"NCI-H1672細(xì)胞：人小細(xì)胞肺癌細(xì)胞系

細(xì)胞背景資料：小細(xì)胞肺癌；男性

細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣

細(xì)胞生長：貼壁

細(xì)胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源

細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)

細(xì)胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。

細(xì)胞來源說明：細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系

細(xì)胞生長特性：貼壁

購買的細(xì)胞死亡或細(xì)胞存活率不佳可能原因？研究人員在細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)出現(xiàn)存活率不佳，原因比較復(fù)雜，常見原因可歸納為：培養(yǎng)基使用錯(cuò)誤或培養(yǎng)基品質(zhì)不佳；血清使用錯(cuò)誤或血清的品質(zhì)不佳；解凍過程錯(cuò)誤；冷凍細(xì)胞解凍后，加以洗滌細(xì)胞和離心；懸渾細(xì)胞誤認(rèn)為死細(xì)胞；培養(yǎng)溫度使用錯(cuò)誤；細(xì)胞置于-８０℃太久等。建議嚴(yán)格參照ATCC的標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程進(jìn)行細(xì)胞復(fù)蘇、凍存等工作。欲將一般動(dòng)物細(xì)胞離心下來，其離心速率應(yīng)為多少轉(zhuǎn)速?欲回收動(dòng)物細(xì)胞，其離心速率一般為３００×g(約１O(jiān)OOrpm),５-１０分鐘，轉(zhuǎn)速過高或離心時(shí)間過長都將造成細(xì)胞死亡。合適的離心轉(zhuǎn)速是根據(jù)相對(duì)離心力決定。RCF=１.１１９×１０５×r×(rpm)２，其中r為離心機(jī)轉(zhuǎn)軸中心與離心套管底部內(nèi)壁的距離；rpm為離心機(jī)每分鐘的轉(zhuǎn)數(shù)；RCF(relative centrifugal force)為相對(duì)離心力，以重力加速度g(９８０.６６cm/s２)的倍數(shù)來表示單位。

細(xì)胞株(系)的使用，為醫(yī)學(xué)研究和測(cè)試工作帶來了極大的方便。但細(xì)胞的傳代是有限制的，長期連續(xù)傳代的細(xì)胞，不僅消耗大量的人力和物力，而且細(xì)胞的生長與形態(tài)等會(huì)有一定退變或轉(zhuǎn)化，因而細(xì)胞失去原有的遺傳特性，有時(shí)還會(huì)由于細(xì)胞污染而造成傳代中斷，種子丟失。因此，在實(shí)際工作中常需凍存一定數(shù)量的細(xì)胞，以備替換使用。細(xì)胞冷凍與復(fù)蘇是細(xì)胞培養(yǎng) 室的常規(guī)工作和通用技術(shù)。目前，細(xì)胞凍存最常用的技術(shù)是液氮冷凍保存法，主要采用加適量保護(hù)劑的緩慢冷凍法凍存細(xì)胞。細(xì)胞在不加任何保護(hù)劑的情況下直接冷凍，細(xì)胞內(nèi)外的水分會(huì)很快形成冰晶，從而引起一系列不良反應(yīng)。如細(xì)胞脫水使局部電解質(zhì)濃度增高，pH值改變，部分蛋白質(zhì)由于上述原因而變性，引起細(xì)胞內(nèi)部空間結(jié)構(gòu)紊亂，溶酶體膜由此遭到損傷而釋放出溶酶體酶，使細(xì)胞內(nèi)結(jié)構(gòu)成分造成破壞，線粒體腫脹，功能丟失，并造成能量代謝障礙。胞膜上的類脂蛋白復(fù)合體也易破壞引起細(xì)胞膜通透性的改變，使細(xì)胞內(nèi)容物丟失。如果細(xì)胞內(nèi)冰晶形成較多，隨冷凍溫度的降低，冰晶體積膨脹造成細(xì)胞核DNA空間構(gòu)型發(fā)生不可逆的損傷，而致細(xì)胞死亡。因此，細(xì)胞冷凍技術(shù)的關(guān)鍵是盡可能地減少細(xì)胞內(nèi)水分，減少細(xì)胞內(nèi)冰晶的形成。采用甘油或二甲基亞砜作保護(hù)劑，這兩種物質(zhì)分子量小，溶解度大，易穿透細(xì)胞，可以使冰點(diǎn)下降，提高細(xì)胞膜對(duì)水的通透性，且對(duì)細(xì)胞無明顯毒性。慢速冷凍方法又可使細(xì)胞內(nèi)的水分滲出細(xì)胞外，減少胞內(nèi)形成冰結(jié)晶的機(jī)會(huì)，從而減少冰晶對(duì)細(xì)胞的損傷。

最近在培養(yǎng)細(xì)胞時(shí)，發(fā)現(xiàn)其狀態(tài)不是很好，很容易扎堆生長，用胰酶消化的時(shí)候也是一團(tuán)一團(tuán)地被消化下來，很難把它們吹散成一個(gè)一個(gè)細(xì)胞。而且長得也挺快也挺不均勻的，傳代的第二天，有些地方就長得滿滿的了。想請(qǐng)教一下這是為什么呢？你好，我養(yǎng)的細(xì)胞和你一樣，消化下來也是一團(tuán)的，但吹打以后就沒有這樣的情況了。建議你分皿前還是要吹勻，分皿后在鏡下看一看，移動(dòng)培養(yǎng)皿的時(shí)候盡量動(dòng)作輕，避免晃動(dòng)。細(xì)胞生長挺快，那么細(xì)胞的增殖能力應(yīng)該較強(qiáng)。胰酶消化成團(tuán)的問題我覺得有以下幾種可能：一、細(xì)胞消化后吹打不均勻，造成細(xì)胞成團(tuán)生長：二、細(xì)胞細(xì)化太過，細(xì)胞成片脫落，吹打時(shí)沒有受力點(diǎn)，細(xì)胞聚團(tuán)生長。解決辦法：根據(jù)細(xì)胞生長的情況進(jìn)行多次消化，將同次消化下來的細(xì)胞放在一個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)。貼壁細(xì)胞傳代培養(yǎng)：一般步驟為：真空泵吸走培養(yǎng)基，１XPBS漂洗兩次，加入１mlEDTA-Tripsin（１００mm皿為例），３７度放置數(shù)分鐘，輕拍培養(yǎng)瓶使細(xì)胞自瓶壁脫落，加入適量血清，以吸管上下吸放數(shù)次以打散細(xì)胞團(tuán)塊，離心后加入新鮮培養(yǎng)基，按比例轉(zhuǎn)移至新皿。細(xì)胞的傳代最重要的是胰酶處理時(shí)間，若胰酶處理太久，容易造成細(xì)胞貼壁不緊，顯微鏡下觀察立體感不強(qiáng)，嚴(yán)重的時(shí)候甚至?xí)斐杉?xì)胞死亡。我談?wù)剛€(gè)人經(jīng)驗(yàn)：HepG-２、A５４９、Hela、SGC-７９０１幾種癌細(xì)胞處理時(shí)間可適當(dāng)放長，一般處理５-６min，C２C１２、COS-７、NIH-３T３比較容易脫落，２min足矣，P１９Cl６和２９３細(xì)胞貼壁不緊，可在PBS漂洗后，直接換新鮮培養(yǎng)基打散。

SCCVII/St細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Panc-327細(xì)胞、LNCaP-ATCC細(xì)胞、LS 180細(xì)胞

RSC-96細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKRC-52細(xì)胞、769-P細(xì)胞、SUM 52PE細(xì)胞

U87MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OE-19細(xì)胞、EFM-192C細(xì)胞、BHK 21細(xì)胞

OE-21細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Colon26細(xì)胞、Jurkat E6.1細(xì)胞、H250細(xì)胞

293-GP細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SHG 44細(xì)胞、SKES1細(xì)胞、Panc2.03細(xì)胞

SJSA1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：L2細(xì)胞、CL34細(xì)胞、SHG44細(xì)胞

Hs706T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SR786細(xì)胞、JC細(xì)胞、Panc02細(xì)胞

RGC-5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：B16F0細(xì)胞、Human Epidermoid carcinoma #2細(xì)胞、A 72細(xì)胞

U87MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OE-19細(xì)胞、EFM-192C細(xì)胞、BHK 21細(xì)胞

NCI-H187細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RCK8細(xì)胞、Y 1細(xì)胞、HEK-293H細(xì)胞

SNU-620細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：DoHH2細(xì)胞、NPC-TW01細(xì)胞、NCIH1435細(xì)胞

PLMVEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：JB6 clone 30, subclone 7b細(xì)胞、HTh-74細(xì)胞、L(TK-)細(xì)胞

DHL-5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KS-1 [Human glioblastoma]細(xì)胞、Human Microvascular Endothelial細(xì)胞：-1細(xì)胞、HCC0070細(xì)胞

WEHI-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BERH-2細(xì)胞、PC-12細(xì)胞、SKGT4細(xì)胞

NEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：U14細(xì)胞、H1355細(xì)胞、Clone M-3細(xì)胞

M059K細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NMCG1細(xì)胞、C-Lu65細(xì)胞、M07e細(xì)胞

M059K細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NMCG1細(xì)胞、C-Lu65細(xì)胞、M07e細(xì)胞

Mv.1.Lu細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：YAC細(xì)胞、BC-027細(xì)胞、LICCF細(xì)胞

OC 316細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SF-539 BT細(xì)胞、Nittby-Salford 1細(xì)胞、MNNG-HOS (Cl#5)細(xì)胞

VMRC-LCD細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：M059K細(xì)胞、NBL-S細(xì)胞、NCI-H1522細(xì)胞

NCI-H78細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK LU 1細(xì)胞、PK-136細(xì)胞、HEL-1細(xì)胞

NCIH820細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HBE細(xì)胞、SNU-668細(xì)胞、SKBr3細(xì)胞

SW 1417細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OB2細(xì)胞、SKMEL1細(xì)胞、U-2 OS細(xì)胞

WERI-Rb 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：C4-2細(xì)胞、RK13細(xì)胞、Y3-Ag1,2,3細(xì)胞

GM01232細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Tu212細(xì)胞、32D.3細(xì)胞、J82 COT細(xì)胞

Cloudman S91 melanoma細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO 206細(xì)胞、CAL39細(xì)胞、NCI-522細(xì)胞

HuT-102細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：102PT細(xì)胞、SK-UT-1細(xì)胞、P3-X63Ag8細(xì)胞

GA10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-322細(xì)胞、HCT116/L細(xì)胞、TK+/- (clone 3.7.2C)細(xì)胞

KU1919細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MC9細(xì)胞、NMC-G1細(xì)胞、Panc 04.03細(xì)胞

P3X63Ag8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK293A細(xì)胞、SCC-7細(xì)胞、SNU407細(xì)胞

PJ34細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3HRI細(xì)胞、SNU-878細(xì)胞、HOP 62細(xì)胞

P1-Raji細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RCC-10RGB細(xì)胞、MG-HU-3細(xì)胞、OCI-AML-5細(xì)胞

L6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKCO 1細(xì)胞、DU4475細(xì)胞、Michigan Cancer Foundation-12F細(xì)胞

PTK 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Medical Research Council cell strain-9細(xì)胞、SKRC-42細(xì)胞、SHI-1細(xì)胞

Ly1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Intestinal Porcine Epithelial細(xì)胞：-1細(xì)胞、Sp2/0細(xì)胞、NCIH847細(xì)胞

COLO679細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：EPC細(xì)胞、Hs-940細(xì)胞、SCH細(xì)胞

MB-49細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HT29細(xì)胞、KOPN-8細(xì)胞、UC-3細(xì)胞

TOV-21G細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H22-H8D8細(xì)胞、H865細(xì)胞、SNU-251細(xì)胞

KM-H2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HMC-1細(xì)胞、CaSki細(xì)胞、KP-2細(xì)胞

Turbot Embryonic細(xì)胞：細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RAOEC細(xì)胞、SKNEP細(xì)胞、Caco-2/BBe細(xì)胞

Hs 578Bst細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC1171細(xì)胞、Tu686細(xì)胞、J82細(xì)胞

MDCK-II細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：C-Lu-65細(xì)胞、MN-60細(xì)胞、HCC94細(xì)胞

TCCPAN2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HLEC細(xì)胞、QGP-1細(xì)胞、OP9細(xì)胞

MHCC-LM3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：C-28I2細(xì)胞、JROECL19細(xì)胞、Hs934T細(xì)胞

TE3A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：U266B1細(xì)胞、HOSEpiC細(xì)胞、A172細(xì)胞

ZR-75-30細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：EBC-1/original細(xì)胞、SiHa細(xì)胞、EAC-E2G8細(xì)胞

C26細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LS123細(xì)胞、TNC-1B12B4細(xì)胞、H9c2細(xì)胞

SU.86細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TCam-2細(xì)胞、IGROV1細(xì)胞、HPAF-I細(xì)胞

Granta 519細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HET-1A細(xì)胞、J 774A.1細(xì)胞、Central Adrenergic TH-expressing a細(xì)胞

HIEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 600.T細(xì)胞、DoHH-2細(xì)胞、CCRF.CEM細(xì)胞

SNT-8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Vero E-6細(xì)胞、HPAEC細(xì)胞、HET-1A細(xì)胞

MV-1-Lu細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BIU-87/Adr細(xì)胞、NOZC-1細(xì)胞、T 98 G細(xì)胞

MCAEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM15452細(xì)胞、293T細(xì)胞、McA-RH 7777細(xì)胞

RPTC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MES13細(xì)胞、293A細(xì)胞、M.D. Anderson-Prostate Cancer-2b細(xì)胞

KM12細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Farage Original Line細(xì)胞、NCI-H165細(xì)胞、SW-839細(xì)胞

TE5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MN-9D細(xì)胞、NCI-H2066細(xì)胞、TE-5細(xì)胞

293 F細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Huh-7.5.1細(xì)胞、RS4-11細(xì)胞、U87細(xì)胞

SVHUC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-2052細(xì)胞、Factor Dependent Cell-Paterson 1細(xì)胞、NCI-H716細(xì)胞

BNL CL.2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TF1細(xì)胞、JURKAT E-6.1細(xì)胞、Colo-206F細(xì)胞

OCI-AML-5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU398細(xì)胞、16HBE細(xì)胞、SK-N-BE(2C)細(xì)胞

NCIH128細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MC3T3, E1 subgroup-4 clone細(xì)胞、EBTr (NBL-4)細(xì)胞、G361mel細(xì)胞

NCTC 1469細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WiDrTC細(xì)胞、Rat Glomerular Endothelial細(xì)胞、HCC-1171細(xì)胞

SUPT-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RIN14B細(xì)胞、Hs852T細(xì)胞、Cates 1B細(xì)胞

COV-362細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BAEC細(xì)胞、MKN45細(xì)胞、PLB 985細(xì)胞

CAL39細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-UT-1細(xì)胞、RBE細(xì)胞、BT-20細(xì)胞

HEM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW 1116細(xì)胞、KASUMI6細(xì)胞、NCI-446細(xì)胞

NTERA2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NBL-4細(xì)胞、NK-92 MI細(xì)胞、SW 1353細(xì)胞

Astrocyte type I clone細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-SNU-1細(xì)胞、H2.35細(xì)胞、SHI1細(xì)胞

GL261細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM02131細(xì)胞、SK-N-MC細(xì)胞、HuH-1細(xì)胞

HCT116細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Rat podocyte細(xì)胞、MKN 45細(xì)胞、SK-N-BE(2)C細(xì)胞

H-2126細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：A253細(xì)胞、SK-MES細(xì)胞、KYSE 150 KYSE150 Kyse150 KY150

細(xì)胞

HepG2-luc細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKNO1細(xì)胞、GS-9L細(xì)胞、MES-SA/Dx5細(xì)胞

U87MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OE-19細(xì)胞、WBF344細(xì)胞、GC-1 spg細(xì)胞

HET1A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HS766T細(xì)胞、KYSE180細(xì)胞、FAK+/+細(xì)胞

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