"SNU-739細(xì)胞：人肝癌細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料：詳見相關(guān)文獻(xiàn)介紹
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣
細(xì)胞生長：貼壁
細(xì)胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細(xì)胞傳代方法：１：２傳代
細(xì)胞來源說明：細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
細(xì)胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細(xì)胞說明書部分
造成實驗室細(xì)胞污染常見情況總結(jié)：細(xì)胞培養(yǎng)中最常見污染的是細(xì)菌、真菌和支原體污染。細(xì)胞一旦污染，大多數(shù)較難處理。那么，哪些情況我們不注意的話就會造成細(xì)胞污染呢？我們根據(jù)常見細(xì)胞培養(yǎng)實驗分析總結(jié)下?！具`規(guī)操作】１)為節(jié)省時間，有人已經(jīng)用超凈臺四個多小時，不開紫外滅菌３０min,酒精擦拭后直接開始試驗；２)器材或者溶液很久沒用，未檢測是否污染而直接使用；離心管多次使用，槍頭為了方便交叉使用；３)超凈臺不點酒精燈；點了酒精燈放在右上角，而你在左下角做試驗；４)不帶手套，徒手操作；５)細(xì)胞培養(yǎng)間配備槍式移液器、手術(shù)器械、離心機、冰箱等專用儀器設(shè)備以及專用的實驗服和拖鞋，未定期消毒。專用物品被帶出傳代細(xì)胞使用。培養(yǎng)細(xì)胞過程中使用的所有實驗用具，如移液管、一次性槍頭、一次性塑料離心管、凍存管等未按要求滅菌使用(通常需１２１°C高壓滅菌２０分鐘后３７％烤干備用)。超凈臺和桌面，東西太多太亂：超凈臺不是儲物箱，什么培養(yǎng)皿、各種規(guī)格的板子、槍頭就不要堆在超凈臺！這樣就會有許多紫外線顧不到的衛(wèi)生死角。傳代細(xì)胞其他的桌面，切忌東西堆積如山，不要將酒精棉球、標(biāo)簽紙、牛皮紙買來后全部堆在傳代細(xì)胞！一不小心“飄”進(jìn)你的細(xì)胞培養(yǎng)板里，細(xì)胞就會養(yǎng)的不好，啥時候死了都不知道！【培養(yǎng)箱太久沒清潔】細(xì)胞污染了，并非直接扔了培養(yǎng)皿就不管了，首先你還得看看這個恒溫培養(yǎng)箱里其他培養(yǎng)皿或孔板里的細(xì)胞是否污染，如果有而且好幾個板子都有類似的污染塊，那很可能是培養(yǎng)箱中的水或者空氣污染了，得給培養(yǎng)箱做個大掃除，重新酒精消毒，照紫外；孵箱里的水，水沒了要記得加，還得記得十天半個月的就用酒精擦擦托盤?！緜鞔?xì)胞人多口雜，難管理】在傳代細(xì)胞這種衛(wèi)生要求高，人多了，不確定因素多了，難以保證試驗在無菌條件下操作。出入試驗室，實驗服當(dāng)風(fēng)衣穿，不扣紐扣，不戴，就容易造成細(xì)胞污染；超凈臺做實驗時，喜歡說話聊著做試驗，要是還不帶口罩，里面就有很多細(xì)菌等著去攻擊你的細(xì)胞呢！
貼壁細(xì)胞的消化方法介紹：１、胰酶。這是用得最多的。一般濃度在０.２５-０.５%。作用時間根據(jù)細(xì)胞種類、作用溫度等因素而變化很大，從幾分鐘到幾十分鐘不等。０.２５%的胰酶作用于單層貼壁的細(xì)胞，在３７度條件下，一般消化１-５分鐘就足夠了。終止是用血清。主要作用于細(xì)胞間。配制時不能用含、鎂的平衡液，否則影響活性。保存于-２０度。２、膠原酶。這種方法比較少，一般是用原代培養(yǎng)時，從組織消化下細(xì)胞。這種方法作用溫和，對細(xì)胞損傷較小，但是，價格也較貴。中止同樣是用血清。３、EDTA。用得也是非常多。一般濃度在０.０２%左右。作用于細(xì)胞與間質(zhì)，對細(xì)胞間也有一定作用。注意，它能顯著影響pH值，而且在弱堿性條件下才易溶。因此，配制時應(yīng)調(diào)節(jié)好酸堿度。它不能被終和。因此，消化下來的細(xì)胞要洗一遍。４、商品化的無酶消化液。個人的使用經(jīng)常覺得對細(xì)胞的損傷比較大，但是分離成單細(xì)胞懸液的能力確實比較強。５、物理法。直接吹打或用細(xì)胞刮子將細(xì)胞刮下來。６、冷凍法。此方法僅能用于細(xì)胞傳代時。無法使組織上的細(xì)胞脫落下來。本方法的原理，我想是因細(xì)胞冷凍后收縮，從而從培養(yǎng)瓶上脫落下來。優(yōu)點是：對細(xì)胞損傷小，不需要中止或洗細(xì)胞，方便，不需要另外配制消化液。特別適用那些貼壁不是特別緊，又特別嬌氣的細(xì)胞。不足是細(xì)胞常成小片脫落。此種方法曾用于因用其它方法傳代導(dǎo)致大量細(xì)胞死亡操作的間充質(zhì)干細(xì)胞、DC細(xì)胞的培養(yǎng)，效果非常滿意。具體過程是：１、用較多的４度的PBS 洗滌一遍細(xì)胞(以６孔板為例，加１.５ml/孔)，２、再加０.５毫升４度的PBS，靜置操作臺上，很快細(xì)胞就小片脫落，３、輕輕吹打，細(xì)胞即完全脫落，４、按一定比例傳代。
最近在培養(yǎng)細(xì)胞時，發(fā)現(xiàn)其狀態(tài)不是很好，很容易扎堆生長，用胰酶消化的時候也是一團(tuán)一團(tuán)地被消化下來，很難把它們吹散成一個一個細(xì)胞。而且長得也挺快也挺不均勻的，傳代的第二天，有些地方就長得滿滿的了。想請教一下這是為什么呢？你好，我養(yǎng)的細(xì)胞和你一樣，消化下來也是一團(tuán)的，但吹打以后就沒有這樣的情況了。建議你分皿前還是要吹勻，分皿后在鏡下看一看，移動培養(yǎng)皿的時候盡量動作輕，避免晃動。細(xì)胞生長挺快，那么細(xì)胞的增殖能力應(yīng)該較強。胰酶消化成團(tuán)的問題我覺得有以下幾種可能：一、細(xì)胞消化后吹打不均勻，造成細(xì)胞成團(tuán)生長：二、細(xì)胞細(xì)化太過，細(xì)胞成片脫落，吹打時沒有受力點，細(xì)胞聚團(tuán)生長。解決辦法：根據(jù)細(xì)胞生長的情況進(jìn)行多次消化，將同次消化下來的細(xì)胞放在一個細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)。貼壁細(xì)胞傳代培養(yǎng)：一般步驟為：真空泵吸走培養(yǎng)基，１XPBS漂洗兩次，加入１mlEDTA-Tripsin（１００mm皿為例），３７度放置數(shù)分鐘，輕拍培養(yǎng)瓶使細(xì)胞自瓶壁脫落，加入適量血清，以吸管上下吸放數(shù)次以打散細(xì)胞團(tuán)塊，離心后加入新鮮培養(yǎng)基，按比例轉(zhuǎn)移至新皿。細(xì)胞的傳代最重要的是胰酶處理時間，若胰酶處理太久，容易造成細(xì)胞貼壁不緊，顯微鏡下觀察立體感不強，嚴(yán)重的時候甚至?xí)斐杉?xì)胞死亡。我談?wù)剛€人經(jīng)驗：HepG-２、A５４９、Hela、SGC-７９０１幾種癌細(xì)胞處理時間可適當(dāng)放長，一般處理５-６min，C２C１２、COS-７、NIH-３T３比較容易脫落，２min足矣，P１９Cl６和２９３細(xì)胞貼壁不緊，可在PBS漂洗后，直接換新鮮培養(yǎng)基打散。
KYSE-140細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-MB-453細(xì)胞、PCI-SG231細(xì)胞、BV-2細(xì)胞
KNS-62細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：UMNSAH-DF-1細(xì)胞、SK-N-BE(2)細(xì)胞、MNNG/HOS細(xì)胞
PGBE1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Simpson細(xì)胞、Clone 15 HL-60細(xì)胞、C6661細(xì)胞
H1734細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-250細(xì)胞、211H細(xì)胞、BE2C細(xì)胞
HLMVEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MKN 7細(xì)胞、ML-2細(xì)胞、HPaSteC(HPSC)細(xì)胞
SO-RB50細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：U118-MG細(xì)胞、NP69SV40T細(xì)胞、H-660細(xì)胞
MDA PCa 2b細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO357細(xì)胞、NCI-H78細(xì)胞、HCT/FU細(xì)胞
UMC11細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：U-373-MG細(xì)胞、KRC/Y細(xì)胞、NTERA-2 cl.D1細(xì)胞
RPTEC/TERT1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PTK-2細(xì)胞、H1819細(xì)胞、NT2細(xì)胞
Fetal Bovine Heart Endothelial細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HT22細(xì)胞、U 266細(xì)胞、PLCPRF5細(xì)胞
HT-115細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：32D.3細(xì)胞、HSMC細(xì)胞、A-172 MG細(xì)胞
CWR22-Rv1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3-X63-Ag8-6-5-3細(xì)胞、Hs822T細(xì)胞、Panc203細(xì)胞
NIH:OVCAR-10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPTEC TERT1細(xì)胞、HONE-1細(xì)胞、MDA MB 175 VII細(xì)胞
COLO-16細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OUMS27細(xì)胞、P3-X63-Ag8.653細(xì)胞、SW900細(xì)胞
Hu-P-T4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：COV362細(xì)胞、697細(xì)胞、Menschliche Und Tierische Zellkulture-3細(xì)胞
NCIH1437細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1385細(xì)胞、Madison lung細(xì)胞、PL11細(xì)胞
B16-F10-BL6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVCAR.4細(xì)胞、Rat Lung Epithelial-6-T-antigen Negative細(xì)胞、NP69細(xì)胞
OVCAR8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RCC4細(xì)胞、SKRC-39細(xì)胞、Panc4.03細(xì)胞
OCI-Ly 8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：K562/ADP細(xì)胞、MOLT3細(xì)胞、MDA-MB-436細(xì)胞
CCD-112 CoN細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：266 Bl細(xì)胞、H211細(xì)胞、Panc-02細(xì)胞
Nb2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：C-4I細(xì)胞、C32-mel細(xì)胞、U-251MG細(xì)胞
32D clone 3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：A875細(xì)胞、MDA231-LM2細(xì)胞、N-9細(xì)胞
HT clone H9細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：AsPC-1細(xì)胞、KU-19-19細(xì)胞、NCI-H2081細(xì)胞
P19細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KYSE140細(xì)胞、LN-18細(xì)胞、L 363細(xì)胞
C-Lu-65細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CMT-167細(xì)胞、AU565細(xì)胞、RH7777細(xì)胞
COLO320 DM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RCC 7860細(xì)胞、A431/P細(xì)胞、MDA-1386細(xì)胞
X63.Ag8.653細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH211細(xì)胞、GC9811-P細(xì)胞、NCI-BL1339細(xì)胞
SuDHL 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HSKMC細(xì)胞、BE2M17細(xì)胞、NCIH3255細(xì)胞
SY5Y細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：DBTRG-05MG細(xì)胞、BHT-101細(xì)胞、TE11細(xì)胞
MOVAS細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUM159PT細(xì)胞、KHYG細(xì)胞、M-O7e細(xì)胞
UM-UC-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：16HBEo-細(xì)胞、A704細(xì)胞、AN3CA細(xì)胞
SKNDZ細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：751-NA-15細(xì)胞、HCC366細(xì)胞、PFSK-1細(xì)胞
ACC3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SU.86細(xì)胞、Detroit562細(xì)胞、OC-316細(xì)胞
BLO 11細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：COR-L105細(xì)胞、HEK-2細(xì)胞、MKN28細(xì)胞
MV411細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SCC7細(xì)胞、Transformed C3H Mouse Kidney-1細(xì)胞、PFSK細(xì)胞
HCC1599細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ARO 81-1細(xì)胞、ChaGo-K-1細(xì)胞、HCC95細(xì)胞
COLO-357細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU449細(xì)胞、S91細(xì)胞、MM1.S細(xì)胞
E6-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：FRhK-4細(xì)胞、293 c18細(xì)胞、143 B細(xì)胞
Doubling time: ~50 hours (ATCC).細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OV1/P細(xì)胞、HFL細(xì)胞、RBSMC細(xì)胞
KU 19-19細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Bovine Turbinate細(xì)胞、NCIH2141細(xì)胞、Caco-2BBe細(xì)胞
BEAS2B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：JOSK-M細(xì)胞、MCA 38細(xì)胞、WM-239-A細(xì)胞
Human ErythroLeukemia細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：EBC-1細(xì)胞、LAN6細(xì)胞、GM3570細(xì)胞
COLO-320DM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H510A細(xì)胞、L-cell細(xì)胞、PK-15細(xì)胞
U2OS細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hela-Ap-1細(xì)胞、BIU-87細(xì)胞、KLN-205細(xì)胞
GM04680細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PL11細(xì)胞、KYSE270細(xì)胞、WSU-HN13細(xì)胞
MD Anderson-Metastatic Breast-157細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDCKII細(xì)胞、NCI-HUT-596細(xì)胞、SK-ES細(xì)胞
OS-732細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：6T-CEM細(xì)胞、H-EMC-SS細(xì)胞、M-1細(xì)胞
hRMECs細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HSAS4細(xì)胞、LSECs細(xì)胞、NCI-H1672細(xì)胞
HK-2 [Human kidney]細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：University of Arizona Cell Culture-812細(xì)胞、KBM-7/Hap8細(xì)胞、H-522細(xì)胞
CFSC-8B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：L-6 myoblast細(xì)胞、HCAEC細(xì)胞、M20 [Human melanoma]細(xì)胞
SKMEL3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H146細(xì)胞、NCI-ADR-RES細(xì)胞、COV434細(xì)胞
WPMY1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TJ905細(xì)胞、SNU-C1細(xì)胞、KYSE 140細(xì)胞
CT26.WT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1341細(xì)胞、SCC-25細(xì)胞、SN-12C細(xì)胞
D-407細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HTR-8細(xì)胞、138 MG細(xì)胞、SNU1040細(xì)胞
U-343-MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OUMS-27細(xì)胞、CMT 93細(xì)胞、H1568細(xì)胞
H-748細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Mel624細(xì)胞、MARC 145細(xì)胞、SK-RC 39細(xì)胞
SHI1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RAG細(xì)胞、U266 Bl細(xì)胞、LIM1215細(xì)胞
RH-35細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-2452細(xì)胞、Psi2-DAP細(xì)胞、H498細(xì)胞
PCI-SG231細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HT1376細(xì)胞、DU-145細(xì)胞、DF1細(xì)胞
OVCAR8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RCC4細(xì)胞、SKRC-39細(xì)胞、Panc4.03細(xì)胞
ATN-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Kit 225細(xì)胞、EMT-6細(xì)胞、H1915細(xì)胞
HCC-78細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H358細(xì)胞、RPMC細(xì)胞、L-Wnt-3A細(xì)胞
SW-900細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HD11細(xì)胞、Hs68細(xì)胞、AMO1細(xì)胞
RCC4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KM933細(xì)胞、NCI-SNU-423細(xì)胞、HEK 293-F細(xì)胞
ECC 10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LC1-Sq細(xì)胞、HCC-2218細(xì)胞、HEEpiC細(xì)胞
H-1688細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA330細(xì)胞、LLC-PK-1細(xì)胞、Moorfields/Institute of Ophthalmology-Muller 1細(xì)胞
SNU1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：K-1735細(xì)胞、SNU449細(xì)胞、MM-1S細(xì)胞
J 774A.1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Panc4.03細(xì)胞、SKCol1細(xì)胞、KBM-5細(xì)胞
NH6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MonoMac6細(xì)胞、WERI細(xì)胞、HDQ-P1細(xì)胞
H-35 Reuber細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO 394細(xì)胞、SHSY5Y細(xì)胞、HCC1569細(xì)胞
TPC1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TE-4細(xì)胞、TE4細(xì)胞、TFH細(xì)胞
NPC-TW 01細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-OV-3細(xì)胞、LNCaP-C4-2細(xì)胞、H-2342細(xì)胞
PGBE1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Simpson細(xì)胞、Vx-2細(xì)胞、HSF細(xì)胞
COLO320-DM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Adeno-293細(xì)胞、MEG-01細(xì)胞、SU-DHL2細(xì)胞
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