"TE-11細(xì)胞：人食管癌細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料：詳見相關(guān)文獻(xiàn)介紹
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣
細(xì)胞生長：貼壁
細(xì)胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細(xì)胞傳代方法：消化３-５分鐘。１：２。３天內(nèi)可長滿。
細(xì)胞來源說明：細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
細(xì)胞生長特性：貼壁生長
培養(yǎng)細(xì)胞真的不難，最關(guān)鍵幾點(diǎn)：１)所有的東西使用，如果你用的血清、培養(yǎng)皿、培養(yǎng)基、胰酶什么的都是進(jìn)口的，真的很難相信你會把細(xì)胞養(yǎng)壞；２)動作要快，胰酶消化，換液什么，細(xì)胞暴露在空氣中的時間越少越好。另外，要掌握好胰酶消化時間，所謂的細(xì)胞狀態(tài)差，很多時候是傳代的原因；３)有時間的話，需要細(xì)胞計(jì)數(shù)，傳相應(yīng)數(shù)目的細(xì)胞到培養(yǎng)皿中，可以大致清楚細(xì)胞的生長曲線，不會臨時要處理，手足無措；４)要做什么心里要非常清楚，合理安排時間，傳代細(xì)胞的實(shí)驗(yàn)穿插進(jìn)行，可以節(jié)省很多時間，也不會耽誤別人的實(shí)驗(yàn)；５)個人的實(shí)驗(yàn)器具自己收一套，不要和別人混用，最近換了什么新的東西稍微記一下，試劑一旦懷疑污染，馬上丟；６)傳代細(xì)胞不能進(jìn)去太多人，避免相互干擾。每天對待細(xì)胞比孝敬爹媽還用心，那真是捧在手里怕碎了，含在嘴里怕化了，看在眼里怕丟了，培養(yǎng)細(xì)胞時有哪些經(jīng)驗(yàn)教訓(xùn)可以分享呢?１)嚴(yán)格無菌操作，多噴噴酒精，要是對滅菌的東西不放心，自己包自己送自己烘干；２)不要和別人共用試劑耗材，自己準(zhǔn)備一套；３)有可能的話在拿到新細(xì)胞的時候做好支原體衣原體檢測；４)水浴鍋很臟，生化培養(yǎng)箱要是得手動加濕的話盤里的水也會很臟，勤換(滅菌水加進(jìn)去)；５)晚上離開的時候給傳代細(xì)胞照紫外，超凈臺是用完就開；６)是同一時間就你一個人在用傳代細(xì)胞在養(yǎng)細(xì)胞。
細(xì)胞復(fù)蘇相關(guān)注意事項(xiàng)：１.取細(xì)胞的過程中注意帶好防凍手套，護(hù)目鏡。此項(xiàng)尤為重要，細(xì)胞凍存管可能漏入液氮，解凍時凍存管中的氣溫急劇上升，可導(dǎo)致爆炸。２.凍存液的問題：凍存液的配置已是常識，在這里不作詳述，但二甲基亞砜(DMSO )對細(xì)胞不是完全無毒副作用，在常溫下，二甲基亞砜對細(xì)胞的毒副作較大，因此，必須在１-２min內(nèi)使凍存液完全融化。如果復(fù)蘇溫度太慢，會造成細(xì)胞的損傷，二甲基亞砜(DMSO)選擇進(jìn)口產(chǎn)品。３.離心前須加入少量培養(yǎng)液。細(xì)胞解凍后二甲基亞砜濃度較高，注意加入少量培養(yǎng)液可稀釋其濃度，以減少對細(xì)胞的損傷。４.離心問題：目前主要有兩種見解。一種是解凍后的細(xì)胞懸液直接吹打均勻后分裝到培養(yǎng)瓶中進(jìn)行培養(yǎng)，第二天換液。因?yàn)殡x心的目的是兩個，去除DMSO，去除死細(xì)胞，這個是標(biāo)準(zhǔn)流程，但對一般人來說，把握不好離心轉(zhuǎn)速和時間，轉(zhuǎn)的不夠活細(xì)胞沉底的少，細(xì)胞就全被扔掉了，轉(zhuǎn)過了活細(xì)胞會受壓過大，死亡。此外在操作過程中容易污染，所以不推薦。另一種說法為細(xì)胞懸液中含有二甲基亞砜(DMSO)，DMSO對細(xì)胞有一定的毒副作用，所以須將離心后的液體前倒凈，且一定倒干凈。我在試驗(yàn)中按照常規(guī)的離心分裝的方法進(jìn)行復(fù)蘇，結(jié)果無異常。５.細(xì)胞貼壁少的問題：教科書中說明凍存細(xì)胞解凍時１ml細(xì)胞液要加１０ml-１５ml培養(yǎng)液，而在我的試驗(yàn)中的經(jīng)驗(yàn)總結(jié)為培養(yǎng)基越少細(xì)胞越容易貼附。６.復(fù)蘇細(xì)胞分裝的問題：試驗(yàn)中我的經(jīng)驗(yàn)總結(jié)為復(fù)蘇１管細(xì)胞一般可分裝到１-２只培養(yǎng)瓶中，分裝過多，細(xì)胞濃度過低，不利于細(xì)胞的貼壁。７.加培養(yǎng)基的量放入問題：這個量的多少的把握主要涉及到的問題DMSO的濃度，從如果你加培養(yǎng)基的太少，那么DMSO的濃度就會比較大，就會影響細(xì)胞生長，從以前的資料來看，DMSO的濃度在小于０.５%的時候?qū)σ话慵?xì)胞沒有什么影響，還有一個說法是１%。所以如果你的凍存液的濃度是１０%DMSO的話那么加１０ml以上的培養(yǎng)基就恰好稀釋到了無害濃度。
細(xì)胞的凍存：為避免污染造成的損失，最小化連續(xù)細(xì)胞系的遺傳改變和避免有限細(xì)胞系的老化和轉(zhuǎn)化，需要凍存哺乳細(xì)胞。凍存細(xì)胞前，細(xì)胞應(yīng)該特性化并檢查是否污染。有幾種普通培養(yǎng)基用來凍存細(xì)胞。對于包含有血清的培養(yǎng)基，成分可能如下：包含１０%甘油的完全培養(yǎng)基；包含１０%二甲基亞砜(DMSO)的完全培養(yǎng)基；５０%細(xì)胞條件培養(yǎng)基和５０%含有１０%甘油的新鮮培養(yǎng)基或５０%細(xì)胞條件培養(yǎng)基和５０%含有１０%二甲基亞砜的新鮮培養(yǎng)基。對于無血清培養(yǎng)基，一些普通的培養(yǎng)基成分可能是：５０%細(xì)胞條件無血清培養(yǎng)基和５０%包含有７.５%二甲基亞砜的新鮮的無血清培養(yǎng)基或包含有７.５%二甲基亞砜和１０%細(xì)胞培養(yǎng)級BSA的新鮮無血清培養(yǎng)基。懸浮細(xì)胞凍存：計(jì)數(shù)將要凍存的活細(xì)胞。細(xì)胞應(yīng)該處于對數(shù)生長期。以大約２００～４００g離心５分鐘沉淀細(xì)胞，使用移液管移去上清到最小體積，不要攪亂細(xì)胞。以１×１０(７)到５×１０(７)細(xì)胞/ml密度，在包含有血清的冷凍培養(yǎng)基中再次懸浮細(xì)胞，或者以０.５×１０(７)到１×１０(７)在無血清培養(yǎng)基中，再次懸浮細(xì)胞。分裝進(jìn)凍存管，將凍存管置于濕冰上或放入４℃冰箱中，５分鐘內(nèi)開始冷凍步驟。細(xì)胞以１℃/分鐘進(jìn)行冷凍，可以通過可編程序的冷凍器進(jìn)行或者把隔離盒中的凍存管放到-７０℃到-９０℃的冰箱中，然后轉(zhuǎn)移到液氮中貯存。貼壁細(xì)胞凍存：使用分離試劑從基層分離細(xì)胞，分離時盡可能溫和，使對細(xì)胞的損傷減少到最小。在完全生長培養(yǎng)基中，再次懸浮分離細(xì)胞，確定有活力細(xì)胞數(shù)。以大約２００g離心５分鐘沉淀細(xì)胞。使用移液管移去上清到最小體積，不要攪亂細(xì)胞。以５×１０(６)到１×１０(６)細(xì)胞/ml密度，在凍存液中懸浮細(xì)胞。分裝進(jìn)凍存管，將凍存管置于濕的冰上或放入４℃冰箱中，５分鐘內(nèi)開始冷凍步驟。細(xì)胞以１℃/分鐘進(jìn)行冷凍，可以通過可編程序的冷凍器進(jìn)行或者把隔離盒中的凍存管放到-７０℃到-９０℃的冰箱中，然后轉(zhuǎn)移到液氮中貯存。
GM00637B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Neukoplast細(xì)胞、L-M(TK-)細(xì)胞、alphaTC1 Clone 6細(xì)胞
MDAMB330細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Sarcoma OSteogenic-2細(xì)胞、OsA-CL細(xì)胞、MADISON LUNG TA-109細(xì)胞
SKG3A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：IOSE29細(xì)胞、B-3細(xì)胞、SW-48細(xì)胞
SCL-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-MB-175-VII細(xì)胞、SO-RB50細(xì)胞、NCI-H1581細(xì)胞
RPMI No. 1846細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H2081細(xì)胞、MDA-MB-231 #4175細(xì)胞、SK-OV-3細(xì)胞
SUDHL5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：T98-G細(xì)胞、NEC-8細(xì)胞、KP 4細(xì)胞
H125細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MOLM16細(xì)胞、LLC-WRC 256細(xì)胞、RPPVEC細(xì)胞
HCT-8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H-295細(xì)胞、CNE1細(xì)胞、SK.MEL.28細(xì)胞
Me-Wo細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CEM細(xì)胞、HO1-N-1細(xì)胞、SW837細(xì)胞
Human Fetal Thymocyte-8810細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC-1569細(xì)胞、H-69細(xì)胞、KATO III細(xì)胞
HEK 293T/17細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKML-28細(xì)胞、FHs 74 Int細(xì)胞、BHT-101細(xì)胞
MAntle cell VERona-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CORL88細(xì)胞、PASMCS細(xì)胞、Tu686細(xì)胞
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H-747細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HPC-Y5細(xì)胞、H727細(xì)胞、VMRC-LCD細(xì)胞
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UM-UC-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：FM88細(xì)胞、YT細(xì)胞、C3H/10T1/2細(xì)胞
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NCIH647細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Kit 225-K6細(xì)胞、Tca-83細(xì)胞、CX1細(xì)胞
Capan-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1341細(xì)胞、NOR 10細(xì)胞、NG10815細(xì)胞
KYSE 450細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Med 283細(xì)胞、WM239細(xì)胞、SNU354細(xì)胞
CAL39細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-UT-1細(xì)胞、RBE細(xì)胞、BT-20細(xì)胞
KU-19-19細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MM1.S細(xì)胞、SK-NEP-1細(xì)胞、HT細(xì)胞
Michigan Cancer Foundation-12F細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HBL 100細(xì)胞、HRCEC細(xì)胞、WM-2664細(xì)胞
MS 751細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVCA5細(xì)胞、BALB 3T3 clone A31細(xì)胞、NCI-H520細(xì)胞
L 929細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUNE-1細(xì)胞、HPAF-II/CD18細(xì)胞、H711細(xì)胞
ssMCF-7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-SNU-C1細(xì)胞、NCI.H522細(xì)胞、AZ 521細(xì)胞
JROECL33細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LS-411N細(xì)胞、HEK AD293細(xì)胞、OCI-AML5細(xì)胞
LLC-PK(1)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Murine Leydig Tumor細(xì)胞：-1細(xì)胞、mRTEC細(xì)胞、HLMVEC細(xì)胞
McArdle RH-7777細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WB F344細(xì)胞、786.O細(xì)胞、OVCAR-420細(xì)胞
C2A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HaCaT細(xì)胞、MD Anderson-Metastatic Breast-435細(xì)胞、Hs445細(xì)胞
Jurkat細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Pt-K1細(xì)胞、ACC2細(xì)胞、mRMEC細(xì)胞
PA I細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM00637H細(xì)胞、P3J.HR1K細(xì)胞、EU-2細(xì)胞
HT144-mel細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA MB 436細(xì)胞、C6細(xì)胞、IHH細(xì)胞
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J 774A.1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Panc4.03細(xì)胞、SKCol1細(xì)胞、KBM-5細(xì)胞
MUM2B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：EL4細(xì)胞、H-187細(xì)胞、KP-N-RT-BM-1細(xì)胞
NPA'87細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Lewis-Lung細(xì)胞、HBZY1細(xì)胞、87 MG細(xì)胞
MAVER-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：AML-193細(xì)胞、NCI-H2170細(xì)胞、SNU-520細(xì)胞
COLO 320DM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：4T1.2細(xì)胞、R2C細(xì)胞、C3H/10T1/2 CL8細(xì)胞
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LIPF155C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：DMS-114細(xì)胞、MonoMac6細(xì)胞、Mv 1 Lu (NBL-7)細(xì)胞
Panc-10.05細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVCA432_Bast細(xì)胞、GP2-293細(xì)胞、Rat1細(xì)胞
CAL33細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPMI-1846細(xì)胞、Menschliche Und Tierische Zellkulture-1細(xì)胞、F-81細(xì)胞
F442-A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MOLT-16細(xì)胞、DH 82細(xì)胞、UCLA-SO-M14細(xì)胞
KYSE50細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HMVEC細(xì)胞、OCI-Ly10細(xì)胞、EJ-1細(xì)胞
H-1105細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：UWB1289細(xì)胞、Pt K2 (NBL-5)細(xì)胞、MD Anderson-Metastatic Breast-330細(xì)胞
SUM190細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW 780細(xì)胞、JURKAT E-61細(xì)胞、SCC15細(xì)胞
H-1105細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：UWB1289細(xì)胞、Pt K2 (NBL-5)細(xì)胞、MD Anderson-Metastatic Breast-330細(xì)胞
SKMEL-31細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NOMO1細(xì)胞、EST81細(xì)胞、b.End3細(xì)胞
OsACL細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Instituto Biologico-Rim Suino-2細(xì)胞、LU65細(xì)胞、SUM-159-PT細(xì)胞
CCRF SB細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1355細(xì)胞、KTCTL-140細(xì)胞、A101D細(xì)胞
Jurkat Clone E6-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CNE2Z細(xì)胞、D-324MED細(xì)胞、RIN-m細(xì)胞
NCTC1469細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SkChA1細(xì)胞、RL952細(xì)胞、Madison 109細(xì)胞
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NCI-BL1339細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Neuro-2a細(xì)胞、Tb 1-Lu細(xì)胞、NCTC1469細(xì)胞
Pt K2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Mouse podocyte細(xì)胞、MHCC 97-H細(xì)胞、KM12細(xì)胞
ECGI10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CG4細(xì)胞、BDCM細(xì)胞、C3H/10T1/2 clone 8細(xì)胞
H-2170細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WILL-2細(xì)胞、Y-79細(xì)胞、RN-c細(xì)胞
Pt K2 (NBL-5)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NP69SV40T細(xì)胞、Cor L88細(xì)胞、NCIH1650細(xì)胞
H-2087細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PL-12細(xì)胞、NIH/3T3細(xì)胞、MDA-MB-453細(xì)胞
PFSK1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：DC 2.4細(xì)胞、Hs-274-T細(xì)胞、TK 10細(xì)胞
CAL85-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO-684細(xì)胞、GM03569D細(xì)胞、SGC-7901/DDP細(xì)胞
H-446細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：U251-MG細(xì)胞、Hs 888.T細(xì)胞、A9(Hamprecht)細(xì)胞
G292細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Nb 2細(xì)胞、HS940細(xì)胞、Lymph Node Carcinoma of the prostate細(xì)胞
H-740細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：UACC 812細(xì)胞、H-1436細(xì)胞、HNE-2細(xì)胞
KNS-42細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：P-388D1細(xì)胞、mRMEC細(xì)胞、T47-D細(xì)胞
Wills Eye Research Institute-Retinoblastoma-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：18G3.cl 1細(xì)胞、NCIH226細(xì)胞、Pa16C細(xì)胞
C-33-A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PVEC細(xì)胞、NCIH1184細(xì)胞、Panc-08.13細(xì)胞
Hs 839.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H661細(xì)胞、NCI-BL6細(xì)胞、MDA-MB-436細(xì)胞
SKG IIIa細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HS578T細(xì)胞、HSC4細(xì)胞、KP-N-RT-BM-1細(xì)胞
BC-019細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HRA 19細(xì)胞、Ketr3細(xì)胞、Vero E-6細(xì)胞
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