"RSC96細胞：大鼠雪旺細胞系
細胞背景資料：雪旺細胞；自發(fā)永生
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
細胞生長：貼壁
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
細胞生長特性：貼壁
培養(yǎng)細胞真的不難，最關(guān)鍵幾點：１)所有的東西使用，如果你用的血清、培養(yǎng)皿、培養(yǎng)基、胰酶什么的都是進口的，真的很難相信你會把細胞養(yǎng)壞；２)動作要快，胰酶消化，換液什么，細胞暴露在空氣中的時間越少越好。另外，要掌握好胰酶消化時間，所謂的細胞狀態(tài)差，很多時候是傳代的原因；３)有時間的話，需要細胞計數(shù)，傳相應(yīng)數(shù)目的細胞到培養(yǎng)皿中，可以大致清楚細胞的生長曲線，不會臨時要處理，手足無措；４)要做什么心里要非常清楚，合理安排時間，傳代細胞的實驗穿插進行，可以節(jié)省很多時間，也不會耽誤別人的實驗；５)個人的實驗器具自己收一套，不要和別人混用，最近換了什么新的東西稍微記一下，試劑一旦懷疑污染，馬上丟；６)傳代細胞不能進去太多人，避免相互干擾。每天對待細胞比孝敬爹媽還用心，那真是捧在手里怕碎了，含在嘴里怕化了，看在眼里怕丟了，培養(yǎng)細胞時有哪些經(jīng)驗教訓(xùn)可以分享呢?１)嚴格無菌操作，多噴噴酒精，要是對滅菌的東西不放心，自己包自己送自己烘干；２)不要和別人共用試劑耗材，自己準備一套；３)有可能的話在拿到新細胞的時候做好支原體衣原體檢測；４)水浴鍋很臟，生化培養(yǎng)箱要是得手動加濕的話盤里的水也會很臟，勤換(滅菌水加進去)；５)晚上離開的時候給傳代細胞照紫外，超凈臺是用完就開；６)是同一時間就你一個人在用傳代細胞在養(yǎng)細胞。
細胞復(fù)蘇相關(guān)注意事項：１.取細胞的過程中注意帶好防凍手套，護目鏡。此項尤為重要，細胞凍存管可能漏入液氮，解凍時凍存管中的氣溫急劇上升，可導(dǎo)致爆炸。２.凍存液的問題：凍存液的配置已是常識，在這里不作詳述，但二甲基亞砜(DMSO )對細胞不是完全無毒副作用，在常溫下，二甲基亞砜對細胞的毒副作較大，因此，必須在１-２min內(nèi)使凍存液完全融化。如果復(fù)蘇溫度太慢，會造成細胞的損傷，二甲基亞砜(DMSO)選擇進口產(chǎn)品。３.離心前須加入少量培養(yǎng)液。細胞解凍后二甲基亞砜濃度較高，注意加入少量培養(yǎng)液可稀釋其濃度，以減少對細胞的損傷。４.離心問題：目前主要有兩種見解。一種是解凍后的細胞懸液直接吹打均勻后分裝到培養(yǎng)瓶中進行培養(yǎng)，第二天換液。因為離心的目的是兩個，去除DMSO，去除死細胞，這個是標準流程，但對一般人來說，把握不好離心轉(zhuǎn)速和時間，轉(zhuǎn)的不夠活細胞沉底的少，細胞就全被扔掉了，轉(zhuǎn)過了活細胞會受壓過大，死亡。此外在操作過程中容易污染，所以不推薦。另一種說法為細胞懸液中含有二甲基亞砜(DMSO)，DMSO對細胞有一定的毒副作用，所以須將離心后的液體前倒凈，且一定倒干凈。我在試驗中按照常規(guī)的離心分裝的方法進行復(fù)蘇，結(jié)果無異常。５.細胞貼壁少的問題：教科書中說明凍存細胞解凍時１ml細胞液要加１０ml-１５ml培養(yǎng)液，而在我的試驗中的經(jīng)驗總結(jié)為培養(yǎng)基越少細胞越容易貼附。６.復(fù)蘇細胞分裝的問題：試驗中我的經(jīng)驗總結(jié)為復(fù)蘇１管細胞一般可分裝到１-２只培養(yǎng)瓶中，分裝過多，細胞濃度過低，不利于細胞的貼壁。７.加培養(yǎng)基的量放入問題：這個量的多少的把握主要涉及到的問題DMSO的濃度，從如果你加培養(yǎng)基的太少，那么DMSO的濃度就會比較大，就會影響細胞生長，從以前的資料來看，DMSO的濃度在小于０.５%的時候?qū)σ话慵毎麤]有什么影響，還有一個說法是１%。所以如果你的凍存液的濃度是１０%DMSO的話那么加１０ml以上的培養(yǎng)基就恰好稀釋到了無害濃度。
細胞培養(yǎng)中支原體污染的經(jīng)驗分享：支原體是一類缺乏細胞壁的原核細胞型微生物，大小一般在０.３-０.５um之間，呈高度多形性，有球形、桿形、絲狀、分枝狀等多種形態(tài)。它不同于細胞，也不同于病毒。支原體用普通染色法不易著色，用姬姆薩染色很淺，革蘭染色為陰性。支原體可在雞胚絨毛尿囊膜上或細胞培養(yǎng)中生長，營養(yǎng)要求比細菌高。細胞培養(yǎng)(特別是傳代細胞)被支原體污染是個世界性問題。在細胞培養(yǎng)中支原體感染發(fā)生率達到６３%，支原體感染發(fā)生后能改變細胞的DNA,RNA及蛋白表達，又不能通過可視法對其進行檢測，而且它對細胞的生長率影響較小，不易引起注意。國內(nèi)外研究表明，９５%以上是以下四種支原體：口腔支原體(M.orale)、精酸支原體(M.arginini)、豬鼻支原體(M.hyorhinis)和萊氏無膽甾原體(A.laidlawii)，為牛源性。以上是最常見的污染細胞培養(yǎng)的支原體菌群，但能夠污染細胞的支原體種類是很多的，國外調(diào)查證明，大約有二十多種支原體能污染細胞，有的細胞株可以同時污染兩種以上的支原體。支原體污染的來源包括工作環(huán)境的污染、操作者本身的污染(一些支原體在人體是正常菌群)、培養(yǎng)基的污染、污染支原體的細胞造成的交叉污染、實驗器材帶來的污染和用來制備細胞的原始組織或器官的污染。組織細胞培養(yǎng)工作中，主要從以下幾個方面來預(yù)防支原體的污染：控制環(huán)境污染;嚴格實驗操作；細胞培養(yǎng)基和器材要保證無菌；在細胞培養(yǎng)基中加入適量的抗生素。支原體污染細胞后，特別是重要的細胞株，有必要清除支原體，常用方法有抗生素處理、抗血清處理、抗生素加抗血清和補體聯(lián)合處理。支原體最突出的結(jié)構(gòu)特征是沒有細胞壁，一般來講，對作用于細胞壁生物合成的抗生素，如萬古霉素等完全不敏感；對多粘菌素(polymycin)、利福平、磺胺藥物普遍耐藥。對支原體最有抑制活性及常用于支原體感染治療的抗生素是四環(huán)素類、大環(huán)內(nèi)酯類及一些喹諾酮;其他類抗生素如基糖苷類、霉素對支原體有較小抑制作用，所以常不用來作為支原體感染的化學(xué)治療劑。
HOP 62細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU886細胞、NCI-SNU-16細胞、H-1105細胞
NRK clone 52E細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PBL細胞、ARO81細胞、NIH:OVCAR-5細胞
LAN5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW 1463細胞、293GP細胞、H295細胞
Colo741細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KYSE-410細胞、EnCa1細胞、TE671細胞
HSC-T6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs742T細胞、MM6細胞、HOC-1細胞
PFSK-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GT38細胞、Tu-212細胞、Roswell Park Memorial Institute 8402細胞
769P細胞系相關(guān)產(chǎn)品：AHH1細胞、AU-565細胞、H-1770細胞
HDQP1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Tissue Culture-1細胞、HuP-T4細胞、Ect1/E6E7細胞
C3H10T1/2 clone8細胞系相關(guān)產(chǎn)品：COS-1細胞、MCF10A細胞、NCIH322細胞
Capan-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1341細胞、NOR 10細胞、NG10815細胞
SW 954細胞系相關(guān)產(chǎn)品：A375-S2細胞、Mel526細胞、SUIT 2細胞
MPC-11細胞系相關(guān)產(chǎn)品：U2OS細胞、SJSA細胞、HIT.T15細胞
Hs 934.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MV4-11細胞、NCIH2030細胞、G 401細胞
HCC-38細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KLM1細胞、KE39細胞、SW-756細胞
COLO206F細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TC7細胞、INS1細胞、MonoMac6細胞
UM-UC14細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH510細胞、OVCAR 8細胞、Psi2-DAP細胞
SW-13細胞系相關(guān)產(chǎn)品：B35細胞、RH35細胞、MCF-7B細胞
ME180細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PNT1-a細胞、L78細胞、Fetal Human Colon細胞
IOSE-Van細胞系相關(guān)產(chǎn)品：VM Cub 1細胞、Potorous tridactylus Kidney 1細胞、HMO6細胞
NCIH2291細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Mouse Colon 38細胞、WB F344細胞、KE37細胞
Cloudman S91 melanoma細胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO 206細胞、CAL39細胞、NCI-522細胞
OE21細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H508細胞、ECV304細胞、H64細胞
H847細胞系相關(guān)產(chǎn)品：FRO細胞、Huh 7.5.1細胞、PE/CA-PJ34 (clone C12)細胞
FL-83B細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW954細胞、Hi-5細胞、MDA175細胞
EB-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW 1783細胞、SK-NM-C細胞、Y3-Ag 1.2.3細胞
H1435細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Panc5.04細胞、NCIH1395細胞、190PT細胞
SCaBER細胞系相關(guān)產(chǎn)品：QGY7703細胞、RGC6細胞、L 428細胞
R-1059-D細胞系相關(guān)產(chǎn)品：DanG細胞、C41細胞、RBL-1細胞
SK-ES-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CD18/HPAF細胞、GCT細胞、N87細胞
GP2-293細胞系相關(guān)產(chǎn)品：AM38細胞、COLO320-DM細胞、NCI-H1944細胞
SP2/0 Ag-14細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Cloudman S91 melanoma細胞、KTA7細胞、Psi-2-DAP細胞
NCI-Hut 125細胞系相關(guān)產(chǎn)品：R1800[RA]細胞、NMCG-1細胞、Strain V細胞
SU-DHL-16細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RH8994細胞、NPC-TW 01細胞、H184A1細胞
CNLMG-B5537SKIN細胞系相關(guān)產(chǎn)品：UPCI:SCC90細胞、L 540細胞、SK-N-BE2細胞
HCT.116細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SO-Rb 50細胞、P3-X63-Ag8-653細胞、SHSY-5Y細胞
MS751細胞系相關(guān)產(chǎn)品：INS1細胞、EJ 138細胞、HEK-293 c18細胞
SRS-82細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BIC-1細胞、MDA-MB415細胞、UMNSAH-DF-1細胞
HO1N1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Case 3細胞、Clone M-3細胞、VMM5A細胞
L-M (TK-)細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Sp2/0細胞、SKGT2細胞、SKG IIIa細胞
NCTC 1469細胞系相關(guān)產(chǎn)品：WiDrTC細胞、Rat Glomerular Endothelial細胞、HCC-1171細胞
HL-60細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Panc-813細胞、CX-1細胞、KNS62細胞
GL-261細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs-746T細胞、NCI-H1623細胞、CCLP-1細胞
SUM 102PT細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H660細胞、BC-009細胞、SK-LU-1細胞
Colon38細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H125細胞、RC13細胞、JF305細胞
RS4:11細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PC-3/M細胞、Ramos (RA 1)細胞、COLO-394細胞
Centre Antoine Lacassagne-148細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ARO-81細胞、A2058細胞、AdHek細胞
NCI-H2444細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MPC-5細胞、NCI-H2009細胞、KPL4細胞
DH 82細胞系相關(guān)產(chǎn)品：A549/DDP細胞、MEG01細胞、IMR 32細胞
CAL120細胞系相關(guān)產(chǎn)品：IMR90細胞、OCILY-19細胞、RK-13細胞
HCC1419細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Lymph Node Carcinoma of the prostate細胞、LC-1Sq細胞、SK-RC 52細胞
PC3M-1E8細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CEMx721.174.T2細胞、MC3T3-E1 Subclone 4細胞、Hs839.T細胞
JB-6 Cl 30細胞系相關(guān)產(chǎn)品：U-343 MG細胞、EC-109細胞、V79細胞
H-1755細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH2342細胞、COLO-680N細胞、OCI-AML-3細胞
ZYM-SVEC01細胞系相關(guān)產(chǎn)品：EB-1細胞、HOS-143B細胞、KTCTL-140細胞
Namalva細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Nakata-1細胞、FF-WT-BJ細胞、Tca-83細胞
NCI-H157細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Tu 212細胞、SUD4細胞、CAL 12T細胞
Hs 821.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RH-35細胞、SK Mel 24細胞、Lilly Laboratories Cell-Porcine Kidney 1細胞
SW 756細胞系相關(guān)產(chǎn)品：G422細胞、RBL-1細胞、CCD 966SK細胞
AML 12細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Kit225 K6細胞、NCI-H1882細胞、NCIN87細胞
SW 527細胞系相關(guān)產(chǎn)品：UMUC-3細胞、H1435細胞、A375-S2細胞
SW-1463細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HO1-N-1細胞、MCF.7細胞、BEAS2B細胞
Ramos細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAL51細胞、PC-9細胞、C32 mel細胞
SW1990細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU1040細胞、CACO2細胞、C-4I細胞
H-1568細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HKC細胞、Me Wo細胞、NP69SV40T細胞
kms 11細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hopkins-92細胞、293-EBNA1細胞、H-1155細胞
H-292細胞系相關(guān)產(chǎn)品：WEHI164細胞、PC3M細胞、NCI-H-128細胞
NMC-G1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MB157細胞、HLCL9B10細胞、PanC1細胞
HCA 7細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-292細胞、GC1-SPG細胞、AR4-IP細胞
Hepa1-6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Dx5細胞、CATH-a細胞、SAS細胞
32D.3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TKB-1細胞、Hs 636.T細胞、Capan1細胞
H2066細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H889細胞、End1/E6E7細胞、DOK細胞
OP-9細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MADB-106細胞、PTK-1細胞、FOX-NY細胞
LAN5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW 1463細胞、SUM 159PT細胞、RCK8細胞
JROECL33細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-415細胞、CORL26細胞、PC-3M-1E8細胞
"