抗體制備過程:
1.材料與試劑
a.提取的動物 Ig
b.弗氏完全佐劑和弗氏不完全佐劑
c.青霉素和鏈霉素
d.實驗動物 兔
e.其它材料及試劑
2、選擇實驗活體。
3、進行動物免疫實驗。
4、試取血樣進行測試,查看免疫效果。
5、如果免疫成功,殺死實驗活體,采集全部血清。
6、純化出抗體。
7、鑒定抗體。胎牛血清(無菌采制)
參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品應(yīng)用 WB=1:100-500 ELISA=1:500-1000 IP=1:20-100 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 IF=1:100-500
(石蠟切片需做抗原修復(fù))
英文名稱 Anti-BMPR2
中文名稱 骨形態(tài)發(fā)生蛋白2受體抗體
別 名 BMPR2
濃 度 1mg/1ml
規(guī) 格 0.1ml/100μg 0.2ml/200μg
抗體來源 Rabbit
克隆類型 polyclonal
交叉反應(yīng) Human, Mouse, Rat, Chicken, Pig, Cow, Horse, Rabbit
產(chǎn)品類型 一抗
研究領(lǐng)域 心血管 免疫學(xué) 信號轉(zhuǎn)導(dǎo) 干細胞 生長因子和激素 細胞表面分子
蛋白分子量 predicted molecular weight: 112kDa
性 狀 Lyophilized or Liquid
免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human BMPR2
亞 型 IgG
純化方法 affinity purified by Protein A
儲 存 液 0.01M PBS, pH 7.4 with 10 mg/ml BSA and 0.1% Sodium azide
抗體的制備過程:
1. 免疫原的制備
普通的大分子蛋白,通過分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進行誘導(dǎo)表達獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為免疫原。
小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯(lián)載體對該分子進行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,常見偶聯(lián)載體如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫動物
常用于制備抗血清的動物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等,大量生產(chǎn)時需要用到狗、綿羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集
一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動脈采血,家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血,家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定
得到的抗血清需要進一步的純化,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進行層析,具有高效,特異性強,純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對分子的質(zhì)量、純度以及特異性。
5. 免疫血清的保存
建議將抗體分裝后進行保存??贵w一般比較穩(wěn)定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價,而真空干燥保存時間可以更久。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑。
抗體分子標記技術(shù):
(一)原理
當應(yīng)用化學(xué)氧化法時(NaI)遇強氧化劑,離子被氧化為分子,所生成的自由分子可與某些基團進行鹵化反應(yīng)。蛋白質(zhì)分子可進行鹵化反應(yīng)的基團主要為酪氨酸殘基,某些組氨酸殘基也可能進行化。在應(yīng)用胺T( Chloramine T)法的實驗中,所用的氧化劑(1,3,4,6- tetrachloro-3a,6adipheny l-glucoluril)強揮發(fā)性的有機溶劑中。該溶劑加入試管后,先讓其揮發(fā)(即讓氧化劑將試管包被),然后把Na125I和蛋白質(zhì)液加入包被好的試管中,反應(yīng)完成即將混合液移入他管終止反應(yīng)。
(二)準備
1.試劑
經(jīng)親和層析純化的多克隆抗體或單克隆抗體;0.5mol/L磷酸鈉緩沖液,pH7.5;無載體的Na125I3.7GBq/ml(100mCi/ml)的NaOH液;100g/L三醋酸;70%乙醇;新鮮制備的含2mg/m1絡(luò)胺T的0.5mol/L磷酸鈉緩沖液(pH7.5);胺T反應(yīng)終止緩沖液;
2.儀器
凝膠過濾柱;¥-記數(shù)器;玻璃纖維濾。
(三)操作要點
1.用胺T法進行化,也可在大約pH7.0的緩沖液中進行;
2.如果氧化反應(yīng)損傷蛋白質(zhì),可將抗體與異硫氰酸熒光素(FITC)偶聯(lián))胺T量減少到0.02mg/m,并將偏重亞硫酸液的濃度降到0.024mg/ml;
3. Iodogen-包被的試管可在干燥器中,于室溫下保存多年;
4.1251標記的抗體,在制備后六周內(nèi)均可使用(1251的半衰期為59.6天);
5.要注意保證所用的Na1251是新鮮的,陳舊制劑的比活性低;
6.酪氨酸的碘化偶爾會對抗原的抗體結(jié)合位點有干擾,因此降低其結(jié)合能力,但這種情況很少見。
下列是骨形態(tài)發(fā)生蛋白2受體抗體 的相關(guān)熱銷產(chǎn)品:
Gramellaechinicola現(xiàn)貨,ATCC菌株
海洋海棲菌培養(yǎng),ATCC菌株
Deinococcusaerolatus保存,ATCC菌株
Oceanicolagranulosus售價,ATCC菌株
Oceanicolabatsensis現(xiàn)貨,ATCC菌株
Citreicellaaestuarii培養(yǎng),ATCC菌株
Litorimicrobiumtaeanense保存,ATCC菌株
Loktanellapyoseonensis售價,ATCC菌株
脫氧胞苷激酶(DCK)ELISA Kit for Deoxycytidine Kinase (DCK)規(guī)格:48T/96T
離子電壓門控通道蛋白1(HVCN1)ELISA Kit for Hydrogen Voltage Gated Channel Protein 1 (HVCN1)規(guī)格:48T/96T
SRC/FGR/YES相關(guān)FYN癌基因(FYN)ELISA Kit for FYN Oncogene Related To SRC/FGR/YES (FYN)規(guī)格:48T/96T
序列相似家族135成員B(FAM135B)ELISA Kit for Family With Sequence Similarity 135, Member B (FAM135B)規(guī)格:48T/96T
過氧化物酶體增殖物激活受體γ(PPARγ)ELISA Kit for Peroxisome Proliferator Activated Receptor Gamma (PPARg)規(guī)格:48T/96T
腺原脫酶Ⅲ(DIO3)ELISA Kit for Deiodinase, Iodothyronine, Type III (DIO3)規(guī)格:48T/96T
Diaphanous同源物1(DIAPH1)ELISA Kit for Diaphanous Homolog 1 (DIAPH1)規(guī)格:48T/96T
NADP依賴性蘋果酶2(ME2)ELISA Kit for Malic Enzyme 2, NADP+ Dependent, Mitochondrial (ME2)規(guī)格:48T/96T
MYC關(guān)聯(lián)因子X(MAX)ELISA Kit for MYC Associated Factor X (MAX)規(guī)格:48T/96T
卵泡抑素樣蛋白3(FSTL3)ELISA Kit for Follistatin Like Protein 3 (FSTL3)規(guī)格:48T/96T
腺苷A2b受體(ADORA2b)ELISA Kit for Adenosine A2b Receptor (ADORA2b)規(guī)格:48T/96T
分揀連接蛋白17(SNX17)ELISA Kit for Sorting Nexin 17 (SNX17)規(guī)格:48T/96T
調(diào)亡誘導(dǎo)因子抗體Procyanidin B2中文名:原花青素B2別名:Epicatechin-(4β→8)-epicatechin分子式:C30H26O12
間變型淋巴瘤激酶抗體6,7,4'-Trihydroxyflavanone中文名:6,7,4'-三羥基二氫黃酮別名:分子式:C15H12O5
α-甲基?;o酶A消旋酶抗體Chrysocauloflavone I中文名:別名:分子式:C30H20O10
腺苷單磷酸活化蛋白激酶β1抗體3',3'''-Biapigenin中文名:別名:分子式:C30H18O10
糖尿病相關(guān)肽/胰島淀粉樣肽抗體Ochnaflavone中文名:別名:分子式:C30H18O10
骨形態(tài)發(fā)生蛋白2受體抗體 Pleurotus│ostreatus種屬:Pleurotus│ostreatus
提供形式:斜面培養(yǎng)物
安全等級:1
模式菌株:no
應(yīng)用領(lǐng)域:用于生產(chǎn)食用菌。
培養(yǎng)方法
培養(yǎng)基:CM0017
生長條件:25℃
存儲條件:液氮超低溫凍結(jié)法;定期移植法糙皮側(cè)耳