"SK-MEL-5細胞：人惡性黑色素瘤細胞系

細胞背景資料：詳見相關(guān)文獻介紹

細胞形態(tài)：上皮細胞樣

細胞生長：貼壁

細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源

細胞產(chǎn)品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)

細胞傳代方法：１：３-１：６傳代，２-３天換液１次。

細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系

細胞生長特性：貼壁生長

常見細胞培養(yǎng)中一些問題總結(jié)：１)培養(yǎng)基中血清的比例多少合適？血清是細胞培養(yǎng)上一個極為重要的營養(yǎng)來源，所以血清的含量多少會對細胞的生長會產(chǎn)生極大的影響。血清的含量一般為５%-１５%，不要低于５%或高過２０%，因為含量過低會導致細胞營養(yǎng)不足，過高則會破壞滲透壓平衡。一般建議血清含量為１０%，可以適量加減；２)何時須更換培養(yǎng)基？視細胞生長密度而定，或遵照細胞株基本數(shù)據(jù)上的更換時間，按時更換培養(yǎng)基即可。還可以參照指示劑的顏色變化進行更換；３)購買的復蘇細胞，為何會有脫落？因為運輸?shù)倪^程中不可避免的會有震蕩，收到后可以離心收集；４)購買的細胞冷凍管經(jīng)解凍后，為何會發(fā)生細胞數(shù)目太少之情形？研究人員在冷凍細胞之培養(yǎng)時出現(xiàn)細胞數(shù)目太少，大都是因為離心過程操作上的失誤，造成細胞的物理性損傷，以及細胞流失。建議細胞解凍后不要立刻離心，應待細胞生長隔夜后再更換培養(yǎng)基即可；５)購買的細胞死亡或細胞存活率不佳可能原因？研究人員在細胞培養(yǎng)時出現(xiàn)存活率不佳，常見原因可歸納為：培養(yǎng)基使用錯誤或培養(yǎng)基品質(zhì)不佳。血清使用錯誤或血清的品質(zhì)不佳。解凍過程錯誤。冷凍細胞解凍后，加以洗滌細胞和離心。懸浮細胞誤認為死細胞。培養(yǎng)溫度使用錯誤。細胞置于–８０°C太久；６)收到的冷凍管瓶身破裂，瓶蓋有裂紋，或瓶蓋脫落之原因？冷凍管瓶蓋裂紋，或瓶身破裂，可能是因為操作者夾取冷凍管時用力不當，造成冷凍管裂損，建議使用止血鉗小心夾取。另冷凍管瓶蓋松動或松脫，乃因熱脹冷縮之物理現(xiàn)象，冷凍管有可能因此而造成細胞污染，故冷凍管于放入和取出液氮桶時，均應立刻將冷凍管再一次扭緊。

正確的細胞復蘇需知事項：細胞凍存好了，接下來要注意什么問題呢？沒錯，就是記得到時間了，拿出來復蘇。那么，細胞復蘇的過程中又有哪些該注意的事項呢？細胞活力和形態(tài)檢查的作用何在？活力檢查——千萬不要使用不健康的細胞，可能有污染(真菌、支原體等)，如果發(fā)現(xiàn)有污染毫不猶豫的丟棄!形態(tài)檢查——檢查細胞的固有形態(tài)和生長行為。凍存細胞：補充新的培養(yǎng)液——在您開始凍存細胞的前一天補充新的培養(yǎng)液。在細胞長至７０%單層時收獲細胞，計數(shù)活細胞數(shù)，用凍存液調(diào)整細胞密度~５ x１０６ Cell s/ml (根據(jù)不同的細胞類型調(diào)整)；凍存液——用凍存液洗細胞并用凍存液重懸細胞，有不同類型的凍存液，根據(jù)細胞類型選擇最合適的凍存液(常用的凍存液成分有)：５-１０% DMSO——注意確保DMSO不含有其他的毒性物質(zhì)；５-１５%甘油；如果細胞在無血清培養(yǎng)基內(nèi)生長，應在５０%條件培養(yǎng)基內(nèi)(細胞在無血清培養(yǎng)基內(nèi)生長２４小時)內(nèi)凍存和復蘇。在凍存管上標記好細胞類型，日期，凍存人等信息，并保證每凍存管不超過１.５ml。放入液氮罐之前記錄凍存管的數(shù)量和位置。以最快的速度轉(zhuǎn)移凍存管知液氮罐內(nèi)，因此，此步驟使用干冰，或者把凍存管浸入裝有液氮的小盒內(nèi)。此外還要注意，在凍存管上沒有足夠的空間記錄細胞的詳細信息，做好記錄是非常非常重要的！還有一個最重要的，一定要在異地的液氮罐內(nèi)保存同樣的一份細胞，以免其中的一個液氮罐出現(xiàn)問題！細胞正確的復蘇方式和正確的凍存方式同樣重要，熟記以下要點：當從液氮罐內(nèi)取出細胞時，有可能會出現(xiàn)凍存管破裂的情況，使用保護面罩和防護服十分必要；其實，細胞復蘇只是一個簡單的實驗，不過這其中卻不可避免有一些需要注意的細節(jié)，不然，也不一定會盡如人意。例如說，人身健康方面：一定要記得做好防凍工作，戴上護目鏡；盡量降低DMSO對細胞的損傷等等。

細胞的衰老:體外細胞培養(yǎng)實驗證明：成纖維細胞：來自胎兒傳代５０次后衰老死亡，來自成人傳代２０次后衰老死亡(與具體年齡有關(guān)；來自小鼠傳代１４--２８次后衰老死亡，來自烏龜傳代９０--１２５次后衰老死亡。細胞衰老過程中會發(fā)生一系列的變化，包括：蛋白質(zhì)合成速度降低，已有蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)變化，特異蛋白質(zhì)成份出現(xiàn);同時，細胞核，線粒體，膜系統(tǒng)、骨架系統(tǒng)等都有結(jié)構(gòu)、功能的改變。細胞衰老原因，尚無定論，出現(xiàn)過好幾種理論與假說，其中得到較廣泛認可的是“自由基損傷假說”。細胞凋亡:細胞的死亡是個體存活的正?，F(xiàn)象，常見的細胞死亡形式有３種：壞死、凋亡和細胞毒性。多細胞生物的生命活動中，因為環(huán)境因素的突然變化或病原物的入侵，導致一部分細胞死去，稱為細胞的病理死亡，或細胞壞死。壞死是細胞暴露于嚴重的物理或化學刺激時導致的細胞死亡；細胞毒性是由細胞或者化學物質(zhì)引起的單純的細胞殺傷事件，不依賴于其它兩種細胞死亡機理，如殺傷T細胞的細胞毒性作用。還有一種情況，一部分細胞的死亡是生物個體正常生命活動(代謝、生長、發(fā)育、分化)的一個必要部分；似乎帶有“犧牲局部，保全整體”的意味。這種情況下的細胞死亡，明顯地受遺傳控制，稱為細胞凋亡。凋亡(Apoptosis)則是程序性的、正常的細胞死亡，是機體清除無用的或者不想要的細胞的手段。它與細胞壞死是兩個截然不同的過程，無論從形態(tài)學、生物學還是生化的特征來說，都有明顯的區(qū)別。細胞凋亡現(xiàn)象普遍存在于生物界。細胞凋亡與細胞增殖、分化和衰老起著互補與平衡的作用，在多細胞動物的發(fā)育、形態(tài)建成與維持中扮演至關(guān)重要的角色。作為細胞的一種基本生命現(xiàn)象，凋亡失控的結(jié)果將是可怕的：凋亡不足時，易發(fā)生癌變、病毒性疾病和自身免疫疾病;而凋亡過量則可能產(chǎn)生獲得性免疫缺陷綜合征(HIV)、重癥肝炎與退行性神經(jīng)疾病，如老年性癡呆癥(Alzheimer""s disease)、帕金森氏癥(Parkinson""s disease)。因此研究細胞凋亡及其機理具有重要的理論和實踐意義。

BMF細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TK10細胞、SW 1990細胞、N9細胞

AN3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Kasumi 1細胞、alpha TC1 clone 6細胞、MNNG/HOS Cl #5細胞

FRTL-5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs-675-T細胞、P3X63Ag8.653細胞、SO-RB50細胞

Hs600T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNK1細胞、Hs832T細胞、U20-S細胞

Jurkat, Clone E6-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H2452細胞、HEYA8細胞、MC3T3E1細胞

NCI-H1618細胞系相關(guān)產(chǎn)品：3396細胞、H-1417細胞、SNU-1細胞

YH-13細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEp-2細胞、NT2細胞、SHEE細胞

SNU-182細胞系相關(guān)產(chǎn)品：B-104細胞、Hep 3B細胞、MDA-MB-175細胞

OCI AML2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MKN-45細胞、SUNE1細胞、GM00346B細胞

WEHI164細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RMS 13細胞、BL2141細胞、HCC0202細胞

SBC-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC4006細胞、NCIH716細胞、RM-1細胞

NCIH295R細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TI-73細胞、NCIH1755細胞、NCI-H2591細胞

H929細胞系相關(guān)產(chǎn)品：639 V細胞、VK-2/E6E7細胞、NOK細胞

KYSE 150 KYSE150 Kyse150 KY150

細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1299細胞、SUP-B15細胞、C6細胞

RS4;11細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KYSE 150 KYSE150 Kyse150 KY150

細胞、Colo741細胞、D10G41細胞

Jurkat (clone E6-1)細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW756細胞、CEM-CCRF (CAMR)細胞、MOLT-16細胞

BCECs細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PANC403細胞、MCF-7/ADR-RES細胞、MDA-MB 468細胞

WIL2S細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TGW細胞、HOC細胞、SF-539細胞

SHSY5Y細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1666細胞、MEF細胞、FL-83B細胞

18G3.cl 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU-216細胞、NCI H157細胞、SKGIIIA細胞

Spodoptera frugiperda clone 9細胞系相關(guān)產(chǎn)品：IPLB-Sf21細胞、VP 267細胞、KBM5細胞

3T3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Me-Wo細胞、WERIRb1細胞、Line 207細胞

SU-DHL2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCoEpiC細胞、Oka-C1細胞、TMD8細胞

Nthy-ori 3.1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CL 1-5細胞、LLC-PK(1)細胞、IPEC1細胞

SW527細胞系相關(guān)產(chǎn)品：R3/1細胞、P3/NS-1細胞、RCM-1 [Human rectum adenocarcinoma]細胞

MN60細胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO-679細胞、VMRCRCZ細胞、WISH細胞

P-3J細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TE14細胞、NCI-H1944細胞、VMCUB-1細胞

SKNEP1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PG-LH7細胞、BV173細胞、HT3細胞

GTL-16細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H35 Reuber細胞、SNG-M細胞、Colo205細胞

SW839細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RC-2細胞、Kit 225 K6細胞、SNU182細胞

2780細胞系相關(guān)產(chǎn)品：aTC1 Clone 6細胞、T-47D細胞、HCC-1428細胞

CaSki細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HSF2細胞、EL 4細胞、KMS26細胞

OCILY7細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU-520細胞、PT-67細胞、Hs839T細胞

TSCC1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW-756細胞、M4e細胞、HuP-T4細胞

L M (TK-)細胞系相關(guān)產(chǎn)品：UT-7細胞、FRTL-5細胞、58F細胞

H69/P細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Mo 59J細胞、SNU-1040細胞、HFT-8810細胞

D341Med細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H2405細胞、U20S細胞、MDA-MB-157細胞

McG-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Y3.AG.1.2.3細胞、HPDEC細胞、ECV-304細胞

RL952細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MV-4:11細胞、IA-LM細胞、Sf-21細胞

RCC-10RGB細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Caco-2細胞、HCC0038細胞、NHLF細胞

Human Kidney-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1975細胞、B16-F10細胞、H-1876細胞

343MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Fox/NY細胞、ECC-12細胞、BCP-1細胞

SCC-9細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Ls-174-T細胞、TU 686細胞、A2780/CP70細胞

HEK 293 c18細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HBEpiC細胞、OVCAR 420細胞、Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-2細胞

TOV112細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKHEP-1細胞、DU145細胞、Hs683細胞

SNU-354細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK RC 20細胞、Ketr-3細胞、NCTC-1469細胞

NCI-H64細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HepaRG細胞、D-324 Med細胞、McA-RH7777細胞

A9(Hamprecht)細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SCC-15細胞、HCC-1359細胞、PC-14細胞

Hs683T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1836細胞、PBL細胞、HTori3細胞

SNK6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BJA-B1細胞、H69C細胞、CCC-HPF-1細胞

JJN3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：DrG細胞、SK-RC 39細胞、MiaPaca.2細胞

SUM190細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW 780細胞、JURKAT E-61細胞、SCC15細胞

PC3-M細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 611.T細胞、H-647細胞、HO-8910細胞

SCC-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1048細胞、TE7細胞、SUM-149PT細胞

ST 486細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCEC-B4G12細胞、KLN 205細胞、BMF細胞

HEK-293-EBNA細胞系相關(guān)產(chǎn)品：32Dcl3細胞、Bac 1.2F5細胞、BALB/3T3 clone A31細胞

HS-5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK293-F細胞、HEK293細胞、TN5B14細胞

APRE-19細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HuTu-80細胞、RAW2647細胞、OCI-LY-1細胞

NCI-H1385細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TCCSUP細胞、H1703細胞、LYR細胞

H-2452細胞系相關(guān)產(chǎn)品：S-16細胞、hOMF細胞、BCaP 37細胞

MDA-MB231細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SF-126細胞、NCI-H1184細胞、TW-039細胞

CHP 212細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC-1806細胞、H-1155細胞、KMS-11細胞

BPH-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H711細胞、HEK;293細胞、Hs-746T細胞

SUIT2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：rRMECs細胞、PG-4(S+L-)細胞、CHO Lec1細胞

SU8686細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BRL3A細胞、PANC-28細胞、LuCL4細胞

Pan02細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVCAR.5細胞、JTC-28細胞、EHEB細胞

Malme-3 M細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KNS-62細胞、NS1-Ag 4/1細胞、SRS-82細胞

P3X63NS1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KYSE 30細胞、RSC 96細胞、VP 267細胞

Leukemia 1210細胞系相關(guān)產(chǎn)品：293T細胞、CL 1-0細胞、U-2OS細胞

CHG5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BE2-M17細胞、OCI-Ly1細胞、UCLA-SO-M20細胞

MUVEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SCC-25細胞、SHP-77細胞、IGROV-1細胞

COLO 16細胞系相關(guān)產(chǎn)品：EFM192C細胞、A427細胞、CAL 12T細胞

FRTL-5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs-675-T細胞、OACP4 C細胞、HEp-2細胞

BSC40細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KATOIII細胞、HeLa 229細胞、Nb2-11細胞

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