抗體反應(yīng)的因素:
1.電解質(zhì) :抗原抗體特異結(jié)合后,膠體粒便可發(fā)生脫水作用,此時(shí)易受電解質(zhì)影響,如有適當(dāng)濃度的電解質(zhì)存在就會使它們失去部分負(fù)電荷而相互凝聚,于是出現(xiàn)明顯的凝集或沉淀現(xiàn)象。
2.酸堿度:合適的pH為6-8。
3.溫度:37℃通常是抗原體反應(yīng)最適溫度。
整合素樣金屬蛋白酶與凝血酶10型抗體 別 名 A disintegrin and metalloproteinase with thrombospondin motifs 10; A disintegrin like and metalloprotease (reprolysin type) with thrombospondin type 1 motif, 10; ADAM metallopeptidase with thrombospondin type 1 motif 10; ADAM TS10; EC 3.4.24; WMS; ATS10_HUMAN.
濃 度 1mg/1ml
規(guī) 格 0.1ml/100μg 0.2ml/200μg
抗體來源 Rabbit
克隆類型 polyclonal
交叉反應(yīng) Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow, Rabbit, Sheep
產(chǎn)品類型 一抗
英文名稱 Anti-ADAMTS10
中文名稱 整合素樣金屬蛋白酶與凝血酶10型抗體
研究領(lǐng)域 細(xì)胞生物 信號轉(zhuǎn)導(dǎo) 細(xì)胞外基質(zhì)
蛋白分子量 predicted molecular weight: 95kDa
性 狀 Lyophilized or Liquid
免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human ADAMTS10
亞 型 IgG
純化方法 affinity purified by Protein A
儲 存 液 Preservative: 15mM Sodium Azide, Constituents: 1% BSA, 0.01M PBS, pH 7.4
產(chǎn)品應(yīng)用 WB=1:100-500 ELISA=1:500-1000 IP=1:20-100 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 IF=1:100-500
(石蠟切片需做抗原修復(fù))
實(shí)驗(yàn)步驟:
1、石蠟切片,常規(guī)脫蠟至水
2、蒸餾水沖洗,pbs 浸泡5 分鐘(如需采用抗原修復(fù),在此步驟后進(jìn)行)。
3、3%雙氧水去離子水(無色液體)孵育15-20 分鐘,以消除內(nèi)源性過氧物酶活性。
4、滴加試劑A(藍(lán)色液體)室溫孵育15-20 分鐘,傾去,勿洗。
5、滴加適當(dāng)比例稀釋的一抗,37℃孵育2-3 小時(shí)或4℃過夜。
6、PBS 沖洗,3 分鐘3 次。
7、滴加試劑B(黃色液體),室溫或37℃孵育15-20 分鐘。
8、PBS 沖洗,3 分鐘3 次。
9、滴加試劑C(橙色液體),室溫或37℃孵育15-20 分鐘。
10、PBS 沖洗,3 分鐘3 次。
11、顯色劑顯色(DAB 或AEC)
12、自來水充分沖洗。
13、如果需要,可進(jìn)行復(fù)染,脫水,透明。
14、選擇適當(dāng)?shù)姆馄瑒┓馄?/span>
抗體的鑒定:
1)抗體的效價(jià)鑒定:不管是用于診斷還是用于治療,制備抗體的目的都是要求較高效價(jià)。不同的抗原制備的抗體,要求的效價(jià)不一。鑒定效價(jià)的方法很多,包括有試管凝集反應(yīng),瓊脂擴(kuò)散試驗(yàn),酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)等。常用的抗原所制備的抗體一般都有約成的鑒定效價(jià)的方法,以資比較。如制備抗抗體的效價(jià),一般就采用瓊脂擴(kuò)散試驗(yàn)來鑒定。
2)抗體的特異性鑒定:抗體的特異性是指與相應(yīng)抗原或近似抗原物質(zhì)的識別能力??贵w的特異性高,它的識別能力就強(qiáng)。衡量特異性通常以交叉反應(yīng)率來表示。交叉反應(yīng)率可用競爭抑制試驗(yàn)測定。以不同濃度抗原和近似抗原分別做競爭抑制曲線,計(jì)算各自的結(jié)合率,求出各自在IC50時(shí)的濃度,并按公式計(jì)算交叉反應(yīng)率。
如果所用抗原濃度IC50濃度為pg/管,而一些近似抗原物質(zhì)的IC50濃度幾乎是無窮大時(shí),表示這一抗血清與其他抗原物質(zhì)的交叉反應(yīng)率近似為0,即該血清的特異性較好。
3)抗體親和力:是指抗體和抗原結(jié)合的牢固程度。親和力的高低是由抗原分子的大小,抗體分子的結(jié)合位點(diǎn)與抗原決定簇之間立體構(gòu)型的合適度決定的。有助于維持抗原抗體復(fù)合物穩(wěn)定的分子間力有氫鍵,疏水鍵,側(cè)鏈相反電荷基因的庫侖力,范德華力和空間斥力。親和力常以親和常數(shù)K表示,K的單位是L/mol。抗體親和力的測定對抗體的篩選,確定抗體的用途,驗(yàn)證抗體的均一性等均有重要意義。
抗體反應(yīng)特點(diǎn):
1.高度特異性,特異性是抗原抗體反應(yīng)的最主要特征,特定抗原決定簇只與特定抗體結(jié)合;
2.可逆性:抗原與抗體結(jié)合形成抗原抗體復(fù)合物的過程是一種動態(tài)平衡, 其反應(yīng)式為:Ag+AbAg·Ab;
3.適當(dāng)濃度和比例;
4.敏感性:在測定血清中某一物質(zhì)的含量時(shí),化學(xué)比色法的敏感度為mg/ml水平,酶反應(yīng)測定法的敏感度約為5~10μg/ml,免疫測定中凝膠擴(kuò)散法的敏感度與酶反應(yīng)法相仿。
含試劑:
1、一抗(應(yīng)用:IHC-P=1:400-800 IHC-F=1:400-800 )
2、無色試劑:內(nèi)源性過氧化物酶阻斷劑
3、試劑A:封閉用正常山羊血清工作液
4、試劑B:生物素標(biāo)記二抗工作液:生物素標(biāo)記羊抗兔IgG
5、試劑C:辣根酶標(biāo)記鏈酶卵白素工作液
6、顯色液D液 (棕色) 1ml
7、顯色液E液(白色)20ml
芽孢桿菌現(xiàn)貨,ATCC菌株
Sphingobacteriumcomposti培養(yǎng),ATCC菌株
單核增生李斯特菌保存,ATCC菌株
水螺菌售價(jià),ATCC菌株
腸炎沙門氏菌腸炎亞種現(xiàn)貨,ATCC菌株
萎蔫短小桿菌培養(yǎng),ATCC菌株
海藻希瓦氏菌保存,ATCC菌株
嗜鹽細(xì)菌屬售價(jià),ATCC菌株
葡萄糖激酶(GCK)ELISA Kit for Glucokinase (GCK)規(guī)格:48T/96T
轉(zhuǎn)鐵蛋白(TRF)ELISA Kit for Transferrin (TRF)規(guī)格:48T/96T
干細(xì)胞因子(SCF)ELISA Kit for Stem Cell Factor (SCF)規(guī)格:48T/96T
窖蛋白(CAV1)ELISA Kit for Caveolin 1 (CAV1)規(guī)格:48T/96T
末端補(bǔ)體復(fù)合體C5b(C5b)ELISA Kit for Terminal Complement Complex C5b (C5b)規(guī)格:48T/96T
緩激肽(BK)ELISA Kit for Bradykinin (BK)規(guī)格:48T/96T
纖溶酶原激活物抑制因子1(PAI1)ELISA Kit for Plasminogen Activator Inhibitor 1 (PAI1)規(guī)格:48T/96T
補(bǔ)體因子B(CFB)ELISA Kit for Complement Factor B (CFB)規(guī)格:48T/96T
血小板生成素(TPO)ELISA Kit for Thrombopoietin (TPO)規(guī)格:48T/96T
激肽釋放酶3(KLK3)ELISA Kit for Kallikrein 3 (KLK3)規(guī)格:48T/96T
單核細(xì)胞趨化蛋白2(MCP2)ELISA Kit for Monocyte Chemotactic Protein 2 (MCP2)規(guī)格:48T/96T
踝蛋白(TLN)ELISA Kit for Talin (TLN)規(guī)格:48T/96T
錨蛋白重復(fù)結(jié)構(gòu)域蛋白50抗體Camptothecin中文名:喜樹堿別名:分子式:C20H16N2O4
氫離子轉(zhuǎn)運(yùn)ATP合成酶6G抗體Vindorosine中文名:別名:16-Demethoxyvindoline分子式:C24H30N2O5
錨蛋白重復(fù)結(jié)構(gòu)域蛋白26抗體Cytochalasin D中文名:細(xì)胞松弛素D別名:Zygosporin A分子式:C30H37NO6
鐵蛋白Fe65抗體4,R-ajmalicine N-oxide中文名:別名:分子式:C21H24N2O4
錨定蛋白B抗體Vasicinone中文名:鴨嘴花酮堿別名:分子式:C11H10N2O2
整合素樣金屬蛋白酶與凝血酶10型抗體 Aspergillus│usamii var.種屬:Aspergillus│usamii var.
提供形式:凍干物
安全等級:1
模式菌株:no
培養(yǎng)方法
培養(yǎng)基:CM0015
生長條件:28-30℃
存儲條件:真空冷凍干燥法宇佐美曲霉變種