"SW837細(xì)胞：人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料：詳見(jiàn)相關(guān)文獻(xiàn)介紹
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣
細(xì)胞生長(zhǎng)：貼壁
細(xì)胞物種來(lái)源：人源或鼠源等其它物種來(lái)源
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細(xì)胞傳代方法：１：２—１：５傳代，每周換液１-２次
細(xì)胞來(lái)源說(shuō)明：細(xì)胞主要來(lái)源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系
細(xì)胞生長(zhǎng)特性：懸浮生長(zhǎng)
細(xì)胞接收操作說(shuō)明：請(qǐng)仔細(xì)閱讀本操作說(shuō)明及相應(yīng)的細(xì)胞說(shuō)明書。本公司細(xì)胞發(fā)貨有四種形式：T２５培養(yǎng)瓶(一般是貼壁細(xì)胞使用，懸浮細(xì)胞也可以)、離心管(懸浮細(xì)胞使用多，當(dāng)然，有些公司也會(huì)用這種離心管形式發(fā)貼壁細(xì)胞，但是，長(zhǎng)期經(jīng)驗(yàn)來(lái)說(shuō)，貼壁細(xì)胞容易發(fā)生形態(tài)變化，估計(jì)是細(xì)胞培養(yǎng)空間狹小，血清不足導(dǎo)致(最主要是怕運(yùn)輸延誤導(dǎo)致這些情況發(fā)生)，個(gè)人不建議用離心管形式發(fā)貼壁細(xì)胞)及干冰(凍存細(xì)胞用，主要是冬天天氣冷，溫度低于４℃的地方，都要考慮凍存細(xì)胞)。T２５培養(yǎng)瓶：是用T２５細(xì)胞培養(yǎng)瓶直接發(fā)貨的形式。收到細(xì)胞后，拆開包裝T２５培養(yǎng)瓶的自封袋，不拆封口膜，表面噴７５%酒精消毒后顯微鏡觀察細(xì)胞狀態(tài)(有條件可以拍下此時(shí)細(xì)胞照片)。將細(xì)胞放入３７度培養(yǎng)箱平衡兩小時(shí)以上，再處理細(xì)胞。首先將T２５中培養(yǎng)基取出裝好備用，如細(xì)胞密度高于８０%，可以直接消化傳代，相反則加入５-６ml培養(yǎng)基放回培養(yǎng)箱繼續(xù)培養(yǎng)即可。離心管：是用１５ml離心管發(fā)貨的形式，只用于懸浮細(xì)胞發(fā)貨。收到細(xì)胞后消毒處理及將細(xì)胞放入３７度培養(yǎng)箱平衡兩小時(shí)以上，再處理細(xì)胞。首先將T２５中培養(yǎng)基取出裝好備用(如果實(shí)驗(yàn)室沒(méi)有T２５培養(yǎng)瓶，可以暫時(shí)T７５培養(yǎng)瓶，加入１０-１５ml培養(yǎng)基，建議１０ml培養(yǎng)基，也可以使用T１７５培養(yǎng)瓶，加入５０-６０ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)瓶越大，需要的培養(yǎng)基越多。當(dāng)然如果剛接收到細(xì)胞密度不夠的話，不用大瓶子，先用小瓶子養(yǎng)起來(lái)再換大的，不然會(huì)長(zhǎng)得很慢，嚴(yán)重的，會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞死亡等危險(xiǎn))，平衡完成后，離心(１０００rpm，３min)收集細(xì)胞，棄上清，用新的培養(yǎng)基重懸細(xì)胞并接種至培養(yǎng)瓶或皿中，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)培養(yǎng)。干冰：是用本公司凍存液凍存細(xì)胞后，直接用干冰將凍存的細(xì)胞冷凍發(fā)貨的形式。收到細(xì)胞后按照細(xì)胞復(fù)蘇的步驟操作即可。
細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中，總是會(huì)出現(xiàn)各種意想不到的問(wèn)題，一不留神就會(huì)全盤皆輸。所謂細(xì)胞虐我千百遍，我待細(xì)胞如初戀。下面是貼壁細(xì)胞的保藏方法，希望對(duì)細(xì)胞培養(yǎng)初學(xué)操作者有所幫助：1)觀察細(xì)胞狀態(tài)：貼壁細(xì)胞密度達(dá)到85-90%，即可以細(xì)胞凍存形式進(jìn)行保藏，拍照，記錄細(xì)胞狀態(tài)；2)細(xì)胞清洗：培養(yǎng)皿表面消毒后，轉(zhuǎn)移至生物安全柜中，去除培養(yǎng)皿中培養(yǎng)液，加入12mlPBS，輕輕搖晃培養(yǎng)皿清洗細(xì)胞，隨后吸除PBS清洗液；3)細(xì)胞消化：將2ml胰酶加入培養(yǎng)皿中，完全覆蓋細(xì)胞，置于顯微鏡下觀察（期間禁止搖晃培養(yǎng)皿），當(dāng)細(xì)胞剛開始脫落時(shí)，立即轉(zhuǎn)移至生物安全柜中，除去大部分胰酶，剩余約0.5ml胰酶，轉(zhuǎn)移至培養(yǎng)箱內(nèi)繼續(xù)消化，每30秒肉眼觀察細(xì)胞狀態(tài)，至細(xì)胞成流沙狀完全脫落，轉(zhuǎn)移至生物安全柜中，加入12ml完全培養(yǎng)基，終止消化；4)細(xì)胞離心：將終止消化后的細(xì)胞懸液吹打均勻，吸取至15ml離心管中，1000r/min（110g），離心3min；5)細(xì)胞凍存：離心后去除細(xì)胞上清液，按照凍存細(xì)胞量5*10^5/ml，吸取凍存液重懸細(xì)胞沉淀，吹打均勻后分裝至相應(yīng)的凍存管中，進(jìn)行凍存；6)細(xì)胞保藏：凍存管做好標(biāo)記，放至程序降溫盒中，于4℃冰箱放置30min，轉(zhuǎn)移至-80℃超低溫冰箱過(guò)夜，將過(guò)夜后的凍存細(xì)胞轉(zhuǎn)移至液氮中保藏。
我?？吹揭粋€(gè)比較復(fù)雜的四步消化法，這個(gè)挺有意思，我也是次聽說(shuō)，應(yīng)該是網(wǎng)友自己發(fā)展出來(lái)的方法，很有參考價(jià)值。但我估計(jì)這個(gè)方法可能對(duì)付少數(shù)非常怪異的細(xì)胞才需要這么復(fù)雜的程序。我目前養(yǎng)過(guò)的近３００株細(xì)胞里面，還沒(méi)遇到這么怪異的。比如Caco２其實(shí)是很好消化的細(xì)胞，不需要胰酶孵育即可，只是有點(diǎn)成片分布。不要以為成片分布是自己沒(méi)養(yǎng)好，這個(gè)視細(xì)胞而定。如果和標(biāo)準(zhǔn)形態(tài)不一致，那可能是自己沒(méi)消化好導(dǎo)致的，但如果消化方法正確，仍然成片分布，甚至完全吹打成單細(xì)胞懸液，貼壁后仍然成片分布，這是細(xì)胞的特性，是因?yàn)橘N壁過(guò)程中重新聚集了。這個(gè)時(shí)候你拼了命要去讓它均勻分布，你的細(xì)胞之后會(huì)對(duì)你越來(lái)越不好；比較難消化的細(xì)胞(潤(rùn)洗方法５min還不能消化)，就以colon cancer為例，比如HCT１５, LS４１１和KM１２，這樣的細(xì)胞一般需要用少量胰酶孵育，但也不需要很多，一般１００ mm dish，一次最多加入５００ul，就足夠了，一般我加３００ul。即使這樣難消化的細(xì)胞，一般不超過(guò)５min，即可見(jiàn)細(xì)胞成片移動(dòng)，就應(yīng)該停止消化。一些正常細(xì)胞也會(huì)有難消化的時(shí)候，比如tsDC細(xì)胞，但也只要用少量胰酶孵育，３min左右即可看到成片沙狀移動(dòng)。
COLO 320細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：THLE-2細(xì)胞、UM-UC-3細(xì)胞、NCI-H1876細(xì)胞
3T3-442A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-MEL-MeWo細(xì)胞、PANC 327細(xì)胞、RKO-AS45-1細(xì)胞
OCM-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BV-173細(xì)胞、GM03320D細(xì)胞、Mv1.Lu細(xì)胞
NOZC-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：F442A細(xì)胞、MFE-280細(xì)胞、Hs 636.T細(xì)胞
Walker/LLC-WRC256細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：INS1-E細(xì)胞、CL1-0細(xì)胞、Vero 76 clone E-6細(xì)胞
RMS 1598細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PC 61.5.3細(xì)胞、JJN-3細(xì)胞、NCIH1693細(xì)胞
MeT-5A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：A-549細(xì)胞、SK-ES1細(xì)胞、PANC 327細(xì)胞
Panc 8.13細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BC-3H-1細(xì)胞、TOV-112D細(xì)胞、Medical Research Council cell strain-5細(xì)胞
SNU-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA436細(xì)胞、U-138MG細(xì)胞、U373-MG細(xì)胞
NCI-H660細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-MEL5細(xì)胞、GM03573細(xì)胞、LS 1034細(xì)胞
MAVER細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HuH 6細(xì)胞、FL-83B細(xì)胞、P3.NS-1/1.Ag4.1細(xì)胞
ROS-17/2.8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA2B細(xì)胞、COLO 824細(xì)胞、GM03570E細(xì)胞
FDCP1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RT4P細(xì)胞、CCRF/CEM細(xì)胞、COR-L23細(xì)胞
SVEC4-10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hx147細(xì)胞、CORL88細(xì)胞、Hs 729.T細(xì)胞
P3HRI細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SCL I細(xì)胞、CCF-STTG1細(xì)胞、MDST8細(xì)胞
Lilly Laboratories Cell-Porcine Kidney 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LIM 1215細(xì)胞、HMC-1細(xì)胞、HuH28細(xì)胞
Lilly Laboratories Cell-Porcine Kidney 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LIM 1215細(xì)胞、HMC-1細(xì)胞、HuH28細(xì)胞
CCLP1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HS0578T細(xì)胞、P3X63-Ag8.653細(xì)胞、F442-A細(xì)胞
Panc-813細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：IA-LM細(xì)胞、PCI:SG-231細(xì)胞、OE-19細(xì)胞
OVCAR10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：U 937細(xì)胞、LS-180細(xì)胞、SAOS 2細(xì)胞
C127細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：M 1細(xì)胞、PTK 1細(xì)胞、TE6細(xì)胞
H345細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NPC-TW039細(xì)胞、UMR106細(xì)胞、P3-X63-Ag8細(xì)胞
Michigan Cancer Foundation-10A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ST486細(xì)胞、VP303細(xì)胞、3T3-J2細(xì)胞
SU.86.86細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：D6P2T細(xì)胞、U031細(xì)胞、IMR90細(xì)胞
HT-1376細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUSM1細(xì)胞、NCI-H716細(xì)胞、KBM7細(xì)胞
hADSCs細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CLONE M3細(xì)胞、MESSA Dx5細(xì)胞、J82COT細(xì)胞
H-676細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：X63-Ag 8.6.5.3細(xì)胞、Hs742T細(xì)胞、H1238細(xì)胞
BC-3-H-I細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CHP126細(xì)胞、Lewis Lung細(xì)胞、NBL-3細(xì)胞
NCI-H-128細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPMI 8226/S細(xì)胞、NRK-49F細(xì)胞、C-127細(xì)胞
RSC-96細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKRC-52細(xì)胞、769-P細(xì)胞、SUM 52PE細(xì)胞
KNS62細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LLC-MK-2細(xì)胞、AML12細(xì)胞、SKNEP-1細(xì)胞
NRK細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：DC2.4細(xì)胞、Sp2/O-Ag14細(xì)胞、NCTC-3960細(xì)胞
D10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HDLM2細(xì)胞、ACC-2細(xì)胞、AAV293細(xì)胞
HEK293S細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Michigan Cancer Foundation-12A細(xì)胞、SUM149PT細(xì)胞、LNCaP.FGC細(xì)胞
Mink細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ROS 17/28細(xì)胞、SUIT2細(xì)胞、Human Microglia Clone 3細(xì)胞
NCI-Hut 125細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：R1800[RA]細(xì)胞、NMCG-1細(xì)胞、Strain V細(xì)胞
Hi-5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC1438細(xì)胞、SNU-C2A細(xì)胞、As-PC1細(xì)胞
KMM1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RMS1598細(xì)胞、SACCLM細(xì)胞、Hs-578T細(xì)胞
Human Lung Microvascular Endothelial細(xì)胞：-5a細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HS940細(xì)胞、S.B.細(xì)胞、Ca761細(xì)胞
COLO 320F細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：G-402細(xì)胞、IAR-20細(xì)胞、Immortalized Human Hepatocytes細(xì)胞
8226細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCT-15細(xì)胞、H-1930細(xì)胞、NCI H295R細(xì)胞
C-33A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH740細(xì)胞、CEM-T4細(xì)胞、PC3M-IE8細(xì)胞
CEM-C7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAL120細(xì)胞、NOMO-1細(xì)胞、Farage OL細(xì)胞
RPTC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MES13細(xì)胞、293A細(xì)胞、M.D. Anderson-Prostate Cancer-2b細(xì)胞
RT112細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RS4;11細(xì)胞、P 815細(xì)胞、HaCaT細(xì)胞
T2 (174 x CEM.T2)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Bowes melanoma cells細(xì)胞、NCIH2347細(xì)胞、GP2d細(xì)胞
130T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：L 132細(xì)胞、HuPT4細(xì)胞、F81細(xì)胞
IPI-2I細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KP-N-RT-BM-1細(xì)胞、Hs870T細(xì)胞、TE-14細(xì)胞
PCI-4M細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：hTERT RPE1細(xì)胞、52PE細(xì)胞、WM451Lu細(xì)胞
OCI-AML-5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU398細(xì)胞、16HBE細(xì)胞、SK-N-BE(2C)細(xì)胞
COLO201細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Duke University 4475細(xì)胞、BC-PAP細(xì)胞、Karpas422細(xì)胞
NTERA2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NBL-4細(xì)胞、NK-92 MI細(xì)胞、SW 1353細(xì)胞
HCC-9724細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LN299細(xì)胞、L-6 myoblast細(xì)胞、697細(xì)胞
PC615.3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC827細(xì)胞、LIM1215細(xì)胞、BEL7402細(xì)胞
Walker-Ca.256細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Tu 177細(xì)胞、WSU-DLCL(2)細(xì)胞、KNS42細(xì)胞
P3-X63.Ag8.653細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MonoMac 6細(xì)胞、SU-DHL-6細(xì)胞、BEL7405細(xì)胞
NMCG-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM00215細(xì)胞、TE-32細(xì)胞、CAL 62細(xì)胞
G-Olig2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：C3H10T1-2細(xì)胞、SNUC1細(xì)胞、Calu 6細(xì)胞
BT-474細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：T-47-D細(xì)胞、Ly10細(xì)胞、BC-028細(xì)胞
Hos TE-85細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MS1細(xì)胞、H650細(xì)胞、ACC3細(xì)胞
293/EBNA細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LS-180細(xì)胞、Line 870 Emory University-4細(xì)胞、MC3T3, E1 subgroup-4 clone細(xì)胞
BNCL-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAKI 2細(xì)胞、QGY-7701細(xì)胞、A72細(xì)胞
HS-683細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HTori3細(xì)胞、OK-WT細(xì)胞、HCC 38細(xì)胞
NCIH716細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM03573A細(xì)胞、3D4/21細(xì)胞、AMJ2C8細(xì)胞
TKB-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Human Embryo Lung-1細(xì)胞、AMC-HN-8細(xì)胞、KYSE270細(xì)胞
GM03671C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：JTC-28細(xì)胞、MCF7ADR細(xì)胞、U-118 MG細(xì)胞
EC-9706細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LTEP-s細(xì)胞、BaF3細(xì)胞、G292細(xì)胞
GM01232細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Tu212細(xì)胞、32D.3細(xì)胞、J82 COT細(xì)胞
CaES-17細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA453細(xì)胞、MNNGHOS細(xì)胞、H211細(xì)胞
SUM 190PT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LS174T細(xì)胞、HeLaS3細(xì)胞、NE-1細(xì)胞
NCI-H1092細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPMI 2650細(xì)胞、HCC0015細(xì)胞、HMEC-1細(xì)胞
MILE SVEN 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：AN3 CA細(xì)胞、EA. hy 926細(xì)胞、G-292細(xì)胞
OCM-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BV-173細(xì)胞、MCF-10 Attached細(xì)胞、SCC-9細(xì)胞
UWB1-289細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUDHL-1細(xì)胞、UMUC3細(xì)胞、MV-4:11細(xì)胞
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