"SNU-739細胞：人肝癌細胞系
細胞背景資料：詳見相關(guān)文獻介紹
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
細胞生長：貼壁
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法：１：２傳代
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
細胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細胞說明書部分
造成實驗室細胞污染常見情況總結(jié)：細胞培養(yǎng)中最常見污染的是細菌、真菌和支原體污染。細胞一旦污染，大多數(shù)較難處理。那么，哪些情況我們不注意的話就會造成細胞污染呢？我們根據(jù)常見細胞培養(yǎng)實驗分析總結(jié)下?！具`規(guī)操作】１)為節(jié)省時間，有人已經(jīng)用超凈臺四個多小時，不開紫外滅菌３０min,酒精擦拭后直接開始試驗；２)器材或者溶液很久沒用，未檢測是否污染而直接使用；離心管多次使用，槍頭為了方便交叉使用；３)超凈臺不點酒精燈；點了酒精燈放在右上角，而你在左下角做試驗；４)不帶手套，徒手操作；５)細胞培養(yǎng)間配備槍式移液器、手術(shù)器械、離心機、冰箱等專用儀器設(shè)備以及專用的實驗服和拖鞋，未定期消毒。專用物品被帶出傳代細胞使用。培養(yǎng)細胞過程中使用的所有實驗用具，如移液管、一次性槍頭、一次性塑料離心管、凍存管等未按要求滅菌使用(通常需１２１°C高壓滅菌２０分鐘后３７％烤干備用)。超凈臺和桌面，東西太多太亂：超凈臺不是儲物箱，什么培養(yǎng)皿、各種規(guī)格的板子、槍頭就不要堆在超凈臺！這樣就會有許多紫外線顧不到的衛(wèi)生死角。傳代細胞其他的桌面，切忌東西堆積如山，不要將酒精棉球、標簽紙、牛皮紙買來后全部堆在傳代細胞！一不小心“飄”進你的細胞培養(yǎng)板里，細胞就會養(yǎng)的不好，啥時候死了都不知道！【培養(yǎng)箱太久沒清潔】細胞污染了，并非直接扔了培養(yǎng)皿就不管了，首先你還得看看這個恒溫培養(yǎng)箱里其他培養(yǎng)皿或孔板里的細胞是否污染，如果有而且好幾個板子都有類似的污染塊，那很可能是培養(yǎng)箱中的水或者空氣污染了，得給培養(yǎng)箱做個大掃除，重新酒精消毒，照紫外；孵箱里的水，水沒了要記得加，還得記得十天半個月的就用酒精擦擦托盤?！緜鞔毎硕嗫陔s，難管理】在傳代細胞這種衛(wèi)生要求高，人多了，不確定因素多了，難以保證試驗在無菌條件下操作。出入試驗室，實驗服當風衣穿，不扣紐扣，不戴，就容易造成細胞污染；超凈臺做實驗時，喜歡說話聊著做試驗，要是還不帶口罩，里面就有很多細菌等著去攻擊你的細胞呢！
貼壁細胞的消化方法介紹：１、胰酶。這是用得最多的。一般濃度在０.２５-０.５%。作用時間根據(jù)細胞種類、作用溫度等因素而變化很大，從幾分鐘到幾十分鐘不等。０.２５%的胰酶作用于單層貼壁的細胞，在３７度條件下，一般消化１-５分鐘就足夠了。終止是用血清。主要作用于細胞間。配制時不能用含、鎂的平衡液，否則影響活性。保存于-２０度。２、膠原酶。這種方法比較少，一般是用原代培養(yǎng)時，從組織消化下細胞。這種方法作用溫和，對細胞損傷較小，但是，價格也較貴。中止同樣是用血清。３、EDTA。用得也是非常多。一般濃度在０.０２%左右。作用于細胞與間質(zhì)，對細胞間也有一定作用。注意，它能顯著影響pH值，而且在弱堿性條件下才易溶。因此，配制時應調(diào)節(jié)好酸堿度。它不能被終和。因此，消化下來的細胞要洗一遍。４、商品化的無酶消化液。個人的使用經(jīng)常覺得對細胞的損傷比較大，但是分離成單細胞懸液的能力確實比較強。５、物理法。直接吹打或用細胞刮子將細胞刮下來。６、冷凍法。此方法僅能用于細胞傳代時。無法使組織上的細胞脫落下來。本方法的原理，我想是因細胞冷凍后收縮，從而從培養(yǎng)瓶上脫落下來。優(yōu)點是：對細胞損傷小，不需要中止或洗細胞，方便，不需要另外配制消化液。特別適用那些貼壁不是特別緊，又特別嬌氣的細胞。不足是細胞常成小片脫落。此種方法曾用于因用其它方法傳代導致大量細胞死亡操作的間充質(zhì)干細胞、DC細胞的培養(yǎng)，效果非常滿意。具體過程是：１、用較多的４度的PBS 洗滌一遍細胞(以６孔板為例，加１.５ml/孔)，２、再加０.５毫升４度的PBS，靜置操作臺上，很快細胞就小片脫落，３、輕輕吹打，細胞即完全脫落，４、按一定比例傳代。
最近在培養(yǎng)細胞時，發(fā)現(xiàn)其狀態(tài)不是很好，很容易扎堆生長，用胰酶消化的時候也是一團一團地被消化下來，很難把它們吹散成一個一個細胞。而且長得也挺快也挺不均勻的，傳代的第二天，有些地方就長得滿滿的了。想請教一下這是為什么呢？你好，我養(yǎng)的細胞和你一樣，消化下來也是一團的，但吹打以后就沒有這樣的情況了。建議你分皿前還是要吹勻，分皿后在鏡下看一看，移動培養(yǎng)皿的時候盡量動作輕，避免晃動。細胞生長挺快，那么細胞的增殖能力應該較強。胰酶消化成團的問題我覺得有以下幾種可能：一、細胞消化后吹打不均勻，造成細胞成團生長：二、細胞細化太過，細胞成片脫落，吹打時沒有受力點，細胞聚團生長。解決辦法：根據(jù)細胞生長的情況進行多次消化，將同次消化下來的細胞放在一個細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)。貼壁細胞傳代培養(yǎng)：一般步驟為：真空泵吸走培養(yǎng)基，１XPBS漂洗兩次，加入１mlEDTA-Tripsin（１００mm皿為例），３７度放置數(shù)分鐘，輕拍培養(yǎng)瓶使細胞自瓶壁脫落，加入適量血清，以吸管上下吸放數(shù)次以打散細胞團塊，離心后加入新鮮培養(yǎng)基，按比例轉(zhuǎn)移至新皿。細胞的傳代最重要的是胰酶處理時間，若胰酶處理太久，容易造成細胞貼壁不緊，顯微鏡下觀察立體感不強，嚴重的時候甚至會造成細胞死亡。我談談個人經(jīng)驗：HepG-２、A５４９、Hela、SGC-７９０１幾種癌細胞處理時間可適當放長，一般處理５-６min，C２C１２、COS-７、NIH-３T３比較容易脫落，２min足矣，P１９Cl６和２９３細胞貼壁不緊，可在PBS漂洗后，直接換新鮮培養(yǎng)基打散。
KYSE-140細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-MB-453細胞、PCI-SG231細胞、BV-2細胞
KNS-62細胞系相關(guān)產(chǎn)品：UMNSAH-DF-1細胞、SK-N-BE(2)細胞、MNNG/HOS細胞
PGBE1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Simpson細胞、Clone 15 HL-60細胞、C6661細胞
H1734細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-250細胞、211H細胞、BE2C細胞
HLMVEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MKN 7細胞、ML-2細胞、HPaSteC(HPSC)細胞
SO-RB50細胞系相關(guān)產(chǎn)品：U118-MG細胞、NP69SV40T細胞、H-660細胞
MDA PCa 2b細胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO357細胞、NCI-H78細胞、HCT/FU細胞
UMC11細胞系相關(guān)產(chǎn)品：U-373-MG細胞、KRC/Y細胞、NTERA-2 cl.D1細胞
RPTEC/TERT1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PTK-2細胞、H1819細胞、NT2細胞
Fetal Bovine Heart Endothelial細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HT22細胞、U 266細胞、PLCPRF5細胞
HT-115細胞系相關(guān)產(chǎn)品：32D.3細胞、HSMC細胞、A-172 MG細胞
CWR22-Rv1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3-X63-Ag8-6-5-3細胞、Hs822T細胞、Panc203細胞
NIH:OVCAR-10細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPTEC TERT1細胞、HONE-1細胞、MDA MB 175 VII細胞
COLO-16細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OUMS27細胞、P3-X63-Ag8.653細胞、SW900細胞
Hu-P-T4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：COV362細胞、697細胞、Menschliche Und Tierische Zellkulture-3細胞
NCIH1437細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1385細胞、Madison lung細胞、PL11細胞
B16-F10-BL6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVCAR.4細胞、Rat Lung Epithelial-6-T-antigen Negative細胞、NP69細胞
OVCAR8細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RCC4細胞、SKRC-39細胞、Panc4.03細胞
OCI-Ly 8細胞系相關(guān)產(chǎn)品：K562/ADP細胞、MOLT3細胞、MDA-MB-436細胞
CCD-112 CoN細胞系相關(guān)產(chǎn)品：266 Bl細胞、H211細胞、Panc-02細胞
Nb2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：C-4I細胞、C32-mel細胞、U-251MG細胞
32D clone 3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：A875細胞、MDA231-LM2細胞、N-9細胞
HT clone H9細胞系相關(guān)產(chǎn)品：AsPC-1細胞、KU-19-19細胞、NCI-H2081細胞
P19細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KYSE140細胞、LN-18細胞、L 363細胞
C-Lu-65細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CMT-167細胞、AU565細胞、RH7777細胞
COLO320 DM細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RCC 7860細胞、A431/P細胞、MDA-1386細胞
X63.Ag8.653細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH211細胞、GC9811-P細胞、NCI-BL1339細胞
SuDHL 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HSKMC細胞、BE2M17細胞、NCIH3255細胞
SY5Y細胞系相關(guān)產(chǎn)品：DBTRG-05MG細胞、BHT-101細胞、TE11細胞
MOVAS細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUM159PT細胞、KHYG細胞、M-O7e細胞
UM-UC-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：16HBEo-細胞、A704細胞、AN3CA細胞
SKNDZ細胞系相關(guān)產(chǎn)品：751-NA-15細胞、HCC366細胞、PFSK-1細胞
ACC3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SU.86細胞、Detroit562細胞、OC-316細胞
BLO 11細胞系相關(guān)產(chǎn)品：COR-L105細胞、HEK-2細胞、MKN28細胞
MV411細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SCC7細胞、Transformed C3H Mouse Kidney-1細胞、PFSK細胞
HCC1599細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ARO 81-1細胞、ChaGo-K-1細胞、HCC95細胞
COLO-357細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU449細胞、S91細胞、MM1.S細胞
E6-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：FRhK-4細胞、293 c18細胞、143 B細胞
Doubling time: ~50 hours (ATCC).細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OV1/P細胞、HFL細胞、RBSMC細胞
KU 19-19細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Bovine Turbinate細胞、NCIH2141細胞、Caco-2BBe細胞
BEAS2B細胞系相關(guān)產(chǎn)品：JOSK-M細胞、MCA 38細胞、WM-239-A細胞
Human ErythroLeukemia細胞系相關(guān)產(chǎn)品：EBC-1細胞、LAN6細胞、GM3570細胞
COLO-320DM細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H510A細胞、L-cell細胞、PK-15細胞
U2OS細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hela-Ap-1細胞、BIU-87細胞、KLN-205細胞
GM04680細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PL11細胞、KYSE270細胞、WSU-HN13細胞
MD Anderson-Metastatic Breast-157細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDCKII細胞、NCI-HUT-596細胞、SK-ES細胞
OS-732細胞系相關(guān)產(chǎn)品：6T-CEM細胞、H-EMC-SS細胞、M-1細胞
hRMECs細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HSAS4細胞、LSECs細胞、NCI-H1672細胞
HK-2 [Human kidney]細胞系相關(guān)產(chǎn)品：University of Arizona Cell Culture-812細胞、KBM-7/Hap8細胞、H-522細胞
CFSC-8B細胞系相關(guān)產(chǎn)品：L-6 myoblast細胞、HCAEC細胞、M20 [Human melanoma]細胞
SKMEL3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H146細胞、NCI-ADR-RES細胞、COV434細胞
WPMY1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TJ905細胞、SNU-C1細胞、KYSE 140細胞
CT26.WT細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1341細胞、SCC-25細胞、SN-12C細胞
D-407細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HTR-8細胞、138 MG細胞、SNU1040細胞
U-343-MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OUMS-27細胞、CMT 93細胞、H1568細胞
H-748細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Mel624細胞、MARC 145細胞、SK-RC 39細胞
SHI1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RAG細胞、U266 Bl細胞、LIM1215細胞
RH-35細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-2452細胞、Psi2-DAP細胞、H498細胞
PCI-SG231細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HT1376細胞、DU-145細胞、DF1細胞
OVCAR8細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RCC4細胞、SKRC-39細胞、Panc4.03細胞
ATN-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Kit 225細胞、EMT-6細胞、H1915細胞
HCC-78細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H358細胞、RPMC細胞、L-Wnt-3A細胞
SW-900細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HD11細胞、Hs68細胞、AMO1細胞
RCC4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KM933細胞、NCI-SNU-423細胞、HEK 293-F細胞
ECC 10細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LC1-Sq細胞、HCC-2218細胞、HEEpiC細胞
H-1688細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA330細胞、LLC-PK-1細胞、Moorfields/Institute of Ophthalmology-Muller 1細胞
SNU1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：K-1735細胞、SNU449細胞、MM-1S細胞
J 774A.1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Panc4.03細胞、SKCol1細胞、KBM-5細胞
NH6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MonoMac6細胞、WERI細胞、HDQ-P1細胞
H-35 Reuber細胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO 394細胞、SHSY5Y細胞、HCC1569細胞
TPC1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TE-4細胞、TE4細胞、TFH細胞
NPC-TW 01細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-OV-3細胞、LNCaP-C4-2細胞、H-2342細胞
PGBE1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Simpson細胞、Vx-2細胞、HSF細胞
COLO320-DM細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Adeno-293細胞、MEG-01細胞、SU-DHL2細胞
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