抗體的制備過程:
1. 免疫原的制備
普通的大分子蛋白,通過分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進(jìn)行誘導(dǎo)表達(dá)獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為免疫原。
小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯(lián)載體對該分子進(jìn)行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,常見偶聯(lián)載體如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫動物
常用于制備抗血清的動物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等,大量生產(chǎn)時需要用到狗、綿羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集
一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動脈采血,家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血,家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定
得到的抗血清需要進(jìn)一步的純化,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進(jìn)行層析,具有高效,特異性強(qiáng),純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對分子的質(zhì)量、純度以及特異性。
5. 免疫血清的保存
建議將抗體分裝后進(jìn)行保存。抗體一般比較穩(wěn)定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價,而真空干燥保存時間可以更久。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑。
參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品應(yīng)用 WB=1:100-500 ELISA=1:500-1000 IP=1:20-100 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 IF=1:100-500
(石蠟切片需做抗原修復(fù))
英文名稱 Anti-ADRB3/beta 3 Adrenergic Receptor
中文名稱 β3腎上腺素能受體抗體
別 名 beta 3 Adrenergic Receptor; β3-adrenergic receptor;β3-AR; adrenergic;beta-3- receptor; ADR B3 ; ADRB 3; ADRB3; ADRB3R; Adrenergic beta 3 receptor; B3AR; Beta 3 adrenoceptor; Beta 3 adrenoreceptor; Beta 3AR; B3AR; BETA3AR.
濃 度 1mg/1ml
規(guī) 格 0.1ml/100μg 0.2ml/200μg
抗體來源 Rabbit
克隆類型 polyclonal
交叉反應(yīng) Human, Mouse, Rat
產(chǎn)品類型 一抗
研究領(lǐng)域 心血管 細(xì)胞生物 神經(jīng)生物學(xué) 生長因子和激素 細(xì)胞膜受體 內(nèi)分泌病
蛋白分子量 predicted molecular weight: 44kDa
性 狀 Lyophilized or Liquid
免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human ADRB3 C-terminus
亞 型 IgG
純化方法 affinity purified by Protein A
儲 存 液 0.01M PBS, pH 7.4 with 10 mg/ml BSA and 0.1% Sodium azide
抗體分子標(biāo)記技術(shù):
(一)原理
當(dāng)應(yīng)用化學(xué)氧化法時(NaI)遇強(qiáng)氧化劑,離子被氧化為分子,所生成的自由分子可與某些基團(tuán)進(jìn)行鹵化反應(yīng)。蛋白質(zhì)分子可進(jìn)行鹵化反應(yīng)的基團(tuán)主要為酪氨酸殘基,某些組氨酸殘基也可能進(jìn)行化。在應(yīng)用胺T( Chloramine T)法的實(shí)驗(yàn)中,所用的氧化劑(1,3,4,6- tetrachloro-3a,6adipheny l-glucoluril)強(qiáng)揮發(fā)性的有機(jī)溶劑中。該溶劑加入試管后,先讓其揮發(fā)(即讓氧化劑將試管包被),然后把Na125I和蛋白質(zhì)液加入包被好的試管中,反應(yīng)完成即將混合液移入他管終止反應(yīng)。
(二)準(zhǔn)備
1.試劑
經(jīng)親和層析純化的多克隆抗體或單克隆抗體;0.5mol/L磷酸鈉緩沖液,pH7.5;無載體的Na125I3.7GBq/ml(100mCi/ml)的NaOH液;100g/L三醋酸;70%乙醇;新鮮制備的含2mg/m1絡(luò)胺T的0.5mol/L磷酸鈉緩沖液(pH7.5);胺T反應(yīng)終止緩沖液;
2.儀器
凝膠過濾柱;¥-記數(shù)器;玻璃纖維濾。
(三)操作要點(diǎn)
1.用胺T法進(jìn)行化,也可在大約pH7.0的緩沖液中進(jìn)行;
2.如果氧化反應(yīng)損傷蛋白質(zhì),可將抗體與異硫氰酸熒光素(FITC)偶聯(lián))胺T量減少到0.02mg/m,并將偏重亞硫酸液的濃度降到0.024mg/ml;
3. Iodogen-包被的試管可在干燥器中,于室溫下保存多年;
4.1251標(biāo)記的抗體,在制備后六周內(nèi)均可使用(1251的半衰期為59.6天);
5.要注意保證所用的Na1251是新鮮的,陳舊制劑的比活性低;
6.酪氨酸的碘化偶爾會對抗原的抗體結(jié)合位點(diǎn)有干擾,因此降低其結(jié)合能力,但這種情況很少見。
抗體制備過程:
1.材料與試劑
a.提取的動物 Ig
b.弗氏完全佐劑和弗氏不完全佐劑
c.青霉素和鏈霉素
d.實(shí)驗(yàn)動物 兔
e.其它材料及試劑
2、選擇實(shí)驗(yàn)活體。
3、進(jìn)行動物免疫實(shí)驗(yàn)。
4、試取血樣進(jìn)行測試,查看免疫效果。
5、如果免疫成功,殺死實(shí)驗(yàn)活體,采集全部血清。
6、純化出抗體。
7、鑒定抗體。胎牛血清(無菌采制)
下列是β3腎上腺素能受體抗體 的相關(guān)熱銷產(chǎn)品:
煙曲霉原變種 Aspergillus fumigatus var.fumigatus
煙曲霉 Aspergillus fumigatus
亞鮮紅鏈霉菌 Streptomyces subrutilus
亞熱帶鏈霉菌 Streptomyces subtropicus
雅致放射毛霉 Actinomucor elegans(Eidam)Benjamin et Hesseltine
崖縣欽氏菌 Chainia yaxianensis
芽枝霉屬菌種 Cladosporium sp.
芽枝霉屬 Cladosporium sp.
芽枝孢霉屬 Cladosporium sp.
芽孢桿菌屬菌種 Bacillus sp.
神經(jīng)介素B(NMB)ELISA Kit for Neuromedin B (NMB)規(guī)格:48T/96T
神經(jīng)肽S(NPS)ELISA Kit for Neuropeptide S (NPS)規(guī)格:48T/96T
極低密度蛋白受體(VLDLR)ELISA Kit for Very Low Density Lipoprotein Receptor (VLDLR)規(guī)格:48T/96T
早期生長應(yīng)答因子4(EGR4)ELISA Kit for Early Growth Response Protein 4 (EGR4)規(guī)格:48T/96T
26S-蛋白酶體(26S-PSM)ELISA Kit for 26S-Proteasome (26S-PSM)規(guī)格:48T/96T
骨形成蛋白6(BMP6)ELISA Kit for Bone Morphogenetic Protein 6 (BMP6)規(guī)格:48T/96T
蛋白激酶Cζ(PKCζ)ELISA Kit for Protein Kinase C Zeta (PKCz)規(guī)格:48T/96T
羥脯(Hyp)ELISA Kit for Hydroxyproline (Hyp)規(guī)格:48T/96T
白介素29(IL29)ELISA Kit for Interleukin 29 (IL29)規(guī)格:48T/96T
抗原提呈關(guān)聯(lián)轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白(TAP)ELISA Kit for Transporter Associated With Antigen Processing (TAP)規(guī)格:48T/96T
芳香烴受體(AhR)ELISA Kit for Aryl Hydrocarbon Receptor (AhR)規(guī)格:48T/96T
肌肌激酶(CKM)ELISA Kit for Creatine Kinase, Muscle (CKM)規(guī)格:48T/96T
α/β水解酶4抗體Neotuberostemonone中文名:別名:分子式:C22H31NO6
ADCK2蛋白抗體Picrasidine I中文名:別名:8-Hydroxydehydrocrenatine分子式:C14H12N2O2
乙醛脫氫酶16家庭A1抗體Daphnicyclidin I中文名:別名:分子式:C22H26N2O3
粘附分子IgG樣結(jié)構(gòu)域蛋白3抗體3-Epiwilsonine中文名:別名:分子式:C20H25NO4
乙醇脫氫酶1抗體Wilsonine中文名:臺灣三尖杉堿別名:分子式:C20H25NO4
β3腎上腺素能受體抗體 Laceyella│putida種屬:Laceyella│putida
分離基物:泥芯
提供形式:凍干物
安全等級:1
模式菌株:yes
培養(yǎng)方法
培養(yǎng)基:CM0249
生長條件:50℃
存儲條件:-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法惡臭萊西氏菌