抗體制備過程：

1.材料與試劑

  a．提取的動物 Ig

  b．弗氏完全佐劑和弗氏不完全佐劑

  c．青霉素和鏈霉素

  d．實驗動物 兔

  e．其它材料及試劑

2、選擇實驗活體。

3、進行動物免疫實驗。

4、試取血樣進行測試，查看免疫效果。

5、如果免疫成功，殺死實驗活體，采集全部血清。

6、純化出抗體。

7、鑒定抗體。胎牛血清（無菌采制）

參數規(guī)格：

產品應用   WB=1:100-500  ELISA=1:500-1000  IP=1:20-100  IHC-P=1:100-500  IHC-F=1:100-500  IF=1:100-500

（石蠟切片需做抗原修復）
英文名稱  Anti-BBC3/PUMA 

中文名稱  p53正向細胞凋亡調控因子抗體  

別    名  bcl-2 binding component 3; BBC 3; BBC3; BCL 2 binding component 3; BCL2 binding component 3; JFY 1; JFY1; p53 up regulated modulator of apoptosis; p53 Upregulated Modulator of Apoptosis; PUMA alpha; PUMA/JFY1; BBC3_RAT.

濃    度  1mg/1ml

規(guī) 格  0.1ml/100μg  0.2ml/200μg    

抗體來源  Rabbit  

克隆類型  polyclonal

交叉反應  Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow   

產品類型  一抗    
研究領域  腫瘤 細胞生物 免疫學 細胞凋亡 線粒體  

蛋白分子量  predicted molecular weight: 21kDa

性    狀  Lyophilized or Liquid

免 疫 原  KLH conjugated synthetic peptide derived from rat BBC3 C-terminus

亞    型  IgG

純化方法  affinity purified by Protein A

儲 存 液  0.01M PBS, pH 7.4 with 10 mg/ml BSA and 0.1% Sodium azide

抗體的制備過程：

1. 免疫原的制備

普通的大分子蛋白，通過分子克隆構建載體并在大腸桿菌中進行誘導表達獲得重組蛋白，純化鑒定后可直接作為免疫原。

小分子蛋白或化合物等分子量小，需要偶聯(lián)載體對該分子進行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原，常見偶聯(lián)載體如BSA、OVA、HAS等。

2. 免疫動物

常用于制備抗血清的動物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等，大量生產時需要用到狗、綿羊、山羊等。

3. 免疫血清的收集

一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動脈采血，家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血，家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。

4. 免疫血清的純化與鑒定

得到的抗血清需要進一步的純化，利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進行層析，具有高效，特異性強，純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對分子的質量、純度以及特異性。

5. 免疫血清的保存

建議將抗體分裝后進行保存?？贵w一般比較穩(wěn)定，在-80℃ ～-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價，而真空干燥保存時間可以更久。保存前需經除菌并添加防腐劑。
抗體分子標記技術：

（一）原理

當應用化學氧化法時(NaI)遇強氧化劑,離子被氧化為分子,所生成的自由分子可與某些基團進行鹵化反應。蛋白質分子可進行鹵化反應的基團主要為酪氨酸殘基,某些組氨酸殘基也可能進行化。在應用胺T( Chloramine T)法的實驗中,所用的氧化劑(1,3,4,6- tetrachloro-3a,6adipheny l-glucoluril)強揮發(fā)性的有機溶劑中。該溶劑加入試管后,先讓其揮發(fā)(即讓氧化劑將試管包被),然后把Na125I和蛋白質液加入包被好的試管中,反應完成即將混合液移入他管終止反應。

（二）準備

1.試劑

經親和層析純化的多克隆抗體或單克隆抗體；0.5mol/L磷酸鈉緩沖液,pH7.5；無載體的Na125I3.7GBq/ml(100mCi/ml)的NaOH液；100g/L三醋酸；70%乙醇；新鮮制備的含2mg/m1絡胺T的0.5mol/L磷酸鈉緩沖液(pH7.5）；胺T反應終止緩沖液；

2.儀器

凝膠過濾柱；￥-記數器；玻璃纖維濾。

（三）操作要點

1.用胺T法進行化,也可在大約pH7.0的緩沖液中進行；

2.如果氧化反應損傷蛋白質，可將抗體與異硫氰酸熒光素(FITC)偶聯(lián))胺T量減少到0.02mg/m，并將偏重亞硫酸液的濃度降到0.024mg/ml；

3. Iodogen-包被的試管可在干燥器中,于室溫下保存多年；

4.1251標記的抗體,在制備后六周內均可使用(1251的半衰期為59.6天）；

5.要注意保證所用的Na1251是新鮮的,陳舊制劑的比活性低；

6.酪氨酸的碘化偶爾會對抗原的抗體結合位點有干擾,因此降低其結合能力,但這種情況很少見。

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酪氨酸蛋白激酶6/乳腺腫瘤激酶抗體Isolicoflavonol中文名：異甘草黃酮醇別名：分子式：C20H18O6

骨堿性磷酸酶抗體Demethylvestitol中文名：別名：分子式：C15H14O4
p53正向細胞凋亡調控因子抗體 Saccharomyces│boulardii種屬:Saccharomyces│boulardii

提供形式:凍干物

安全等級:1

模式菌株:no

應用領域:釀造食醋

培養(yǎng)方法

培養(yǎng)基:CM0013

生長條件:28℃

存儲條件:真空冷凍干燥法博拉迪酵母