"NCI-H3255細(xì)胞：人肺癌細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料：詳見相關(guān)文獻(xiàn)介紹
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣
細(xì)胞生長：貼壁
細(xì)胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細(xì)胞傳代方法：１：２傳代
細(xì)胞來源說明：細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
細(xì)胞生長特性：貼壁生長
常見細(xì)胞培養(yǎng)中一些問題總結(jié)：１)培養(yǎng)基中血清的比例多少合適？血清是細(xì)胞培養(yǎng)上一個(gè)極為重要的營養(yǎng)來源，所以血清的含量多少會(huì)對細(xì)胞的生長會(huì)產(chǎn)生極大的影響。血清的含量一般為５%-１５%，不要低于５%或高過２０%，因?yàn)楹窟^低會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞營養(yǎng)不足，過高則會(huì)破壞滲透壓平衡。一般建議血清含量為１０%，可以適量加減；２)何時(shí)須更換培養(yǎng)基？視細(xì)胞生長密度而定，或遵照細(xì)胞株基本數(shù)據(jù)上的更換時(shí)間，按時(shí)更換培養(yǎng)基即可。還可以參照指示劑的顏色變化進(jìn)行更換；３)購買的復(fù)蘇細(xì)胞，為何會(huì)有脫落？因?yàn)檫\(yùn)輸?shù)倪^程中不可避免的會(huì)有震蕩，收到后可以離心收集；４)購買的細(xì)胞冷凍管經(jīng)解凍后，為何會(huì)發(fā)生細(xì)胞數(shù)目太少之情形？研究人員在冷凍細(xì)胞之培養(yǎng)時(shí)出現(xiàn)細(xì)胞數(shù)目太少，大都是因?yàn)殡x心過程操作上的失誤，造成細(xì)胞的物理性損傷，以及細(xì)胞流失。建議細(xì)胞解凍后不要立刻離心，應(yīng)待細(xì)胞生長隔夜后再更換培養(yǎng)基即可；５)購買的細(xì)胞死亡或細(xì)胞存活率不佳可能原因？研究人員在細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)出現(xiàn)存活率不佳，常見原因可歸納為：培養(yǎng)基使用錯(cuò)誤或培養(yǎng)基品質(zhì)不佳。血清使用錯(cuò)誤或血清的品質(zhì)不佳。解凍過程錯(cuò)誤。冷凍細(xì)胞解凍后，加以洗滌細(xì)胞和離心。懸浮細(xì)胞誤認(rèn)為死細(xì)胞。培養(yǎng)溫度使用錯(cuò)誤。細(xì)胞置于–８０°C太久；６)收到的冷凍管瓶身破裂，瓶蓋有裂紋，或瓶蓋脫落之原因？冷凍管瓶蓋裂紋，或瓶身破裂，可能是因?yàn)椴僮髡邐A取冷凍管時(shí)用力不當(dāng)，造成冷凍管裂損，建議使用止血鉗小心夾取。另冷凍管瓶蓋松動(dòng)或松脫，乃因熱脹冷縮之物理現(xiàn)象，冷凍管有可能因此而造成細(xì)胞污染，故冷凍管于放入和取出液氮桶時(shí)，均應(yīng)立刻將冷凍管再一次扭緊。
正確的細(xì)胞復(fù)蘇需知事項(xiàng)：細(xì)胞凍存好了，接下來要注意什么問題呢？沒錯(cuò)，就是記得到時(shí)間了，拿出來復(fù)蘇。那么，細(xì)胞復(fù)蘇的過程中又有哪些該注意的事項(xiàng)呢？細(xì)胞活力和形態(tài)檢查的作用何在？活力檢查——千萬不要使用不健康的細(xì)胞，可能有污染(真菌、支原體等)，如果發(fā)現(xiàn)有污染毫不猶豫的丟棄!形態(tài)檢查——檢查細(xì)胞的固有形態(tài)和生長行為。凍存細(xì)胞：補(bǔ)充新的培養(yǎng)液——在您開始凍存細(xì)胞的前一天補(bǔ)充新的培養(yǎng)液。在細(xì)胞長至７０%單層時(shí)收獲細(xì)胞，計(jì)數(shù)活細(xì)胞數(shù)，用凍存液調(diào)整細(xì)胞密度~５ x１０６ Cell s/ml (根據(jù)不同的細(xì)胞類型調(diào)整)；凍存液——用凍存液洗細(xì)胞并用凍存液重懸細(xì)胞，有不同類型的凍存液，根據(jù)細(xì)胞類型選擇最合適的凍存液(常用的凍存液成分有)：５-１０% DMSO——注意確保DMSO不含有其他的毒性物質(zhì)；５-１５%甘油；如果細(xì)胞在無血清培養(yǎng)基內(nèi)生長，應(yīng)在５０%條件培養(yǎng)基內(nèi)(細(xì)胞在無血清培養(yǎng)基內(nèi)生長２４小時(shí))內(nèi)凍存和復(fù)蘇。在凍存管上標(biāo)記好細(xì)胞類型，日期，凍存人等信息，并保證每凍存管不超過１.５ml。放入液氮罐之前記錄凍存管的數(shù)量和位置。以最快的速度轉(zhuǎn)移凍存管知液氮罐內(nèi)，因此，此步驟使用干冰，或者把凍存管浸入裝有液氮的小盒內(nèi)。此外還要注意，在凍存管上沒有足夠的空間記錄細(xì)胞的詳細(xì)信息，做好記錄是非常非常重要的！還有一個(gè)最重要的，一定要在異地的液氮罐內(nèi)保存同樣的一份細(xì)胞，以免其中的一個(gè)液氮罐出現(xiàn)問題！細(xì)胞正確的復(fù)蘇方式和正確的凍存方式同樣重要，熟記以下要點(diǎn)：當(dāng)從液氮罐內(nèi)取出細(xì)胞時(shí)，有可能會(huì)出現(xiàn)凍存管破裂的情況，使用保護(hù)面罩和防護(hù)服十分必要；其實(shí)，細(xì)胞復(fù)蘇只是一個(gè)簡單的實(shí)驗(yàn)，不過這其中卻不可避免有一些需要注意的細(xì)節(jié)，不然，也不一定會(huì)盡如人意。例如說，人身健康方面：一定要記得做好防凍工作，戴上護(hù)目鏡；盡量降低DMSO對細(xì)胞的損傷等等。
為了防止因污染或技術(shù)原因使長期培養(yǎng)功虧一簣，考慮到培養(yǎng)細(xì)胞因傳代而遲早會(huì)出現(xiàn)變異，有時(shí)因寄贈(zèng)、交換和購買，培養(yǎng)細(xì)胞從一個(gè)實(shí)驗(yàn)室轉(zhuǎn)運(yùn)到另一個(gè)實(shí)驗(yàn)室，的策略是進(jìn)行低溫保存。這對于維持一些特殊細(xì)胞株的遺傳特性極為重要?，F(xiàn)簡要介紹深低溫保存法(-７０℃~-１９６℃)的特點(diǎn)。細(xì)胞深低溫保存的基本原理是：在-７０℃以下時(shí)，細(xì)胞內(nèi)的酶活性均己停止，即代謝處于完全停止?fàn)顟B(tài)，故可以長期保存。細(xì)胞低溫保存的關(guān)鍵，在于通過０~２０℃階段的處理過程。在此溫度范圍內(nèi)，水晶呈針狀，極易招致細(xì)胞的嚴(yán)重?fù)p傷。凍存細(xì)胞的復(fù)蘇：凍存細(xì)胞較脆弱，要輕柔操作。凍存細(xì)胞要快速融化，并直接加入完全生長培養(yǎng)基中。若細(xì)胞對凍存劑(DMSO或甘油)敏感，離心去除凍存培養(yǎng)基，然后加入完全生長培養(yǎng)基中。直接鋪板方法：取出貯存細(xì)胞，３７℃水浴中快速融化；直接用完全生長培養(yǎng)基鋪板細(xì)胞。１ml凍存細(xì)胞使用１０~２０ml完全生長培養(yǎng)基。進(jìn)行活細(xì)胞計(jì)數(shù)，細(xì)胞接種應(yīng)該至少在３×１０(５)活細(xì)胞/ml；培養(yǎng)細(xì)胞１２到２４小時(shí)，更換新鮮的完全生長培養(yǎng)基，去除凍存劑。離心方法：取出貯存細(xì)胞，３７℃水浴中快速融化；把１到２ml凍存細(xì)胞加入到大約２５ml完全生長培養(yǎng)基，輕輕混勻；以大約８０x離心２到３分鐘；棄去上清。在完全生長培養(yǎng)基輕輕再次懸浮細(xì)胞，并且進(jìn)行活細(xì)胞計(jì)數(shù)。細(xì)胞鋪板，細(xì)胞接種應(yīng)該至少為３×１０(５)活細(xì)胞/ml。細(xì)胞的分化：一個(gè)成年人全身細(xì)胞總數(shù)約１０１２個(gè)，可以區(qū)分為２００多種不同類型的細(xì)胞：形態(tài)結(jié)構(gòu)，代謝，行為，功能等各不相同。追根溯源，這么多種細(xì)胞均來自一個(gè)受精卵細(xì)胞。所以，通常把發(fā)育過程中，細(xì)胞后代在形態(tài)、結(jié)構(gòu)和功能上發(fā)生差異的過程稱為細(xì)胞分化。細(xì)胞分化發(fā)生在胚胎階段，也發(fā)生在胎兒出生以后，乃至成人階段。例如，人體血細(xì)胞的產(chǎn)生和分化，這個(gè)過程在人的一生中一直持續(xù)著。由旺盛生長不斷分裂的細(xì)胞，轉(zhuǎn)入分化，通常從細(xì)胞周期中G１期開始時(shí)一個(gè)確定的點(diǎn)G０點(diǎn)“逃逸”出細(xì)胞周期。旺盛生長分裂的細(xì)胞和各種分化了的細(xì)胞，它們的基因表達(dá)和代謝活動(dòng)各不相同。
Rat-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KMS18細(xì)胞、Kit225-K6細(xì)胞、526細(xì)胞
U-87MG ATCC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BJ [Human fibroblast]細(xì)胞、SW 1222細(xì)胞、HT-1376細(xì)胞
NCIH647細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Kit 225-K6細(xì)胞、Tca-83細(xì)胞、CX1細(xì)胞
SHI-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：T24(ECV304)細(xì)胞、C32r細(xì)胞、A 172細(xì)胞
H-526細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HMEC-1細(xì)胞、GM05384細(xì)胞、Mono-Mac-1細(xì)胞
PL9細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Centre Antoine Lacassagne-78細(xì)胞、CAKI1細(xì)胞、MDA-MB-231-GFP細(xì)胞
DC 2.4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：526細(xì)胞、HFLS-OA細(xì)胞、NBL-S細(xì)胞
RSMC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SU-DH-L5細(xì)胞、TKB1細(xì)胞、UWB1.289細(xì)胞
COLO 16細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：EFM192C細(xì)胞、MSTO-211H細(xì)胞、MES23.5細(xì)胞
CBRH7919細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CHP100細(xì)胞、MDA-PCa-2b細(xì)胞、BT 325細(xì)胞
OEC19細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TE671細(xì)胞、PE/CA-PJ34細(xì)胞、Mia PACA 2細(xì)胞
PC3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDCK-2細(xì)胞、NCI-H1770細(xì)胞、NUGC3細(xì)胞
Capan-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1341細(xì)胞、NOR 10細(xì)胞、NG10815細(xì)胞
MEC-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HPAF-I細(xì)胞、HCC-2935細(xì)胞、NCI-H889細(xì)胞
OV433細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HMO6細(xì)胞、SH-SY5Y細(xì)胞、RSC96細(xì)胞
G-361細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：U-118MG細(xì)胞、U-87MG細(xì)胞、HCMEC細(xì)胞
G-361細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：U-118MG細(xì)胞、U-87MG細(xì)胞、HCMEC細(xì)胞
SW 1463細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC202細(xì)胞、H-345細(xì)胞、GT38細(xì)胞
V-79細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-SNU-5細(xì)胞、H9細(xì)胞、SKM1細(xì)胞
HANK細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BJAB-1細(xì)胞、HCT/FU細(xì)胞、SUP-B1細(xì)胞
P3-X63-Ag8-6-5-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：JJN-3細(xì)胞、CT26細(xì)胞、HEK293-EBNA1細(xì)胞
TCMK1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CMT.64細(xì)胞、OCI Ly1細(xì)胞、H-23細(xì)胞
BCPAP細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCCIT細(xì)胞、X63-AG 8.653細(xì)胞、COLO-357細(xì)胞
C41細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK293-A細(xì)胞、C2A細(xì)胞、EMT6細(xì)胞
JIMT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HECV細(xì)胞、OCILY19細(xì)胞、SUPB15細(xì)胞
GL-261細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs-746T細(xì)胞、NCI-H1623細(xì)胞、CCLP-1細(xì)胞
Hs840T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BTI-Tn5B14細(xì)胞、NCI H548細(xì)胞、HT-55細(xì)胞
NCI-441細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SGC-996細(xì)胞、HCC-1569細(xì)胞、A 253細(xì)胞
SUD-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CHOK1細(xì)胞、H4-II-E-C3細(xì)胞、CHL-IU細(xì)胞
OKT3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TNC-1B12B4細(xì)胞、Experimental Mammary Tumour-6細(xì)胞、343 MG細(xì)胞
H1930細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NB.4細(xì)胞、HPBALL細(xì)胞、HuTu 80細(xì)胞
UMC11細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：U-373-MG細(xì)胞、KRC/Y細(xì)胞、NTERA-2 cl.D1細(xì)胞
4T1-LUC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEL-92.1.7細(xì)胞、BT-325細(xì)胞、H650細(xì)胞
GC1-SPG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SaOS-2細(xì)胞、SUM149-PT細(xì)胞、H-1048細(xì)胞
OE-33細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MEC1細(xì)胞、Hs 934.T細(xì)胞、KM12 SM細(xì)胞
RMG-I細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HMCB細(xì)胞、C3H-10T1/2細(xì)胞、293T/17細(xì)胞
TE-85細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Calf Pulmonary Artery 47細(xì)胞、MDCK Type II細(xì)胞、COLO-320細(xì)胞
ME16C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H250細(xì)胞、Hs-611-T細(xì)胞、3T3J2細(xì)胞
Tca8113細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 695T細(xì)胞、SUDHL-5細(xì)胞、Tu-212細(xì)胞
SKG IIIa細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HS578T細(xì)胞、NIH:OVCAR-3細(xì)胞、WEHI 3細(xì)胞
L-M (TK-)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Sp2/0細(xì)胞、SKGT2細(xì)胞、SKG IIIa細(xì)胞
SK_N_BE2C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MSTO-211 H細(xì)胞、NCI-H865細(xì)胞、NCIH2126細(xì)胞
He La細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：C81-61細(xì)胞、EST50細(xì)胞、M210B4細(xì)胞
NCIH841細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：C33-A細(xì)胞、HARAB細(xì)胞、NCI-SNU-761細(xì)胞
SEG-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1522細(xì)胞、CNLMG-B5537SKIN細(xì)胞、AR4-2J細(xì)胞
SK-MEL2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO824細(xì)胞、NCIH2286細(xì)胞、NBL-2細(xì)胞
UCLA-SO-14細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H650細(xì)胞、HDSMC細(xì)胞、H-711細(xì)胞
HEp-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Jurkat-E6細(xì)胞、HCC38細(xì)胞、beta TC6細(xì)胞
Clone 15 HL-60細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs-578Bst細(xì)胞、CW-2細(xì)胞、KU-19-19細(xì)胞
SHZ-88細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PF382細(xì)胞、NCIH1648細(xì)胞、Metastatic Variant 522細(xì)胞
HRA-19細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H441細(xì)胞、aTC1-6細(xì)胞、HL 60細(xì)胞
MDA-MB-453細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-2444細(xì)胞、C57 Mouse Tumor 64細(xì)胞、HS-729細(xì)胞
RS(4;11)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Stanford University Pediatric T-cell line 1細(xì)胞、MUTZ1細(xì)胞、THLE2細(xì)胞
Nittby-Salford 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：FAK+/+細(xì)胞、H-1522細(xì)胞、Dx5細(xì)胞
HCC78細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-N-SH細(xì)胞、SK-MEL2細(xì)胞、SW-837細(xì)胞
OV-90細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3JHR-1細(xì)胞、RK-13細(xì)胞、OK-WT細(xì)胞
ARPE19細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Balb/3T3-4-Cl31細(xì)胞、U 937細(xì)胞、IM 9細(xì)胞
H322T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H676B細(xì)胞、MV-522細(xì)胞、U138MG細(xì)胞
CAL 12細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PTK2細(xì)胞、HO8910/PM細(xì)胞、IPLB-SF 21細(xì)胞
X63-Ag8.653細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LU451細(xì)胞、H-196細(xì)胞、SHIN3細(xì)胞
SH-SY5Y細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HMEC1細(xì)胞、COR L279細(xì)胞、ES-2細(xì)胞
HEK-293-FT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NP-69細(xì)胞、32D:cl3細(xì)胞、C3H/10T1/2-clone8細(xì)胞
H1522細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Swiss 3T3細(xì)胞、AML193細(xì)胞、CTLA4Ig-24細(xì)胞
KMB-17細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TE354T細(xì)胞、IOSE-80細(xì)胞、Med 283細(xì)胞
KMY1022細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCILY-19細(xì)胞、CT26.CL25細(xì)胞、HCC0095細(xì)胞
HCC94細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC-2218細(xì)胞、AN-3細(xì)胞、H2227細(xì)胞
RD-ES細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BSC1細(xì)胞、H-810細(xì)胞、OCI-AML-4細(xì)胞
Glioma 261細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：A431細(xì)胞、KYSE450細(xì)胞、WM 115細(xì)胞
MFE-280細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HSAS3細(xì)胞、JB6Cl30細(xì)胞、L- cell細(xì)胞
BT483細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SN-12C細(xì)胞、RPMI8226/S細(xì)胞、NCI-H1648細(xì)胞
IR 983F細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-MB-231 #4175細(xì)胞、Hep 3B細(xì)胞、HS 1.Tes細(xì)胞
MDA175細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-MEL28細(xì)胞、HT-29細(xì)胞、NB-4細(xì)胞
NCIH647細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Kit 225-K6細(xì)胞、Evsa T細(xì)胞、NPC-TW-039細(xì)胞
Calu-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ATN1細(xì)胞、SW-839細(xì)胞、COLO394細(xì)胞
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