǎng)基洗一遍，兩次所得懸液混合傳入新瓶。即為第二步（你可以將這些傳入新瓶培養(yǎng)，以與后面胰酶消化過(guò)的細(xì)胞對(duì)比觀察看誰(shuí)長(zhǎng)的更好一點(diǎn)就知道該細(xì)胞對(duì)胰酶的敏感度了。）３)吸干凈瓶?jī)?nèi)剩余液體，加入０.３ml左右的胰酶潤(rùn)洗一遍，吸掉棄之，再加入１ml左右的胰酶消化。消化的同時(shí)置于顯微鏡下觀察，待細(xì)胞與細(xì)胞之間間隙明顯的時(shí)候立即吸掉胰酶與干凈子彈頭里備用，加入新培養(yǎng)基開(kāi)始吹打，吹打２-３遍后吸取懸液于試管或新瓶暫存。用２ml左右新培養(yǎng)基洗一遍與前面的混合。（你也可以傳入新瓶培養(yǎng)，以與后面及前面的做對(duì)比。）這是第三步。４)然后把前面剛吸出來(lái)的胰酶重新加進(jìn)去瓶里繼續(xù)消化剩余的貼壁牢固的細(xì)胞。當(dāng)然你也可以用新的胰酶，如果你們那比較富裕的話，呵呵。繼續(xù)鏡下觀察，待剩余細(xì)胞間隙明顯，細(xì)胞獨(dú)立開(kāi)來(lái)的時(shí)候，吸掉胰酶，加入新培養(yǎng)基吹打。懸液傳入新瓶培養(yǎng)（根據(jù)實(shí)際情況你自己把握）。這是第四步。其實(shí)還可以有第五步，對(duì)于特別難消化的細(xì)胞和對(duì)胰酶特別敏感的細(xì)胞的話，你可以繼續(xù)加第五步甚至第六步。為了細(xì)胞更好的狀態(tài)，更漂亮的樣子，沒(méi)辦法，你必須分多批多次消化，這樣才能限度地將胰酶對(duì)細(xì)胞的損傷降到最低，保證細(xì)胞的狀態(tài)能夠。當(dāng)然了，如果細(xì)胞是屬于那種很容易消化的細(xì)胞，像RAW２６４.７，僅僅第二步就搞定了。就沒(méi)必要第三步第四步了。這個(gè)是需要你在實(shí)驗(yàn)中能夠自己用心去體會(huì)的。建議你接受一個(gè)新細(xì)胞時(shí)把各步消化的細(xì)胞分別培養(yǎng)起來(lái)做比較，去摸索好細(xì)胞對(duì)胰酶的要求。便于你后續(xù)實(shí)驗(yàn)的開(kāi)展。將細(xì)胞消化分成這幾步，除了是為了避免胰酶對(duì)細(xì)胞的損傷之外，還有一個(gè)更重要的作用就是，可以程度地把細(xì)胞吹打成單個(gè)單個(gè)的狀態(tài)，不成片不連體。
H2110細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：COV504細(xì)胞、HEK-AD 293細(xì)胞、CCD18Co細(xì)胞
WI 38細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM-346細(xì)胞、MOLT-4細(xì)胞、Okayama University Medical School-27細(xì)胞
HCFB（HCF）細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WEHI-231細(xì)胞、MG63細(xì)胞、OVCAR 420細(xì)胞
SU-86-86細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCA 7細(xì)胞、NCIH820細(xì)胞、OVCA8細(xì)胞
OE-19細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Nthy-ori 3.1細(xì)胞、CTLA4Ig-24細(xì)胞、JM-1細(xì)胞
PK15細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WM 2664細(xì)胞、HEC151細(xì)胞、Mel RM細(xì)胞
H1954細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Eca109細(xì)胞、HEK-293-FT細(xì)胞、EAC細(xì)胞
B-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO-738細(xì)胞、Hs578Bst細(xì)胞、H-2452細(xì)胞
GM02219C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MCF 10A細(xì)胞、Lec1細(xì)胞、RD 2細(xì)胞
G402細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MOLP2細(xì)胞、TE353.SK細(xì)胞、PANC403細(xì)胞
HTSMC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LIM-1215細(xì)胞、Ej138細(xì)胞、HTori-3細(xì)胞
HL-60 Clone 15細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HHUA細(xì)胞、Roswell Park Memorial Institute 7666細(xì)胞、TE-6細(xì)胞
KMST6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MH7A細(xì)胞、SUM102PT細(xì)胞、NB19-RIKEN細(xì)胞
CHL-11細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：U373 MG細(xì)胞、Chang Cells細(xì)胞、HC11 Mammary Epithelium細(xì)胞
Murine Thymic Epithelial細(xì)胞： 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：T-84細(xì)胞、Lilly Laboratories Cell-Porcine Kidney 1細(xì)胞、PA I細(xì)胞
2780CP細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KOPN8細(xì)胞、TFH細(xì)胞、CHP-100細(xì)胞
2780CP細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KOPN8細(xì)胞、TFH細(xì)胞、CHP-100細(xì)胞
COR-L23細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CF Pac1細(xì)胞、J774A1細(xì)胞、NFS 60細(xì)胞
HC11 Mammary Epithelium細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：F98細(xì)胞、H-1734細(xì)胞、4T1.2細(xì)胞
Line 870 Emory University-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCD841CoTr細(xì)胞、U343細(xì)胞、Wien-133細(xì)胞
CA 46細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：D283 Med細(xì)胞、WERI-Rb 1細(xì)胞、Colo741細(xì)胞
NCI-H838細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：hTERT-RPE-1細(xì)胞、R1610細(xì)胞、Okayama University Medical School-23細(xì)胞
Co-115細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RIN Cl-5F細(xì)胞、HCT-FET細(xì)胞、MDAMB415細(xì)胞
NCI-BL6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEC251細(xì)胞、TE15細(xì)胞、BJ1細(xì)胞
MyLa2059細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKMEL-24細(xì)胞、PC 61 5.3細(xì)胞、NCI-H1781細(xì)胞
CAL-120細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Ishikawa細(xì)胞、RAT2細(xì)胞、MBT-2細(xì)胞
AAV293細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：COS1細(xì)胞、MLE12細(xì)胞、NCIH2171細(xì)胞
A-253細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPMI2650細(xì)胞、GA-10-Clone-4細(xì)胞、SW756細(xì)胞
MCF-7/ADR細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAL 62細(xì)胞、CRFK細(xì)胞、SCC9細(xì)胞
COLO-357細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU449細(xì)胞、S91細(xì)胞、MM1.S細(xì)胞
NS-I/1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：3T3J2細(xì)胞、WRL-68細(xì)胞、SNUC2B細(xì)胞
NCI-H1105細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1694細(xì)胞、RKO-E6細(xì)胞、Sup T-1細(xì)胞
H-1563細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H2023細(xì)胞、MIN6細(xì)胞、NCIH1568細(xì)胞
28SC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCC-ESF-1細(xì)胞、HEC1A細(xì)胞、COLO201細(xì)胞
SF 767細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TSUpr1細(xì)胞、ESC細(xì)胞、PE/CA-PJ-34細(xì)胞
COLO 16細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：EFM192C細(xì)胞、MSTO-211H細(xì)胞、MES23.5細(xì)胞
SNU-869細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：P 3 HR 1細(xì)胞、Uhth-74細(xì)胞、T-98細(xì)胞
NL20SV細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MA-c細(xì)胞、NCI-SNU-398細(xì)胞、Jiyoye細(xì)胞
L cells細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HMC3細(xì)胞、M619細(xì)胞、MKN 28細(xì)胞
MOVAS-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Human Liver-7702細(xì)胞、NCI-H460細(xì)胞、WM266細(xì)胞
Hs 766T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HRVEC細(xì)胞、MDA MB 436細(xì)胞、WM-266-4細(xì)胞
DU4475細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LNCaP細(xì)胞、MT-4細(xì)胞、KTC1細(xì)胞
C57 Mouse Tumor 64細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BALB/3T3細(xì)胞、MDAPCa2b細(xì)胞、RT-4細(xì)胞
PaTu 8988s細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：22Rv1細(xì)胞、HK2細(xì)胞、NCTC 929細(xì)胞
Institute for Medical Research-32細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-415細(xì)胞、HCC1187細(xì)胞、COLO357細(xì)胞
SJSA1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：L2細(xì)胞、CL34細(xì)胞、SHG44細(xì)胞
SNU-878細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HR8348細(xì)胞、OCI-Ly 1細(xì)胞、NCI-SNU-878細(xì)胞
293細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NPA87細(xì)胞、HT-144細(xì)胞、A875細(xì)胞
H2405細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BALL-1細(xì)胞、C3H/10T1/2 CL8細(xì)胞、P3 NS1 Ag4細(xì)胞
MAEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH820細(xì)胞、TF1細(xì)胞、RBL細(xì)胞
Toledo細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：G-361細(xì)胞、H-295細(xì)胞、KP4細(xì)胞
AMO1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RKO-AS-45-1細(xì)胞、MHCC 97-L細(xì)胞、OPM2細(xì)胞
GM17346細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：A-375.S2細(xì)胞、Line 697細(xì)胞、NCIH2342細(xì)胞
HT-55細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BT-474細(xì)胞、NS1/1-Ag4.1細(xì)胞、HLEB-3細(xì)胞
SK N SH細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDCC MSB1細(xì)胞、Hopkins-92細(xì)胞、H-1341細(xì)胞
SW 780細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs-695-T細(xì)胞、H82sclc細(xì)胞、H-1734細(xì)胞
Earle's L cells細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MGECs細(xì)胞、NCI-SNU-620細(xì)胞、JHH7細(xì)胞
TGW-I-nu細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NOK細(xì)胞、N1E-115細(xì)胞、MD Anderson-Metastatic Breast-157細(xì)胞
PL-45細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KPNRTBM1細(xì)胞、SAOS 2細(xì)胞、DHL-4細(xì)胞
P31-FUJ細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：801-D細(xì)胞、HCT 15細(xì)胞、SL-29細(xì)胞
ZR75_1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：AML193細(xì)胞、CCC-ESF-1細(xì)胞、RPMI 2650細(xì)胞
LNCaP-ATCC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MLA 144細(xì)胞、Japanese Tissue Culture-28細(xì)胞、P3HRI細(xì)胞
EFM-192B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH548細(xì)胞、CEK細(xì)胞、Hs 578T細(xì)胞
UMUC3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：JJN3細(xì)胞、hTERT-RPE1細(xì)胞、Rat Lung-65細(xì)胞
HCCLM6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LM3細(xì)胞、639 V細(xì)胞、Capan 2細(xì)胞
HCEC-B4G12細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：AX-Mel細(xì)胞、MNNG細(xì)胞、H-1975細(xì)胞
Melan-a細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC15細(xì)胞、HNE1細(xì)胞、HPAF-2細(xì)胞
OVCAR-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TE10細(xì)胞、SW1417細(xì)胞、LN-382細(xì)胞
Rat 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HMrSV5細(xì)胞、NCI-H1792細(xì)胞、ACT-1細(xì)胞
BL-6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAL62細(xì)胞、Hs729細(xì)胞、HemECs細(xì)胞
L78細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：L929(NCTC)細(xì)胞、HOMEC細(xì)胞、LX-2細(xì)胞
MB39細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Mc Ardle 7777細(xì)胞、3AA細(xì)胞、COR-L51細(xì)胞
HCE細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEC-1-A細(xì)胞、MC-3T3-E1細(xì)胞、TE-6細(xì)胞
GEO細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NEC細(xì)胞、Roswell Park Memorial Institute 2650細(xì)胞、PAI細(xì)胞
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