"SK-MEL-28細胞：人惡性黑色素瘤細胞系
細胞背景資料：詳見相關(guān)文獻介紹
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
細胞生長：貼壁
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法：１：３-１：８傳代，２-３天換液１次。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
細胞生長特性：貼壁生長
培養(yǎng)細胞真的不難，最關(guān)鍵幾點：１)所有的東西使用，如果你用的血清、培養(yǎng)皿、培養(yǎng)基、胰酶什么的都是進口的，真的很難相信你會把細胞養(yǎng)壞；２)動作要快，胰酶消化，換液什么，細胞暴露在空氣中的時間越少越好。另外，要掌握好胰酶消化時間，所謂的細胞狀態(tài)差，很多時候是傳代的原因；３)有時間的話，需要細胞計數(shù)，傳相應(yīng)數(shù)目的細胞到培養(yǎng)皿中，可以大致清楚細胞的生長曲線，不會臨時要處理，手足無措；４)要做什么心里要非常清楚，合理安排時間，傳代細胞的實驗穿插進行，可以節(jié)省很多時間，也不會耽誤別人的實驗；５)個人的實驗器具自己收一套，不要和別人混用，最近換了什么新的東西稍微記一下，試劑一旦懷疑污染，馬上丟；６)傳代細胞不能進去太多人，避免相互干擾。每天對待細胞比孝敬爹媽還用心，那真是捧在手里怕碎了，含在嘴里怕化了，看在眼里怕丟了，培養(yǎng)細胞時有哪些經(jīng)驗教訓(xùn)可以分享呢?１)嚴(yán)格無菌操作，多噴噴酒精，要是對滅菌的東西不放心，自己包自己送自己烘干；２)不要和別人共用試劑耗材，自己準(zhǔn)備一套；３)有可能的話在拿到新細胞的時候做好支原體衣原體檢測；４)水浴鍋很臟，生化培養(yǎng)箱要是得手動加濕的話盤里的水也會很臟，勤換(滅菌水加進去)；５)晚上離開的時候給傳代細胞照紫外，超凈臺是用完就開；６)是同一時間就你一個人在用傳代細胞在養(yǎng)細胞。
細胞復(fù)蘇相關(guān)注意事項：１.取細胞的過程中注意帶好防凍手套，護目鏡。此項尤為重要，細胞凍存管可能漏入液氮，解凍時凍存管中的氣溫急劇上升，可導(dǎo)致爆炸。２.凍存液的問題：凍存液的配置已是常識，在這里不作詳述，但二甲基亞砜(DMSO )對細胞不是完全無毒副作用，在常溫下，二甲基亞砜對細胞的毒副作較大，因此，必須在１-２min內(nèi)使凍存液完全融化。如果復(fù)蘇溫度太慢，會造成細胞的損傷，二甲基亞砜(DMSO)選擇進口產(chǎn)品。３.離心前須加入少量培養(yǎng)液。細胞解凍后二甲基亞砜濃度較高，注意加入少量培養(yǎng)液可稀釋其濃度，以減少對細胞的損傷。４.離心問題：目前主要有兩種見解。一種是解凍后的細胞懸液直接吹打均勻后分裝到培養(yǎng)瓶中進行培養(yǎng)，第二天換液。因為離心的目的是兩個，去除DMSO，去除死細胞，這個是標(biāo)準(zhǔn)流程，但對一般人來說，把握不好離心轉(zhuǎn)速和時間，轉(zhuǎn)的不夠活細胞沉底的少，細胞就全被扔掉了，轉(zhuǎn)過了活細胞會受壓過大，死亡。此外在操作過程中容易污染，所以不推薦。另一種說法為細胞懸液中含有二甲基亞砜(DMSO)，DMSO對細胞有一定的毒副作用，所以須將離心后的液體前倒凈，且一定倒干凈。我在試驗中按照常規(guī)的離心分裝的方法進行復(fù)蘇，結(jié)果無異常。５.細胞貼壁少的問題：教科書中說明凍存細胞解凍時１ml細胞液要加１０ml-１５ml培養(yǎng)液，而在我的試驗中的經(jīng)驗總結(jié)為培養(yǎng)基越少細胞越容易貼附。６.復(fù)蘇細胞分裝的問題：試驗中我的經(jīng)驗總結(jié)為復(fù)蘇１管細胞一般可分裝到１-２只培養(yǎng)瓶中，分裝過多，細胞濃度過低，不利于細胞的貼壁。７.加培養(yǎng)基的量放入問題：這個量的多少的把握主要涉及到的問題DMSO的濃度，從如果你加培養(yǎng)基的太少，那么DMSO的濃度就會比較大，就會影響細胞生長，從以前的資料來看，DMSO的濃度在小于０.５%的時候?qū)σ话慵毎麤]有什么影響，還有一個說法是１%。所以如果你的凍存液的濃度是１０%DMSO的話那么加１０ml以上的培養(yǎng)基就恰好稀釋到了無害濃度。
冷凍細胞解凍程序：依據(jù)細胞株數(shù)據(jù)單指定之基礎(chǔ)培養(yǎng)基種類、血清種類和其它指定之成份和比例，制備培養(yǎng)基。絕大多數(shù)之細胞均無法立即適應(yīng)不同之基礎(chǔ)培養(yǎng)基或不同之血清種類，若因?qū)嶒炐枰?，必須有所不同時，務(wù)必以緩慢比例漸次改變培養(yǎng)基組成，確定細胞適應(yīng)后，方進行所需之實驗。FBS(fetal bovine serum,胚牛血清), CS(calf serum,小牛血清)和HS(horse serum,馬血清)，對細胞而言差異極大，請務(wù)必依據(jù)細胞株資料單指定之血清種類培養(yǎng)之。將培養(yǎng)基置于３７°C水槽中回溫，回溫后噴以７０%酒精并擦拭之，移入無菌操作臺內(nèi)。取出冷凍管，立即放入３７°C水槽中快速解凍，水面高度不可接近或高過冷凍管之蓋沿，否則易發(fā)生污染。輕搖冷凍管使其在１分鐘內(nèi)全部融化后，以７０%ethanol擦拭冷凍管外部，移入無菌操作臺內(nèi)。依據(jù)細胞種類和濃度，于無菌操作臺內(nèi)?。保癿l培養(yǎng)基加至T２５或T７５flask中。取出已解凍之細胞懸浮液，緩緩加入T２５或T７５flask內(nèi)之培養(yǎng)基，混合均勻，放入３７°C，５%CO２培養(yǎng)箱培養(yǎng)。對絕大多數(shù)細胞而言，１%以下之冷凍保護劑DMSO，不會對細胞之貼附或活化有不良影響，不需立刻由解凍細胞中去除，待第二天確定細胞生長或貼附良好后再去除即可。惟對極少數(shù)因?qū)MSO敏感或會造成細胞分化之細胞，需立即去除DMSO者，則可將解凍后之細胞懸浮液放入５-１０ml培養(yǎng)基中，離心３００xg(約１０００rpm)，５分鐘，小心移去上清液，加入適量新鮮培養(yǎng)基，將細胞均勻混合后，轉(zhuǎn)移至培養(yǎng)瓶中，再放入３７°C，５%CO２培養(yǎng)箱培養(yǎng)。
MRMT-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HOEC細胞、SNU-638細胞、CORL88細胞
VSMC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hce8693細胞、Calu3細胞、IGROV 1細胞
Karpas-299細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCM細胞、SHIN-3細胞、Rat Lung Epithelial-6-T-antigen Negative細胞
MDA MB 134VI細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KYSE410細胞、DHL-4細胞、PK-136細胞
hRMECs細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HSAS4細胞、LSECs細胞、NCI-H1672細胞
PC-9/S1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SU86-86細胞、H-498細胞、D407細胞
VMM-5A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CC-LP-I細胞、AtT20細胞、PL-9細胞
H-1341細胞系相關(guān)產(chǎn)品：A1847細胞、MDBK (NBL-1)細胞、D-341Med細胞
A 375細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 746T細胞、MCF-7/ADR細胞、451Lu細胞
MHCC 97-L細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CT-26 WT細胞、U-2OS細胞、Colon38細胞
F442-A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MOLT-16細胞、DH 82細胞、UCLA-SO-M14細胞
NRCC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Fu97細胞、8505C細胞、COLO320HSR細胞
FL62891細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PCI-SG231細胞、SNU-601細胞、SNU-668細胞
OVCAR433細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BEL/FU細胞、HBZY-1細胞、Lilly Laboratories Cell-Monkey Kidney 2細胞
PANC1005細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-2198細胞、N-87細胞、MOLM-16細胞
OCI Ly19細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-3255細胞、M-20細胞、HCC70細胞
OCI Ly19細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-3255細胞、M-20細胞、HCC70細胞
HKF細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-157細胞、OV1063細胞、NCIH520細胞
NG-108-15細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TC-1 [Mouse lung]細胞、CL11細胞、BNL CL.2細胞
GA-10細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NIH3T3-L1細胞、HIEC-6細胞、K1細胞
Caco-2 BBe細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPMI 6666細胞、Human Lung Microvascular Endothelial細胞：-5a細胞、Colo-678細胞
A2780/Taxol細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RT112細胞、OVMANA細胞、HSC/mHSC細胞
BE2C細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H.Ep.-2細胞、DLD1細胞、LA4細胞
MGHU3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MOLT.4細胞、WM-115細胞、NCIH1963細胞
OLN-93細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SRA 01/04細胞、C3H/10T1/2細胞、NS1/1-Ag4.1細胞
293-EBNA細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Calf Pulmonary Artery Endothelial細胞、NRK49F細胞、CBRH-7919細胞
SW403細胞系相關(guān)產(chǎn)品：V-79細胞、no-11細胞、6T-CEM細胞
CAL-12T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BEL-7404細胞、RF/6A細胞、NCI-HUT-292細胞
LS 123細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LS1034細胞、GRSL細胞、YTMLC-90細胞
MKN 7細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MCAEC細胞、COR-L279細胞、JEG-3細胞
16-HBEo細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Normal Rat Kidney-49F細胞、OSC-19細胞、NCIH1915細胞
Roswell Park Memorial Institute 8226細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Clone Y1細胞、H-2087細胞、SRA 01/04細胞
DMS 53細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCRF-CEM C7細胞、VB細胞、Eca 109細胞
PANC0504細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ATN1細胞、HIT細胞、SK-MEL-24細胞
Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Tsup-1細胞、P3X63Ag8細胞、HTori-3.1細胞
JB 6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1417細胞、16-HBE細胞、FC33細胞
U-266 AR1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：DI TNC1細胞、SU86.86細胞、H1819細胞
NCI-H-82細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BMDC細胞、HOS-TE85細胞、M619細胞
Radiation Effects Research Foundation-Lung Cancer-MS細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCLY8細胞、HCC-15細胞、HPAF細胞
A3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SF-763細胞、X63-Ag8-653細胞、NPA87細胞
Hx-147細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PLB 985細胞、MES-23.5細胞、PG-4細胞
H1435細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Panc5.04細胞、NCIH1395細胞、190PT細胞
CAL-85-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW837細胞、WIL2 Secreting細胞、NCI-H1688細胞
DHL-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NTHY-ORI3.1細胞、Panc-813細胞、H2110細胞
JHH7細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TE354.T細胞、GM03190細胞、WERI-Rb-1細胞
M21細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1385細胞、RKO細胞、SKCO 1細胞
X63-Ag8細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H187細胞、SW 1783細胞、H1930細胞
NCIH1648細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NRK-49F細胞、Hs343T細胞、NS-1細胞
Human Lung Microvascular Endothelial細胞：-5a細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HS940細胞、S.B.細胞、Ca761細胞
LS-411N細胞系相關(guān)產(chǎn)品：N-87細胞、H1648細胞、MESSA細胞
H4IIEC3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Virginia Mason Research Center-Lung Cancer D細胞、MM1-S細胞、HCC2108細胞
Hs 675.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PanC1細胞、KYSE-270細胞、NHEK細胞
HCC0366細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MCF/Adr細胞、RN-c細胞、NTC200細胞
CNE-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HPBALL細胞、SUSM1細胞、IA-LM細胞
NUGC4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCEpiC細胞、IGROV-1細胞、TGW-nu-1細胞
NCI-H2029細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Ku812細胞、P30 OHK細胞、SK-NEP-1細胞
NCI-H2029細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Ku812細胞、P30 OHK細胞、SK-NEP-1細胞
A7r5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKCol1細胞、HuH6細胞、NCI-H64細胞
OAC-P4C細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hut292細胞、Karpas 422細胞、AG06814-M細胞
RCC4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KM933細胞、NCI-SNU-423細胞、HEK 293-F細胞
WM-451Lu細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MD Anderson-Metastatic Breast-453細胞、H-1666細胞、LN-18細胞
Roswell Park Memorial Institute 2650細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LPC-H12細胞、NCI-H1417細胞、Duke University 145細胞
BHP-10細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-Mel 2細胞、FCCH1018細胞、OE33細胞
U-118MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PK-15細胞、293EBNA細胞、HPDEC細胞
M-07e細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KP-2細胞、TGW-nu-1細胞、NCI-H2108細胞
RCC10RGB細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PLA801-95C細胞、Michigan Cancer Foundation-10A細胞、MIO-M1細胞
NCI-H78細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK LU 1細胞、PK-136細胞、HEL-1細胞
H-1734細胞系相關(guān)產(chǎn)品：JM-1細胞、3T3NIH細胞、HBL-100細胞
BE(2)-C細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H209細胞、MESSA/Dx5細胞、COLO679細胞
INS-1E細胞系相關(guān)產(chǎn)品：AA-Mel細胞、Ramos (RA)細胞、PL-45細胞
WI 38細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM-346細胞、CMT 64細胞、UWB1289細胞
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Karpas299細胞系相關(guān)產(chǎn)品：DAN-G細胞、H2073細胞、BCP1細胞
TGHAVSMC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Liver-02細胞、PLA801-95C細胞、KMS18細胞
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