"BHK-21細胞：倉鼠腎成纖維細胞系
細胞背景資料：詳見相關(guān)文獻介紹
細胞形態(tài)：成纖維細胞樣
細胞生長：貼壁
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法：１：２傳代，每周換液１-２次。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
細胞生長特性：貼壁生長
細胞傳代注意事項：①傳代培養(yǎng)時注意無菌操作并防止細胞間的交叉污染。所有操作盡量靠近酒精燈火焰。每次只進行一種細胞的操作。每種細胞使用一套器材；②每天觀察細胞形態(tài)，掌握好細胞是否健康的標(biāo)準(zhǔn)：健康細胞的形態(tài)飽滿，折光性好，生長致密時即可傳代；③如發(fā)現(xiàn)細胞有污染跡象，應(yīng)立即采取措施，一般應(yīng)棄置污染的細胞，如果必須挽救，可加含有抗生素的BBS或培養(yǎng)基反復(fù)清洗，隨后培養(yǎng)基中加入較大量的抗生素，并經(jīng)常更換培養(yǎng)基。傳代細胞的建系和維持：細胞系的維持通過換液傳代再換液、再傳代和細胞種子凍存來實現(xiàn)。對每一個細胞系來說都有其自身的特點，要做好建系的維持必須記錄好細胞檔案,換液傳代和做好細胞系的管理工作。培養(yǎng)細胞的凍存及復(fù)蘇：細胞低溫凍存是培養(yǎng)室常規(guī)工作和通用技術(shù)。細胞凍存在-１９６℃液氮中，儲存時間幾乎是無限的。細胞凍存及復(fù)蘇的原則是慢凍快融。
凍存和復(fù)蘇的原則：慢凍快融》當(dāng)細胞冷到零度以下，可以產(chǎn)生以下變化：細胞器脫水，細胞中可溶性物質(zhì)濃度升高，并在細胞內(nèi)形成冰晶。如果緩慢冷凍，可使細胞逐步脫水，細胞內(nèi)不致產(chǎn)生大的冰晶；相反，結(jié)晶就大，大結(jié)晶會造成細胞膜、綱胞器的損傷和破裂。復(fù)蘇過程應(yīng)快融，目的是防止小冰晶形成大冰晶，即冰晶的重結(jié)晶。慢凍程序》1.標(biāo)準(zhǔn)程序：采用細胞凍存器》當(dāng)溫度在-25℃以上時，1~2℃/min；當(dāng)溫度達-25℃以下時，5~10℃/min；當(dāng)溫度達-100℃時，可迅速放入液氮中。2.簡易程序：將冷凍管（管口要朝上）放入紗布袋內(nèi)，紗布袋系以線繩，通過線繩將紗布袋固定于液氮罐罐口，按每分鐘溫度下降1~2℃的速度，在40min內(nèi)降至液氮表面過夜，次晨投人液氮中。3.傳統(tǒng)程序：冷凍管置于4℃10分鐘→-20℃30分鐘→-80℃16~18小時（或隔夜）→液氮槽長期儲存。細胞凍存方法：1.預(yù)先配制凍存液》（1）8%DMSO+細胞生長液（92%血清）2.取對數(shù)生長期細胞，經(jīng)胰酶消化后，加入適量凍存液，用吸管吹打制成細胞懸液（1×10(6)~5×10(6)細胞/ml）。3.加入1ml細胞于凍存管中，密封后標(biāo)記冷凍細胞名稱和冷凍日期。液氮長期保存。保存細胞的復(fù)蘇方法：1.快速解凍》凍存細胞從液氮中取出后，立即放入37℃水浴中，輕輕搖動冷凍管，使其在1分鐘內(nèi)全部融化（不要超過3分鐘）。2.解凍后的細胞可直接接種到含完全生長培養(yǎng)液的細胞培養(yǎng)瓶中直接進行培養(yǎng)，24小時后再用新鮮完全培養(yǎng)液替換舊培養(yǎng)液，以去除DMSO。3.如果細胞對冷凍保護劑特別敏感解凍后的細胞應(yīng)先通過離心去除冷凍保護劑，然后再接種到含完全生長培養(yǎng)液的培養(yǎng)瓶中。
細胞消化過程總結(jié)：其實絕大部分細胞消化的時候是只要用胰酶潤洗一遍即可，吸去胰酶后，殘留的那些無法計算體積的附著在細胞表面的微量胰酶在３７度一般不到２min足夠消化細胞（絕大部分１min不到）。對于這些細胞原則上不要用胰酶孵育細胞，連續(xù)這樣傳代，對細胞傷害很大。簡單的程序是PBS潤洗吸去，胰酶潤洗吸去，然后３７度消化。２，什么算是消化好了呢？不是細胞全部成間隔分布很離散的單個圓形才算消化好了，一般你肉眼觀察貼壁細胞層，只要能移動了，多半呈沙壯移動，其實已經(jīng)可以了，很多人喜歡把細胞消化或者吹打成完全分離細胞，這是沒有必要的。一般能移動了，說明細胞與培養(yǎng)基質(zhì)材料的附著已經(jīng)消失了，細胞之間的附著也已經(jīng)消失了，細胞已經(jīng)獨立分布了（雖然沒有呈現(xiàn)很廣的離散分布）。這個時候應(yīng)該停止消化，不要等到看到鏡下所有細胞都分離得非常好，間隙很大，才停止。細胞就是完全成單個細胞懸液，之后在貼壁的過程中仍然會聚集，這個是貼壁培養(yǎng)的細胞，尤其是腫瘤細胞的一個特性，無論死活的細胞都是如此，你可以嘗試，準(zhǔn)備１００%的單個細胞懸液，貼壁后觀察細胞，仍然是幾個幾個細胞聚集在一起。一些懸浮培養(yǎng)細胞也是如此，容易聚集，不要去嘗試過幾個小時就拿出來吹打成單細胞懸液（不要笑，這個是初養(yǎng)懸浮細胞的人常犯的錯誤，以為懸浮培養(yǎng)就是一個一個分開）。細胞只要能從基質(zhì)上脫離下來，這個時候即使是成片的（比如Calu-３細胞），吹打不超過２０次后（一般１０次即可），成小規(guī)模聚集（１０個細胞左右），是正常的，不要試圖再去延長消化時間，或者像有的同學(xué)那樣吹打１h，等待單細胞懸液出現(xiàn)。比較難消化的細胞（潤洗方法５min還不能消化），比如HCT１５, LS４１１和KM１２，這樣的細胞一般需要用少量胰酶孵育，但也不需要很多，一般１００mm dish，一次最多加入５００ul，就足夠了，一般我加３００ul。即使這樣難消化的細胞，一般不超過５min，即可見細胞成片移動，就應(yīng)該停止消化。一些正常細胞也會有難消化的時候，比如tsDC細胞，但也只要用少量胰酶孵育，３min左右即可看到成片沙狀移動。
K-1735細胞系相關(guān)產(chǎn)品：786.O細胞、Calu 6細胞、HSAS3細胞
H-1651細胞系相關(guān)產(chǎn)品：A431/P細胞、SC1細胞、LTEP-sm細胞
RIMEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：AKR細胞、H-2081細胞、H8細胞
FT-293細胞系相關(guān)產(chǎn)品：B104 [Rat neuroblastoma]細胞、ARH-77細胞、NPA87-1細胞
P3-NS1/1-Ag4-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NHLF細胞、NCI-H524細胞、Caco 2細胞
ECGI10細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CG4細胞、BDCM細胞、C3H/10T1/2 clone 8細胞
HANK1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MCA-38細胞、H-1781細胞、NCI-H322細胞
CEM T4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：DHL5細胞、Douglas Foster-1細胞、NPA 87細胞
RCC10RGB細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PLA801-95C細胞、Michigan Cancer Foundation-10A細胞、MIO-M1細胞
LL/2 (LLC1)細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HeLa229細胞、ROS 17/2.8細胞、LAN6細胞
Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-8細胞系相關(guān)產(chǎn)品：AGS細胞、P388.D1細胞、P3X63 AG8-653細胞
MC/CAR細胞系相關(guān)產(chǎn)品：A-2058細胞、A 72細胞、WEHI 3B細胞
P3X63NS1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KYSE 30細胞、RSC 96細胞、VP 267細胞
MA-104細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Rin-M-5F細胞、RT4-D6P2T細胞、UMR106細胞
HEL-92.1.7細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-35 Reuber細胞、SW620細胞、H-1836細胞
HHUA細胞系相關(guān)產(chǎn)品：U266BL細胞、Hs-578Bst細胞、NK92-MI細胞
HHUA細胞系相關(guān)產(chǎn)品：U266BL細胞、Hs-578Bst細胞、NK92-MI細胞
MHH-CALL-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HIEC細胞、KYSE 270細胞、OCI/AML-3細胞
DMS 153細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs852T細胞、CHO細胞、T/G HA VSMC細胞
SNT8細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCD33Co細胞、OCI-LY-10細胞、HP615細胞
MDA 231-LM2-4175細胞系相關(guān)產(chǎn)品：University of Michigan-Urothelial Carcinoma-14細胞、Ca761細胞、H719細胞
IHHA-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：G402細胞、BEL 7405細胞、TE-32細胞
QGY細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCD-1112sk細胞、IPLB-SF-21細胞、HCC-4006細胞
SNU-739細胞系相關(guān)產(chǎn)品：A-498細胞、HGBEC細胞、AM-38細胞
H-1299細胞系相關(guān)產(chǎn)品：T98G細胞、P116細胞、MFE 296細胞
E.L.4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEL9217細胞、HEL299細胞、SVHUC細胞
T2(174 x CEM.T2)細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PANC.1細胞、H295R細胞、CNE2Z細胞
UMNSAH-DF1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PC10細胞、BE(2)-M17細胞、CAL-12T細胞
A427細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCD 841 CoN細胞、SW 954細胞、RH-35細胞
Los Angeles Prostate Cancer-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SF295細胞、HKBML細胞、HRVEC細胞
PLA801C細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MBT-2細胞、CCD-19Lu細胞、Experimental Mammary Tumour-6細胞
HTori:3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KBM-7/Hap8細胞、H4-II-E細胞、SCC7細胞
TC-1 [Mouse lung]細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 274細胞、HuH-28細胞、NCIH2023細胞
ACC-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：4T1-LUC細胞、HRA 19細胞、SUM-149細胞
mREC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKNBE(2c)細胞、16-HBE14o細胞、LLC-PK-1細胞
HSC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDAMB435S細胞、AC29細胞、D407 RPE細胞
BC-3-H-I細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CHP126細胞、Lewis Lung細胞、NBL-3細胞
Roswell Park Memorial Institute 1846細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PLC PRF 5細胞、HuT-102細胞、GM02219細胞
Mv1.Lu細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-MB-361細胞、H1975細胞、P3X63細胞
H-929細胞系相關(guān)產(chǎn)品：C3H/10T1/2 CL8細胞、ZR751細胞、NCI-H661細胞
B16-F10細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Sp2/mIL-6細胞、HEK293-A細胞、EU-4細胞
QGY7703細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Jurkat77細胞、PK-15細胞、SuDHL 5細胞
Me-Wo細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CEM細胞、HO1-N-1細胞、SW837細胞
MDAPCa-2b細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TOV-112D細胞、U-373MG細胞、HS-683細胞
THEECs細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-N-BE2細胞、NTC200細胞、L-5178-Y-R細胞
B16 melanoma細胞系相關(guān)產(chǎn)品：As-PC1細胞、End1/E6E7細胞、H889細胞
HPAC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：JVM-3細胞、H2198細胞、YES2細胞
Pt K1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Ly18細胞、PZ-HPV-7細胞、H2452細胞
HN6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HPB-ALL細胞、NOZ細胞、MOPC細胞
SU4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NW38細胞、MCA-38細胞、CAL-39細胞
U266 Bl細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1651細胞、TM4細胞、SU.86.86細胞
NCI-BL1339細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Neuro-2a細胞、Tb 1-Lu細胞、NCTC1469細胞
NIT-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NPA 87細胞、Co-115細胞、HCC202細胞
H2029細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAL27細胞、Panc08.13細胞、Hs 274細胞
KYSE180細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RSC-96細胞、SU4細胞、JROECL21細胞
OVCA8細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM03320細胞、RCC-10細胞、hA549細胞
OVCA8細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM03320細胞、RCC-10細胞、hA549細胞
MV 4;11細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KYSE 140細胞、CV-1.K細胞、RAW2647細胞
RCCJF細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HSC-1細胞、UMUC1細胞、CLONE M3細胞
LLC-PK-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KHYG細胞、INS-1細胞、HEK293EBNA細胞
A20細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HNE2細胞、HME1細胞、95C細胞
PIG3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HT 29細胞、786-O RCC細胞、JURKAT E-61細胞
Ramos 2G6 4C10細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PANC-04-03細胞、TE-85細胞、Statens Seruminstitut Rabbit Cornea細胞
CII細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MLFC細胞、bEnd3細胞、HEL92.1.7細胞
NCI-H740細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LA-N-6細胞、AM細胞、Panc_08_13細胞
H1963細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK Col 1細胞、GA-10 clone 4細胞、MCF-7/ADR細胞
Capan1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-RC-20細胞、UWB1-289細胞、HRMC細胞
H-2141細胞系相關(guān)產(chǎn)品：67NR細胞、TK10細胞、bEND.3細胞
P3X63Ag8653細胞系相關(guān)產(chǎn)品：A704細胞、CHO cell clone K1細胞、HEC-1B細胞
TR-146細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-231細胞、University of Michigan-Urothelial Carcinoma-3細胞、CHO細胞
GMK,BSC-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TE 85 ClF-5細胞、NB4細胞、COLO 205細胞
Rat Fetal Lung-6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：JB6 [Mouse]細胞、Kit-225細胞、RS4-11細胞
RIMEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：AKR細胞、Wien133細胞、NCI-H727細胞
SLMT-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCILY3細胞、RAW2647細胞、HONE1細胞
"