抗體的制備過(guò)程:
1. 免疫原的制備
普通的大分子蛋白,通過(guò)分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進(jìn)行誘導(dǎo)表達(dá)獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為免疫原。
小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯(lián)載體對(duì)該分子進(jìn)行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,常見(jiàn)偶聯(lián)載體如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫動(dòng)物
常用于制備抗血清的動(dòng)物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等,大量生產(chǎn)時(shí)需要用到狗、綿羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集
一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動(dòng)脈采血,家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血,家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定
得到的抗血清需要進(jìn)一步的純化,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進(jìn)行層析,具有高效,特異性強(qiáng),純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對(duì)分子的質(zhì)量、純度以及特異性。
5. 免疫血清的保存
建議將抗體分裝后進(jìn)行保存??贵w一般比較穩(wěn)定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會(huì)影響效價(jià),而真空干燥保存時(shí)間可以更久。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑。
參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品應(yīng)用 WB=1:100-500 ELISA=1:500-1000 IP=1:20-100 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 IF=1:100-500
(石蠟切片需做抗原修復(fù))
英文名稱(chēng) Anti-AVEN
中文名稱(chēng) 細(xì)胞死亡調(diào)節(jié)蛋白抗體(凋亡、半胱胺酸蛋白酶激活抑制劑)
別 名 1700013A01Rik; 1700056A21Rik; mAven L; mAven S; MGC124011; Apoptosis caspase activation inhibitor; Cell death regulator Aven; OTTMUSP00000016129; PDCD12; Programmed cell death 12; RP23-52C15.2; AVEN_HUMAN
濃 度 1mg/1ml
規(guī) 格 0.1ml/100μg 0.2ml/200μg
抗體來(lái)源 Rabbit
克隆類(lèi)型 polyclonal
交叉反應(yīng) Human, Mouse, Rat, Chicken, Pig, Horse, Rabbit
產(chǎn)品類(lèi)型 一抗
研究領(lǐng)域 細(xì)胞生物 細(xì)胞凋亡
蛋白分子量 predicted molecular weight: 38kDa
性 狀 Lyophilized or Liquid
免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human AVEN
亞 型 IgG
純化方法 affinity purified by Protein A
儲(chǔ) 存 液 0.01M PBS, pH 7.4 with 10 mg/ml BSA and 0.1% Sodium azide
抗體分子標(biāo)記技術(shù):
(一)原理
當(dāng)應(yīng)用化學(xué)氧化法時(shí)(NaI)遇強(qiáng)氧化劑,離子被氧化為分子,所生成的自由分子可與某些基團(tuán)進(jìn)行鹵化反應(yīng)。蛋白質(zhì)分子可進(jìn)行鹵化反應(yīng)的基團(tuán)主要為酪氨酸殘基,某些組氨酸殘基也可能進(jìn)行化。在應(yīng)用胺T( Chloramine T)法的實(shí)驗(yàn)中,所用的氧化劑(1,3,4,6- tetrachloro-3a,6adipheny l-glucoluril)強(qiáng)揮發(fā)性的有機(jī)溶劑中。該溶劑加入試管后,先讓其揮發(fā)(即讓氧化劑將試管包被),然后把Na125I和蛋白質(zhì)液加入包被好的試管中,反應(yīng)完成即將混合液移入他管終止反應(yīng)。
(二)準(zhǔn)備
1.試劑
經(jīng)親和層析純化的多克隆抗體或單克隆抗體;0.5mol/L磷酸鈉緩沖液,pH7.5;無(wú)載體的Na125I3.7GBq/ml(100mCi/ml)的NaOH液;100g/L三醋酸;70%乙醇;新鮮制備的含2mg/m1絡(luò)胺T的0.5mol/L磷酸鈉緩沖液(pH7.5);胺T反應(yīng)終止緩沖液;
2.儀器
凝膠過(guò)濾柱;¥-記數(shù)器;玻璃纖維濾。
(三)操作要點(diǎn)
1.用胺T法進(jìn)行化,也可在大約pH7.0的緩沖液中進(jìn)行;
2.如果氧化反應(yīng)損傷蛋白質(zhì),可將抗體與異硫氰酸熒光素(FITC)偶聯(lián))胺T量減少到0.02mg/m,并將偏重亞硫酸液的濃度降到0.024mg/ml;
3. Iodogen-包被的試管可在干燥器中,于室溫下保存多年;
4.1251標(biāo)記的抗體,在制備后六周內(nèi)均可使用(1251的半衰期為59.6天);
5.要注意保證所用的Na1251是新鮮的,陳舊制劑的比活性低;
6.酪氨酸的碘化偶爾會(huì)對(duì)抗原的抗體結(jié)合位點(diǎn)有干擾,因此降低其結(jié)合能力,但這種情況很少見(jiàn)。
抗體制備過(guò)程:
1.材料與試劑
a.提取的動(dòng)物 Ig
b.弗氏完全佐劑和弗氏不完全佐劑
c.青霉素和鏈霉素
d.實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 兔
e.其它材料及試劑
2、選擇實(shí)驗(yàn)活體。
3、進(jìn)行動(dòng)物免疫實(shí)驗(yàn)。
4、試取血樣進(jìn)行測(cè)試,查看免疫效果。
5、如果免疫成功,殺死實(shí)驗(yàn)活體,采集全部血清。
6、純化出抗體。
7、鑒定抗體。胎牛血清(無(wú)菌采制)
下列是細(xì)胞死亡調(diào)節(jié)蛋白抗體(凋亡、半胱胺酸蛋白酶激活抑制劑) 的相關(guān)熱銷(xiāo)產(chǎn)品:
熱紫鏈霉菌 Streptomyces thermoviolaceus
稀疏鏈霉菌 Streptomyces sparsogenes
滅癌素鏈霉菌 Streptomyces gancidicus
柯奈尼亞小單胞菌 Micromonospora chokoriensis
豐后鏈霉菌 Streptomyces bungoensis
仙臺(tái)鏈霉菌 Streptomyces sindenensis
中殺菌素鏈霉菌 Streptomyces mauvecolor
灰繡赤鏈霉菌 Streptomyces griseorubiginosus
洛蒙德鏈霉菌 Streptomyces lomondensis
桑格利娜氏鏈霉菌 Streptomyces sanglieri
突觸融合蛋白1B(STX1B)ELISA Kit for Syntaxin 1B (STX1B)規(guī)格:48T/96T
K-酰轉(zhuǎn)移酶5(KAT5)ELISA Kit for K-Acetyltransferase 5 (KAT5)規(guī)格:48T/96T
干擾素α7(IFNα7)ELISA Kit for Interferon Alpha 7 (IFNa7)規(guī)格:48T/96T
絲脫水酶(SDS)ELISA Kit for Serine Dehydratase (SDS)規(guī)格:48T/96T
樣糖基轉(zhuǎn)移酶(LARGE)ELISA Kit for Like Glycosyltransferase (LARGE)規(guī)格:48T/96T
表皮生長(zhǎng)因子途徑底物蛋白1(EPN1)ELISA Kit for Epsin 1 (EPN1)規(guī)格:48T/96T
鈣黏蛋白10(CDH10)ELISA Kit for Cadherin 10 (CDH10)規(guī)格:48T/96T
原肌球調(diào)節(jié)蛋白3(TMOD3)ELISA Kit for Tropomodulin 3 (TMOD3)規(guī)格:48T/96T
異烯半胱氧化酶1(PCYOX1)ELISA Kit for Prenylcysteine Oxidase 1 (PCYOX1)規(guī)格:48T/96T
轉(zhuǎn)移抑制因子1(MTSS1)ELISA Kit for Metastasis Suppressor 1 (MTSS1)規(guī)格:48T/96T
糖磺基轉(zhuǎn)移酶5(CHST5)ELISA Kit for Carbohydrate Sulfotransferase 5 (CHST5)規(guī)格:48T/96T
腺苷合酶(ADSS)ELISA Kit for Adenylosuccinate Synthase (ADSS)規(guī)格:48T/96T
含錨蛋白重復(fù)序列-細(xì)胞因子信號(hào)抑制物盒蛋白家族12抗體Buxbodine B中文名:別名:分子式:C26H41NO2
含錨蛋白重復(fù)序列-細(xì)胞因子信號(hào)抑制物盒蛋白家族7抗體1-Hydroxymethyl-β-carboline glucoside中文名:別名:分子式:C18H20N2O6
含錨蛋白重復(fù)序列-細(xì)胞因子信號(hào)抑制物盒蛋白家族17抗體Seneciphylline中文名:千里光菲靈堿別名:分子式:C18H23NO5
鈉鉀ATP酶通道蛋白抗體Picrasidine T中文名:別名:分子式:C28H25N4O4
?;o酶A合成酶家族4抗體Strictosamide中文名:異長(zhǎng)春花苷內(nèi)酰胺別名:分子式:C26H30N2O8
細(xì)胞死亡調(diào)節(jié)蛋白抗體(凋亡、半胱胺酸蛋白酶激活抑制劑) Aspergillus│tamarii種屬:Aspergillus│tamarii
提供形式:凍干物
安全等級(jí):1
模式菌株:no
應(yīng)用領(lǐng)域:糖化用菌。
培養(yǎng)方法
培養(yǎng)基:CM0077
生長(zhǎng)條件:28-30℃
存儲(chǔ)條件:-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法;定期移植法溜曲霉