抗體的制備過程:
1. 免疫原的制備
普通的大分子蛋白,通過分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進(jìn)行誘導(dǎo)表達(dá)獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為免疫原。
小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯(lián)載體對(duì)該分子進(jìn)行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,常見偶聯(lián)載體如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫動(dòng)物
常用于制備抗血清的動(dòng)物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等,大量生產(chǎn)時(shí)需要用到狗、綿羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集
一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動(dòng)脈采血,家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血,家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定
得到的抗血清需要進(jìn)一步的純化,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進(jìn)行層析,具有高效,特異性強(qiáng),純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對(duì)分子的質(zhì)量、純度以及特異性。
5. 免疫血清的保存
建議將抗體分裝后進(jìn)行保存??贵w一般比較穩(wěn)定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會(huì)影響效價(jià),而真空干燥保存時(shí)間可以更久。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑。
參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品應(yīng)用 WB=1:100-500 ELISA=1:500-1000 IP=1:20-100 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 IF=1:100-500
(石蠟切片需做抗原修復(fù))
英文名稱 Anti-B7-DC/CD273/PDL2
中文名稱 程序性死亡配體2抗體
別 名 B7 dendritic cell molecule; B7-DC; B7DC; bA574F11.2; Btdc; Butyrophilin B7 DC; Butyrophilin B7-DC; Butyrophilin B7DC; CD 273; CD273; CD273 antigen; MGC142238; MGC142240; PD 1 ligand 2; PD L2; PD-1 ligand 2; PD-L2; PD1 ligand 2; PD1L2_HUMAN; PDCD 1 ligand 2; PDCD1 ligand 2; PDCD1L2; Pdcd1lg2; PDL 2; PDL2; Programmed cell death 1 ligand 2; Programmed death ligand 2.
濃 度 1mg/1ml
規(guī) 格 0.1ml/100μg 0.2ml/200μg
抗體來源 Rabbit
克隆類型 polyclonal
交叉反應(yīng) Human, Mouse, Rat, Cow
產(chǎn)品類型 一抗
研究領(lǐng)域 細(xì)胞生物 免疫學(xué)
蛋白分子量 predicted molecular weight: 29kDa
性 狀 Lyophilized or Liquid
免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human B7-DC (41-85aa)
亞 型 IgG
純化方法 affinity purified by Protein A
儲(chǔ) 存 液 0.01M PBS, pH 7.4 with 10 mg/ml BSA and 0.1% Sodium azide
抗體分子標(biāo)記技術(shù):
(一)原理
當(dāng)應(yīng)用化學(xué)氧化法時(shí)(NaI)遇強(qiáng)氧化劑,離子被氧化為分子,所生成的自由分子可與某些基團(tuán)進(jìn)行鹵化反應(yīng)。蛋白質(zhì)分子可進(jìn)行鹵化反應(yīng)的基團(tuán)主要為酪氨酸殘基,某些組氨酸殘基也可能進(jìn)行化。在應(yīng)用胺T( Chloramine T)法的實(shí)驗(yàn)中,所用的氧化劑(1,3,4,6- tetrachloro-3a,6adipheny l-glucoluril)強(qiáng)揮發(fā)性的有機(jī)溶劑中。該溶劑加入試管后,先讓其揮發(fā)(即讓氧化劑將試管包被),然后把Na125I和蛋白質(zhì)液加入包被好的試管中,反應(yīng)完成即將混合液移入他管終止反應(yīng)。
(二)準(zhǔn)備
1.試劑
經(jīng)親和層析純化的多克隆抗體或單克隆抗體;0.5mol/L磷酸鈉緩沖液,pH7.5;無載體的Na125I3.7GBq/ml(100mCi/ml)的NaOH液;100g/L三醋酸;70%乙醇;新鮮制備的含2mg/m1絡(luò)胺T的0.5mol/L磷酸鈉緩沖液(pH7.5);胺T反應(yīng)終止緩沖液;
2.儀器
凝膠過濾柱;¥-記數(shù)器;玻璃纖維濾。
(三)操作要點(diǎn)
1.用胺T法進(jìn)行化,也可在大約pH7.0的緩沖液中進(jìn)行;
2.如果氧化反應(yīng)損傷蛋白質(zhì),可將抗體與異硫氰酸熒光素(FITC)偶聯(lián))胺T量減少到0.02mg/m,并將偏重亞硫酸液的濃度降到0.024mg/ml;
3. Iodogen-包被的試管可在干燥器中,于室溫下保存多年;
4.1251標(biāo)記的抗體,在制備后六周內(nèi)均可使用(1251的半衰期為59.6天);
5.要注意保證所用的Na1251是新鮮的,陳舊制劑的比活性低;
6.酪氨酸的碘化偶爾會(huì)對(duì)抗原的抗體結(jié)合位點(diǎn)有干擾,因此降低其結(jié)合能力,但這種情況很少見。
抗體制備過程:
1.材料與試劑
a.提取的動(dòng)物 Ig
b.弗氏完全佐劑和弗氏不完全佐劑
c.青霉素和鏈霉素
d.實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 兔
e.其它材料及試劑
2、選擇實(shí)驗(yàn)活體。
3、進(jìn)行動(dòng)物免疫實(shí)驗(yàn)。
4、試取血樣進(jìn)行測(cè)試,查看免疫效果。
5、如果免疫成功,殺死實(shí)驗(yàn)活體,采集全部血清。
6、純化出抗體。
7、鑒定抗體。胎牛血清(無菌采制)
下列是程序性死亡配體2抗體 的相關(guān)熱銷產(chǎn)品:
大毛霉現(xiàn)貨,ATCC菌株
五通橋毛霉培養(yǎng),ATCC菌株
亮白曲霉保存,ATCC菌株
平展米曲霉(米曲霉平展變種)售價(jià),ATCC菌株
康寧木霉現(xiàn)貨,ATCC菌株
哈茨木霉培養(yǎng),ATCC菌株
厚孢根霉保存,ATCC菌株
中華根霉售價(jià),ATCC菌株
血栓調(diào)節(jié)蛋白(TM)ELISA Kit for Thrombomodulin (TM)規(guī)格:48T/96T
尼克酰腺嘌呤二核苷磷氧化酶1(NOX1)ELISA Kit for Nicotinamide Adenine Dinucleotide Phosphate Oxidase 1 (NOX1)規(guī)格:48T/96T
軟骨寡聚基質(zhì)蛋白(COMP)ELISA Kit for Cartilage Oligomeric Matrix Protein (COMP)規(guī)格:48T/96T
血小板衍生生長因子B(PDGFB)ELISA Kit for Platelet Derived Growth Factor Subunit B (PDGFB)規(guī)格:48T/96T
維X受體α(RXRα)ELISA Kit for Retinoid X Receptor Alpha (RXRa)規(guī)格:48T/96T
血管性血友病因子(vWF)ELISA Kit for Von Willebrand Factor (vWF)規(guī)格:48T/96T
載蛋白B100(APOB100)ELISA Kit for Apolipoprotein B100 (APOB100)規(guī)格:48T/96T
上皮中性粒細(xì)胞激活肽78(ENA78)ELISA Kit for Epithelial Neutrophil Activating Peptide 78 (ENA78)規(guī)格:48T/96T
補(bǔ)體成分8γ(C8γ)ELISA Kit for Complement Component 8g (C8g)規(guī)格:48T/96T
白介素35(IL35)ELISA Kit for Interleukin 35 (IL35)規(guī)格:48T/96T
α2-HS糖蛋白(αHSG)ELISA Kit for Alpha-Heremans Schmid Glycoprotein (aHSG)規(guī)格:48T/96T
神經(jīng)營養(yǎng)因子3(NT3)ELISA Kit for Neurotrophin 3 (NT3)規(guī)格:48T/96T
共濟(jì)失調(diào)7樣蛋白3B抗體Ononin中文名:芒柄花苷別名:分子式:C22H22O9
感染性蛋白唯一蛋白1抗體Hematoxylin中文名:蘇木精別名:分子式:C16H14O6
含錨蛋白重復(fù)序列-細(xì)胞因子信號(hào)抑制物盒蛋白家族5抗體7,4'-Dihydroxy-8-methylflavan中文名:別名:分子式:C16H16O3
植物生長激素ABP1抗體Abyssinone V中文名:別名:分子式:C25H28O5
含錨蛋白重復(fù)序列-細(xì)胞因子信號(hào)抑制物盒蛋白家族8抗體5-Hydroxysophoranone中文名:別名:分子式:C30H36O5
程序性死亡配體2抗體 Cordyceps│militaris種屬:Cordyceps│militaris
提供形式:斜面培養(yǎng)物
安全等級(jí):1
模式菌株:no
應(yīng)用領(lǐng)域:保健、藥用,適合液體發(fā)酵生產(chǎn)菌絲體。
培養(yǎng)方法
培養(yǎng)基:CM0017
生長條件:25℃
存儲(chǔ)條件:液氮超低溫凍結(jié)法;定期移植法蛹蟲草(北冬蟲夏草,北蟲草)