"Fao細(xì)胞：小鼠肝癌細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料：詳見(jiàn)相關(guān)文獻(xiàn)介紹
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣
細(xì)胞生長(zhǎng)：貼壁
細(xì)胞物種來(lái)源：人源或鼠源等其它物種來(lái)源
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細(xì)胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
細(xì)胞來(lái)源說(shuō)明：細(xì)胞主要來(lái)源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系
細(xì)胞生長(zhǎng)特性：貼壁或懸浮，詳見(jiàn)細(xì)胞說(shuō)明書(shū)部分
購(gòu)買的細(xì)胞死亡或細(xì)胞存活率不佳可能原因？研究人員在細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)出現(xiàn)存活率不佳，原因比較復(fù)雜，常見(jiàn)原因可歸納為：培養(yǎng)基使用錯(cuò)誤或培養(yǎng)基品質(zhì)不佳；血清使用錯(cuò)誤或血清的品質(zhì)不佳；解凍過(guò)程錯(cuò)誤；冷凍細(xì)胞解凍后，加以洗滌細(xì)胞和離心；懸渾細(xì)胞誤認(rèn)為死細(xì)胞；培養(yǎng)溫度使用錯(cuò)誤；細(xì)胞置于-８０℃太久等。建議嚴(yán)格參照ATCC的標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程進(jìn)行細(xì)胞復(fù)蘇、凍存等工作。欲將一般動(dòng)物細(xì)胞離心下來(lái)，其離心速率應(yīng)為多少轉(zhuǎn)速?欲回收動(dòng)物細(xì)胞，其離心速率一般為３００×g(約１O(jiān)OOrpm),５-１０分鐘，轉(zhuǎn)速過(guò)高或離心時(shí)間過(guò)長(zhǎng)都將造成細(xì)胞死亡。合適的離心轉(zhuǎn)速是根據(jù)相對(duì)離心力決定。RCF=１.１１９×１０５×r×(rpm)２，其中r為離心機(jī)轉(zhuǎn)軸中心與離心套管底部?jī)?nèi)壁的距離；rpm為離心機(jī)每分鐘的轉(zhuǎn)數(shù)；RCF(relative centrifugal force)為相對(duì)離心力，以重力加速度g(９８０.６６cm/s２)的倍數(shù)來(lái)表示單位。
細(xì)胞株(系)的使用，為醫(yī)學(xué)研究和測(cè)試工作帶來(lái)了極大的方便。但細(xì)胞的傳代是有限制的，長(zhǎng)期連續(xù)傳代的細(xì)胞，不僅消耗大量的人力和物力，而且細(xì)胞的生長(zhǎng)與形態(tài)等會(huì)有一定退變或轉(zhuǎn)化，因而細(xì)胞失去原有的遺傳特性，有時(shí)還會(huì)由于細(xì)胞污染而造成傳代中斷，種子丟失。因此，在實(shí)際工作中常需凍存一定數(shù)量的細(xì)胞，以備替換使用。細(xì)胞冷凍與復(fù)蘇是細(xì)胞培養(yǎng) 室的常規(guī)工作和通用技術(shù)。目前，細(xì)胞凍存最常用的技術(shù)是液氮冷凍保存法，主要采用加適量保護(hù)劑的緩慢冷凍法凍存細(xì)胞。細(xì)胞在不加任何保護(hù)劑的情況下直接冷凍，細(xì)胞內(nèi)外的水分會(huì)很快形成冰晶，從而引起一系列不良反應(yīng)。如細(xì)胞脫水使局部電解質(zhì)濃度增高，pH值改變，部分蛋白質(zhì)由于上述原因而變性，引起細(xì)胞內(nèi)部空間結(jié)構(gòu)紊亂，溶酶體膜由此遭到損傷而釋放出溶酶體酶，使細(xì)胞內(nèi)結(jié)構(gòu)成分造成破壞，線粒體腫脹，功能丟失，并造成能量代謝障礙。胞膜上的類脂蛋白復(fù)合體也易破壞引起細(xì)胞膜通透性的改變，使細(xì)胞內(nèi)容物丟失。如果細(xì)胞內(nèi)冰晶形成較多，隨冷凍溫度的降低，冰晶體積膨脹造成細(xì)胞核DNA空間構(gòu)型發(fā)生不可逆的損傷，而致細(xì)胞死亡。因此，細(xì)胞冷凍技術(shù)的關(guān)鍵是盡可能地減少細(xì)胞內(nèi)水分，減少細(xì)胞內(nèi)冰晶的形成。采用甘油或二甲基亞砜作保護(hù)劑，這兩種物質(zhì)分子量小，溶解度大，易穿透細(xì)胞，可以使冰點(diǎn)下降，提高細(xì)胞膜對(duì)水的通透性，且對(duì)細(xì)胞無(wú)明顯毒性。慢速冷凍方法又可使細(xì)胞內(nèi)的水分滲出細(xì)胞外，減少胞內(nèi)形成冰結(jié)晶的機(jī)會(huì)，從而減少冰晶對(duì)細(xì)胞的損傷。
最近在培養(yǎng)細(xì)胞時(shí)，發(fā)現(xiàn)其狀態(tài)不是很好，很容易扎堆生長(zhǎng)，用胰酶消化的時(shí)候也是一團(tuán)一團(tuán)地被消化下來(lái)，很難把它們吹散成一個(gè)一個(gè)細(xì)胞。而且長(zhǎng)得也挺快也挺不均勻的，傳代的第二天，有些地方就長(zhǎng)得滿滿的了。想請(qǐng)教一下這是為什么呢？你好，我養(yǎng)的細(xì)胞和你一樣，消化下來(lái)也是一團(tuán)的，但吹打以后就沒(méi)有這樣的情況了。建議你分皿前還是要吹勻，分皿后在鏡下看一看，移動(dòng)培養(yǎng)皿的時(shí)候盡量動(dòng)作輕，避免晃動(dòng)。細(xì)胞生長(zhǎng)挺快，那么細(xì)胞的增殖能力應(yīng)該較強(qiáng)。胰酶消化成團(tuán)的問(wèn)題我覺(jué)得有以下幾種可能：一、細(xì)胞消化后吹打不均勻，造成細(xì)胞成團(tuán)生長(zhǎng)：二、細(xì)胞細(xì)化太過(guò)，細(xì)胞成片脫落，吹打時(shí)沒(méi)有受力點(diǎn)，細(xì)胞聚團(tuán)生長(zhǎng)。解決辦法：根據(jù)細(xì)胞生長(zhǎng)的情況進(jìn)行多次消化，將同次消化下來(lái)的細(xì)胞放在一個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)。貼壁細(xì)胞傳代培養(yǎng)：一般步驟為：真空泵吸走培養(yǎng)基，１XPBS漂洗兩次，加入１mlEDTA-Tripsin（１００mm皿為例），３７度放置數(shù)分鐘，輕拍培養(yǎng)瓶使細(xì)胞自瓶壁脫落，加入適量血清，以吸管上下吸放數(shù)次以打散細(xì)胞團(tuán)塊，離心后加入新鮮培養(yǎng)基，按比例轉(zhuǎn)移至新皿。細(xì)胞的傳代最重要的是胰酶處理時(shí)間，若胰酶處理太久，容易造成細(xì)胞貼壁不緊，顯微鏡下觀察立體感不強(qiáng)，嚴(yán)重的時(shí)候甚至?xí)斐杉?xì)胞死亡。我談?wù)剛€(gè)人經(jīng)驗(yàn)：HepG-２、A５４９、Hela、SGC-７９０１幾種癌細(xì)胞處理時(shí)間可適當(dāng)放長(zhǎng)，一般處理５-６min，C２C１２、COS-７、NIH-３T３比較容易脫落，２min足矣，P１９Cl６和２９３細(xì)胞貼壁不緊，可在PBS漂洗后，直接換新鮮培養(yǎng)基打散。
KE37細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H2107細(xì)胞、J111細(xì)胞、M14細(xì)胞
HME-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ACT-1細(xì)胞、GM02219C細(xì)胞、MIHA細(xì)胞
NCI-H1693細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MARC 145細(xì)胞、RCK8細(xì)胞、Hs888Lu細(xì)胞
LS 1034細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MNNG-HOS (TE 85, clone F-5)細(xì)胞、LY細(xì)胞、OVCA 433細(xì)胞
Line 522細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H4IIEC3細(xì)胞、F442-A細(xì)胞、hMSC-BM細(xì)胞
HuLEC-5a細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：AG06814-M細(xì)胞、OCI-AML-5細(xì)胞、NBLAN5T細(xì)胞
HFL細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HeLaS3細(xì)胞、hTERT RPE-1細(xì)胞、SKLU-1細(xì)胞
UM-UC-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：16HBEo-細(xì)胞、A704細(xì)胞、AN3CA細(xì)胞
NRK clone 49F細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H322T細(xì)胞、OVCA-420細(xì)胞、OE21細(xì)胞
SKG3A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：IOSE29細(xì)胞、B-3細(xì)胞、SW-48細(xì)胞
B6Tert-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CEM-0細(xì)胞、EL4細(xì)胞、SNT8細(xì)胞
MDAMB436細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW-1990細(xì)胞、UMR-106細(xì)胞、SJRH-30細(xì)胞
OCI-LY-19細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCD-18Co細(xì)胞、A-427細(xì)胞、NCIH2452細(xì)胞
BV-173細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 940.T細(xì)胞、Mv1.Lu細(xì)胞、H676細(xì)胞
BTI-Tn-5B1-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RMC細(xì)胞、H1581細(xì)胞、OKT 3細(xì)胞
LAD2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：IPEC-1細(xì)胞、RGB細(xì)胞、WERIRb1細(xì)胞
LAD2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：IPEC-1細(xì)胞、RGB細(xì)胞、WERIRb1細(xì)胞
MFHL-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Normal fibroblast-10細(xì)胞、KLN205細(xì)胞、H-2198細(xì)胞
MKN 28細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：AG06814-N細(xì)胞、RPMI #1846細(xì)胞、University of Michigan-Urothelial Carcinoma-1細(xì)胞
KYSE-510細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVCAR432細(xì)胞、KE37細(xì)胞、B78細(xì)胞
HCC1438細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-N-BE-2細(xì)胞、OVCA-433細(xì)胞、A-673細(xì)胞
HEL-299細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：EoL-1細(xì)胞、TE3A細(xì)胞、NCIH810細(xì)胞
RD-ES細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BSC1細(xì)胞、H-810細(xì)胞、OCI-AML-4細(xì)胞
MALME.3M細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3J細(xì)胞、TALL-1 [Human adult T-ALL]細(xì)胞、SP-2細(xì)胞
PA I細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM00637H細(xì)胞、P3J.HR1K細(xì)胞、EU-2細(xì)胞
SKHEP1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Rat 1細(xì)胞、Human Liver-7702細(xì)胞、KHYG1細(xì)胞
V-79-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HBZY 1細(xì)胞、C3H/10T1/2 clone 8細(xì)胞、A204細(xì)胞
NT2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：T1-73細(xì)胞、C 643細(xì)胞、NFHIOSE-80細(xì)胞
OCI-Ly 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TE8細(xì)胞、RGCs細(xì)胞、A549 ATCC細(xì)胞
NCI.H226細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEC1-B細(xì)胞、5-8F細(xì)胞、NCI H508細(xì)胞
HMEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BE(2)-M17細(xì)胞、SKGT4細(xì)胞、QGP 1細(xì)胞
HIEC-6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM04679細(xì)胞、SW1573細(xì)胞、RPMI2650細(xì)胞
U-266細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：EA.hy 926細(xì)胞、NCI H508細(xì)胞、HCC-1500細(xì)胞
SCL2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MD Anderson-Metastatic Breast-415細(xì)胞、4175細(xì)胞、TFK-1細(xì)胞
SNU-C2A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：AAV293細(xì)胞、SNU-354細(xì)胞、SNU-5細(xì)胞
KASUMI1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：9L細(xì)胞、Tca-8113細(xì)胞、NCI-H295R細(xì)胞
SUDHL6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H841細(xì)胞、RAOEC細(xì)胞、ATN-1細(xì)胞
CESS細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：EFM-19細(xì)胞、B16 melanoma細(xì)胞、CaSki細(xì)胞
L363細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：alpha-TC1-6細(xì)胞、H1568細(xì)胞、S180細(xì)胞
IMCD3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：P560細(xì)胞、MKN-1細(xì)胞、NCI-H2052細(xì)胞
OCILY-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 888Lu細(xì)胞、Walker/LLC-WRC256細(xì)胞、P3X63 Ag8.653細(xì)胞
NCI-H295細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH2141細(xì)胞、HUC-1細(xì)胞、Keio University-19-19細(xì)胞
U2OS細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hela-Ap-1細(xì)胞、BIU-87細(xì)胞、KLN-205細(xì)胞
WM-239-A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Daudi細(xì)胞、Jurkat (clone E6-1)細(xì)胞、MKN-28細(xì)胞
A549-Taxol細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MLM細(xì)胞、KYSE410細(xì)胞、LNCaP-Clone-FGC細(xì)胞
NPC-TW 01細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-OV-3細(xì)胞、V79-4細(xì)胞、BLO11細(xì)胞
V 79-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：FHs 74 Int細(xì)胞、K 562細(xì)胞、AU-565細(xì)胞
OC-316細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ZR75_1細(xì)胞、HT-115細(xì)胞、alpha-TC1.6細(xì)胞
SKMEL24細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：32D clone 3細(xì)胞、UMNSAH/DF-1細(xì)胞、RGC6細(xì)胞
H-2444細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAL85-1細(xì)胞、PA-1細(xì)胞、NCI-H1341細(xì)胞
HBMEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LNCaP clone FGC細(xì)胞、U-266 AR1細(xì)胞、LS-174T細(xì)胞
PCI-SG231細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HT1376細(xì)胞、DU-145細(xì)胞、DF1細(xì)胞
JM-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPMI No. 1846細(xì)胞、Clone Y-1細(xì)胞、H7721細(xì)胞
HuPT4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MC-38細(xì)胞、Loucy細(xì)胞、SJSA1細(xì)胞
Kit225/K6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：J111細(xì)胞、GM00215細(xì)胞、OCI-AML4細(xì)胞
HH [Human lymphoma]細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1184細(xì)胞、H-1882細(xì)胞、C2A細(xì)胞
P31/Fujioka細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：B958細(xì)胞、SK BR 03細(xì)胞、D562細(xì)胞
H889細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDAMB415細(xì)胞、MDA.MB.435細(xì)胞、Ramos 2G6 4C10細(xì)胞
MonoMac6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：DMS53細(xì)胞、SUM190細(xì)胞、NCI-H810細(xì)胞
NCI-H220細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEC-1A細(xì)胞、WM 239細(xì)胞、MUTZ1細(xì)胞
M059J細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Reuber-H-35 hepatoma細(xì)胞、RPE D407細(xì)胞、CFSC-8B細(xì)胞
Ramos-2G6-4C10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BT 549細(xì)胞、PANC0327細(xì)胞、COS7細(xì)胞
TSU-Pr1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1568細(xì)胞、COLO-829細(xì)胞、R.K.13細(xì)胞
CEMx721.174.T2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Tn5B1-4細(xì)胞、TE-13細(xì)胞、2BS細(xì)胞
SuDHL 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HSKMC細(xì)胞、BE2M17細(xì)胞、NCIH3255細(xì)胞
HCC0015細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：COV434細(xì)胞、IBMF-7細(xì)胞、IMCD-3細(xì)胞
ASH3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：University of Michigan-Renal Carcinoma-2細(xì)胞、MM1細(xì)胞、NCTC-929細(xì)胞
Glioma-261細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BHP 10-3細(xì)胞、H2141細(xì)胞、COLO 205細(xì)胞
CL1.0細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：COR-L 105細(xì)胞、M14-MEL細(xì)胞、MMAc-Serum Free細(xì)胞
RT4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：U-118-MG細(xì)胞、OLN 93細(xì)胞、SVOG細(xì)胞
TGW-nu-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hep2細(xì)胞、FLC-7細(xì)胞、SK 1細(xì)胞
CCC-HEL-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SF763細(xì)胞、HOC細(xì)胞、NIH 3T3細(xì)胞
NCI-H1693細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MARC 145細(xì)胞、SNU-C2B細(xì)胞、NS653細(xì)胞
SK-SH-SY5Y細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Mel-MeWo細(xì)胞、EB2細(xì)胞、HPB/ALL細(xì)胞
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