"MDCK細胞：犬腎細胞系
細胞背景資料：詳見相關文獻介紹
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
細胞生長：貼壁
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法：１：２傳代
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
細胞生長特性：貼壁生長
造成實驗室細胞污染常見情況總結：細胞培養(yǎng)中最常見污染的是細菌、真菌和支原體污染。細胞一旦污染，大多數(shù)較難處理。那么，哪些情況我們不注意的話就會造成細胞污染呢？我們根據(jù)常見細胞培養(yǎng)實驗分析總結下?！具`規(guī)操作】１)為節(jié)省時間，有人已經(jīng)用超凈臺四個多小時，不開紫外滅菌３０min,酒精擦拭后直接開始試驗；２)器材或者溶液很久沒用，未檢測是否污染而直接使用；離心管多次使用，槍頭為了方便交叉使用；３)超凈臺不點酒精燈；點了酒精燈放在右上角，而你在左下角做試驗；４)不帶手套，徒手操作；５)細胞培養(yǎng)間配備槍式移液器、手術器械、離心機、冰箱等專用儀器設備以及專用的實驗服和拖鞋，未定期消毒。專用物品被帶出傳代細胞使用。培養(yǎng)細胞過程中使用的所有實驗用具，如移液管、一次性槍頭、一次性塑料離心管、凍存管等未按要求滅菌使用(通常需１２１°C高壓滅菌２０分鐘后３７％烤干備用)。超凈臺和桌面，東西太多太亂：超凈臺不是儲物箱，什么培養(yǎng)皿、各種規(guī)格的板子、槍頭就不要堆在超凈臺！這樣就會有許多紫外線顧不到的衛(wèi)生死角。傳代細胞其他的桌面，切忌東西堆積如山，不要將酒精棉球、標簽紙、牛皮紙買來后全部堆在傳代細胞！一不小心“飄”進你的細胞培養(yǎng)板里，細胞就會養(yǎng)的不好，啥時候死了都不知道！【培養(yǎng)箱太久沒清潔】細胞污染了，并非直接扔了培養(yǎng)皿就不管了，首先你還得看看這個恒溫培養(yǎng)箱里其他培養(yǎng)皿或孔板里的細胞是否污染，如果有而且好幾個板子都有類似的污染塊，那很可能是培養(yǎng)箱中的水或者空氣污染了，得給培養(yǎng)箱做個大掃除，重新酒精消毒，照紫外；孵箱里的水，水沒了要記得加，還得記得十天半個月的就用酒精擦擦托盤?！緜鞔毎硕嗫陔s，難管理】在傳代細胞這種衛(wèi)生要求高，人多了，不確定因素多了，難以保證試驗在無菌條件下操作。出入試驗室，實驗服當風衣穿，不扣紐扣，不戴，就容易造成細胞污染；超凈臺做實驗時，喜歡說話聊著做試驗，要是還不帶口罩，里面就有很多細菌等著去攻擊你的細胞呢！
貼壁細胞的消化方法介紹：１、胰酶。這是用得最多的。一般濃度在０.２５-０.５%。作用時間根據(jù)細胞種類、作用溫度等因素而變化很大，從幾分鐘到幾十分鐘不等。０.２５%的胰酶作用于單層貼壁的細胞，在３７度條件下，一般消化１-５分鐘就足夠了。終止是用血清。主要作用于細胞間。配制時不能用含、鎂的平衡液，否則影響活性。保存于-２０度。２、膠原酶。這種方法比較少，一般是用原代培養(yǎng)時，從組織消化下細胞。這種方法作用溫和，對細胞損傷較小，但是，價格也較貴。中止同樣是用血清。３、EDTA。用得也是非常多。一般濃度在０.０２%左右。作用于細胞與間質(zhì)，對細胞間也有一定作用。注意，它能顯著影響pH值，而且在弱堿性條件下才易溶。因此，配制時應調(diào)節(jié)好酸堿度。它不能被終和。因此，消化下來的細胞要洗一遍。４、商品化的無酶消化液。個人的使用經(jīng)常覺得對細胞的損傷比較大，但是分離成單細胞懸液的能力確實比較強。５、物理法。直接吹打或用細胞刮子將細胞刮下來。６、冷凍法。此方法僅能用于細胞傳代時。無法使組織上的細胞脫落下來。本方法的原理，我想是因細胞冷凍后收縮，從而從培養(yǎng)瓶上脫落下來。優(yōu)點是：對細胞損傷小，不需要中止或洗細胞，方便，不需要另外配制消化液。特別適用那些貼壁不是特別緊，又特別嬌氣的細胞。不足是細胞常成小片脫落。此種方法曾用于因用其它方法傳代導致大量細胞死亡操作的間充質(zhì)干細胞、DC細胞的培養(yǎng)，效果非常滿意。具體過程是：１、用較多的４度的PBS 洗滌一遍細胞(以６孔板為例，加１.５ml/孔)，２、再加０.５毫升４度的PBS，靜置操作臺上，很快細胞就小片脫落，３、輕輕吹打，細胞即完全脫落，４、按一定比例傳代。
細胞培養(yǎng)中支原體污染的經(jīng)驗分享：支原體是一類缺乏細胞壁的原核細胞型微生物，大小一般在０.３-０.５um之間，呈高度多形性，有球形、桿形、絲狀、分枝狀等多種形態(tài)。它不同于細胞，也不同于病毒。支原體用普通染色法不易著色，用姬姆薩染色很淺，革蘭染色為陰性。支原體可在雞胚絨毛尿囊膜上或細胞培養(yǎng)中生長，營養(yǎng)要求比細菌高。細胞培養(yǎng)(特別是傳代細胞)被支原體污染是個世界性問題。在細胞培養(yǎng)中支原體感染發(fā)生率達到６３%，支原體感染發(fā)生后能改變細胞的DNA,RNA及蛋白表達，又不能通過可視法對其進行檢測，而且它對細胞的生長率影響較小，不易引起注意。國內(nèi)外研究表明，９５%以上是以下四種支原體：口腔支原體(M.orale)、精酸支原體(M.arginini)、豬鼻支原體(M.hyorhinis)和萊氏無膽甾原體(A.laidlawii)，為牛源性。以上是最常見的污染細胞培養(yǎng)的支原體菌群，但能夠污染細胞的支原體種類是很多的，國外調(diào)查證明，大約有二十多種支原體能污染細胞，有的細胞株可以同時污染兩種以上的支原體。支原體污染的來源包括工作環(huán)境的污染、操作者本身的污染(一些支原體在人體是正常菌群)、培養(yǎng)基的污染、污染支原體的細胞造成的交叉污染、實驗器材帶來的污染和用來制備細胞的原始組織或器官的污染。組織細胞培養(yǎng)工作中，主要從以下幾個方面來預防支原體的污染：控制環(huán)境污染;嚴格實驗操作；細胞培養(yǎng)基和器材要保證無菌；在細胞培養(yǎng)基中加入適量的抗生素。支原體污染細胞后，特別是重要的細胞株，有必要清除支原體，常用方法有抗生素處理、抗血清處理、抗生素加抗血清和補體聯(lián)合處理。支原體最突出的結構特征是沒有細胞壁，一般來講，對作用于細胞壁生物合成的抗生素，如萬古霉素等完全不敏感；對多粘菌素(polymycin)、利福平、磺胺藥物普遍耐藥。對支原體最有抑制活性及常用于支原體感染治療的抗生素是四環(huán)素類、大環(huán)內(nèi)酯類及一些喹諾酮;其他類抗生素如基糖苷類、霉素對支原體有較小抑制作用，所以常不用來作為支原體感染的化學治療劑。
AE 1201細胞系相關產(chǎn)品：Ly10細胞、L-5178-Y細胞、SNU-1040細胞
SN12CPM6細胞系相關產(chǎn)品：SV40-HCEC細胞、COLO 320HSR細胞、Hs-274-T細胞
OCI-Ly7細胞系相關產(chǎn)品：NRK 49F細胞、HFT 8810細胞、PC-2 [Human pancreatic carcinoma]細胞
SK MEL 28細胞系相關產(chǎn)品：Fetal Human Colon細胞、NP69細胞、HREC細胞
GM03320D細胞系相關產(chǎn)品：TK.10細胞、HLEB3細胞、RH35細胞
RN-c細胞系相關產(chǎn)品：BSC-1細胞、X63細胞、NTERA-2細胞
HSKMC細胞系相關產(chǎn)品：C8166-CD4細胞、MD Anderson-Metastatic Breast-157細胞、SIRC細胞
H2108細胞系相關產(chǎn)品：MES-13細胞、H-2405細胞、NCIH69細胞
H-1944細胞系相關產(chǎn)品：SNB.19細胞、H-35細胞、Rat 2細胞
OE21細胞系相關產(chǎn)品：NCI-H508細胞、ECV304細胞、H64細胞
Vx-2細胞系相關產(chǎn)品：HuPT3細胞、GL-261細胞、Sun Yat-sen university Ophtalmic center-Retinoblastoma 50細胞
U14細胞系相關產(chǎn)品：IFRS1細胞、DR2R 1610細胞、H-1838細胞
SF 539細胞系相關產(chǎn)品：SNU739細胞、HTR-8/SV-neo細胞、NH6細胞
FRTL-5 Cl 2細胞系相關產(chǎn)品：P3X63Ag8.653細胞、HUCEC細胞、MCF-7/AdrR細胞
CAL-62細胞系相關產(chǎn)品：mRMEC細胞、KYSE180細胞、HS766T細胞
BTT739細胞系相關產(chǎn)品：U-937細胞、H1869細胞、My-La 2059細胞
BTT739細胞系相關產(chǎn)品：U-937細胞、H1869細胞、My-La 2059細胞
PCI-SG231細胞系相關產(chǎn)品：HT1376細胞、DU-145細胞、DF1細胞
NCIH2141細胞系相關產(chǎn)品：Large Cell Lung Cancer-103H細胞、BJAB-1細胞、MESSA-DX5細胞
HcaF細胞系相關產(chǎn)品：H8細胞、YD-15細胞、RT-112細胞
MC3T3-E1 Subclone 4細胞系相關產(chǎn)品：RCF細胞、H184A1細胞、CAL 148細胞
INS1細胞系相關產(chǎn)品：OVCAR-8細胞、L5178Y TK+/- (clone 3.7.2C)細胞、MRCV細胞
NE-4C細胞系相關產(chǎn)品：PK-136細胞、rRMECs細胞、NuTu-19細胞
SK 1細胞系相關產(chǎn)品：Colo-206F細胞、SW 756細胞、Hep 3B2細胞
Pa18C細胞系相關產(chǎn)品：HS-766T細胞、BSC40細胞、NCI-441細胞
NCI-HUT-292細胞系相關產(chǎn)品：NCIH2291細胞、H322T細胞、SUDHL4細胞
SNU-886細胞系相關產(chǎn)品：SuDHL 2細胞、RBL 1細胞、MIN-6細胞
K1細胞系相關產(chǎn)品：McCoy B細胞、PLA-802細胞、PNEC30細胞
BCP1細胞系相關產(chǎn)品：M4e細胞、SK-CO-1細胞、IOSE29細胞
HBVP細胞系相關產(chǎn)品：NCIH1793細胞、Panc-8_13細胞、Reuber H35細胞
PANC0403細胞系相關產(chǎn)品：L-540細胞、RGE細胞、A704細胞
DHL-8細胞系相關產(chǎn)品：NS-1細胞、CAL-51細胞、PTK 2細胞
ACC-3細胞系相關產(chǎn)品：4T1-LUC細胞、HRA 19細胞、SUM-149細胞
TW 01細胞系相關產(chǎn)品：A20細胞、ECC-1細胞、SC細胞
NCI-H1975細胞系相關產(chǎn)品：LS-174細胞、H-889細胞、Jurkat-E6細胞
NTERA-2cl.D1細胞系相關產(chǎn)品：DHBE細胞、MDA PCa 2b細胞、KCL22S細胞
P3/X63/Ag8.653細胞系相關產(chǎn)品：TE-5細胞、CTLL2細胞、CD18/HPAF細胞
P3/X63/Ag8.653細胞系相關產(chǎn)品：TE-5細胞、CTLL2細胞、CD18/HPAF細胞
FDCP-1細胞系相關產(chǎn)品：M21細胞、HCC1599細胞、GT1-1細胞
KU812-F細胞系相關產(chǎn)品：639V細胞、B35細胞、Pro-5 Lec1.3c細胞
HHUA細胞系相關產(chǎn)品：U266BL細胞、Hs-578Bst細胞、NK92-MI細胞
Danio rerio Gill細胞系相關產(chǎn)品：SKG-3a細胞、343MG細胞、FHs74Int細胞
CEM-CCRF細胞系相關產(chǎn)品：PLC-8024細胞、A7r5細胞、COLO 320HSR細胞
IEC 6細胞系相關產(chǎn)品：NCI-H865細胞、H4細胞、Hs 606.T細胞
HCEC細胞系相關產(chǎn)品：HARAB細胞、VSC4.1細胞、B104 [Rat neuroblastoma]細胞
Wien 133細胞系相關產(chǎn)品：NCI-H1404細胞、KLM-1細胞、MNNG細胞
Human Lung Microvascular Endothelial細胞：-5a細胞系相關產(chǎn)品：HS940細胞、S.B.細胞、Ca761細胞
NCI-H820細胞系相關產(chǎn)品：P31/FUJ細胞、Caco 2細胞、HHUA細胞
SK-MEL24細胞系相關產(chǎn)品：IGROV 1細胞、EFM192B細胞、COLO-1細胞
HR1K細胞系相關產(chǎn)品：JB6 Cl 30-7b細胞、TM-4細胞、IB-RS2細胞
SW 620細胞系相關產(chǎn)品：H-650細胞、SKMEL2細胞、Hs695細胞
CWR22R-V1細胞系相關產(chǎn)品：HLE-SRA-01/04細胞、NG-108-15細胞、CAL12T細胞
ABC-1細胞系相關產(chǎn)品：NCIH1869細胞、L 363細胞、NCIH1930細胞
IOSE29細胞系相關產(chǎn)品：C32r細胞、SCC7細胞、CORL26細胞
Super Tube細胞系相關產(chǎn)品：SCCVII/St細胞、COR-L23/P細胞、TE5細胞
H125細胞系相關產(chǎn)品：MOLM16細胞、LLC-WRC 256細胞、RPPVEC細胞
H125細胞系相關產(chǎn)品：MOLM16細胞、LLC-WRC 256細胞、RPPVEC細胞
SW-837細胞系相關產(chǎn)品：P3HR-1細胞、WM451Lu細胞、TCam-2細胞
NCI-H1299細胞系相關產(chǎn)品：COR-L23細胞、Madison 109細胞、C643細胞
DLD 1細胞系相關產(chǎn)品：PC-3細胞、MCF-12A細胞、NK-92 transfected with MFG-hIL2細胞
H524細胞系相關產(chǎn)品：MN-60細胞、H1781細胞、GM3569細胞
OCI AML5細胞系相關產(chǎn)品：H-1693細胞、Hs-688A-T細胞、X63Ag8.653細胞
HLF細胞系相關產(chǎn)品：HSC-T6細胞、NCI-H774細胞、SW-1222細胞
PM6細胞系相關產(chǎn)品：H-1694細胞、hEEC細胞、HCT116細胞
C127細胞系相關產(chǎn)品：M 1細胞、PTK 1細胞、TE6細胞
MIA-PaCa-2細胞系相關產(chǎn)品：Dakiki細胞、HSC3細胞、HCPEpiC細胞
GLRK 13細胞系相關產(chǎn)品：IB-RS-2細胞、RCC_7860細胞、67NR細胞
MDA-1386細胞系相關產(chǎn)品：786-0細胞、VMM-5A細胞、SK BR 03細胞
NS1/1-Ag4.1細胞系相關產(chǎn)品：JEG-3細胞、SW 839細胞、MCF-7ADR細胞
IPLB-SF 21AE細胞系相關產(chǎn)品：SKO3細胞、Intestinal Porcine Epithelial細胞：-J2細胞、HCC-2108細胞
PCI:SG-231細胞系相關產(chǎn)品：SK-ES1細胞、A20細胞、FLC7細胞
NTC-200細胞系相關產(chǎn)品：Panc-05.04細胞、H-2052細胞、MDCK supertube細胞
OCI-Ly7細胞系相關產(chǎn)品：NRK 49F細胞、PAa細胞、Blotchy fibroblast-11細胞
NCI-H1666細胞系相關產(chǎn)品：HBL-1 [Human diffuse large B-cell lymphoma]細胞、BNL CL.2細胞、OV 1063細胞
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