"Caco-2細(xì)胞：人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料：細(xì)胞株分離自一個(gè)原發(fā)性結(jié)腸癌。當(dāng)細(xì)胞長(zhǎng)滿(mǎn)時(shí)，表現(xiàn)出典型的腸細(xì)胞分化的特征。Caco-２細(xì)胞表達(dá)維生素A酸結(jié)合蛋白I和視黃醇結(jié)合蛋白II，角蛋白陽(yáng)性。
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣
細(xì)胞生長(zhǎng)：貼壁
細(xì)胞物種來(lái)源：人源或鼠源等其它物種來(lái)源
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細(xì)胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
細(xì)胞來(lái)源說(shuō)明：細(xì)胞主要來(lái)源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系
細(xì)胞生長(zhǎng)特性：貼壁
購(gòu)買(mǎi)的細(xì)胞死亡或細(xì)胞存活率不佳可能原因？研究人員在細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)出現(xiàn)存活率不佳，原因比較復(fù)雜，常見(jiàn)原因可歸納為：培養(yǎng)基使用錯(cuò)誤或培養(yǎng)基品質(zhì)不佳；血清使用錯(cuò)誤或血清的品質(zhì)不佳；解凍過(guò)程錯(cuò)誤；冷凍細(xì)胞解凍后，加以洗滌細(xì)胞和離心；懸渾細(xì)胞誤認(rèn)為死細(xì)胞；培養(yǎng)溫度使用錯(cuò)誤；細(xì)胞置于-８０℃太久等。建議嚴(yán)格參照ATCC的標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程進(jìn)行細(xì)胞復(fù)蘇、凍存等工作。欲將一般動(dòng)物細(xì)胞離心下來(lái)，其離心速率應(yīng)為多少轉(zhuǎn)速?欲回收動(dòng)物細(xì)胞，其離心速率一般為３００×g(約１O(jiān)OOrpm),５-１０分鐘，轉(zhuǎn)速過(guò)高或離心時(shí)間過(guò)長(zhǎng)都將造成細(xì)胞死亡。合適的離心轉(zhuǎn)速是根據(jù)相對(duì)離心力決定。RCF=１.１１９×１０５×r×(rpm)２，其中r為離心機(jī)轉(zhuǎn)軸中心與離心套管底部?jī)?nèi)壁的距離；rpm為離心機(jī)每分鐘的轉(zhuǎn)數(shù)；RCF(relative centrifugal force)為相對(duì)離心力，以重力加速度g(９８０.６６cm/s２)的倍數(shù)來(lái)表示單位。
細(xì)胞株(系)的使用，為醫(yī)學(xué)研究和測(cè)試工作帶來(lái)了極大的方便。但細(xì)胞的傳代是有限制的，長(zhǎng)期連續(xù)傳代的細(xì)胞，不僅消耗大量的人力和物力，而且細(xì)胞的生長(zhǎng)與形態(tài)等會(huì)有一定退變或轉(zhuǎn)化，因而細(xì)胞失去原有的遺傳特性，有時(shí)還會(huì)由于細(xì)胞污染而造成傳代中斷，種子丟失。因此，在實(shí)際工作中常需凍存一定數(shù)量的細(xì)胞，以備替換使用。細(xì)胞冷凍與復(fù)蘇是細(xì)胞培養(yǎng) 室的常規(guī)工作和通用技術(shù)。目前，細(xì)胞凍存最常用的技術(shù)是液氮冷凍保存法，主要采用加適量保護(hù)劑的緩慢冷凍法凍存細(xì)胞。細(xì)胞在不加任何保護(hù)劑的情況下直接冷凍，細(xì)胞內(nèi)外的水分會(huì)很快形成冰晶，從而引起一系列不良反應(yīng)。如細(xì)胞脫水使局部電解質(zhì)濃度增高，pH值改變，部分蛋白質(zhì)由于上述原因而變性，引起細(xì)胞內(nèi)部空間結(jié)構(gòu)紊亂，溶酶體膜由此遭到損傷而釋放出溶酶體酶，使細(xì)胞內(nèi)結(jié)構(gòu)成分造成破壞，線(xiàn)粒體腫脹，功能丟失，并造成能量代謝障礙。胞膜上的類(lèi)脂蛋白復(fù)合體也易破壞引起細(xì)胞膜通透性的改變，使細(xì)胞內(nèi)容物丟失。如果細(xì)胞內(nèi)冰晶形成較多，隨冷凍溫度的降低，冰晶體積膨脹造成細(xì)胞核DNA空間構(gòu)型發(fā)生不可逆的損傷，而致細(xì)胞死亡。因此，細(xì)胞冷凍技術(shù)的關(guān)鍵是盡可能地減少細(xì)胞內(nèi)水分，減少細(xì)胞內(nèi)冰晶的形成。采用甘油或二甲基亞砜作保護(hù)劑，這兩種物質(zhì)分子量小，溶解度大，易穿透細(xì)胞，可以使冰點(diǎn)下降，提高細(xì)胞膜對(duì)水的通透性，且對(duì)細(xì)胞無(wú)明顯毒性。慢速冷凍方法又可使細(xì)胞內(nèi)的水分滲出細(xì)胞外，減少胞內(nèi)形成冰結(jié)晶的機(jī)會(huì)，從而減少冰晶對(duì)細(xì)胞的損傷。
最近在培養(yǎng)細(xì)胞時(shí)，發(fā)現(xiàn)其狀態(tài)不是很好，很容易扎堆生長(zhǎng)，用胰酶消化的時(shí)候也是一團(tuán)一團(tuán)地被消化下來(lái)，很難把它們吹散成一個(gè)一個(gè)細(xì)胞。而且長(zhǎng)得也挺快也挺不均勻的，傳代的第二天，有些地方就長(zhǎng)得滿(mǎn)滿(mǎn)的了。想請(qǐng)教一下這是為什么呢？你好，我養(yǎng)的細(xì)胞和你一樣，消化下來(lái)也是一團(tuán)的，但吹打以后就沒(méi)有這樣的情況了。建議你分皿前還是要吹勻，分皿后在鏡下看一看，移動(dòng)培養(yǎng)皿的時(shí)候盡量動(dòng)作輕，避免晃動(dòng)。細(xì)胞生長(zhǎng)挺快，那么細(xì)胞的增殖能力應(yīng)該較強(qiáng)。胰酶消化成團(tuán)的問(wèn)題我覺(jué)得有以下幾種可能：一、細(xì)胞消化后吹打不均勻，造成細(xì)胞成團(tuán)生長(zhǎng)：二、細(xì)胞細(xì)化太過(guò)，細(xì)胞成片脫落，吹打時(shí)沒(méi)有受力點(diǎn)，細(xì)胞聚團(tuán)生長(zhǎng)。解決辦法：根據(jù)細(xì)胞生長(zhǎng)的情況進(jìn)行多次消化，將同次消化下來(lái)的細(xì)胞放在一個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)。貼壁細(xì)胞傳代培養(yǎng)：一般步驟為：真空泵吸走培養(yǎng)基，１XPBS漂洗兩次，加入１mlEDTA-Tripsin（１００mm皿為例），３７度放置數(shù)分鐘，輕拍培養(yǎng)瓶使細(xì)胞自瓶壁脫落，加入適量血清，以吸管上下吸放數(shù)次以打散細(xì)胞團(tuán)塊，離心后加入新鮮培養(yǎng)基，按比例轉(zhuǎn)移至新皿。細(xì)胞的傳代最重要的是胰酶處理時(shí)間，若胰酶處理太久，容易造成細(xì)胞貼壁不緊，顯微鏡下觀(guān)察立體感不強(qiáng)，嚴(yán)重的時(shí)候甚至?xí)斐杉?xì)胞死亡。我談?wù)剛€(gè)人經(jīng)驗(yàn)：HepG-２、A５４９、Hela、SGC-７９０１幾種癌細(xì)胞處理時(shí)間可適當(dāng)放長(zhǎng)，一般處理５-６min，C２C１２、COS-７、NIH-３T３比較容易脫落，２min足矣，P１９Cl６和２９３細(xì)胞貼壁不緊，可在PBS漂洗后，直接換新鮮培養(yǎng)基打散。
Jurkat Clone E6-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CNE2Z細(xì)胞、D-324MED細(xì)胞、RIN-m細(xì)胞
H2196細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LA-N-6(OAN)細(xì)胞、MC/CAR細(xì)胞、IGR-OV1細(xì)胞
HUT 226細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC-2185細(xì)胞、HCoEpiC細(xì)胞、CMT 167細(xì)胞
Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NHEK細(xì)胞、T-HEECs細(xì)胞、SV40-MES13細(xì)胞
EnCa1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：K7M2-WT細(xì)胞、CHL-11細(xì)胞、NCI-H2023細(xì)胞
SNU-5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKLU01細(xì)胞、HCT_116細(xì)胞、KYSE-50細(xì)胞
MC 3T3-E1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUNE1細(xì)胞、WBF344細(xì)胞、OE19細(xì)胞
PC-9/S1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SU86-86細(xì)胞、H-498細(xì)胞、D407細(xì)胞
SKG3A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：IOSE29細(xì)胞、B-3細(xì)胞、SW-48細(xì)胞
OVCAR3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BLO-11細(xì)胞、SNB.19細(xì)胞、NCI-H711細(xì)胞
SK-MEL-28細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HSF細(xì)胞、AQ-Mel細(xì)胞、4-1st細(xì)胞
SNG-M細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKMEL5細(xì)胞、OVCA432細(xì)胞、CCC-HIE-2細(xì)胞
A 253細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：P31 FUJ細(xì)胞、HFLS-RA細(xì)胞、FOXNY細(xì)胞
H125細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MOLM16細(xì)胞、LLC-WRC 256細(xì)胞、RPPVEC細(xì)胞
COC1/CDDP細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：UCLA RO-81A-1細(xì)胞、IFRS1細(xì)胞、DHL-6細(xì)胞
PLB 985細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SHI1細(xì)胞、OEC33細(xì)胞、FRH-0201細(xì)胞
PLB 985細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SHI1細(xì)胞、OEC33細(xì)胞、FRH-0201細(xì)胞
HCC 94細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：624mel細(xì)胞、SK-MEL 28細(xì)胞、hTERT RPE-1細(xì)胞
U-118 MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：DH82細(xì)胞、NTHY-ORI3.1細(xì)胞、Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-3細(xì)胞
NCI-H676細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKN-SH細(xì)胞、OCILY-3細(xì)胞、BC-027細(xì)胞
NCI-H2195細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Menschliche Und Tierische Zellkulture-3細(xì)胞、HEK 293 EBNA細(xì)胞、VMCUB1細(xì)胞
KNS-81細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1876細(xì)胞、RS1細(xì)胞、BRL 3A細(xì)胞
STC-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Tu-686細(xì)胞、P3-NS1/1Ag 4.1細(xì)胞、NIH/3T3細(xì)胞
HEK-EBNA細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-ES細(xì)胞、Statens Seruminstitut Rabbit Cornea細(xì)胞、MD Anderson-Metastatic Breast-436細(xì)胞
CPA 47細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC1954-BL細(xì)胞、CEM T4細(xì)胞、FHL-124細(xì)胞
H-2009細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NTera 2細(xì)胞、SJSA-1細(xì)胞、Caco2-BBE細(xì)胞
SuDHL 4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Evsa T細(xì)胞、H-1876細(xì)胞、WTRL1細(xì)胞
NCI-H2073細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Gerner 7666細(xì)胞、HS-68細(xì)胞、B35細(xì)胞
PGBE1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Simpson細(xì)胞、Clone 15 HL-60細(xì)胞、C6661細(xì)胞
Mo 59J細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GA-10 clone 4細(xì)胞、HuTu 80細(xì)胞、Ca759細(xì)胞
SKNBE(2c)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Melan-a細(xì)胞、HCA 7細(xì)胞、NCI-H522細(xì)胞
ChaGo-K-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Michigan Cancer Foundation-7細(xì)胞、LS123細(xì)胞、CAKI1細(xì)胞
TE-32細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3-Jiyoye細(xì)胞、hTERT-RPE細(xì)胞、EVSAT細(xì)胞
HEK-293-F細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：201T細(xì)胞、NCI-H1048細(xì)胞、STO細(xì)胞
TC-1[JHU-1]細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI/AML5細(xì)胞、BEL/FU細(xì)胞、MLA 144細(xì)胞
7404細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：4-1st細(xì)胞、Hs 706.T細(xì)胞、Hs 821.T細(xì)胞
MV4;11細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Transformed Human Liver Epithelial-2細(xì)胞、LICR-HN6細(xì)胞、PA1細(xì)胞
SNB-19細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LP1細(xì)胞、CCD18細(xì)胞、SKOV3細(xì)胞
H1618細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TE-12細(xì)胞、TCMK-1細(xì)胞、H810細(xì)胞
U251細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Human Lung Microvascular Endothelial細(xì)胞：-5a細(xì)胞、H-2444細(xì)胞、B16-F10-BL6細(xì)胞
SKNF1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HAC-84細(xì)胞、SNU638細(xì)胞、AtT-20細(xì)胞
MOLM-14細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：C-643細(xì)胞、OCI-Ly07細(xì)胞、PANC0203細(xì)胞
Leukemia 1210細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：293T細(xì)胞、CL 1-0細(xì)胞、U-2OS細(xì)胞
BALB/3T3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM03573細(xì)胞、HEL 92.1.7細(xì)胞、T9細(xì)胞
Human Embryonic Kidney 293細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：My-La 2059細(xì)胞、NKL細(xì)胞、NKL細(xì)胞
A9(Hamprecht)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SCC-15細(xì)胞、HCC-1359細(xì)胞、PC-14細(xì)胞
HCC-38細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KLM1細(xì)胞、KE39細(xì)胞、SW-756細(xì)胞
C-28/I2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：C-32細(xì)胞、L-5178-Y-R細(xì)胞、BNCL-2細(xì)胞
SMMC 7721細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：EBNA293細(xì)胞、NCIH1792細(xì)胞、H2347細(xì)胞
CAL 62細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NTC200細(xì)胞、TB1 Lu細(xì)胞、SP2-0-Ag14細(xì)胞
Psi-2 DAP細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HFT 8810細(xì)胞、SJRH 30細(xì)胞、HCC1954 BL細(xì)胞
GI-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUDHL-10細(xì)胞、SW-1088細(xì)胞、National Medical Center-Glioma 1細(xì)胞
COLO-824細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Med 341細(xì)胞、Rat Skin 1細(xì)胞、M1細(xì)胞
NCI-H1963細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：IMR-90細(xì)胞、MSB1細(xì)胞、OsA-CL細(xì)胞
Hs-600-T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1781細(xì)胞、TMK1細(xì)胞、FM88細(xì)胞
OCI Ly3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Tokyo Medical and Dental university 8細(xì)胞、MDAMB436細(xì)胞、CESS細(xì)胞
SO-RB50細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：U118-MG細(xì)胞、NP69SV40T細(xì)胞、H-660細(xì)胞
HEC1-B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HConEpic細(xì)胞、HT 1376.T細(xì)胞、GDM-1細(xì)胞
EFO27細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH2171細(xì)胞、H1417細(xì)胞、Balb/c 3T3細(xì)胞
HUT-125細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEL-92_1_7細(xì)胞、hTERT-RPE-1細(xì)胞、VeroE6細(xì)胞
UWB1.289細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：118MG細(xì)胞、NCIH196細(xì)胞、FD-LSC-1細(xì)胞
MX1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BXPC3細(xì)胞、ASH-3細(xì)胞、Lu-65細(xì)胞
Lewis lung carcinoma細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Duck embryo細(xì)胞、293H細(xì)胞、WERI-Rb1細(xì)胞
HEL299細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKOV3細(xì)胞、SK.OV.3細(xì)胞、TGBC11T細(xì)胞
Baby Hamster Kidney-21細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：UMC-11細(xì)胞、SW527細(xì)胞、HCC4006細(xì)胞
Kit 225-K6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：3T3-F442A細(xì)胞、PIEC細(xì)胞、SK-MEL-3細(xì)胞
MDA-MB-134細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVCA432細(xì)胞、Tu212細(xì)胞、624-mel細(xì)胞
Hep 3B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Factor Dependent Continuous-Paterson 1細(xì)胞、SNGM細(xì)胞、HEK 293 c18細(xì)胞
MALME.3M細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3J細(xì)胞、TALL-1 [Human adult T-ALL]細(xì)胞、SP-2細(xì)胞
SK.MEL.5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Co 115細(xì)胞、HCT.116細(xì)胞、PLA801C細(xì)胞
AR4-IP細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：S3 HeLa細(xì)胞、H1568細(xì)胞、293-H細(xì)胞
H1618細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TE-12細(xì)胞、NCI-H841細(xì)胞、H-522細(xì)胞
HUT 125細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LTEP a2細(xì)胞、HCT-8/V細(xì)胞、COLO 394細(xì)胞
CEK細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Panc-1-P細(xì)胞、P-2003細(xì)胞、HEC-1A細(xì)胞
"