抗體反應(yīng)的因素:
1.電解質(zhì) :抗原抗體特異結(jié)合后,膠體粒便可發(fā)生脫水作用,此時易受電解質(zhì)影響,如有適當濃度的電解質(zhì)存在就會使它們失去部分負電荷而相互凝聚,于是出現(xiàn)明顯的凝集或沉淀現(xiàn)象。
2.酸堿度:合適的pH為6-8。
3.溫度:37℃通常是抗原體反應(yīng)最適溫度。
脂肪細胞特異性粘附分子抗體 別 名 ACAM; Adipocyte specific adhesion molecule; CAR like membrane protein; CLMP; Coxsackie and adenovirus receptor like membrane protein.
濃 度 1mg/1ml
規(guī) 格 0.1ml/100μg 0.2ml/200μg
抗體來源 Rabbit
克隆類型 polyclonal
交叉反應(yīng) Human, Mouse, Rat, Dog, Cow, Horse, Rabbit, Sheep
產(chǎn)品類型 一抗
英文名稱 Anti-ASAM/ACAM
中文名稱 脂肪細胞特異性粘附分子抗體
研究領(lǐng)域 免疫學(xué) 信號轉(zhuǎn)導(dǎo) 細胞表面分子 細胞骨架
蛋白分子量 predicted molecular weight: 39kDa
性 狀 Lyophilized or Liquid
免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human ASAM/ACAM
亞 型 IgG
純化方法 affinity purified by Protein A
儲 存 液 0.01M PBS, pH 7.4 with 10 mg/ml BSA and 0.1% Sodium azide
產(chǎn)品應(yīng)用 ELISA=1:500-1000 IP=1:20-100 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 Flow-Cyt=1:100-500 ICC=1:100-500 IF=1:100-500
(石蠟切片需做抗原修復(fù))
實驗步驟:
1、石蠟切片,常規(guī)脫蠟至水
2、蒸餾水沖洗,pbs 浸泡5 分鐘(如需采用抗原修復(fù),在此步驟后進行)。
3、3%雙氧水去離子水(無色液體)孵育15-20 分鐘,以消除內(nèi)源性過氧物酶活性。
4、滴加試劑A(藍色液體)室溫孵育15-20 分鐘,傾去,勿洗。
5、滴加適當比例稀釋的一抗,37℃孵育2-3 小時或4℃過夜。
6、PBS 沖洗,3 分鐘3 次。
7、滴加試劑B(黃色液體),室溫或37℃孵育15-20 分鐘。
8、PBS 沖洗,3 分鐘3 次。
9、滴加試劑C(橙色液體),室溫或37℃孵育15-20 分鐘。
10、PBS 沖洗,3 分鐘3 次。
11、顯色劑顯色(DAB 或AEC)
12、自來水充分沖洗。
13、如果需要,可進行復(fù)染,脫水,透明。
14、選擇適當?shù)姆馄瑒┓馄?/span>
抗體的鑒定:
1)抗體的效價鑒定:不管是用于診斷還是用于治療,制備抗體的目的都是要求較高效價。不同的抗原制備的抗體,要求的效價不一。鑒定效價的方法很多,包括有試管凝集反應(yīng),瓊脂擴散試驗,酶聯(lián)免疫吸附試驗等。常用的抗原所制備的抗體一般都有約成的鑒定效價的方法,以資比較。如制備抗抗體的效價,一般就采用瓊脂擴散試驗來鑒定。
2)抗體的特異性鑒定:抗體的特異性是指與相應(yīng)抗原或近似抗原物質(zhì)的識別能力??贵w的特異性高,它的識別能力就強。衡量特異性通常以交叉反應(yīng)率來表示。交叉反應(yīng)率可用競爭抑制試驗測定。以不同濃度抗原和近似抗原分別做競爭抑制曲線,計算各自的結(jié)合率,求出各自在IC50時的濃度,并按公式計算交叉反應(yīng)率。
如果所用抗原濃度IC50濃度為pg/管,而一些近似抗原物質(zhì)的IC50濃度幾乎是無窮大時,表示這一抗血清與其他抗原物質(zhì)的交叉反應(yīng)率近似為0,即該血清的特異性較好。
3)抗體親和力:是指抗體和抗原結(jié)合的牢固程度。親和力的高低是由抗原分子的大小,抗體分子的結(jié)合位點與抗原決定簇之間立體構(gòu)型的合適度決定的。有助于維持抗原抗體復(fù)合物穩(wěn)定的分子間力有氫鍵,疏水鍵,側(cè)鏈相反電荷基因的庫侖力,范德華力和空間斥力。親和力常以親和常數(shù)K表示,K的單位是L/mol。抗體親和力的測定對抗體的篩選,確定抗體的用途,驗證抗體的均一性等均有重要意義。
抗體反應(yīng)特點:
1.高度特異性,特異性是抗原抗體反應(yīng)的最主要特征,特定抗原決定簇只與特定抗體結(jié)合;
2.可逆性:抗原與抗體結(jié)合形成抗原抗體復(fù)合物的過程是一種動態(tài)平衡, 其反應(yīng)式為:Ag+AbAg·Ab;
3.適當濃度和比例;
4.敏感性:在測定血清中某一物質(zhì)的含量時,化學(xué)比色法的敏感度為mg/ml水平,酶反應(yīng)測定法的敏感度約為5~10μg/ml,免疫測定中凝膠擴散法的敏感度與酶反應(yīng)法相仿。
含試劑:
1、一抗(應(yīng)用:IHC-P=1:400-800 IHC-F=1:400-800 )
2、無色試劑:內(nèi)源性過氧化物酶阻斷劑
3、試劑A:封閉用正常山羊血清工作液
4、試劑B:生物素標記二抗工作液:生物素標記羊抗兔IgG
5、試劑C:辣根酶標記鏈酶卵白素工作液
6、顯色液D液 (棕色) 1ml
7、顯色液E液(白色)20ml
糞腸球菌 Enterococcus faecalis
產(chǎn)氨棒桿菌 Corynebacterium ammoniagenes
構(gòu)巢曲霉 Aspergillus nidulans
嗜熱乳酸鏈球菌 StreptococusthermophilusOrla-Jensen
蛹蟲草(北冬蟲夏草,北蟲草) Cordyceps militaris
蛹蟲草(北冬蟲夏草,北蟲草) Cordyceps militaris
白地霉 GeotrichumcandidumLink
茯苓 Poriacocos(Fr.)Wolf
蟬花1-13 Isaria cicadae Miq.
火針層孔菌 Phellinus igniarius (L.) Quél.
改良V-P培養(yǎng)基250克V-P Medium Modified蠟樣芽孢桿菌的溶血試驗
R2A瓊250克RA Agar飲用水中導(dǎo)生細菌分離培養(yǎng)
乳糖蛋白胨肉湯250克Lactose Peptone Broth飲用水中總大腸菌群多管發(fā)酵法檢驗
Cary-Blair氏運送培養(yǎng)基250克Cary-Blair Transfort Medium運送腸道致病菌標本
卵磷吐溫80營養(yǎng)瓊250克Lecithin Tween 80 Nutrient Agar化妝品檢驗中細菌計數(shù)
酰瓊250克Acetamide Agar綠膿桿菌的選擇性分離培養(yǎng)
A1培養(yǎng)基250克A1 Medium檢測水中的大腸菌群
酵母提取物瓊250克Yeast Extract Agar水中細菌總數(shù)的檢測
MFC培養(yǎng)基250克MFC Medium飲用水中大腸菌群濾膜法檢驗
亮綠乳糖培養(yǎng)基250克Brilliant Green Lactose Medium飲用天然礦泉水中大腸桿菌檢驗
SCDLP液體培養(yǎng)基250克SCDLP Broth Medium化妝品檢驗中樣品制備、增菌
假單胞菌屬選擇瓊250克Cetrimide Agar用于綠膿桿菌的分離培養(yǎng)
2號染色體開放閱讀框88抗體Taspine中文名:塔斯品堿別名:分子式:C20H19NO6
載脂蛋白D抗體Echitoveniline中文名:別名:分子式:C31H36N2O7
粘附調(diào)節(jié)分子1抗體Caulophylline B中文名:別名:分子式:C19H21NO5
G蛋白偶聯(lián)受體ARHGEF18抗體Scandine Nb-oxide中文名:別名:分子式:C21H22N2O4
酸敏感離子通道1抗體1-Hydroxyacridone中文名:1-羥基吖啶酮別名:分子式:C13H9NO2
脂肪細胞特異性粘附分子抗體 Candida│gelidadi種屬:Candida│gelidadi
分離基物:酒曲
提供形式:斜面培養(yǎng)物
安全等級:1
模式菌株:no
應(yīng)用領(lǐng)域:用于曲酒增香。
培養(yǎng)方法
培養(yǎng)基:CM0077
生長條件:28-30℃
存儲條件:定期移植法凍膠假絲酵母