"HSC-3細胞：人口腔鱗癌細胞系
細胞背景資料：詳見相關文獻介紹
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
細胞生長：貼壁
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法：１ x １０^５ cells/１０cm dish
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
細胞生長特性：貼壁生長
常見細胞培養(yǎng)中一些問題總結：１)培養(yǎng)基中血清的比例多少合適？血清是細胞培養(yǎng)上一個極為重要的營養(yǎng)來源，所以血清的含量多少會對細胞的生長會產生極大的影響。血清的含量一般為５%-１５%，不要低于５%或高過２０%，因為含量過低會導致細胞營養(yǎng)不足，過高則會破壞滲透壓平衡。一般建議血清含量為１０%，可以適量加減；２)何時須更換培養(yǎng)基？視細胞生長密度而定，或遵照細胞株基本數(shù)據(jù)上的更換時間，按時更換培養(yǎng)基即可。還可以參照指示劑的顏色變化進行更換；３)購買的復蘇細胞，為何會有脫落？因為運輸?shù)倪^程中不可避免的會有震蕩，收到后可以離心收集；４)購買的細胞冷凍管經解凍后，為何會發(fā)生細胞數(shù)目太少之情形？研究人員在冷凍細胞之培養(yǎng)時出現(xiàn)細胞數(shù)目太少，大都是因為離心過程操作上的失誤，造成細胞的物理性損傷，以及細胞流失。建議細胞解凍后不要立刻離心，應待細胞生長隔夜后再更換培養(yǎng)基即可；５)購買的細胞死亡或細胞存活率不佳可能原因？研究人員在細胞培養(yǎng)時出現(xiàn)存活率不佳，常見原因可歸納為：培養(yǎng)基使用錯誤或培養(yǎng)基品質不佳。血清使用錯誤或血清的品質不佳。解凍過程錯誤。冷凍細胞解凍后，加以洗滌細胞和離心。懸浮細胞誤認為死細胞。培養(yǎng)溫度使用錯誤。細胞置于–８０°C太久；６)收到的冷凍管瓶身破裂，瓶蓋有裂紋，或瓶蓋脫落之原因？冷凍管瓶蓋裂紋，或瓶身破裂，可能是因為操作者夾取冷凍管時用力不當，造成冷凍管裂損，建議使用止血鉗小心夾取。另冷凍管瓶蓋松動或松脫，乃因熱脹冷縮之物理現(xiàn)象，冷凍管有可能因此而造成細胞污染，故冷凍管于放入和取出液氮桶時，均應立刻將冷凍管再一次扭緊。
正確的細胞復蘇需知事項：細胞凍存好了，接下來要注意什么問題呢？沒錯，就是記得到時間了，拿出來復蘇。那么，細胞復蘇的過程中又有哪些該注意的事項呢？細胞活力和形態(tài)檢查的作用何在？活力檢查——千萬不要使用不健康的細胞，可能有污染(真菌、支原體等)，如果發(fā)現(xiàn)有污染毫不猶豫的丟棄!形態(tài)檢查——檢查細胞的固有形態(tài)和生長行為。凍存細胞：補充新的培養(yǎng)液——在您開始凍存細胞的前一天補充新的培養(yǎng)液。在細胞長至７０%單層時收獲細胞，計數(shù)活細胞數(shù)，用凍存液調整細胞密度~５ x１０６ Cell s/ml (根據(jù)不同的細胞類型調整)；凍存液——用凍存液洗細胞并用凍存液重懸細胞，有不同類型的凍存液，根據(jù)細胞類型選擇最合適的凍存液(常用的凍存液成分有)：５-１０% DMSO——注意確保DMSO不含有其他的毒性物質；５-１５%甘油；如果細胞在無血清培養(yǎng)基內生長，應在５０%條件培養(yǎng)基內(細胞在無血清培養(yǎng)基內生長２４小時)內凍存和復蘇。在凍存管上標記好細胞類型，日期，凍存人等信息，并保證每凍存管不超過１.５ml。放入液氮罐之前記錄凍存管的數(shù)量和位置。以最快的速度轉移凍存管知液氮罐內，因此，此步驟使用干冰，或者把凍存管浸入裝有液氮的小盒內。此外還要注意，在凍存管上沒有足夠的空間記錄細胞的詳細信息，做好記錄是非常非常重要的！還有一個最重要的，一定要在異地的液氮罐內保存同樣的一份細胞，以免其中的一個液氮罐出現(xiàn)問題！細胞正確的復蘇方式和正確的凍存方式同樣重要，熟記以下要點：當從液氮罐內取出細胞時，有可能會出現(xiàn)凍存管破裂的情況，使用保護面罩和防護服十分必要；其實，細胞復蘇只是一個簡單的實驗，不過這其中卻不可避免有一些需要注意的細節(jié)，不然，也不一定會盡如人意。例如說，人身健康方面：一定要記得做好防凍工作，戴上護目鏡；盡量降低DMSO對細胞的損傷等等。
冷凍細胞解凍程序：依據(jù)細胞株數(shù)據(jù)單指定之基礎培養(yǎng)基種類、血清種類和其它指定之成份和比例，制備培養(yǎng)基。絕大多數(shù)之細胞均無法立即適應不同之基礎培養(yǎng)基或不同之血清種類，若因實驗需要，必須有所不同時，務必以緩慢比例漸次改變培養(yǎng)基組成，確定細胞適應后，方進行所需之實驗。FBS(fetal bovine serum,胚牛血清), CS(calf serum,小牛血清)和HS(horse serum,馬血清)，對細胞而言差異極大，請務必依據(jù)細胞株資料單指定之血清種類培養(yǎng)之。將培養(yǎng)基置于３７°C水槽中回溫，回溫后噴以７０%酒精并擦拭之，移入無菌操作臺內。取出冷凍管，立即放入３７°C水槽中快速解凍，水面高度不可接近或高過冷凍管之蓋沿，否則易發(fā)生污染。輕搖冷凍管使其在１分鐘內全部融化后，以７０%ethanol擦拭冷凍管外部，移入無菌操作臺內。依據(jù)細胞種類和濃度，于無菌操作臺內?。保癿l培養(yǎng)基加至T２５或T７５flask中。取出已解凍之細胞懸浮液，緩緩加入T２５或T７５flask內之培養(yǎng)基，混合均勻，放入３７°C，５%CO２培養(yǎng)箱培養(yǎng)。對絕大多數(shù)細胞而言，１%以下之冷凍保護劑DMSO，不會對細胞之貼附或活化有不良影響，不需立刻由解凍細胞中去除，待第二天確定細胞生長或貼附良好后再去除即可。惟對極少數(shù)因對DMSO敏感或會造成細胞分化之細胞，需立即去除DMSO者，則可將解凍后之細胞懸浮液放入５-１０ml培養(yǎng)基中，離心３００xg(約１０００rpm)，５分鐘，小心移去上清液，加入適量新鮮培養(yǎng)基，將細胞均勻混合后，轉移至培養(yǎng)瓶中，再放入３７°C，５%CO２培養(yǎng)箱培養(yǎng)。
UT-7細胞系相關產品：HCCC-9810細胞、Panc_04_03細胞、FL62891細胞
HCT_116細胞系相關產品：RT4-D6P2T細胞、Hs-675-T細胞、WB F344細胞
CHL-1細胞系相關產品：NCI-128細胞、HEK/EBNA細胞、MGH-U1細胞
HCC1395細胞系相關產品：COLO-829細胞、3T6細胞、Human Fetal Thymocyte-8810細胞
SNK-6細胞系相關產品：Turbot Embryonic細胞：細胞、HepaRG細胞、HL1細胞
Metastatic Variant-522細胞系相關產品：NCI-H2291細胞、GH 3細胞、Granta 519細胞
RH-35細胞系相關產品：H-2452細胞、Psi2-DAP細胞、H498細胞
EMT6細胞系相關產品：NT-2細胞、OVCAR 4細胞、P3-X63-Ag 8.653細胞
SRA 01/04細胞系相關產品：HN4細胞、CEM-0細胞、MC38細胞
KM12SM細胞系相關產品：OV90細胞、16-HBEo細胞、SW 948細胞
OACP4 C細胞系相關產品：H1581細胞、LLCPK1細胞、MOLT4細胞
NCIH524細胞系相關產品：SDBMSC細胞、MDA-415細胞、Kit225細胞
SNU-719細胞系相關產品：HcerEpic細胞、P36細胞、Sp2/0-Ag14細胞
A172細胞系相關產品：OCI-Ly 8細胞、SN12C-PM6細胞、RPMI-7951細胞
NCI-H2106細胞系相關產品：Institute for Medical Research-32細胞、SK-OV-433細胞、VMM-5A細胞
MFHL-2細胞系相關產品：Normal fibroblast-10細胞、KLN205細胞、H-2198細胞
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PIG1細胞系相關產品：L78細胞、FTC133細胞、SKMEL24細胞
H295細胞系相關產品：T173細胞、CMK細胞、KRCY細胞
YES2細胞系相關產品：MDAMB175細胞、WM2664細胞、H-295R細胞
MES-23.5細胞系相關產品：P3J.HR1K細胞、TMD-8細胞、RT4細胞
ESC細胞系相關產品：Y-79細胞、HS-294T細胞、HCe-8693細胞
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Vero-E6細胞系相關產品：LS-513細胞、KMH-2細胞、PSN1細胞
MDA-175細胞系相關產品：Tn-5細胞、KY180細胞、M4e細胞
SO-Rb 50細胞系相關產品：293/EBNA細胞、H-1385細胞、RASMC細胞
PT-K75細胞系相關產品：KBM5細胞、NCIH548細胞、HMVEC細胞
SW-982細胞系相關產品：LADMAC細胞、C4I細胞、YD-38細胞
Z310細胞系相關產品：NCI660細胞、NCI-H2122細胞、TE354.T細胞
MHCC 97-L細胞系相關產品：CT-26 WT細胞、U-2OS細胞、Colon38細胞
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RERF-LC-MS細胞系相關產品：NH6細胞、H-211細胞、RBL-I細胞
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Panc 5.04細胞系相關產品：WBF344細胞、CA-OV-3細胞、MESSA Dx5細胞
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GM-346細胞系相關產品：OVHM細胞、KM H-2細胞、NBLS細胞
Roswell Park Memorial Institute 2650細胞系相關產品：LPC-H12細胞、NCI-H1417細胞、Duke University 145細胞
K422細胞系相關產品：N2a細胞、DHL-8細胞、Chang Cells細胞
HuH6細胞系相關產品：Mel526細胞、LC1細胞、Wistar Institute, Susan Hayflick細胞
Kelly細胞系相關產品：OSC19細胞、CHL-IU細胞、CCD-1095Sk細胞
ARIP細胞系相關產品：AR4-2J細胞、H1666細胞、CFSC-2G細胞
CCD 966 SK細胞系相關產品：A2780 CP70細胞、149PT細胞、BE2-C細胞
Tb 1-Lu細胞系相關產品：BNL-HCC細胞、NCIH1688細胞、GM07404D細胞
HuT-78細胞系相關產品：LLC-PK1細胞、University of Arizona Cell Culture-812細胞、LS-513細胞
KCL22S細胞系相關產品：Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-10細胞、SHG-44細胞、SK UT 1細胞
HSC-6細胞系相關產品：PC3M-2B4細胞、OVCAR.8細胞、Ca Ski細胞
Panc10.05細胞系相關產品：MUGCHOR1細胞、MLE-12細胞、Japanese Tissue Culture-28細胞
WiDr-TC細胞系相關產品：Los Angeles Prostate Cancer-4細胞、SUM-190PT細胞、WIL2 Secreting細胞
MDA-MB 361細胞系相關產品：Roswell Park Memorial Institute 6666細胞、HUASMC細胞、SF-126細胞
Mouse Bladder Tumor line-2細胞系相關產品：NPA87-1細胞、Porcine Kidney-15細胞、IPLB-SF-21細胞
T-cell Acute Lymphoblastic Leukemia-1細胞系相關產品：Hs 766細胞、H-676細胞、RPVSMC細胞
HT 1080.T細胞系相關產品：SK-Hep1細胞、HANK細胞、HFL細胞
SUM-190PT細胞系相關產品：SK-N-F1細胞、Calu-1細胞、CWR22-R1細胞
H220細胞系相關產品：H-676細胞、L cells細胞、EL 4細胞
RCM1細胞系相關產品：J-82細胞、DanG細胞、COLO829細胞
HT-3細胞系相關產品：TE353.SK細胞、BEL 7405細胞、SJRH-30細胞
CHL-1細胞系相關產品：NCI-128細胞、RCM1細胞、LLC1細胞
FHs74Int細胞系相關產品：MCFs細胞、HPB/ALL細胞、D-341細胞
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