"8305C細(xì)胞：人類甲狀腺未分化癌細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料：詳見相關(guān)文獻(xiàn)介紹
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣
細(xì)胞生長：貼壁
細(xì)胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細(xì)胞傳代方法：１：６傳代
細(xì)胞來源說明：細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
細(xì)胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細(xì)胞說明書部分
細(xì)胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程(請嚴(yán)格遵照無菌操作)：１)吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，PBS緩沖液潤洗細(xì)胞兩次，加２-３ml ０.２５%胰酶進(jìn)行消化細(xì)胞(注意把握消化時間，通?？刂圃冢?２min)；２)鏡下觀察消化情況，在細(xì)胞邊緣縮小，貼壁松動時(不建議消化到細(xì)胞漂浮)去掉胰酶，加６-８ml完全培養(yǎng)基，輕輕吹打細(xì)胞層，盡量把細(xì)胞層吹落，吹散；３)取部分細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿/瓶中，添加適當(dāng)?shù)耐耆囵B(yǎng)基，把細(xì)胞懸液打勻，于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；４)注意培養(yǎng)基PH值變化情況，定期換液(每周２-３次)，待細(xì)胞密度達(dá)到８０%以后重復(fù)１項操作或者凍存；特別注意：(如使用公共實驗室或者初次接觸細(xì)胞培養(yǎng)，建議添加雙抗培養(yǎng))１)收到細(xì)胞后請盡快更換為含１５%血清的新鮮培養(yǎng)基，如因特殊情況需要繼續(xù)使用原瓶，請在原瓶培養(yǎng)基中額外添加１０%的血清，(原瓶培養(yǎng)基的繼續(xù)使用時間最長不宜超過７２小時)；２)貼壁細(xì)胞收到當(dāng)天切忌立刻消化，請將細(xì)胞換液后放置培養(yǎng)箱孵育到第二天再做消化傳代，請優(yōu)先選擇直徑６cm的培養(yǎng)皿進(jìn)行傳代培養(yǎng)；３)如簽收時出現(xiàn)培養(yǎng)瓶壁破裂，漏液等情況請及時做好照片記錄并聯(lián)系實驗室。
貼壁細(xì)胞消化傳代時通常采用兩種方法：一、加入胰酶等細(xì)胞脫落后，再加培養(yǎng)基中止胰酶作用，離心傳代；二、加入胰酶后，鏡下觀察待細(xì)胞始脫落時，棄胰酶，加培養(yǎng)液分瓶。但前者太麻煩，而后者有可能對細(xì)胞施加胰酶選擇，因為總是貼壁不牢的細(xì)胞先脫落，對腫瘤細(xì)胞來說，這部分細(xì)胞有可能是惡性程度較高的細(xì)胞亞群。一種簡單的消化傳代方法。加入PBS洗去血清或加入胰酶先中和血清的作用(３０s)，棄之，再加入適量胰酶作用１０s-４０s(根據(jù)細(xì)胞消化的難易程度)，棄之，這樣依賴殘余的胰酶就可將細(xì)胞消化單細(xì)胞。對于較難消化的細(xì)胞，可以用２%利多卡因消化５-８分鐘，然后再棄去，加培養(yǎng)基吹打也可以，對細(xì)胞的影響不大。不用PBS也不用Hanks洗，只要把舊培養(yǎng)液吸的干凈一點，直接加酶消化應(yīng)該不會有什么問題。棄培養(yǎng)液后，用０.０４%的EDTA沖洗一次，再用１/４v的０.０４%的EDTA室溫孵育５min，棄取大部分EDTA，加入與剩余EDTA等量的胰酶(預(yù)熱)總體積１/１０v。消化到有細(xì)胞脫落。不過有人說EDTA對細(xì)胞不好，有證據(jù)嗎？培養(yǎng)的BASMC：倒掉舊培養(yǎng)液加入少量胰酶沖一下，倒掉再加入０.１２５-０.２５%胰酶約６-１０滴或１ml(２５ml bottle)消化再加入適量新培養(yǎng)基中和，并分瓶這種方法簡單、省事；效果很好并且不損失細(xì)胞！
最近在培養(yǎng)細(xì)胞時，發(fā)現(xiàn)其狀態(tài)不是很好，很容易扎堆生長，用胰酶消化的時候也是一團一團地被消化下來，很難把它們吹散成一個一個細(xì)胞。而且長得也挺快也挺不均勻的，傳代的第二天，有些地方就長得滿滿的了。想請教一下這是為什么呢？你好，我養(yǎng)的細(xì)胞和你一樣，消化下來也是一團的，但吹打以后就沒有這樣的情況了。建議你分皿前還是要吹勻，分皿后在鏡下看一看，移動培養(yǎng)皿的時候盡量動作輕，避免晃動。細(xì)胞生長挺快，那么細(xì)胞的增殖能力應(yīng)該較強。胰酶消化成團的問題我覺得有以下幾種可能：一、細(xì)胞消化后吹打不均勻，造成細(xì)胞成團生長：二、細(xì)胞細(xì)化太過，細(xì)胞成片脫落，吹打時沒有受力點，細(xì)胞聚團生長。解決辦法：根據(jù)細(xì)胞生長的情況進(jìn)行多次消化，將同次消化下來的細(xì)胞放在一個細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)。貼壁細(xì)胞傳代培養(yǎng)：一般步驟為：真空泵吸走培養(yǎng)基，１XPBS漂洗兩次，加入１mlEDTA-Tripsin（１００mm皿為例），３７度放置數(shù)分鐘，輕拍培養(yǎng)瓶使細(xì)胞自瓶壁脫落，加入適量血清，以吸管上下吸放數(shù)次以打散細(xì)胞團塊，離心后加入新鮮培養(yǎng)基，按比例轉(zhuǎn)移至新皿。細(xì)胞的傳代最重要的是胰酶處理時間，若胰酶處理太久，容易造成細(xì)胞貼壁不緊，顯微鏡下觀察立體感不強，嚴(yán)重的時候甚至?xí)斐杉?xì)胞死亡。我談?wù)剛€人經(jīng)驗：HepG-２、A５４９、Hela、SGC-７９０１幾種癌細(xì)胞處理時間可適當(dāng)放長，一般處理５-６min，C２C１２、COS-７、NIH-３T３比較容易脫落，２min足矣，P１９Cl６和２９３細(xì)胞貼壁不緊，可在PBS漂洗后，直接換新鮮培養(yǎng)基打散。
PC.3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-NM-C細(xì)胞、AZ 521細(xì)胞、SK-NM-C細(xì)胞
DoTc2-4510細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MS-751細(xì)胞、RPMI no. 8226細(xì)胞、SG231細(xì)胞
COR-L105細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HSC1細(xì)胞、NCIH1435細(xì)胞、Tca-8113細(xì)胞
COLO-320DM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H510A細(xì)胞、L-cell細(xì)胞、PK-15細(xì)胞
HCC1954 BL細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Sun Yat-sen university Ophtalmic center-Retinoblastoma 50細(xì)胞、HPC-Y5細(xì)胞、SW 900細(xì)胞
H2023細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUPT-1細(xì)胞、Hmy.2 CIR細(xì)胞、H1651細(xì)胞
H1650細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H2171細(xì)胞、PLB-985細(xì)胞、HCCLM6細(xì)胞
Tokyo Medical and Dental university 8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CEK細(xì)胞、HB 611細(xì)胞、FLC-7細(xì)胞
Ly10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-LU-1細(xì)胞、NRK 52E細(xì)胞、HT 144細(xì)胞
FBHE細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1781細(xì)胞、A2780/CP細(xì)胞、MHCC97L細(xì)胞
PCI:SG231細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCTC-1469細(xì)胞、NCI747細(xì)胞、A10細(xì)胞
LED-WiDr細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SVOG細(xì)胞、H1404細(xì)胞、ARO-81細(xì)胞
Panc05.04細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCPEpiC細(xì)胞、SW.620細(xì)胞、AtT20細(xì)胞
LIM1215細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC44細(xì)胞、HL60細(xì)胞、MDAMB468細(xì)胞
Hs 274細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CFPAC-1細(xì)胞、TK-10細(xì)胞、AML 12細(xì)胞
16-HBEo細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Normal Rat Kidney-49F細(xì)胞、OSC-19細(xì)胞、NCIH1915細(xì)胞
BL2141細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAL148細(xì)胞、MOVAS-1細(xì)胞、PL 45細(xì)胞
H-1568細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HKC細(xì)胞、Me Wo細(xì)胞、NP69SV40T細(xì)胞
Human Embryo Lung-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1437細(xì)胞、SKNBE(1)細(xì)胞、TKB-1細(xì)胞
H-522細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK-293-F細(xì)胞、HTR8/SVneo細(xì)胞、H-1703細(xì)胞
L6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKCO 1細(xì)胞、DU4475細(xì)胞、Michigan Cancer Foundation-12F細(xì)胞
KG-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SPC-A1細(xì)胞、Hs 895.T細(xì)胞、AMJ2-C8細(xì)胞
BNL CL2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BT 20細(xì)胞、MDA2B細(xì)胞、Hs-600-T細(xì)胞
ML2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HARA-B細(xì)胞、H-526細(xì)胞、SGC996細(xì)胞
ST 486細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCEC-B4G12細(xì)胞、KLN 205細(xì)胞、BMF細(xì)胞
UMR-106細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NK 10a細(xì)胞、T8細(xì)胞、HOS-TE85細(xì)胞
Hs-27細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKNBE2細(xì)胞、NTERA2-D1細(xì)胞、SNU5細(xì)胞
HEK293-F細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3-X63Ag8.653細(xì)胞、SKG3A細(xì)胞、B4G12細(xì)胞
HT clone H9細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：AsPC-1細(xì)胞、KU-19-19細(xì)胞、NCI-H2081細(xì)胞
OE19細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Panc-10.05細(xì)胞、BT 20細(xì)胞、DH82細(xì)胞
KLE細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Chinese Hamster Ovary細(xì)胞、T-CAM2細(xì)胞、Madison lung細(xì)胞
MES 13細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MCA38細(xì)胞、HLEB-3細(xì)胞、SUM 149PT細(xì)胞
VM-CUB-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BT-483細(xì)胞、SF-126細(xì)胞、AU565細(xì)胞
HCC-1588細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-2087細(xì)胞、ARH77細(xì)胞、KU 19-19細(xì)胞
NCIH1395細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：C2-C12細(xì)胞、MH-S細(xì)胞、BJAB-1細(xì)胞
MOLT.4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H295細(xì)胞、A2780S細(xì)胞、DCS細(xì)胞
YD-38細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H64細(xì)胞、293-FT細(xì)胞、MS 751細(xì)胞
AgC11x3A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Cloudman M3細(xì)胞、SUM 102細(xì)胞、NTera 2/cl.D1細(xì)胞
NS-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MADB 106細(xì)胞、MLOY4細(xì)胞、KYSE-140細(xì)胞
Hs895.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BMU-S1細(xì)胞、D10細(xì)胞、H1395細(xì)胞
H-1355細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCC-HIE-2細(xì)胞、BERH-2細(xì)胞、UCLA NPA871細(xì)胞
GM06141B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MGH-U1 (EJ)細(xì)胞、SN12-PM6細(xì)胞、H-719細(xì)胞
ROS 17/28細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：A-427細(xì)胞、BpRcl細(xì)胞、Ly19細(xì)胞
786-O細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：P-19細(xì)胞、Y3M細(xì)胞、KU812-F細(xì)胞
KCL22S細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-10細(xì)胞、SHG-44細(xì)胞、SK UT 1細(xì)胞
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CCRF/CEM/0細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H9c2(2-1)細(xì)胞、HCC-1419細(xì)胞、H661細(xì)胞
UMNSAH/DF#1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUM 149細(xì)胞、HELF細(xì)胞、IEC-18細(xì)胞
HSC 3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：P1-Raji細(xì)胞、YES2細(xì)胞、SNU368細(xì)胞
NCI-H1395細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-HUT-520細(xì)胞、MESSA細(xì)胞、H-748細(xì)胞
HFL-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCRF-SB細(xì)胞、RCC10RGB細(xì)胞、H196細(xì)胞
NCI/ADR-RES細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：FM-88細(xì)胞、DC 2.4細(xì)胞、L-cell細(xì)胞
SNU1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：K-1735細(xì)胞、SNU449細(xì)胞、MM-1S細(xì)胞
SW 1222細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-2029細(xì)胞、T. T細(xì)胞、CAL 51細(xì)胞
NCIH1694細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GC1-SPG細(xì)胞、S3-HeLa細(xì)胞、Hs 636 T細(xì)胞
NCI-SNU-668細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：B16-BL6細(xì)胞、PATU-S細(xì)胞、L2細(xì)胞
MAVER細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HuH 6細(xì)胞、FL-83B細(xì)胞、P3.NS-1/1.Ag4.1細(xì)胞
QGY7701細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：U343細(xì)胞、CX1細(xì)胞、AM細(xì)胞
HSAEC1-KT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW-403細(xì)胞、Duke University 4475細(xì)胞、H-1623細(xì)胞
MRAEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LNCaP C4-2B細(xì)胞、LS-123細(xì)胞、RAMSCs細(xì)胞
LA795細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Vero from pool #76細(xì)胞、HLF-a細(xì)胞、OVCAR-5細(xì)胞
NT-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CATH.a細(xì)胞、CT 26細(xì)胞、3T3-L1細(xì)胞
HK-2 [Human kidney]細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：University of Arizona Cell Culture-812細(xì)胞、KBM-7/Hap8細(xì)胞、H-522細(xì)胞
Hopkins-92細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKBr3細(xì)胞、H1650細(xì)胞、Panc 4.03細(xì)胞
LM-TK-細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPTC細(xì)胞、ID8細(xì)胞、GC-2spd(ts)細(xì)胞
GM03570細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Onda 11細(xì)胞、NCI-Hut 125細(xì)胞、T-ALL-1細(xì)胞
TE-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GOS-3細(xì)胞、3T3L1細(xì)胞、LN299細(xì)胞
COR-L105細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HSC1細(xì)胞、MOLM16細(xì)胞、beta-TC6細(xì)胞
J774 A1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3X63-Ag8.653細(xì)胞、UPCI:SCC90細(xì)胞、HcerEpic細(xì)胞
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